基因治療用于乳腺癌的研究現(xiàn)狀

何祥宇 金榮仲

【摘要】 乳腺癌（breast cancer，BC）是女性最為常見的惡性腫瘤，也是全球女性癌癥死亡的主要原因。手術(shù)、放療和化療等常規(guī)治療的效果往往不如預(yù)期。基因治療通過糾正缺陷基因和調(diào)節(jié)基因的表達(dá)來達(dá)到預(yù)期的治療效果，目前已成為一種有前景的乳腺癌治療策略。在乳腺癌的基因治療中通常使用病毒載體和非病毒載體作為遞送載體。病毒載體具有較高的轉(zhuǎn)基因效率，但病毒載體存在免疫原性較高、具有插入突變的風(fēng)險(xiǎn)和生物安全性等問題。非病毒載體與病毒載體相比，細(xì)胞毒性、免疫原性和誘變性均較低。但它還需要解決基因轉(zhuǎn)移效率較低、特異性不足、基因表達(dá)持續(xù)時(shí)間短等問題。本文綜述了目前利用病毒載體和非病毒載體治療乳腺癌的研究現(xiàn)狀，這些基因治療載體各有優(yōu)缺點(diǎn)，因此本文對(duì)目前使用的基因治療載體進(jìn)行相關(guān)概述。

【關(guān)鍵詞】 乳腺癌 基因治療 病毒載體 非病毒載體

Current Status of Gene Therapy for Breast Cancer/HE Xiangyu， JIN Rongzhong. //Medical Innovation of China， 2023， 20（11）： -183

[Abstract] Breast cancer （BC） is the most common malignant tumor in women and the leading cause of cancer death in women worldwide. Conventional treatments like surgery， radiation and chemotherapy often don't work as well as expected. Gene therapy has become a promising strategy for breast cancer treatment by correcting defective genes and regulating gene expression to achieve the desired therapeutic effect. Viral and non-viral vectors are commonly used as delivery vectors in gene therapy of breast cancer. Viral vectors have high transgene efficiency， but there are some problems such as high immunogenicity， insertional mutation risk and biosafety of viral vectors. Non-viral vectors showed lower cytotoxicity， immunogenicity and mutagenicity than viral vectors. But it also needs to solve the low efficiency of gene transfer， lack of specificity， short duration of gene expression and other problems. This article reviews the current research status of the use of viral vectors and non-viral vectors in the treatment of breast cancer. These gene therapy vectors have their own advantages and disadvantages， so this article summarizes the current use of gene therapy vectors.

[Key words] Breast cancer Gene therapy Viral vectors Non-viral vectors

First-author's address： College of Intelligent Medicine and Biotechnology， Guilin Medical University， Guilin 541199， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.11.042

乳腺癌是絕經(jīng)后婦女的主要死亡原因之一，占所有因癌癥而死亡女性人數(shù)的23%[1]。目前乳腺癌的主要常規(guī)治療方法包括手術(shù)治療、化療、放射治療、激素治療、免疫治療。但是有多達(dá)1/3的乳腺腫瘤，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)治療會(huì)產(chǎn)生耐藥或轉(zhuǎn)移。所以引入基因治療可以降低乳腺癌患者的死亡率，并提高患者的生活質(zhì)量[2]。同時(shí)基因治療還可以提高現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)治療的效果。

基因治療指的是將遺傳物質(zhì)（DNA或RNA）轉(zhuǎn)移到患者的細(xì)胞中，改變患者的基因以達(dá)到治療、治愈或預(yù)防某種疾病或改善其健康狀況的治療[3]。轉(zhuǎn)移的遺傳物質(zhì)通常通過以下三種方式之一來發(fā)揮作用：（1）外源基因能夠表達(dá)并發(fā)揮功能。（2）抑制細(xì)胞自身靶基因的表達(dá)和功能。（3）修飾靶基因，改變細(xì)胞原有基因的功能。一般情況下，基因治療需要載體將特定遺傳物質(zhì)遞送到靶細(xì)胞中?；蜉d體可以是病毒載體或非病毒載體，他們在宿主體內(nèi)保持活躍的時(shí)間，主要是取決于它們與宿主免疫系統(tǒng)等的相互作用和穿透所有屏障的能力，因此它們具有不同的免疫原性、表達(dá)水平和生物安全性。在基因治療中這些基因載體是起到安全有效治療的重要因素，因此需要慎重選擇[4]。

