基于多組學(xué)的真菌病毒與寄主真菌互作的研究進(jìn)展

范 煜，何楨銳，黃曉彤，楊 媚，周而勛

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 植物保護(hù)學(xué)院/廣東省微生物信號與作物病害防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510642）

真菌病毒（Fungal virus或Mycovirus）是一種以真菌為寄主，能在真菌體內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和繁殖的病毒。1962年，Hollings[1]在栽培的雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）中通過電子顯微鏡首次發(fā)現(xiàn)了3種真菌病毒。20世紀(jì)50年代，Grente等[2]在栗疫病菌（Cryphonectria parasitica）中發(fā)現(xiàn)，可以通過菌絲融合的方式將弱毒菌株中的低毒力轉(zhuǎn)染給強(qiáng)毒力菌株，造成病原真菌的弱毒現(xiàn)象，于1995年將這種導(dǎo)致其寄主真菌致病力降低的一類無衣殼蛋白的真菌病毒定義為弱毒真菌病毒。近些年來，隨著越來越多的弱毒病毒被發(fā)現(xiàn)，對其侵染過程以及與寄主真菌互作機(jī)制的研究也受到更廣泛的關(guān)注。研究表明，部分弱毒真菌病毒侵染可造成寄主真菌生長異常以及致病力下降等現(xiàn)象，病毒的侵染可以改變寄主真菌的轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組、代謝組和表觀基因組等方面的表達(dá)水平[3]。目前，研究真菌病毒與寄主真菌互作的經(jīng)典技術(shù)包括核酸與核酸互作、核酸與蛋白互作、蛋白與蛋白互作這3種技術(shù)類型。而隨著后基因組時(shí)代的深入，測序、質(zhì)譜、生物信息聯(lián)合分析等技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，使得高通量篩選生物標(biāo)記物、尋找生物關(guān)聯(lián)分子、探索生物之間的影響機(jī)制變成可能，同時(shí)對生物間互作技術(shù)的應(yīng)用也提出了更高的要求。近年來，寄主真菌遺傳操作系統(tǒng)和反向遺傳學(xué)系統(tǒng)的構(gòu)建，為弱毒真菌病毒與寄主真菌互作系統(tǒng)的建立提供了科學(xué)依據(jù)，涵蓋了多種植物致病真菌與其真菌病毒的互作系統(tǒng)[4]。在真菌病毒與寄主真菌互作系統(tǒng)當(dāng)中，RNA沉默（RNA silencing，RNAi）作為一種寄主真菌抵御病毒入侵的防御機(jī)制，受到研究人員的廣泛關(guān)注。目前，在栗疫病菌、核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum)和禾谷鐮刀菌(Fusarium graminearum)等多種植物致病真菌中先后發(fā)現(xiàn)，真菌病毒的成功侵入與該機(jī)制被破壞存在關(guān)聯(lián)[5-7]。在RNA沉默病毒防御機(jī)制中，Dicer蛋白能夠?qū)σ环N具有發(fā)卡結(jié)構(gòu)的雙鏈RNA（precursor microRNA）進(jìn)行識別并將其加工成為miRNA（microRNA），Argonaute蛋白對miRNA進(jìn)行解旋并釋放其中一條單鏈后形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（RNA-induced silencing complex，RISC），最終通過RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體上的導(dǎo)鏈與目的基因上的堿基序列進(jìn)行互補(bǔ)配對，以實(shí)現(xiàn)對病毒基因沉默，達(dá)到抵御病毒侵入的目的（圖1）[8]。越來越多的研究表明，寄主真菌的弱毒現(xiàn)象與其RNA沉默防御機(jī)制受到抑制有關(guān)[9]。深入探索真菌病毒與寄主真菌的互作機(jī)制，了解運(yùn)用組學(xué)技術(shù)探究弱毒真菌病毒造成其寄主真菌弱致病力原理的研究進(jìn)展，可為植物病原真菌的生物防治提供理論依據(jù)。

