添加微生態(tài)制劑和碳源對云斑尖塘鱧生長性能及肌肉品質(zhì)的影響

李琳娜 王智勇 王廣軍 付兵 李本旺 賈麗娟 李希國

摘要 ［目的］探究在養(yǎng)殖水體中添加微生態(tài)制劑和碳源在云斑尖塘鱧養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用效果，為改善云斑尖塘鱧養(yǎng)殖環(huán)境和肌肉品質(zhì)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。［方法］以葡萄糖為碳源，研究添加微生態(tài)制劑和碳源對云斑尖塘鱧生長、肌肉質(zhì)構(gòu)和營養(yǎng)組成、氨基酸、脂肪酸等營養(yǎng)成分的影響，并對其肌肉品質(zhì)進(jìn)行評價(jià)。［結(jié)果］在水體中添加微生態(tài)制劑和碳源顯著促進(jìn)了云斑尖塘鱧生長，增重率與對照組相比提高了25.19%；添加微生態(tài)制劑和碳源提高了云斑尖塘鱧肌肉中灰分含量，試驗(yàn)組比對照組提高了11.38%；顯著降低了粗脂肪含量，試驗(yàn)組比對照組降低了39.74%；但對粗蛋白、水分含量和氨基酸組成與含量無顯著影響（P>0.05）；添加微生態(tài)制劑顯著降低了云斑尖塘鱧肌肉中脂肪酸的含量（P<0.05），飽和脂肪酸與多不飽和脂肪酸均顯著低于對照組（P<0.05），其中n-3系多不飽和脂肪酸差異最顯著，降低了37.23%。［結(jié)論］在養(yǎng)殖水體中添加225 g/（hm2·d）的微生態(tài)制劑和投喂飼料重量的1%葡萄糖可以促進(jìn)云斑尖塘鱧的生長，降低云斑尖塘鱧肌肉中粗脂肪含量，增加粗灰分含量。

關(guān)鍵詞 微生態(tài)制劑；碳源；云斑尖塘鱧；生長性能；營養(yǎng)成分

中圖分類號 S965? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A

文章編號 0517-6611（2023）10-0069-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.10.015

Abstract ［Objective］In order to study the effect of adding probiotics and carbon source in the culture water on growth performance and muscle quality of Oxyeleotris marmoratus，which would provide some basic data for improving the culture environment and muscle quality of O.marmoratus.［Method］In this study，with the glucose as carbon source，the growth，muscle texture and nutritional composition，amino acids，fatty acids and other nutritional components of O.marmoratus were determined.［Result］The results showed that adding probiotics and carbon source in culture water could promote the growth of O.marmoratus，and the weight gain rate increased by 25.19% compared with the control group.With adding probiotics and carbon source could increase the content of crude ash 11.38%，and could decrease the content of crude fat 39.74%，but had no significant effect on the composition and content of crude protein，moisture and amino acids （P>0.05）.Adding the probiotics significantly reduced the content of fatty acids in the muscle of O.marmoratus （P<0.05），the saturated fatty acids and polyunsaturated fatty acids were significantly lower than those in the control group （P<0.05）.Among them，the difference of polyunsaturated fatty acids in n-3 line was the most significant，reduced by 37.23%.［Conclusion］ The results showed that the adding probiotics and carbon source in water could promote the growth of O.marmoratus，reduce the content of crude fat in its muscle and increase the content of crude ash.The addition amounts of probiotics and carbon source were 225 g/（hm2·d） and 1% of total feed weight.

Key words Probiotics;Carbon source;O.marmoratus;Growth performance;Nutrient components

云斑尖塘鱧（Oxyeleotris marmoratus），屬鱸形目蝦虎魚亞目塘鱧科尖塘鱧屬，原產(chǎn)于泰國、東南亞等國家和地區(qū)，俗稱泰國筍殼魚，因其肉質(zhì)細(xì)膩、味道鮮美、營養(yǎng)價(jià)值高而廣受消費(fèi)者的喜愛［1］。其體表黃褐色，斑紋明顯，外形美觀，市場售價(jià)高［2］。我國珠三角地區(qū)于1986年引進(jìn)云斑尖塘鱧，1996年又引進(jìn)線紋尖塘鱧（俗稱澳洲筍殼魚）進(jìn)行養(yǎng)殖試驗(yàn)，隨后人工繁殖成功。經(jīng)過30余年的發(fā)展，現(xiàn)已在我國廣東、海南等地呈規(guī)模化養(yǎng)殖。但在快速發(fā)展的同時(shí)也出現(xiàn)了一些問題，養(yǎng)殖過程中未被攝食的飼料直接在養(yǎng)殖水體中降解，攝食后未被消化吸收的氮、磷則以糞便等形式排入水中［3-4］。這些未被利用的氮、磷在水體中長期積累會引起水質(zhì)惡化，造成水產(chǎn)疾病頻發(fā)。為了防治病害，大量化學(xué)藥品和抗生素被使用，加速了水體的惡化。此外，未經(jīng)處理的養(yǎng)殖尾水一旦排入河流或湖泊，還會引起周邊水體的富營養(yǎng)化，對周邊水域造成污染，甚至還會危害人體健康［5］。