1 病毒載體的基因治療

病毒載體是將遺傳物質(zhì)有效遞送到細(xì)胞中的工具。它們利用病毒的天然能力將有效遺傳物質(zhì)傳遞到細(xì)胞中，使腫瘤的復(fù)制能力受損或喪失。病毒載體具有較高的轉(zhuǎn)基因效率，因此它們經(jīng)常用于各類癌癥的基因治療中[5]。成功的病毒載體基因治療的效果可以持續(xù)很多年，這樣既可以減輕患者的疾病負(fù)擔(dān)，又能大大提高患者的生存質(zhì)量。盡管使用病毒載體的研究已經(jīng)顯示出相對(duì)有益的結(jié)果，但病毒載體的使用往往受到固有缺點(diǎn)的限制，包括免疫原性、插入突變、載量小和無法到達(dá)實(shí)體瘤。在此對(duì)已被用于基因治療的五種病毒載體進(jìn)行概述。

1.1 腺病毒載體 腺病毒載體（Ads）具有許多優(yōu)點(diǎn)，因此是基因治療中最常用的病毒載體之一。Ads是無包膜的并且具有雙鏈DNA基因組的二十面體蛋白質(zhì)衣殼（直徑≥90 nm）。Ads的基因組DNA范圍為26～45 kb，側(cè)翼為兩個(gè)反向末端重復(fù)序列（ITR）。腺病毒基因組在宿主細(xì)胞核中保持游離狀態(tài)。Ads具有大包裝尺寸，高達(dá)30 kb。Ads基因組作為附加體維持在細(xì)胞核中，因此使病毒基因組DNA整合到宿主基因組中的概率能夠最小化，這降低了外源基因插入人類基因組進(jìn)而誘發(fā)結(jié)構(gòu)變異的風(fēng)險(xiǎn)。此外，Ads可以有效轉(zhuǎn)導(dǎo)廣泛的靶細(xì)胞，包括分裂的細(xì)胞和靜止的細(xì)胞。

根據(jù)腺病毒載體在靶細(xì)胞中的復(fù)制能力，重組腺病毒載體可分為復(fù)制型和非復(fù)制型[6]。研究發(fā)現(xiàn)，通過瘤內(nèi)注射編碼白細(xì)胞介素-12（IL-12）的非復(fù)制型Ads與表達(dá)抗血管生成肽激素血管緊張素的Ads聯(lián)合使用，可在乳腺癌小鼠模型中產(chǎn)生協(xié)同抗腫瘤作用[7]。有研究發(fā)現(xiàn)，Survivin是細(xì)胞凋亡抑制蛋白（IAP）家族的一員。Survivin的表達(dá)已被證明與癌癥耐藥性有關(guān)。紫杉醇是目前治療乳腺癌最常用的化療藥物之一。然而，紫杉醇的獲得性耐藥是其最終化療失敗的重要原因之一。紫杉醇耐藥的機(jī)制之一是凋亡調(diào)控蛋白Survivin的改變。研究人員使用攜帶針對(duì)Survivin的小干擾RNA（siRNA）的重組腺病毒載體來治療乳腺癌，結(jié)果顯示了特異性siRNA對(duì)Survivin的抑制，增強(qiáng)了紫杉醇誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞的凋亡[8]。Ads介導(dǎo)的基因治療主要問題是該載體具有很強(qiáng)的免疫原性和全身給藥的假定毒性，所以瘤內(nèi)給藥似乎是解決該問題的一個(gè)好方法。

1.2 單純皰疹病毒載體 單純皰疹病毒（HSV）是α-皰疹病毒亞家族的成員，該病毒含有120 kb的雙鏈DNA基因組，編碼70個(gè)或更多的基因。目前，lysotype HSV是第一個(gè)被開發(fā)成重組溶瘤病毒治療載體的病毒，也是第一個(gè)對(duì)抗癌癥的溶瘤病毒。HSV具有以下優(yōu)點(diǎn)：（1）HSV在細(xì)胞中能夠快速復(fù)制并具有感染多種癌細(xì)胞的能力。（2）HSV的基因組較大，可以修飾并插入多個(gè)額外的轉(zhuǎn)基因[9]。（3）當(dāng)劑量開始對(duì)患者的生命構(gòu)成威脅時(shí)，可以使用抗病毒藥物應(yīng)對(duì)其產(chǎn)生的副作用[10]。（4）修飾HSV的糖蛋白可以改善對(duì)腫瘤細(xì)胞的靶向性[11]。