圖1 RNA沉默病毒防御機(jī)制示意圖[8]

本綜述旨在闡明利用多組學(xué)技術(shù)揭示真菌病毒與寄主真菌互作的原理，綜述多組學(xué)技術(shù)研究方法及利用多組學(xué)技術(shù)探究弱毒病毒與寄主真菌互作的研究進(jìn)展,為真菌病毒的利用及病毒與寄主互作的深入研究提供參考。

1 基于轉(zhuǎn)錄組學(xué)的真菌病毒與寄主真菌互作

1.1 轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究方法基因在表達(dá)上的差異變化是轉(zhuǎn)錄調(diào)控細(xì)胞生命活動過程的核心機(jī)制。轉(zhuǎn)錄組學(xué)（Transcriptomics）是功能基因組學(xué)研究個(gè)體基因組的重要組成部分。是一門在整體水平上研究細(xì)胞中所有基因轉(zhuǎn)錄的情況并揭示轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律的學(xué)科[10]。目前，轉(zhuǎn)錄組主要包括基于雜交技術(shù)的微陣列技術(shù)（Microarray）和基于測序技術(shù)的轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)（RNA sequencing）2種系統(tǒng)研究技術(shù)。在研究真菌病毒與寄主真菌互作過程中，通常對病毒侵染前后的寄主真菌進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析，識別寄主真菌在被真菌病毒侵染前后和不同時(shí)間階段的差異表達(dá)基因（differentially expressed gene, DEG）。然后通過富集分析、蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析和轉(zhuǎn)錄因子分析等技術(shù)手段，篩選出差異基因，最終得出真菌病毒影響寄主真菌相關(guān)的致病性與寄主真菌關(guān)聯(lián)基因表達(dá)的相關(guān)性[11]。

1.2 轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)在研究互作機(jī)理中的應(yīng)用

栗疫病菌的弱毒真菌病毒（CHV1）與栗疫病菌的互作系統(tǒng)是研究真菌病毒與寄主真菌互作關(guān)系最為徹底的系統(tǒng)。栗疫病菌抗病毒防御反應(yīng)是一種RNA沉默機(jī)制，觸發(fā)其機(jī)制所需的Dicer蛋白基因dcl2可在真菌病毒侵染時(shí)能夠被誘導(dǎo)并抑制病毒RNA的表達(dá)。而栗疫病菌抗病毒防御反應(yīng)激活，只需要4個(gè)Argonaute蛋白中的1個(gè)基因，即agl2基因表達(dá)，該基因是dcl2基因轉(zhuǎn)錄所必需的通路[12-13]。通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，與野生型相比，缺乏p29蛋白的突變型菌株，在受病毒侵染時(shí)，Agl2和dcl2轉(zhuǎn)錄物增長到更高水平[5]。這表明病毒侵入時(shí)，CHV1中p29蛋白能夠調(diào)控Agl2和dcl2基因的表達(dá)，從而降低其對真菌病毒的抗性。此外，通過分析CHV1 侵染寄主栗疫病菌前后的轉(zhuǎn)錄水平后發(fā)現(xiàn)，真菌病毒侵染導(dǎo)致的毒力降低和相關(guān)表型變化與真菌病毒侵染引起G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的改變有關(guān)。Shang等[14]報(bào)告了6 318個(gè)單基因序列，并對栗疫病菌的G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑進(jìn)行了虛擬重建。該途徑包括轉(zhuǎn)錄因子（Ste12和CYP1），膜受偶聯(lián)的異源三聚體G蛋白（Gα、 Gβ和Gγ）和絲裂原活化蛋白（MAP）激酶CpMK2[15]。轉(zhuǎn)錄分析表明，編碼Ste12、CYP1、Gα、Gβ、Gγ和CpMK2基因的轉(zhuǎn)錄水平被病毒侵染均受到不同幅度的下調(diào)，這表明調(diào)節(jié)G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路基因的缺失將導(dǎo)致栗疫病菌毒力降低。