微生態(tài)制劑是指經(jīng)特殊工藝制成的一類活菌制劑，具有對環(huán)境友好、無不良反應(yīng)和無耐藥性等特點(diǎn)，是一種可以促進(jìn)養(yǎng)殖動物生長、凈化養(yǎng)殖環(huán)境的生物制劑。因此，近年來越來越多的微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中得到研究和應(yīng)用。碳源為微生物生長提供營養(yǎng)所需的碳元素，通過細(xì)胞內(nèi)的一系列化學(xué)變化，被微生物合成各種代謝產(chǎn)物。根據(jù)來源不同，可將碳源分為無機(jī)碳源和有機(jī)碳源。糖類是可被微生物較好利用的碳源，特別是單糖、雙糖等，絕大多數(shù)微生物都能很好地利用。

相關(guān)研究表明，在養(yǎng)殖水體中添加微生態(tài)制劑能有效改善水體，提高水產(chǎn)動物的生長性能和免疫功能，增強(qiáng)抗病力。但水體中微生物發(fā)揮作用常受限于水體中碳源的不足，因此，將微生物制劑和碳源聯(lián)合使用，比單一使用微生物制劑效果更加明顯。王立明［6］研究表明，飼料中添加芽孢桿菌可以提升黃羽肉雞生長性能和飼料表觀消化率；鄭俠飛［7］研究了添加微生物制劑和碳源對水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境的影響及作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)微生態(tài)制劑和碳源的添加可以改變水體微生物的組成，改善水質(zhì)，利于水產(chǎn)動物生長；艾金龍等［8］研究表明，微生物制劑可作為水質(zhì)改良劑、疾病防控劑、生態(tài)平衡劑、飼料添加劑用于小龍蝦養(yǎng)殖，可降低養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)；張優(yōu)平等［9］研究表明，添加微生態(tài)制劑可提升長豐鰱苗種生長性能，改善養(yǎng)殖環(huán)境。目前，有關(guān)微生態(tài)制劑的研究主要集中于生長性能和改善水質(zhì)方面，對微生物制劑與碳源聯(lián)合使用作用于魚類品質(zhì)的研究不多，對云斑尖塘鱧生長性能和肌肉品質(zhì)的影響研究尚鮮見報(bào)道。為此，筆者以葡萄糖為碳源，在養(yǎng)殖水體中添加微生態(tài)制劑和葡萄糖，探討其對云斑尖塘鱧生長和品質(zhì)改善的影響，以期為云斑尖塘鱧的品質(zhì)提升和健康養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用魚來自廣東省東莞市南方特種水產(chǎn)研究所自行繁育的云斑尖塘鱧成魚；微生態(tài)制劑和葡萄糖均購自廣州先得生物科技有限公司，微生態(tài)制劑為乳酸菌復(fù)合制劑，有效活菌數(shù)≥1 000億/kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)地點(diǎn)在廣東省東莞市虎門鎮(zhèn)南方特種水產(chǎn)研究所養(yǎng)殖基地（22°09′34.59″N，113.64′49.89″E）。隨機(jī)在該基地選擇面積相近的6口池塘，其中3口池塘為對照組，3口池塘為試驗(yàn)組。6口池塘面積均為255 hm2，水深2 m，放養(yǎng)云斑尖塘鱧12 000 尾/hm2，混養(yǎng)少量鰱、鳙。飼料為魚漿（冰鮮魚糜+配合飼料），對照組與試驗(yàn)組投喂相同飼料，試驗(yàn)組定期向水體添加微生物制劑和葡萄糖，其中微生物制劑添加量為225 g/（hm2·d），葡萄糖添加量為投喂飼料重量的1%，試驗(yàn)周期為75 d（2021年7月9日至9月24日）。每日投喂2次（09：30、17：00），投喂量為魚體質(zhì)量的3%～4%。

1.3 樣品采集與分析

試驗(yàn)開始時(shí)，每口池塘隨機(jī)抽取30尾逐條測量體長和體重，作為初始體長和體重。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，禁食24 h，每口池塘隨機(jī)抽取30尾逐條測量體長和體重，作為終末體長和體重。同時(shí)用三卡因甲磺酸鹽（250 mg/L）麻醉后，解剖魚體，取出內(nèi)臟團(tuán)，剝離肝臟，分別稱量內(nèi)臟團(tuán)和肝臟的重量。每口池塘隨機(jī)取5尾魚，取背部肌肉，用于質(zhì)構(gòu)檢測；另取部分背部肌肉于-80 ℃冰箱中保存，用于試驗(yàn)魚肌肉營養(yǎng)成分、氨基酸和脂肪酸組成分析。

