新生兒缺氧缺血性腦病患兒血清IL-6 的表達及臨床意義研究*

汪桂美 肖文靜 趙裕君

（廣東省惠東縣人民醫(yī)院新生兒科 惠東 516300）

缺氧缺血性腦?。℉IE）是由于腦組織缺氧缺血導(dǎo)致的病變，以胎兒宮內(nèi)窘迫、不同程度意識障礙、顱內(nèi)壓升高等為主要臨床表現(xiàn)，病情至重度時則會出現(xiàn)呼吸暫停、持續(xù)性強直、中樞性呼吸衰竭等癥狀，從而影響腦干[1]。已有臨床研究表明，新生兒HIE可發(fā)生于圍產(chǎn)期的各個階段，且產(chǎn)婦合并妊娠期相關(guān)并發(fā)癥、胎盤與臍帶異常、重度溶血性休克等均可提高新生兒HIE 的發(fā)生風(fēng)險[2]。新生兒HIE 被認為是導(dǎo)致死亡、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育障礙的重要因素，若未及時給予診斷與治療則會導(dǎo)致患兒出現(xiàn)不同程度的視聽損害、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，威脅新生兒生命健康[3]。白細胞介素-6（IL-6）是臨床應(yīng)用較為廣泛的多功能細胞因子，其是由T 細胞2（Th2）產(chǎn)生的因子，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)中具有重要意義[4]。此外，IL-6 涉及炎癥免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)與急性期反應(yīng)，在正常新生兒的腦脊液中可不表達，而當(dāng)腦組織受到外源性刺激后，其合成增加并釋放進入腦脊液與血液中。國內(nèi)外已有研究表明[5～6]，IL-6 在調(diào)節(jié)機體損傷于防御中扮演重要角色，且可參與疾病的發(fā)生與發(fā)展過程。鑒于此，本研究研究新生兒HIE 患兒血清IL-6 的表達及臨床意義，并分析不同病變嚴重程度患兒血清IL-6 水平差異?，F(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021 年4 月至2022 年4 月惠東縣人民醫(yī)院新生兒科收治的30 例新生兒HIE患兒作為HIE 組，男18 例，女12 例；胎齡37～42周，平均（38.56±0.54）周；出生體質(zhì)量2 500～4 000 g，平均（2 793.21±141.59）g。另選取同期在醫(yī)院分娩的30 例正常健康新生兒作為對照組，男20 例，女10 例；胎齡37～42 周，平均（38.64±0.51）周；出生體質(zhì)量2 500～4 000 g，平均（2 814.85±140.79）g。兩組一般資料比較均衡性良好（P＞0.05）。

1.2 入組標準 納入標準：（1）HIE 組符合《新生兒缺氧缺血性腦病診斷標準》[7]中的HIE 相關(guān)診斷標準；有明確的胎兒宮內(nèi)窘迫病史，或在分娩過程中有明顯窒息史；新生兒出生時1 min 阿氏評分（Apgar）≤3 分，新生兒重度窒息；出生后出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，且持續(xù)24 h 以上；排除顱內(nèi)出血、電解質(zhì)紊亂、宮內(nèi)感染、遺傳性代謝性疾病等病因引起的抽搐或腦損傷；（2）胎齡37～42 周；（3）家屬均簽署知情同意書。排除標準：（1）合并感染性疾病；（2）合并先天性畸形、先天性心臟病等；（3）合并顱內(nèi)感染、黃疸等導(dǎo)致神經(jīng)功能異常；（4）孕婦在妊娠期間使用過免疫抑制劑等藥品。

1.3 研究方法

1.3.1 血清IL-6 水平檢測 于新生兒出生后1 d、3 d、10 d 采集靜脈血2 ml，離心處理（3 000 r/min，10 min）后獲得上清液保存待檢。儀器選擇RT-6100 雷杜（Rayto）酶標分析儀，采用酶聯(lián)免疫吸附實驗法（ELISA）對IL-6 水平進行檢測，所有操作均嚴格按照試劑盒說明書完成。

1.3.2 新生兒行為神經(jīng)測定（NBNA）評分 HIE 組患兒出生12～24 h 內(nèi)（急性期）、出生后10～14 d（恢復(fù)期）進行NBNA 評分，量表包含新生兒行為能力、被動肌張力、主動肌張力、原始反射及一般評估等5個方面，共20 項。每項以0～2 分計分，總分為0～40分，得分＜35 分提示患兒預(yù)后可能較差。