在核盤菌（Sclerotinia sclerotiorum）中已發(fā)現(xiàn)由弱毒真菌病毒引起3種菌株（Ep-1PN、AH98和DT-8）的低毒現(xiàn)象，其中，分別鑒定出3種核酸類型（dsRNA、ssRNA和ssDNA）的弱毒真菌病毒（Sclerotinia sclerotiorumdebilitation-associated RNA virus, SsDRV；Sclerotinia sclerotiorumhypovirulence-associated DNA virus 1, SsHADV-1；Sclerotinia sclerotiorumnegative-stranded RNA virus 1,SsNSRV-1）。利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)，通過對病毒侵染前后或?qū)D(zhuǎn)化特定基因突變體的菌株進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析，能夠揭示病毒侵染引起低毒現(xiàn)象的機(jī)制。通過正向和反向遺傳學(xué)方法證實(shí)，在SsDRV侵染后，核盤菌的SSITL蛋白表達(dá)會被沉默，導(dǎo)致其毒力和生長率顯著降低[16]。將 SsNSRV-1 ORF Ⅰ的編碼蛋白（ORF Ⅰ）缺失和過表達(dá)轉(zhuǎn)化突變型菌株分別進(jìn)行轉(zhuǎn)錄學(xué)分析，結(jié)果顯示，SsNSRV-1的ORF Ⅰ可以調(diào)節(jié)寄主基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯和修飾以促進(jìn)病毒增殖并降低寄主的毒力[11]。通過對SsHADV1侵染前后的寄主核盤菌株DT-8進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析，結(jié)果顯示，SsHADV1感染可能會影響宿主Ras-small G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，從而可能調(diào)節(jié)宿主代謝的變化[17]。此外，高通量測序（RNA-sequencing，RNA-seq）證實(shí)，SsHADV-1病毒侵染能下調(diào)參與碳水化合物和脂質(zhì)代謝、核糖體組裝、翻譯和毒力因子的基因的表達(dá)，從而造成了核盤菌的低毒現(xiàn)象。

2 基于蛋白組學(xué)的真菌病毒與寄主真菌互作

2.1 蛋白組學(xué)研究方法蛋白質(zhì)是生物學(xué)功能的效應(yīng)物，其水平的變化反應(yīng)細(xì)胞翻譯和調(diào)控水平。蛋白質(zhì)組學(xué)（Proteomics）可用于檢測各種狀態(tài)下的蛋白質(zhì)，包括蛋白質(zhì)在任何階段的表達(dá)、結(jié)構(gòu)、功能、相互作用和修飾[18]。目前，雙向電泳（two-dimensional electrophoresis, 2-DE）與質(zhì)譜（Mass spectrometry, MS）聯(lián)用是進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)研究最常用的方法，該方法可以極高的靈敏度分離成分復(fù)雜的蛋白質(zhì)[19]。在研究真菌病毒與寄主真菌互作過程中，為探究真菌病毒侵染導(dǎo)致寄主真菌中蛋白質(zhì)種類、表達(dá)水平和功能的動態(tài)變化，應(yīng)先對侵染前后的寄主真菌進(jìn)行蛋白質(zhì)定性或定量的檢測，然后利用富集分析以及蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)分析對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，最終篩選出差異蛋白，以揭示真菌病毒與寄主真菌互作機(jī)制中，蛋白質(zhì)組成及其變化的規(guī)律。

