2016—2021年血型血清學實驗室間質量評價結果分析*

周劉祥,謝毓濱,曠開其,陽智芬,彭俏,王清(長沙血液中心輸血研究所,長沙410001)

輸血相容性檢測的準確性是保證患者用血安全的重要因素,參加實驗室間質量評價(室間質評)是評價實驗室檢測能力的重要手段[1]。為提高血型血清學實驗室檢測的準確性,更好地服務臨床輸血,本研究回顧性分析本實驗室參加2016—2021年WHO中國地區(qū)血型血清學輸血室間質評(以下簡稱WHO-NEQAS)中與參考答案的不符項,審視本實驗室的問題和不足之處,舉一反三分析日常檢測中可能影響到檢測質量的因素,如人員培訓、試劑和方法的選擇、環(huán)節(jié)質控等內容并提出解決策略;同時通過與WHO-NEQAS實驗室溝通交流,反饋其中存在的問題,有利于WHO-NEQAS方案的持續(xù)優(yōu)化。

1 材料與方法

1.1數(shù)據(jù)來源 本實驗室2016—2021年參加WHO-NEQAS的12份報告,室間質評樣本由上海市血液中心血型參比實驗室發(fā)放,每年發(fā)放2次,每次含21個項目,共計252項。

1.2主要試劑與設備 抗A、抗B血清(長春博德公司),ABO試劑紅細胞(上海血液公司),抗D血清(上海血液公司、英國Millipore公司、荷蘭sanquin公司),抗人球蛋白(上海血液公司、荷蘭sanquin公司),微柱凝膠卡(荷蘭sanquin公司), 篩選細胞(上海血液公司、荷蘭sanquin公司), 譜細胞(上海血液公司、荷蘭sanquin公司);KA-2200血清學離心機(日本久保田公司),恒溫孵育器(美國Bio-Rad公司)。

1.3檢測方法 采用試管法和微柱凝膠法檢測,具體操作步驟依據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[2]參照執(zhí)行。

2 結果

2.1WHO-NEQAS結果 12份報告結果均為滿意,Z值均值為0.53,其中有6份結果為0,有3份Z值相對其他報告略高。ABO定型項目參考答案不僅包含了3種臨床常見血型,還設置了一份亞型樣本;RhD定型陽性率80.6%,涵蓋了陽性、陰性、變異型及有輸血史患者的檢測,其中D變異平均符合率只有47.9%。36項抗體篩選中,抗體陽性率為44.4%,其中多重抗體占25.0%(9/36),遠高于臨床[4],且多重抗體鑒定的平均符合率僅55.8%,可見對RhD陰性、D變異及復合抗體鑒定是WHO-NEQAS的重點和難點。2016—2021年WHO-NEQAS項目參考答案分布見表1。

表1 WHO-NEQAS項目參考答案分布情況

2.2WHO-NEQAS中抗體分布情況 16例抗體鑒定項目中檢出27個抗體,覆蓋了6個系統(tǒng)的12種類型,3項中含有不確定抗體,排名前三的系統(tǒng)分別為Rh血型系統(tǒng)59.26%(16/27)、MNS血型系統(tǒng)11.11%(3/27)和Lewis血型系統(tǒng)7.41%(2/27),與臨床上檢出的不規(guī)則抗體分布基本一致[4],見表2。

表2 抗體鑒定的抗體分布

2.3本實驗室結果與參考答案不符合情況 252項結果中,本實驗室符合率為94.0%(238/252),有15項與參考答案不一致,主要分布在RhD定型和抗體鑒定項目中,產生罰分的11項包括ABO定型1項、RhD定型4項、抗體鑒定5 項和交叉配血1項,其中抗體鑒定罰分均為復合抗體。在4例不符合且未予罰分項結果中,18N2-1歸于WHO-NEQAS首次考察D變異而未設置該項;16N2-2樣本發(fā)放后隨著時間推移Leb抗體效價由1下降至更低;16N2-3中由于大多數(shù)品牌的篩選鑒定細胞中不包含Wra抗原。見表3。

表3 本實驗室結果與參考答案不符合的分布

3 討論

2016—2021年本實驗室12次質評結果均為滿意,Z值分布無趨勢現(xiàn)象,252項檢測結果整體符合率為94.0%(238/252),反映出本實驗室總體水平較好。其中有3份新員工參與檢測的Z值相對其他報告略高,提示在日常工作中應注意加強對新員工處理疑難樣本的帶教、指導和培訓,嚴格執(zhí)行雙人復核的工作模式。

本實驗室在ABO定型中21N2-3的不確定為AB3型,試管法中抗B、抗AB常呈3+以上強陽性混合凝集,很容易誤判為AB型[5];試管法判斷結果時,應注意多次離心結合使用顯微鏡,有條件的可聯(lián)合采用微柱凝膠法避免亞型的漏檢。在RhD定型中19N2-1的不符合歸于檢測人員忽略了近期輸血史這一重要的臨床信息,導致混合凝集現(xiàn)象的漏檢,此類樣本可使用毛細管超速離心法輔助判斷[6];21N2-1不符是由于樣本直接抗球蛋白試驗和自身抗體陽性對鑒定的影響,該類樣本可通過放散方法或采用木瓜酶處理至直接抗球蛋白試驗陰性后實驗[7-8];21N2-3血清學反應凝集呈2+s,對獻血者的判定習慣將其判為陽性,提示應重視弱反應結果,規(guī)范RhD結果的判定標準?？贵w鑒定的3例多檢、2例漏檢罰分均與Rh血型抗體相關,這對人員在譜細胞格局微弱差異的辨析能力提出挑戰(zhàn);17N1-3、18N2-2和19N1-2的多檢樣本其血漿內均含有自身或不確定抗體,復合或多重抗體的存在導致格局不清晰,應注意參照抗體篩選結果、自身紅細胞表型、血清學增強技術等措施輔助鑒定[9]。交叉配血17N2-3與3號獻血者的罰分是由于患者體內的弱抗e抗體的漏檢導致假陰性。

綜上所述,本實驗室通過參加WHO-NEQAS,對自身的檢測能力有了一個客觀的評估;針對室間質評中出現(xiàn)的問題提出改進措施,做好實驗室質量控制,不斷提高實驗室的檢測能力,保障臨床輸血安全。