1.3.3 病情嚴重程度 HIE 組患兒根據(jù)病情嚴重程度分為輕度組（7 例）、中度組（12 例）及重度組（11例）。參照新生兒HIE 病情嚴重程度分級標準進行病情嚴重程度的評估。見表1。

表1 新生兒HIE 病情嚴重程度分級

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS25.0 軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗；符合正態(tài)分布的計量資料以（）表示，采用獨立樣本t檢驗。采用Spearman 相關(guān)系數(shù)分析IL-6 水平與NBNA 評分的相關(guān)性，繪制受試者工作特征（ROC）曲線，分析血清IL-6 預(yù)測HIE 病情嚴重程度的價值。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組別IL-6 水平對比 輕度組與對照組出生后1 d、3 d、10 d IL-6 水平相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；中度組與重度組出生后1 d、3 d、10 d IL-6 水平均高于輕度組、對照組（P＜0.05）；重度組出生后1 d、3 d、10 d IL-6 水平高于中度組（P＜0.05）。見表2。

表2 不同組別出生后1 d、3 d、10 d IL-6 水平對比（ng/L，）

表2 不同組別出生后1 d、3 d、10 d IL-6 水平對比（ng/L，）

注：與對照組相比，*P＜0.05；與輕度組相比，#P＜0.05。

組別n1 d3 d10 d HIE 組輕度組中度組重度組對照組30 7 12 11 30 28.51±9.06 15.72±2.53 28.98±3.54*#36.14±6.76*#15.42±6.89 23.41±6.86 15.26±3.67 22.89±3.46*#29.17±5.63*#16.74±7.43 22.15±4.99 14.96±2.71 22.79±2.17*#26.03±3.25*#15.24±5.91

2.2 HIE 組急性期與恢復(fù)期IL-6 水平、NBNA 評分對比 HIE 組急性期IL-6 水平高于恢復(fù)期，NBNA評分低于恢復(fù)期（P＜0.05）。見表3。

表3 HIE 組急性期與恢復(fù)期IL-6 水平、NBNA 評分對比（）

表3 HIE 組急性期與恢復(fù)期IL-6 水平、NBNA 評分對比（）

時間nIL-6（ng/L）NBNA（分）急性期恢復(fù)期30 30 t P 21.48±4.85 16.37±5.80 3.702 0.001 34.83±1.64 37.21±1.05 6.694 0.000

2.3 HIE 組急性期、 恢復(fù)期IL-6 水平與NBNA 評分的相關(guān)性分析 經(jīng)點二列相關(guān)性分析結(jié)果顯示，急性期、恢復(fù)期IL-6 水平與NBNA 評分呈負相關(guān)（r＜0，P＜0.05）。見表4。

表4 HIE 組急性期、恢復(fù)期IL-6 水平與NBNA 評分的相關(guān)性分析

2.4 血清IL-6 預(yù)測HIE 患兒病情嚴重化程度的價值分析 將血清IL-6 水平作為檢驗變量，HIE 患兒病情嚴重程度作為狀態(tài)變量（1=輕度組，2=中度組，3=重度組），繪制ROC 曲線結(jié)果顯示，血清IL-6水平預(yù)測新生兒HIE 病情嚴重程度的曲線下面積（AUC）為0.745（0.526～0.964），具有一定預(yù)測價值。見表5、圖1。

圖1 血清IL-6 預(yù)測HIE 患兒病情嚴重程度的ROC 曲線圖

表5 血清IL-6 預(yù)測HIE 患兒病情嚴重程度的價值分析

3 討論

現(xiàn)階段，HIE 的發(fā)病機制尚未完全明確，多認為與各種因素引起的腦組織缺血缺氧密切相關(guān)。新生兒腦部在出現(xiàn)缺氧情況下會出現(xiàn)腦血管的調(diào)節(jié)功能下降，腦血流灌注受到全身因素的影響而減少；同時，血管周圍星形細胞腫脹與血管內(nèi)皮細胞水泡樣變性可引起管腔狹窄甚至閉塞。在腦血流恢復(fù)后，血液無法流入缺血區(qū)域，會導(dǎo)致區(qū)域性的缺血，進一步發(fā)展為腦實質(zhì)不可逆損傷[8]。