2.2 蛋白組學(xué)技術(shù)在研究互作機(jī)理中的應(yīng)用

禾谷鐮刀菌（Fusarium graminearum）DK21菌株中發(fā)現(xiàn)一種弱毒真菌病毒（Fusarium graminearumvirus 1, FgV1）[20]。利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分別對病毒侵染前后的菌株進(jìn)行雙向電泳及質(zhì)譜分析表明，148個(gè)位點(diǎn)中23種蛋白質(zhì)表達(dá)發(fā)生了差異表達(dá)。其中，參與細(xì)胞分化、代謝和蛋白質(zhì)合成相關(guān)的7種蛋白質(zhì)被顯著上調(diào)；而參與代謝、細(xì)胞組成、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、防御和毒力相關(guān)的16種蛋白質(zhì)被顯著下調(diào)。初步證實(shí)FgV1能夠調(diào)控寄主真菌的相關(guān)蛋白表達(dá)水平，提高對病毒侵染的敏感性。寄主真菌的多種蛋白質(zhì)表達(dá)差異的鑒定，為該互作系統(tǒng)機(jī)制的后續(xù)研究提供了有力支撐。在病毒侵染后36 h和120 h 的2個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)，通過對產(chǎn)生差異表達(dá)的蛋白基因數(shù)據(jù)再次進(jìn)行實(shí)時(shí)分析。結(jié)果顯示，早期FgV1能夠通過上調(diào)禾谷鐮刀菌中的轉(zhuǎn)錄與翻譯機(jī)制，以此促進(jìn)病毒復(fù)制。相比之下，參與細(xì)胞代謝和運(yùn)輸系統(tǒng)所需的基因被顯著下調(diào)，以此破壞宿主的防御機(jī)制與真菌毒力[21]。為進(jìn)一步研究蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)病毒的RNA復(fù)制機(jī)制，Son等[22-23]通過轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)組學(xué)分析，以禾谷鐮刀菌中的伏魯寧體成分蛋白FgHex1作為研究對象，通過構(gòu)建缺乏和過表達(dá)FgHex1蛋白的突變體菌株，以及使用FgHex1蛋白和FgV1基因組的RNA序列進(jìn)行了電泳遷移率分析（electrophoretic mobility shift assays，EMSA），證明FgHex1可能通過特異性結(jié)合FgV1基因組RNA在FgV1侵染禾谷鐮刀菌的復(fù)制中起直接作用，并促進(jìn)病毒RNA在FgV1感染的宿主真菌中的積累。這是首次關(guān)于真菌細(xì)胞蛋白可以直接與病毒基因組RNA結(jié)合的報(bào)道[24]。

禾谷鐮刀菌包含2種編碼dicer蛋白的基因（FgDicer1和FgDicer2）和2種編碼Argonaute蛋白的基因（FgAgo1和FgAgo2）。有研究表明，dicer蛋白和Argonaute蛋白在發(fā)夾RNA（hpRNA）介導(dǎo)的RNA沉默病毒防御機(jī)制中發(fā)揮了關(guān)鍵作用[25]。為研究禾谷鐮刀菌中RNA沉默相關(guān)的病毒防御機(jī)制，Yu等[26-27]通過綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)錄本表達(dá)測定以及開放閱讀框（open reading frame,ORF）的表達(dá)轉(zhuǎn)錄水平差異測定證實(shí)，F(xiàn)gV1 ORF2編碼蛋白（pORF2）能夠體外與FgDICERs和FgAGOs的上游區(qū)域結(jié)合，抑制寄主真菌防御相關(guān)基因的表達(dá)。

3 基于代謝組學(xué)的真菌病毒與寄主真菌互作

3.1 代謝組學(xué)研究方法內(nèi)源性代謝物受機(jī)體內(nèi)基因以及蛋白質(zhì)的調(diào)控，其在機(jī)體的豐度能夠直接地反映疾病發(fā)生的表征生物學(xué)信息規(guī)律。代謝組學(xué)（Metabolomics）研究對象是某一生物、系統(tǒng)或細(xì)胞中所有代謝產(chǎn)物的集合[28]。目前，代謝組學(xué)研究主要采用核磁共振（nuclear magnetic resonance,NMR）和質(zhì)譜這2種分析技術(shù)。而隨著質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展，氣相色譜質(zhì)譜（gas chromatography/mass spectrometry, GC/MS）、液相色譜質(zhì)譜（liquid chromatography/mass spectrometry, LC/MS）等測定方法也不斷提高和完善，已成為代謝組學(xué)研究的重要工具[29]。在真菌病毒互作研究領(lǐng)域，可以通過GC-MS分析方法，獲得內(nèi)源性代謝物譜，之后利用主成分分析（principal component analysis,PCA）對樣本原始數(shù)據(jù)進(jìn)行降維處理，然后運(yùn)用最小二乘法判別分析（partial least squares discriminant analysis, PLS-DA）以及正交偏最小二乘方判別分析（orthogonal partial least square discriminant analysis, OPLS-DA）識別代謝物譜，判別組間差異大小。最終通過差異倍數(shù)分析、聚類分析以及富集分析等分析手段，揭示真菌病毒侵染過程代謝物組分的差異變化，進(jìn)而推導(dǎo)出被真菌病毒侵染的寄主真菌體內(nèi)代謝紊亂的相關(guān)生理機(jī)制。

