孔茲創(chuàng)傷球菌致背部膿腫1例

黃廷廷,金菲,夏文穎,倪芳,陸燕飛(.東海縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇連云港222322;2.南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)學(xué)部,南京20029;3.國家醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床醫(yī)學(xué)研究中心分中心,南京20029)

孔茲創(chuàng)傷球菌是一種革蘭陽性球菌,觸酶陰性、兼性厭氧,1993年首次在傷口中分離得到[1]。該菌最初被認(rèn)為是人和動物皮膚的正常定植菌,尤其是在下肢皮膚[2]。目前認(rèn)為,孔茲創(chuàng)傷球菌是人類少見的機(jī)會性感染病原菌,且對人體具有潛在致病性[3]。該菌引起的臨床感染少見,主要引起糖尿病等患有基礎(chǔ)疾病及免疫力低下患者下肢及足部的化膿性感染,也可引起軟組織膿腫、蜂窩織炎、感染性心內(nèi)膜炎、腦膜炎甚至敗血癥等嚴(yán)重感染[1-4]。由孔茲創(chuàng)傷球菌引起的軟組織感染部位包括下肢、足部、乳腺、胸部、肩部等,背部膿腫尚未見報(bào)道[4]。2021年5月,從1例高血壓患者背部膿腫中分離出純培養(yǎng)的孔茲創(chuàng)傷球菌,報(bào)道如下。

1 病歷摘要

患者男,65歲,因背部局部出現(xiàn)一包塊,伴紅腫、疼痛,于當(dāng)?shù)匦l(wèi)生院行抗炎治療(具體藥物不詳),10余天后紅腫未見明顯緩解,自覺紅腫疼痛漸加重,遂于2021年5月31日在江蘇省東?？h人民醫(yī)院皮膚科門診就診,門診擬“背部膿腫”收治入院。患者既往高血壓病史10年,血壓控制良好。入院體格檢查:體溫36.6 ℃,脈搏72次/分,呼吸20次/分,血壓128/71 mmHg;?？茩z查:背部包塊,伴紅腫,大小約3 cm×3 cm,中間稍隆起,有壓痛,輕微波動感,邊界清,活動差,無異常搏動;實(shí)驗(yàn)室檢查:白細(xì)胞計(jì)數(shù) 6.18×109/L,中性粒細(xì)胞百分比64.1%,血紅蛋白 133 g/L,D-二聚體3.44 mg/L,空腹血糖 5.81 mmol/L。患者于入院當(dāng)天局部麻醉下行“背部膿腫切開引流術(shù)”,患處皮膚表面消毒后,切開表面皮膚,見有較多膿液,取深部膿液送微生物實(shí)驗(yàn)室檢查,清除膿胎及壞死組織,術(shù)后予以頭孢唑肟鈉抗感染。6月4日膿液培養(yǎng)提示孔茲創(chuàng)傷球菌,根據(jù)藥敏結(jié)果,繼續(xù)原抗菌藥物治療方案。6月6日患者背部切口愈合尚可,無明顯膿液,輔料干燥,予以出院。

2 微生物學(xué)檢查及結(jié)果

2.1細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定 膿液送至微生物實(shí)驗(yàn)室后立即接種于血瓊脂平板及巧克力平板,同時(shí)進(jìn)行需氧及厭氧培養(yǎng),需氧培養(yǎng)置于5% CO2培養(yǎng)箱,厭氧培養(yǎng)置于厭氧袋中。35 ℃需氧及厭氧培養(yǎng)48 h后血平板均見圓形、細(xì)小、半透明似露珠、輕微α溶血的菌落,見圖1A。菌落革蘭染色鏡檢見革蘭陽性球菌,成雙、成團(tuán)或四聯(lián)排列,大小不等,較葡萄球菌稍大,見圖1B。

注:A,血平板需氧培養(yǎng)48 h后菌落形態(tài);B,菌落涂片革蘭染色油鏡(×1 000)。

該菌使用鄭州安圖生物公司全自動微生物質(zhì)譜檢測系統(tǒng)Autof ms1000鑒定為孔茲創(chuàng)傷球菌(Helcococcuskunzii,得分9.705),使用法國生物梅里埃公司Vitek 2 Compact全自動微生物分析系統(tǒng)GP卡鑒定為孔茲創(chuàng)傷球菌(Helcococcuskunzii,鑒定率94%,生物編碼:020112300111020)。該菌進(jìn)一步送至南京擎科生物有限公司進(jìn)行分子生物學(xué)檢測,使用16S rDNA基因測序,引物序列:27F,5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′;1492R,5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′,反應(yīng)條件:98 ℃變性10 s,55 ℃退火10 s,72 ℃延伸10 s,循環(huán)35次。采用ABI 3730測序儀進(jìn)行檢測,測序結(jié)果經(jīng)BLAST比對后,與孔茲創(chuàng)傷球菌(GenBank登錄號:MW391555.1)99.86%同源。