溶瘤單純皰疹病毒（oHSV）載體已經(jīng)被證明是一種安全有效的治療乳腺癌的基因治療載體[12]。oHSV病毒載體在腫瘤內(nèi)通過選擇性復(fù)制和病毒誘導(dǎo)，使細(xì)胞裂解并直接破壞腫瘤細(xì)胞。G47Δ是基于G207的第三代可復(fù)制HSV-1載體。該研究發(fā)現(xiàn)G47Δ可以有效殺死不同亞型的乳腺腫瘤細(xì)胞。G47Δ對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MDA-MB-435和MDA-MB-468具有高度殺傷性，第4天時(shí)，超過98%的腫瘤細(xì)胞已經(jīng)死亡，MOI為0.01。該研究還證明，G47Δ可以有效地靶向來自不同乳腺癌亞型的非癌干細(xì)胞（non-cancer stem cells，NCSCs）和癌癥干細(xì)胞（cancer stem cells，CSCs），G47Δ還會(huì)損害CSCs的自我更新能力。G47Δ也表現(xiàn)出與紫杉醇的協(xié)同作用，可在體外和體內(nèi)放大對(duì)NCSCs和CSCs的殺傷力[13]。

1.3 腺相關(guān)病毒載體 腺相關(guān)病毒（adeno-associated virus，AAV）也稱為腺伴隨病毒，屬于微小病毒科依賴病毒屬，是目前發(fā)現(xiàn)的一類結(jié)構(gòu)最簡單的單鏈DNA缺陷型病毒，復(fù)制時(shí)需要輔助病毒的參與。AAV于1965年被首次分離，雖然它不能自主復(fù)制，但AAV能夠感染多種宿主細(xì)胞，包括分裂和不分裂細(xì)胞。感染后AAV基因組在宿主細(xì)胞中保持潛伏，在腺相關(guān)病毒整合位點(diǎn)（AAVS1）整合到宿主細(xì)胞的DNA中。AAV復(fù)制和感染需要輔助病毒，如Ads或HSV共感染。盡管AAV感染在人類中很常見，但目前沒有證據(jù)證明該病毒可以直接引起特定的疾病。AAV在人體中是非致病性的，并且由于能夠轉(zhuǎn)導(dǎo)多種類型的細(xì)胞，因此AAV是基因治療遞送遺傳內(nèi)容的理想候選載體之一。AAV是很有潛力的治療性基因傳遞載體，因?yàn)樗軌蜣D(zhuǎn)導(dǎo)廣泛的組織，并以較低的免疫原性長期表達(dá)。這些優(yōu)點(diǎn)和較好的安全性使它成為抗腫瘤基因治療的理想載體之一。

已有研究表明，野生型AAV-2型的感染可誘導(dǎo)不同的乳腺癌細(xì)胞系進(jìn)行凋亡，通過瘤內(nèi)注射AAV-2到人MDA-MB-435乳腺腫瘤裸鼠移植瘤中可延緩腫瘤的生長并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞壞死[14]。CH50是一種人纖連蛋白的重組CBD-HepⅡ多肽。研究發(fā)現(xiàn)用編碼CH50的重組AAV-2載體來感染人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231和MDA-MB-468并分泌可溶性的CH50。在兩種乳腺癌細(xì)胞中，CH50通過干擾乳腺癌模型中的aVb3的信號(hào)傳導(dǎo)來發(fā)揮其抗轉(zhuǎn)移的作用。CH50對(duì)aVb3表達(dá)的下調(diào)抑制了乳腺癌細(xì)胞與ECM蛋白的黏附，進(jìn)而抑制了FAK的激活、cdc2的上調(diào)及MMP-9的產(chǎn)生和激活。結(jié)果表明，重組腺相關(guān)病毒（rAAV）載體介導(dǎo)的CH50可以持續(xù)表達(dá)并抑制原位乳腺癌異種移植物的生長和自發(fā)轉(zhuǎn)移。也就是說rAAV-CH50介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移可以抑制乳腺癌的早期腫瘤轉(zhuǎn)移[15]。同時(shí)AAV也存在一些缺點(diǎn)，比如它的包裝容量僅在5 kb以下，而且在某些細(xì)胞中的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和特異性偏低。