3.2 代謝組學(xué)技術(shù)在研究互作機(jī)理中的應(yīng)用

立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）是引起水稻紋枯病的病原真菌。筆者所在實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)，水稻紋枯病菌D122菌株中有3種dsRNA真菌病毒（Rhizoctonia solanidsRNA virus 1～3, Rs-RV1～3）存在[30-31]。一種導(dǎo)致其致病力減弱的內(nèi)源性RNA病毒（Rhizoctonia solaniendornavirus 1,RsEV1）在立枯絲核菌GD-2菌株中被發(fā)現(xiàn)。利用GS-MS分析表明，致病強(qiáng)毒菌株GD-118P與其同基因低毒力菌株GD-118P-V1之間有32種代謝物的差異表達(dá)。差異代謝物主要包含有機(jī)酸、氨基酸、碳水化合物和能量代謝的中間產(chǎn)物。參與了戊糖和葡萄糖醛酸的相互轉(zhuǎn)化以及乙醛酸、二羧酸、淀粉和蔗糖等代謝途徑。綜合研究結(jié)果分析，RsEV1侵染立枯絲核菌后可導(dǎo)致代謝紊亂，從而降低其侵染毒性[32]。

灰霉菌（Botrytis cinerea）是寄主廣泛且具嚴(yán)重破壞性的植物病原真菌之一，引起全球200多種作物的灰霉病，造成嚴(yán)重的積極損失[33]。真菌病毒（Botrytis virus F, BVF）是一種被認(rèn)為能夠造成灰霉菌產(chǎn)生低毒性的ssRNA弱毒真菌病毒，通過代謝組學(xué)分析，BVF的侵染造成灰霉菌中的多種代謝物體出現(xiàn)了明顯的差異表達(dá)，包括碳水化合物、氨基酸、脂肪酸的代謝情況。其中，甘氨酸和蘇氨酸被顯著下調(diào)，而甲硫氨酸、纈氨酸和同型半胱氨酸的表達(dá)水平被顯著上調(diào)[34]。近期，Córdoba等[35]通過構(gòu)建BVF的侵染性克隆體，將病毒成功導(dǎo)入2種不同的灰霉菌菌株（B05.10和Pi258.9），然而，通過表型分析顯示，在菌絲營養(yǎng)生長以及致病力方面，BVF侵染的灰霉菌菌株與無毒菌株并無明顯差異。

