妊娠婦女高危型人乳頭瘤病毒感染特點(diǎn)及基因分型

樊 榮,王雪梅

(北京市通州區(qū)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 1.病理科;2.婦產(chǎn)科,北京101100)

子宮頸癌在女性常見惡性腫瘤中發(fā)病率居第二位,人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是導(dǎo)致宮頸癌的主要原因,其中高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染是引起宮頸癌的最主要原因。隨著HPV在女性中感染率的增加,妊娠期婦女感染HPV的患者在逐年上升。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道妊娠期HPV感染在5.5%～65%,平均為24%[1]。國(guó)內(nèi)有研究顯示HPV的感染率為13.42%[2]。另有報(bào)道妊娠期子宮頸癌的患病人數(shù)占妊娠總?cè)藬?shù)的1.5/10萬(wàn)～12/10萬(wàn),是妊娠期間最常見的惡性腫瘤[3]。目前,對(duì)妊娠期宮頸癌臨床篩查和預(yù)防不到位,積極監(jiān)測(cè)高危型HPV分布及其亞型流行情況,對(duì)妊娠期宮頸癌防治具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

收集251例妊娠婦女臨床資料,其中18～25歲患者67例,26～35歲患者168例,36～45歲患者16例;所有患者均有性生活史,沒(méi)有宮頸病變手術(shù)史及其他惡性腫瘤疾病史,均處于妊娠狀態(tài)。

1.2 主要試劑與儀器

DNA提取試劑盒、熒光定量PCR試劑盒均購(gòu)至上海之江生物技術(shù)有限公司;AUTRAX全制動(dòng)核酸提取儀購(gòu)至上海之江生物技術(shù)有限公司;醫(yī)用核酸擴(kuò)增儀購(gòu)買自上海宏石公司;超速離心機(jī)購(gòu)買自貝克曼庫(kù)爾特公司。

1.3 HPV檢測(cè)與分型

醫(yī)護(hù)人員用窺陰器暴露宮頸,用無(wú)菌棉拭子將宮頸口過(guò)多的分泌物擦去,取出專用宮頸刷置于宮頸口,單向旋轉(zhuǎn)4-5圈以獲得足量的上皮細(xì)胞樣本,然后將宮頸刷頭部放入含有3 ml宮頸細(xì)胞保護(hù)液的樣本瓶中,4℃保存待測(cè)。24 h內(nèi)對(duì)樣本進(jìn)行高危型HPV檢測(cè)及基因分型。

1.3.1DNA提取 將樣本放入AUTRAX全制動(dòng)核酸提取儀中進(jìn)行DNA提取。

1.3.2PCR擴(kuò)增 將AUTRAX全制動(dòng)核酸提取儀中完成的總反應(yīng)體系管放PCR擴(kuò)增儀,PCR擴(kuò)增條件：94℃ 2 min預(yù)變性,93℃ 10 s變性、62℃ 31 s退火和延伸,經(jīng)40個(gè)循環(huán)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

收集患者臨床資料,包括患者年齡、性生活次數(shù)等,采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS25.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。P<0．05判定為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡妊娠婦女高危型HPV感染情況

251例妊娠患者,感染高危型HPV患者39例,感染率15.54%。18～25歲、26～35歲、36～45歲妊娠婦女HPV感染率分別為6.0%、19.05%、18.75%。其中26～35歲妊娠婦女高危型HPV感染率最高,36～45歲感染率次之(χ2=6.889,P<0.05)。年齡是影響妊娠婦女高危型HPV感染的因素。

2.2 不同性生活特征妊娠婦女高危型HPV感染情況

首次性生活年齡<18歲、性伴侶個(gè)數(shù)為2個(gè)及以上、性生活次數(shù)3次/周以上的妊娠婦女高危型HPV感染率明顯高于其他患者(P<0.05),首次性生活年齡、性伴侶個(gè)數(shù)、性生活頻率都是影響妊娠女性高危型HPV感染的因素,見表1。