1.4 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體 逆轉(zhuǎn)錄病毒是基因轉(zhuǎn)移的有效工具。它能夠?qū)⑦z傳信息穩(wěn)定地整合到宿主細(xì)胞染色體中。這種插入是通過逆轉(zhuǎn)錄將RNA基因組轉(zhuǎn)化為雙鏈的DNA[16]。在感染的細(xì)胞有絲分裂后，雙鏈DNA可以整合到宿主基因組中并產(chǎn)生表達(dá)[17]。逆轉(zhuǎn)錄病毒分為兩種：簡單的逆轉(zhuǎn)錄病毒，如Moloney鼠白血病病毒和復(fù)雜的慢病毒（LVs），如人類免疫缺陷病毒（HIV）。簡單的逆轉(zhuǎn)錄病毒只能感染活躍的分裂細(xì)胞，而LVs能感染分裂的細(xì)胞，也能感染未分裂的細(xì)胞[18]。這些載體能夠進(jìn)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞并且長期穩(wěn)定表達(dá)，使得它們成為基因治療的理想候選載體。

慢病毒（LVs）已被用于轉(zhuǎn)導(dǎo)外周血T細(xì)胞表達(dá)嵌合抗原受體（CAR）。該受體由腫瘤抗原特異性抗體與T細(xì)胞內(nèi)信號(hào)域融合而成。然后將CAR-LVs轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞重新注射到宿主體內(nèi)，以特異性靶向表達(dá)抗原的乳腺腫瘤細(xì)胞，如HER-2和MUC-1[19]，或FRα[20]。在一項(xiàng)研究中，皮下注射編碼乳腺腫瘤抗原HER-2胞外區(qū)的LVs疫苗，可使攜帶自發(fā)性乳腺腫瘤的BALB/c-HER-2/Neu轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)生抗腫瘤免疫[21]。LVs的多功能使其成為治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的免疫基因治療的理想候選載體。雖然它的生產(chǎn)復(fù)雜并且滴度不高，但是因?yàn)樗牡兔庖咴院烷L期轉(zhuǎn)基因表達(dá)等優(yōu)點(diǎn)，使LVs成為癌癥治療的首選病毒載體之一。

1.5 新城疫病毒 新城疫病毒（NDV）是20世紀(jì)后期以來發(fā)現(xiàn)的首批溶瘤病毒之一[22]。NDV通過半胱天冬酶依賴性和半胱天冬酶非依賴性途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[23]。NDV又稱禽副粘病毒1型（APMV-1），屬于副粘病毒科的Avulavirus屬。它是一種有包膜的單鏈RNA病毒，基因大小為16 kb。在腫瘤細(xì)胞中具有溶瘤活性，而在正常的人類細(xì)胞中不具有溶瘤活性。NDV作為抗癌劑的一些優(yōu)點(diǎn)包括：（1）通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，能夠與細(xì)胞進(jìn)行良好的結(jié)合。（2）在腫瘤細(xì)胞中進(jìn)行選擇性復(fù)制而且不依賴細(xì)胞的增殖。（3）沒有嚴(yán)重的毒副作用[24]。

癌細(xì)胞通常需要大量的葡萄糖產(chǎn)生能量來支持它的代謝功能[25]。乳腺癌的干細(xì)胞具有發(fā)酵糖酵解依賴性，這使得它對(duì)糖酵解抑制劑較為敏感[26]。D-甘露庚酮糖（MH）是一種不可代謝的葡萄糖類似物，可以抑制己糖激酶，從而阻止癌細(xì)胞產(chǎn)生能量達(dá)到抗癌的作用[27]。研究結(jié)果表明，MH和NDV的組合可以通過抑制糖酵解途徑和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡對(duì)乳腺癌細(xì)胞系產(chǎn)生有效的細(xì)胞毒作用，但對(duì)正常REF細(xì)胞系沒有細(xì)胞毒作用[27]。新城疫病毒AF2240是一種速生毒株。經(jīng)研究證明，新城疫病毒AF2240在體外以時(shí)間依賴的方式誘導(dǎo)MDA-MB-231細(xì)胞凋亡，而對(duì)內(nèi)皮HUVEC細(xì)胞和Hs578Bst乳腺上皮細(xì)胞等正常細(xì)胞沒有毒性[28]。然而，仍有待確定的是NDV可以表達(dá)多少轉(zhuǎn)基因及它可耐受的最大基因組的大小。