4 小結(jié)與展望

利用多組學(xué)研究真菌病毒與寄主真菌互作已是近年來廣泛的研究方法，尤其是利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)對真菌病毒的侵染機(jī)制進(jìn)行研究。轉(zhuǎn)錄組學(xué)相較于傳統(tǒng)互作研究方法以及其他組學(xué)研究方法，有著更好的前瞻性和針對性。從本質(zhì)上來看，病毒與寄主的互作機(jī)制，是在蛋白質(zhì)水平上體現(xiàn)的。而蛋白質(zhì)受基因的調(diào)控，而代謝物提供實(shí)時(shí)生物學(xué)表型的終端信息。利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)進(jìn)行分析能夠快速推斷未知基因的功能，并從轉(zhuǎn)錄水平揭示產(chǎn)生蛋白質(zhì)互作的機(jī)理。而發(fā)掘寄主真菌轉(zhuǎn)錄水平的差異，能夠揭示真菌病毒侵染寄主真菌造成其發(fā)生疾病現(xiàn)象的本質(zhì)。相比于轉(zhuǎn)錄水平，蛋白質(zhì)表達(dá)水平更適合作為動態(tài)的生化指標(biāo)。蛋白質(zhì)組學(xué)能夠發(fā)掘侵染過程中真菌病毒與寄主真菌中蛋白質(zhì)互作的機(jī)制，從兩者互作的這一關(guān)鍵環(huán)節(jié)揭示其相互關(guān)系。而基因與蛋白質(zhì)水平表達(dá)的差異在代謝水平上放大，使其更易檢測，也準(zhǔn)確地提供寄主真菌在受真菌病毒侵染后的表型信息。相比于其他組學(xué)，代謝組學(xué)反應(yīng)蛋白質(zhì)在功能上的作用，是連接其他組學(xué)和表型之間的橋梁，能夠反映生物狀態(tài)的實(shí)時(shí)信號，如果說研究基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)能夠推斷病毒與寄主互作的原理機(jī)制，那么研究代謝組學(xué)將能夠揭示病毒與寄主互作時(shí)細(xì)胞生命活動發(fā)生的實(shí)時(shí)差異變化。但無論通過何種組學(xué)技術(shù)分析研究，都離不開發(fā)掘和篩選其中的數(shù)據(jù)差異，通過分析數(shù)據(jù)差異來探尋病毒侵染寄主背后，調(diào)控因子的作用功能以及互作的復(fù)雜原理機(jī)制。需要注意的是，組學(xué)技術(shù)的誕生，是為了探尋生物體微觀層面的變化，以發(fā)掘生命活動中深層次的因素。這就需要操作平臺的靈敏度和精確度能夠達(dá)到比較高的水平，因此每次測量所花費(fèi)的資金成本較高。并且，受平臺技術(shù)限制，單一儀器無法對測量目標(biāo)進(jìn)行多方位的測量，難免會造成測量數(shù)據(jù)出現(xiàn)假陽性。

生物與生物之間的關(guān)系是相互促進(jìn)，相互進(jìn)化的。生物會隨時(shí)間進(jìn)化出符合自身?xiàng)l件與適應(yīng)環(huán)境的生存法則。多組學(xué)技術(shù)的發(fā)展為探索真菌病毒更為復(fù)雜的侵染機(jī)制提供了可能，而多組學(xué)聯(lián)合分析在真菌病毒與寄主真菌互作機(jī)制研究中也具有獨(dú)特的優(yōu)勢，可以填補(bǔ)單一組學(xué)數(shù)據(jù)分析的數(shù)據(jù)假陽性帶來的問題，通過多組學(xué)數(shù)據(jù)之間的相互驗(yàn)證，提高數(shù)據(jù)的可信度[36]。更重要的是，多組學(xué)數(shù)據(jù)的聯(lián)合分析，能探究真菌病毒與寄主真菌互作過程的各類生命物質(zhì)的演化，更利于對互作位點(diǎn)的發(fā)掘以及真菌病害發(fā)生完整機(jī)制的研究。真菌病毒與其寄主真菌在植物上的互作，是不同于實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)物上的相互作用。對于已發(fā)現(xiàn)的互作機(jī)制，可以利用多組學(xué)技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證。此外，根據(jù)病毒侵入真菌時(shí)兩者發(fā)生互作的關(guān)鍵位點(diǎn)，以此為突破口，或許對受到菌體不親和限制的菌株或真菌病毒進(jìn)行基因改造，能夠拓展真菌病毒的傳播途徑，以打破真菌病毒在菌株間的傳播受到菌體不親和的限制[37]。倘若要對有價(jià)值的真菌病毒進(jìn)行利用，還需要通過多組學(xué)系統(tǒng)地研究真菌病毒、真菌和植物之間的三重相互作用，以探究其在自然環(huán)境中作用的真實(shí)性。