表1 不同性生活特征的妊娠婦女高危型HPV感染情況

2.3 不同妊娠和分娩方式妊娠婦女高危型HPV感染情況

妊娠次數(shù)<2次、≥2次患者數(shù)分別為176和75例,高危型HPV感染數(shù)為21例和18例,感染率分別為11.93%和24.0%(χ2=5.836,P<0．05)。分娩方式為自然生產(chǎn)和剖宮產(chǎn)患者分別為197例和54例,感染數(shù)為27例和12例,感染率分別為17.78%和33.33%,(χ2=2.342,P>0．05)。妊娠次數(shù)是影響妊娠婦女高危型HPV感染的因素。

2.4 不同妊娠階段中妊娠婦女高危型HPV感染情況

妊娠早期(≤12周)高危型HPV感染者15例,感染率為14.88%;妊娠中期(>12周且≤27周)高危型HPV感染者20例,感染率為24.39%;妊娠晚期(≥28周)高危型HPV感染者4例,感染率為36.36%;(χ2=6.986,P<0.05)。妊娠中、晚期是影響妊娠婦女高危型HPV感染的因素,見表2。

表2 不同妊娠階段妊娠婦女高危型HPV感染情況

2.5 不同經(jīng)濟(jì)狀況及受教育程度妊娠婦女高危型HPV感染情況

月收入≤2800元和>2800元患者分別為118和133例,感染數(shù)分別為25和14例,感染率分別為21.19%和10.53%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.141,P<0．05)。大學(xué)以下學(xué)歷、大學(xué)以上學(xué)歷患者數(shù)分別為139和112例,高危型HPV感染數(shù)分別為28和11例,感染率分別為20.14%和9.82%,(χ2=5.036,P<0．05)。經(jīng)濟(jì)狀況和受教育程度是影響婦妊娠婦女高危型HPV感染的因素。

2.6 基因分型

251例妊娠婦女,感染高危型HPV者39例,感染率15.53%。對(duì)39例感染高危型HPV患者進(jìn)行基因分型,結(jié)果表明,妊娠婦女高危型HPV單一感染率為71.79%,多重感染率為28.21%。單一高危型HPV感染類型中,52型感染率64.3%(18例),其次是58型感染率為35.7%(10例)(P<0.05);多重高危型HPV感染類型中,二重感染率63.64%,三重感染率36.36%,P<0.05,見表3。