2.2藥敏試驗(yàn) 美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(CLSI)無孔茲創(chuàng)傷球菌的藥敏試驗(yàn)方法及折點(diǎn)判讀,參考鏈球菌藥敏方法,采用5%綿羊血MHA培養(yǎng)基,使用E-test法對菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn),48 h后觀察結(jié)果,各藥物最低抑菌濃度(MIC)值分別為:青霉素0.012 μg/mL,氨芐西林0.064 μg/mL,紅霉素>256 μg/mL,克林霉素>256 μg/mL,頭孢曲松0.125 μg/mL,萬古霉素0.38 μg/mL,利奈唑胺2 μg/mL,亞胺培南0.16 μg/mL。

3 討論

本例為孔茲創(chuàng)傷球菌引起高血壓患者的背部膿腫,此感染部位尚未見報(bào)道,且為孔茲創(chuàng)傷球菌單菌感染,再一次證實(shí)了該菌的致病性及易感人群。因此,當(dāng)臨床分離出孔茲創(chuàng)傷球菌時(shí),應(yīng)引起重視并考慮其致病性。目前,有關(guān)孔茲創(chuàng)傷球菌致病機(jī)制的研究不多,其特殊的N端結(jié)構(gòu)及染色體中的甲基化酶基因erm(47)可能與之相關(guān)[4-5]。

創(chuàng)傷球菌在表型及生化特征上與氣球菌相近,臨床應(yīng)注意鑒別,孔茲創(chuàng)傷球菌在厭氧環(huán)境中生長良好、α-溶血不明顯、不分解蔗糖、菊糖、棉子糖和甘露醇等碳水化合物,不水解膽汁七葉苷、不產(chǎn)生β-半乳糖苷酶、對紅霉素多耐藥,而綠色氣球菌則相反[1,3]。自動化鑒定儀器中,API 20 Strep鑒定系統(tǒng)不可靠,易將孔茲創(chuàng)傷球菌錯(cuò)誤鑒定為綠色氣球菌,Vitek 2 Compact及基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜儀可準(zhǔn)確鑒定該菌[3,6-7]。本例亦是通過上述兩種儀器準(zhǔn)確鑒定出孔茲創(chuàng)傷球菌,并經(jīng)16S rDNA確認(rèn)。

創(chuàng)傷球菌的體外藥敏試驗(yàn)數(shù)據(jù)缺乏,CLSI無相應(yīng)折點(diǎn)判讀標(biāo)準(zhǔn)。Vergne等[8]參考?xì)W洲抗菌藥敏試驗(yàn)委員會(EUCAST)草綠色鏈球菌折點(diǎn),利用微量肉湯稀釋法測定了39株孔茲創(chuàng)傷球菌對18種抗菌藥物的敏感性,發(fā)現(xiàn)該菌對β-內(nèi)酰胺類藥物、萬古霉素、利奈唑胺、達(dá)托霉素、替考拉寧敏感性最高,對紅霉素耐藥率最高、其次為克林霉素,并建議β-內(nèi)酰胺類藥物尤其是青霉素可作為孔茲創(chuàng)傷球菌感染的首選藥物。本例孔茲創(chuàng)傷球菌對紅霉素及克林霉素的MIC值均高于256 μg/mL,對其余藥物MIC值均較低,與上述文獻(xiàn)報(bào)道一致。目前,孔茲創(chuàng)傷球菌感染的臨床治療以β-內(nèi)酰胺類藥物及萬古霉素為主,甲硝唑和利福平也有治療成功的案例報(bào)道[4]。除藥物治療外,外科清創(chuàng)引流是快速有效清除病原體的重要方式,特別是在處理創(chuàng)傷球菌引起的局部感染時(shí)[9]。本例患者先行抗炎治療效果不佳,后通過膿腫切開引流術(shù),迅速改善了預(yù)后。

綜上,孔茲創(chuàng)傷球菌是人類少見的潛在致病性微生物,臨床應(yīng)引起重視,微生物檢驗(yàn)人員應(yīng)提高對該菌的認(rèn)識,快速準(zhǔn)確地鑒定病原菌對后期抗感染治療具有重要意義。