氨基酸分析儀檢出限以及分離度不確定的評定

佟俊婷

【摘要】本文使用氨基酸混合標準物質(zhì)，對氨基酸分析儀檢出限以及分離度進行不確定度評定。結(jié)果表明：檢出限擴展相對不確定度為9.6%，通過不確定度分析，基線噪聲的波動性對儀器檢出限的影響最大，降低基線噪聲可有效改善儀器檢出限；分離度的擴展相對不確定度為6.1%，通過不確定度分析發(fā)現(xiàn)，標準物質(zhì)的不確定度以及待測物濃度對分離度的影響最大，在儀器的線性范圍內(nèi)適當增大待測物濃度可有效改善待測物的分離度。

【關鍵詞】氨基酸分析儀；不確定度評定；檢出限；分離度

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2023.02.012

【基金項目】遼寧省檢驗檢測認證中心青年人才創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項目（SC20210106）。

Evaluation of Uncertainty of Detection Lmit and Resolution of Amino Acid Analyzer

TONG Junting

（Liaoning Institute of Measurement，Shenyang 110004，China）

Abstract：In this paper，the mixed standard substance of amino acid is used to evaluate the uncertainty of detection limit and resolution of amino acid analyzer. The results show that the expanded relative uncertainty of the detection limit is 9.6%. Through uncertainty analysis，the fluctuation of baseline noise has the greatest impact on the detection limit of the instrument. Reducing baseline noise can effectively improve the detection limit of the instrument. The expanded relative uncertainty of degree of separation is 6.1%. Through uncertainty analysis，the uncertainty of reference materials and concentration of the analytes has the greatest impact on the degree of separation. Appropriately increasing the concentration of the analytes within the linear range of the instrument can effectively improve the degree of separation of the instrument.

Key words：amino acid analyzer；evaluation of uncertainty；detection limit；degree of separation

氨基酸分析儀是一款廣泛應用于食品科學、農(nóng)業(yè)環(huán)境、生物化學、醫(yī)療衛(wèi)生及化工領域的分析儀器[1-2]。氨基酸分析儀的基本原理為：試樣經(jīng)過前處理去蛋白之后，樣液經(jīng)離子交換柱層析分離，被分離出的氨基酸通過柱后衍生與茚三酮溶液反應顯色，用紫外檢測器檢測，外標法定量[3-4]。檢出限是評價分析方法的重要指標，一般分為儀器檢出限、分析方法檢出限。儀器檢出限是指分析儀器能區(qū)分噪聲的最低檢出濃度的能力，而方法檢出限不但與儀器噪聲有關，還與方法全部流程的各個環(huán)節(jié)相關。目前，研究方法檢出限的較多，但較少有針對儀器檢出限不確定度進行評定的方法。為正確評估儀器檢出限，本文將針對氨基酸分析儀進行儀器檢出限不確定度的評定，為檢出限不確定度評定提供解決方案。分離度是氨基酸分析儀判斷待測物質(zhì)在色譜柱中分離情況的另一個重要指標。氨基酸分析儀的分離度是指峰高分離度。本文通過結(jié)合分離度和儀器檢出限的不確定度分析，對氨基酸分析儀的性能水平作出準確評價。

1材料與方法

1.1材料與儀器

17種氨基酸混合標準溶液：濃度約為1 mmol/L，擴展不確定度為0.02～0.04 mmol/L（k=2），中國計量科學研究院生產(chǎn)；電子天平：Ⅰ級，感量為0.1 mg，METTLER TOLEDO公司；L-8900型氨基酸分析儀：日立公司；游標卡尺：測量范圍為0～150 mm，最小分度0.02 mm，檢定的不確定度為0.04 mm，k=2，桂林廣陸數(shù)字測控股份有限公司；容量瓶：100 mL/250 mL/1000 mL，A級。

1.2方法

1.2.1樣品

取適量濃度、適量體積氨基酸標準物質(zhì)注入儀器，準備檢出限以及分離度的測定。

1.2.2測定方法

本次使用的氨基酸分析儀采用衍生化間接分析方法，原理是基于陽離子交換樹脂分離-柱后茚三酮衍生化分光光度檢測方法。本方法使用陽離子交換樹脂柱為固定相，酸性緩沖液為流動相，經(jīng)過離子交換柱樣品中不同種類的氨基酸分離流出后，與茚三酮進行衍生反應，生成具有可見光吸收的衍生物，進入檢測器，選用570 nm進行定量檢測。

2氨基酸分析儀檢出限不確定度評定

2.1數(shù)學模型的建立