表3 妊娠婦女高危型HPV感染情況

3 討論

女性一般自18歲左右趨于成熟,歷時(shí)約30年。此時(shí)為卵巢生殖功能與內(nèi)分泌功能最旺盛時(shí)期。在此期間,身體各部分發(fā)育成熟,出現(xiàn)周期性的排卵及行經(jīng),并具有生育能力。通常從40歲以后,女性卵巢功能開始衰退,機(jī)體對(duì)HPV清除能力減弱,陰道內(nèi)微生態(tài)平衡功能減弱,進(jìn)而導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變、甚至宮頸癌的可能性增加[4]。因此,不同年齡女性對(duì)HPV清除能力存在差異。本研究調(diào)查結(jié)果顯示,不同年齡段妊娠婦女均有HPV感染發(fā)生,其中以26～35歲者居多,其次是36～45歲妊娠者。26～45歲的女性性行為相對(duì)較頻繁,可能有多個(gè)性伴侶,導(dǎo)致該群體患者更容易發(fā)生HPV感染[5]。除年齡外,不同性生活特征、不同妊娠階段和分娩特點(diǎn)都也是影響妊娠女性發(fā)生HPV感染的主要因素。首次性生活年齡較早的患者,性激素分泌水平增加,過(guò)早性行為和活躍的性生活,會(huì)導(dǎo)致HPV感染可能性增加[6]。因此,為了減少HPV感染,需要積極的安全教育宣傳,減少過(guò)早性行為。同時(shí)性伴侶個(gè)數(shù)以及性生活次數(shù)也是影響妊娠女性發(fā)生HPV感染的主要因素,性伴侶個(gè)數(shù)增多,發(fā)生交叉感染可能性增加;頻繁的性生活,可能改變患者自身免疫系統(tǒng),降低患者自身對(duì)HPV清除能力,還可能使?jié)摲腍PV感染復(fù)發(fā)。本研究結(jié)果顯示隨著妊娠次數(shù)的增加,宮頸受損程度增加,亦增加HPV易感性;妊娠次數(shù)≥2次,其妊娠期發(fā)生HPV感染率明顯增高,以上結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致以上結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致[7];有文獻(xiàn)報(bào)道行剖宮產(chǎn)分娩者感染率高于自然生產(chǎn)患者以上結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致[7],本研究結(jié)果顯示兩者無(wú)差異,可能是樣本量少導(dǎo)致數(shù)據(jù)有差異;因此臨床中應(yīng)關(guān)注多次妊娠的婦女,積極監(jiān)測(cè)HPV感染情況,及時(shí)進(jìn)行管理,及時(shí)發(fā)現(xiàn)其他疾病的可能性。在妊娠期中胎盤分泌大量雌孕激素、絨毛膜促性腺激素、胎盤生乳素等均可抑制母體免疫應(yīng)答,母體呈現(xiàn)出自然的免疫耐受或免疫無(wú)應(yīng)答狀態(tài),母體抵抗病毒能力下降[8]。有研究結(jié)果顯示,不同區(qū)域及人種中妊娠期HPV感染發(fā)生率差異較大(5.4%～68.8%),在妊娠中晚期感染率較高[9-10]。本研究調(diào)查結(jié)果顯示妊娠晚期HPV感染率為36.36%,明顯高于妊娠早期和中期。受教育程度較低的妊娠婦女HPV感染率明顯高于其他患者,這可能與患者長(zhǎng)期衛(wèi)生習(xí)慣差、知識(shí)缺乏、對(duì)性行為衛(wèi)生不重視有關(guān)。同時(shí),經(jīng)濟(jì)狀況較差者感染率明顯高于其他患者,這與患者生活的營(yíng)養(yǎng)條件、洗浴條件、HPV感染篩查不及時(shí)、衛(wèi)生保健用品購(gòu)買能力等有關(guān)[11]。

在妊娠期,因免疫力低下,抗病毒感染能力下降,HPV復(fù)制表達(dá)活躍,致使HPV母體感染率均高于非孕期,如同時(shí)有妊娠合并癥(妊娠合并糖尿病等),感染率增加[12]。除免疫狀態(tài)之外,妊娠期盆腔充血、生殖系統(tǒng)血供豐富,陰道分泌 物增加等也是孕期 HPV等病原體生長(zhǎng)的極有利條件。本研究調(diào)查結(jié)果與相關(guān)研究結(jié)果一致[13],妊娠婦女高危型HPV單一感染率比多重感染率顯著增高;單一高危型HPV感染類型中,以52型為主,其次是58型、16型;多重高危型HPV感染類型中,二重感染率顯著高于三重感染率。有研究報(bào)道孕婦HPV感染可能導(dǎo)致了早產(chǎn)、胎膜早破、胎兒生長(zhǎng)受限,與不良母嬰結(jié)局具有一定相關(guān)性[14]。妊娠期HPV感染可以發(fā)生母嬰傳播,據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì),孕期HPV感染母嬰傳播率為4%～79%不等[15]。Wu等[16]報(bào)道妊娠期中國(guó)婦女子宮頸異常細(xì)胞檢出率為8%～12%。妊娠期婦女CIN 發(fā)病率約為 1.3‰～2.7‰[17],有研究表明 CIN 2/3的孕婦罹患子宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)是正常人群的2～5倍[18]。因此,妊娠期人乳頭瘤病毒(HPV)感染應(yīng)得到臨床的重視。