2 非病毒載體的基因治療

非病毒性載體與病毒載體相比，非病毒載體的細(xì)胞毒性、免疫原性和誘變性均較低，這些優(yōu)點(diǎn)吸引了很多研究人員對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步的探索，從而推動(dòng)了基因治療領(lǐng)域的快速發(fā)展。但是非病毒載體用于基因治療目前還存在較多的問題，它需要解決基因轉(zhuǎn)移效率、特異性、基因表達(dá)持續(xù)時(shí)間和安全性等關(guān)鍵問題。非病毒載體需要保護(hù)遺傳物質(zhì)免受核酸內(nèi)切酶的降解，并向細(xì)胞核進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)和核攝取。而載體和細(xì)胞之間往往因治療方式不同而產(chǎn)生不同的相互作用，這樣會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)染的效率產(chǎn)生較大的影響。除效率之外，其毒性也不容忽視，免疫毒性則主要取決于具體的細(xì)胞和載體材料。但大多數(shù)非病毒基因載體的免疫毒性低于病毒載體，因此需要根據(jù)具體的情況對(duì)其進(jìn)行評(píng)估。以下是用作基因治療的三種非病毒載體類型。

2.1 聚酰胺胺（PAMAM）樹枝狀大分子 PAMAM樹枝狀大分子常用于藥物和基因的遞送。PAMAM樹枝狀大分子表面的正電荷降低了它的細(xì)胞毒性。PAMAM的特點(diǎn)如：高效的遞送、特異靶向性、生物降解性、無毒性、非免疫原性和保護(hù)DNA免受降解的能力。PAMAM樹枝狀大分子為基因遞送提供了一種有前景的載體[29]。與病毒輸送載體相比，非病毒載體因其許多的優(yōu)點(diǎn)而備受推崇[30]。但因其細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率較低，限制了它在臨床上的應(yīng)用。

Polo樣激酶1是由Plk1基因編碼的絲氨酸/蘇氨酸激酶[31]。Plk1基因的活性在增殖的癌細(xì)胞中升高[32]。用抗Plk1 siRNA（siPlk1）抑制Plk1會(huì)導(dǎo)致有絲分裂停滯、細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤生長[33]。然而siRNA的傳遞較困難，因?yàn)樗鼈兪菐Ц哓?fù)電荷的分子，因此它們不能輕易地穿過細(xì)胞膜。該研究使用應(yīng)用于癌癥治療的PAMAM樹枝狀大分子的第4代（PG4）作為基因治療載體。PG4與抗癌siRNA（siPlk1）復(fù)合形成siPlk1-PG4 dendriplex。PG4可以有效保護(hù)siPlk1免受核糖核酸酶（RNase）的影響，同時(shí)增強(qiáng)了siPlk1的血清穩(wěn)定性。通過進(jìn)行MCF-7細(xì)胞的體外抗癌活性研究表明，siPlk1-PG4可以導(dǎo)致細(xì)胞死亡。與裸siPlk1溶液相比，siPlk1-PG4導(dǎo)致MDA-MB-231細(xì)胞對(duì)siPlk1的攝取增強(qiáng)。通過細(xì)胞周期分析，與裸siPlk1溶液相比，siPlk1-PG4增加了亞G1期的細(xì)胞群停滯。結(jié)果表明，PG4可能是乳腺癌治療中遞送siPlk1的潛在載體[33]。

2.2 二硫交聯(lián)聚乙烯亞胺（PEI-SS） PEI-SS是使用低分子量聚乙二醇（PEI）和二硫鍵為交聯(lián)劑合成的。PEI-SS是一種谷胱甘肽反應(yīng)性基因載體[34]，PEI-SS作為一種聚陽離子可以與miRNA結(jié)合生成PEI-SS/miRNA多聚體[35]。

微小核糖核酸MicroRNA（miRNA）是一種小的非編碼RNA分子，約含有22個(gè)核苷酸。miRNA在基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中起到關(guān)鍵的作用[36]?；蜉d體則幫助miRNA穿過細(xì)胞膜，并保護(hù)miRNA免受體核酸內(nèi)切酶的降解[37]。目前，PEI-SS已被認(rèn)為是傳遞DNA/miRNA的高效基因載體。

在一項(xiàng)研究中，PEI-SS首次被描述作為miRNA的非病毒載體。通過MTT測定PEI-SS對(duì)MDA-MB-231（人乳腺癌細(xì)胞系）的細(xì)胞毒性，顯示PEI-SS具有較低的細(xì)胞毒性。PEI-SS能有效結(jié)合anti-miR-155，形成10～100 nm的納米球形結(jié)構(gòu)復(fù)合物。這種復(fù)合體被癌細(xì)胞中的還原劑谷胱甘肽（GSH）降解，然后釋放出anti-miR-155并有效抑制腫瘤的生長。為了測試PEI-SS/anti-miR-155復(fù)合物的體內(nèi)治療效果，將3×105個(gè)MDA-MB-231細(xì)胞注射到裸鼠的乳腺脂肪墊中構(gòu)建了異種移植腫瘤小鼠模型。在腫瘤生長期，發(fā)現(xiàn)與陰性對(duì)照相比，PEI-SS/anti-miR-155顯著抑制了腫瘤的生長[34]。