1.4 項(xiàng)目測定與方法

1.4.1 生長性能與形體指標(biāo)的測定。分別按照以下公式計(jì)算增重率（WGR）、肥滿度（CF）、內(nèi)臟指數(shù)（VSI）和肝臟指數(shù)（HSI）。

WGR（%）=100×（Gt-G0）/G0

CF（%）=100×Gt/L3

VSI（%）=100×Gv/Gt

HSI（%）=100×Gh/Gt

式中，G0為云斑尖塘鱧的初始體重，g；Gt為終末體重，g；Gh為肝臟濕重，g；Gv為內(nèi)臟濕重，g；L為體長，cm。

1.4.2 常規(guī)營養(yǎng)成分分析。水分含量測定參照GB 5009.3—2016；粗蛋白含量測定參照GB 5009.5—2016；粗脂肪含量測定參照GB 5009.6—2016；灰分含量測定參照GB 5009.4—2016。

1.4.3 氨基酸含量測定。

參照GB 5009.124—2016《食品中氨基酸的測定》中的方法測定，所用儀器為高速氨基酸分析儀。

1.4.4 氨基酸營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)。根據(jù)FAO/WHO中的氨基酸評分標(biāo)準(zhǔn)模式［10］，并和全雞蛋蛋白質(zhì)的氨基酸模式［11］進(jìn)行比較，分別計(jì)算氨基酸評分（AAS）、化學(xué)評分（CS）和必需氨基酸指數(shù)（EAAI）［12］。

AAS=待測樣品中某種氨基酸含量FAO/WHO標(biāo)準(zhǔn)模式中同種氨基酸含量（1）

CS=待測樣品中氨基酸含量全雞蛋蛋白質(zhì)中同種氨基酸含量（2）

EAAI=naA×100×bB×100×cD×100×…×gG×100? ? ? ?（3）

式中，n為氨基酸數(shù)；a，b，c，…，g為待測樣品氨基酸含量，mg/g；A，B，C，…，G為全雞蛋蛋白中同種氨基酸含量，mg/g。

1.4.5 脂肪酸含量測定。

參照GB 5009.168—2016第二法，用微波萃取法提取脂肪酸，甲酯化后用氣象色譜儀進(jìn)行測定。

1.4.6 脂肪酸營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)。

根據(jù)文獻(xiàn)［13-14］，分別計(jì)算致動脈粥樣化指數(shù)（IA）和血栓形成指數(shù)（IT），用于評估云斑尖塘鱧肌肉脂肪酸對人類心血管疾病發(fā)生的影響。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2019統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)，采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間差異性分析，顯著水平為0.05，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 養(yǎng)殖水體中添加微生態(tài)制劑和葡萄糖對云斑尖塘鱧生長性能的影響

由表1可知，添加碳源和微生態(tài)制劑對云斑尖塘鱧的生長有明顯的促進(jìn)作用，表現(xiàn)為試驗(yàn)組的增重率顯著高于對照組（P<0.05），試驗(yàn)組的臟體指數(shù)也顯著高于對照組；肝體指數(shù)和肥滿度高于對照組，但二者均與對照組差異不顯著（P>0.05）。

2.2 常規(guī)營養(yǎng)成分分析

由表2可知，試驗(yàn)組魚體粗脂肪含量（0.47%）顯著低于對照組（0.78%）（P<0.05）；試驗(yàn)組灰分含量顯著高于對照組（P<0.05），但粗蛋白質(zhì)和水分含量均與對照差異不顯著。

2.3 氨基酸組成及營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)

由表3可知，試驗(yàn)組與對照組均檢測出16種氨基酸，分別為必需氨基酸7 種，半必需氨基酸2種和非必需氨基酸7 種。結(jié)果顯示，試驗(yàn)組與對照組各氨基酸含量均無顯著性差異（P>0.05），其含量較高的氨基酸均包括：天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、 亮氨酸、賴氨酸、精氨酸。試驗(yàn)組呈味氨基酸（DAA）、非必需氨基酸（NEAA）和總氨基酸（TAA）含量均略高于對照組，必需氨基酸（EAA）含量略低于對照組，但差異不顯著（P>0.05）。試驗(yàn)組和對照組必需氨基酸分別占氨基酸總量的47.90%和49.24%，均高于WHO/FAO標(biāo)準(zhǔn)（35.38%）；必需氨基酸分別占非必需氨基酸的94.48%和97.33%，都比WHO/FAO推薦的蛋白模式標(biāo)準(zhǔn)（60%）高。