既往研究表明，在大腦能量代謝出現(xiàn)相應(yīng)障礙后，新生兒腦組織中三磷酸腺苷（ATP）的水平相對較低，可引起神經(jīng)元病變死亡[9]；而腦組織缺氧缺血后會出現(xiàn)再灌注損害、氧自由基增多等，誘導(dǎo)大量細胞因子釋放，從而引起一系列臨床反應(yīng)。國內(nèi)研究學(xué)者發(fā)現(xiàn)[10]，炎癥介質(zhì)過度釋放會引起機體的免疫功能紊亂，在HIE 的發(fā)生與發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。王洪蓉等[11]研究發(fā)現(xiàn)，HIE 患兒炎癥介質(zhì)水平均高于健康對照組，且中度組與重度組HIE 患兒的血清炎癥介質(zhì)[IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）]水平較輕度組高，可能與病情嚴重程度存在一定關(guān)系。另一學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，白細胞介素-1β（IL-1β）可對腦內(nèi)特異性的白細胞介素-1（IL-1）受體發(fā)揮作用，引起腦內(nèi)炎癥遞質(zhì)與凝血酶原水平升高，造成急性神經(jīng)病理的相應(yīng)變化[12]。因此，深入闡明過度的炎癥反應(yīng)在HIE 發(fā)生發(fā)展中的作用，有望為HIE 治療提供新的靶點。李娜等[13]在動物實驗中發(fā)現(xiàn)，IL-1β 在缺氧缺血后大腦皮質(zhì)出現(xiàn)輕微和異常胞體腫脹，IL-1β 水平明顯升高。Li SJ 等[14]亦發(fā)現(xiàn)，新生大鼠缺氧缺血性腦損傷24～72 h 可至損傷高峰，炎癥介質(zhì)如TNF-α 和IL-6 促進HIE 誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡，而白細胞介素-10（IL-10）可起到拮抗效果。上述結(jié)論均可證實，在HIE 的發(fā)生與發(fā)展過程中有多種炎癥介質(zhì)參與，且扮演不同角色。

IL-6 是臨床常見的炎癥介質(zhì)，也是機體中細胞因子的必要成分之一，其廣泛分布于機體的淋巴細胞、中樞神經(jīng)細胞中，也可在腦內(nèi)的小膠質(zhì)細胞與星形膠質(zhì)細胞中存在。在不同的組織中，IL-6 可發(fā)揮多種生物學(xué)功能，如促進B 細胞與T 細胞的增殖、分化，對抵抗病原體入侵、刺激造血干細胞增殖均具有重要作用。同時，IL-6 還能夠調(diào)節(jié)Th1/Th2、Th17/Treg 介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，維持細胞間的平衡。已有研究表明，IL-6 在正常的腦脊液中具有一定的濃度，可維持神經(jīng)細胞的生長，保證神經(jīng)功能的正常運作[15]。而在腦組織受到缺血、缺氧等刺激后會增加IL-6 的合成。本研究結(jié)果顯示，輕度組與對照組1 d、3 d、10 d IL-6 水平相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；中度組與重度組1 d、3 d、10 d IL-6 水平均高于輕度組與對照組，提示IL-6 在中、重度HIE 患兒中呈高水平表達，可能參與HIE 的發(fā)生與病情加重過程中。經(jīng)點二列相關(guān)性分析，結(jié)果顯示HIE 組急性期、恢復(fù)期IL-6 水平與NBNA 評分呈負相關(guān)，證實隨著IL-6 水平的升高，患兒的預(yù)后更差。分析原因可能是由于：（1）IL-6 可刺激細胞間黏附因子-1（ICAM-1）的合成，導(dǎo)致諸多炎癥介質(zhì)在病變區(qū)域聚集，增加中性粒細胞受刺激，從而釋放氧自由基，發(fā)揮其毒性作用。（2）IL-6 本身作為機體多功能細胞因子可促進炎癥反應(yīng)，引起機體器官免疫炎癥損傷，加快腦損傷的進程。進一步繪制ROC 曲線結(jié)果顯示，血清IL-6 水平預(yù)測新生兒HIE 患兒病情嚴重程度的AUC 為0.745（0.526～0.964），具有一定預(yù)測價值，臨床可通過對該項指標進行密切監(jiān)測，從而了解患兒病情的嚴重程度，指導(dǎo)臨床合理診治。

綜上所述，血清IL-6 在新生兒HIE 患兒中呈高水平表達，且與NBNA 評分呈負相關(guān)，臨床可動態(tài)監(jiān)測血清IL-6 水平變化，從而了解病情的嚴重程度。