2.3 無機(jī)納米粒子（NPs） 研究人員發(fā)現(xiàn)，可以用NPs作為基因載體，因?yàn)樗鼈冿@示出了優(yōu)于傳統(tǒng)有機(jī)載體的幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)，分別是它們的尺寸較小，穩(wěn)定性較高及易于合成[38]。金納米顆粒（AuNPs）作為無機(jī)納米粒子中的一種表現(xiàn)出了許多有利的特性，這有助于將其作為基因傳遞的載體[39]。siRNA能以靜電結(jié)合的方式到陽離子聚合物包覆的AuNPs上，而且AuNPs的一個(gè)主要優(yōu)勢是它們的合成是可調(diào)的，允許合成不同的尺寸和形狀。聚乙烯亞胺（PEI）修飾的AuNPs有助于在體外和體內(nèi)的三陰型乳腺癌（TNBC）模型中有效地敲除真核細(xì)胞延伸因子激酶（EEF-2K）基因[40]。有報(bào)道用天然聚合物殼聚糖（CS）包裹的AuNPs成功地將c-myc siRNA導(dǎo)入MCF-7細(xì)胞。這些納米復(fù)合體促進(jìn)了MCF-7細(xì)胞中c-myc癌基因的顯著下調(diào)[41]。Ahwazi等[42]使用包被HIV-1 TAT的AuNPs在MDA-MB-231細(xì)胞中敲除掉了ROR1基因。

介孔二氧化硅納米粒子（MSNPs）也是一種無機(jī)納米粒子，它含有直徑為2～50 nm的孔，因其具有生物相容性、大孔徑和高負(fù)載等能力，所以也是理想的候選載體[43-44]。PEI包被的介孔二氧化硅顆粒（MSNs）已被用于在體外和體內(nèi)的MDA-MB-231模型中敲低PKM2基因，從而降低蛋白質(zhì)的表達(dá)并抑制細(xì)胞的遷移[45]。研究人員還通過在中孔內(nèi)利用MSNPs的多孔結(jié)構(gòu)加載siRNA，從而防止核酸酶的降解。據(jù)報(bào)道，在MDA-MB-231模型中，使用具有23 nm大孔徑的MSNPs封裝siRNA，可以使血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）基因在體外和體內(nèi)得到了顯著的下調(diào)[46]。

3 總結(jié)與展望

在過去的幾十年中，基因治療得到了迅速的發(fā)展。如今通過基因療法治療癌細(xì)胞，然后應(yīng)用抗腫瘤的化學(xué)藥物或放射療法治療可以達(dá)到腫瘤消退的效果。在乳腺癌的基因治療中使用病毒載體和非病毒載體作為遞送載體已經(jīng)引起了人們的關(guān)注，并發(fā)揮出了一定的療效。在基因治療中，載體的作用十分關(guān)鍵，用于基因遞送的最佳載體應(yīng)表現(xiàn)出高效的負(fù)載能力，具有對(duì)特定靶細(xì)胞的趨向性，高效的轉(zhuǎn)導(dǎo)性和較少的細(xì)胞毒性。在這篇綜述中，討論了病毒載體和非病毒載體的研究現(xiàn)狀，其中病毒載體包括：腺病毒、HSV、腺相關(guān)病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和NDV。非病毒載體包括：PAMAM樹枝狀大分子、PEI-SS和NPs。利用病毒載體或非病毒載體運(yùn)送核酸作為治療途徑似乎是治療乳腺癌的一種好策略。但是自從基因治療問世以來，它的安全性和有效性一直是人們擔(dān)心的問題。通常，人們認(rèn)為病毒載體的效果更佳，但非病毒載體在大規(guī)模生產(chǎn)的簡易性和較低的免疫原性等方面更具優(yōu)勢，繼而開發(fā)出更加安全和高效的載體是非常必要的。將病毒載體與非病毒載體相結(jié)合，似乎是一種具有良好發(fā)展前景的基因治療載體新技術(shù)，并且這種組合將利用兩種方法的優(yōu)勢來繞過目前存在的障礙。

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（收稿日期：2022-10-21） （本文編輯：何玉勤）