必需氨基酸的氨基酸評分和化學(xué)評分結(jié)果見表4。由表4可知，試驗(yàn)組蛋氨酸的氨基酸評分和化學(xué)評分高于對照組，其他必需氨基酸（除酪氨酸外）的AAS、CS和EAAI均小于或等于對照組。AAS、CS結(jié)果表明，試驗(yàn)組和對照組第一限制性氨基酸均為蛋氨酸，第二限制性氨基酸均為纈氨酸。因此，在養(yǎng)殖云斑尖塘鱧過程中，可投喂富含蛋氨酸、纈氨酸的飼料，以提高云斑尖塘鱧的營養(yǎng)價(jià)值。

EAAI可反映必需氨基酸含量與全雞蛋白質(zhì)含量的相似度，也是體現(xiàn)蛋白質(zhì)消化利用率的具體指標(biāo)之一［15］。由表4可知，試驗(yàn)組和對照組的EAAI分別為1.14和1.10，說明2 組云斑尖塘鱧均屬于優(yōu)質(zhì)蛋白源，且試驗(yàn)組蛋白質(zhì)的消化利用率高于對照組。

2.4 脂肪酸組成與營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)

由表5可知，對照組共檢測出21種脂肪酸，試驗(yàn)組檢測出14種。分析結(jié)果顯示，試驗(yàn)組飽和脂肪酸含量除十七烷酸外，其余均顯著低于對照組（P<0.05）；不飽和脂肪酸除二十四碳一烯酸和十七碳一烯酸外，其余均有顯著差異（P<0.05），油酸和亞油酸含量顯著高于對照組，其他顯著低于對照組（P<0.05）。試驗(yàn)組飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸含量均低于對照組，試驗(yàn)組與對照組脂肪酸相對含量均為PUFAs>SFA>MUFA。試驗(yàn)組n-6系PUFA含量較高，而對照組n-3系多不飽和脂肪酸含量較高，其中EPA＋DHA相對含量明顯高于試驗(yàn)組。

3 討論

前期研究表明，微生態(tài)制劑具有提高水產(chǎn)動物增長率，增強(qiáng)水產(chǎn)動物免疫力等方面的功能，在漁業(yè)養(yǎng)殖中得到了大量的使用［16-17］。該試驗(yàn)結(jié)果表明，在水體中添加微生態(tài)制劑和碳源顯著提高了云斑尖塘鱧的增重率，說明添加上述2種物質(zhì)對云斑尖塘鱧的生長具有明顯的促進(jìn)作用。這一結(jié)果與白利丹等［18-19］的研究結(jié)果相似。

該研究表明，添加微生物制劑和碳源可以顯著降低粗脂肪含量。一般認(rèn)為，魚肉中脂肪含量與魚肉口感和嫩滑有關(guān)，同時(shí)脂肪含量的上升還會導(dǎo)致其風(fēng)味的變化［20］。如果肌肉脂肪含量太高，會使得魚肉腥味加重，食用時(shí)易出現(xiàn)油膩感，使得總體感官品質(zhì)下降，難以滿足人們對高品質(zhì)水產(chǎn)品的需求。試驗(yàn)組粗脂肪含量比對照組顯著降低，說明添加微生物制劑和碳源一定程度上可以提升云斑尖塘鱧的肌肉品質(zhì)。

肌肉的蛋白質(zhì)含量決定了魚類肌肉的營養(yǎng)價(jià)值，而氨基酸是組成蛋白質(zhì)基本單元，氨基酸組成是反映蛋白質(zhì)質(zhì)量的一個重要指標(biāo)，氨基酸特別是必需氨基酸的組成和含量決定蛋白質(zhì)的品質(zhì)［21］。該研究中添加微生物制劑和碳源魚體總氨基酸含量、非必需氨基酸含量均比未使用上述2種物質(zhì)的要高，說明通過上述措施可以提高肌肉品質(zhì)。肌肉中的鮮味取決于肌肉中的鮮味氨基酸組成和含量［22］。鮮味氨基酸的含量提高，表明添加微生物制劑提升了云斑尖塘鱧肌肉的鮮美程度。

飼料中脂肪水平和脂肪酸含量會影響到魚體肌肉中脂肪酸組成及含量［23］。脂肪酸分為飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸，其中飽和脂肪酸可在動物體內(nèi)合成。多數(shù)情況下，魚類不能合成n-3、ｎ-6系列的不飽和脂肪酸，因此這些不飽和脂肪酸被看作是其生長發(fā)育所必需的脂肪酸［24］。張?zhí)烊蔚龋?5］對刺參的研究發(fā)現(xiàn)，水體中添加微生態(tài)制劑，可以顯著減少刺參體中飽和脂肪酸的含量，這與該試驗(yàn)結(jié)果一致。該試驗(yàn)添加微生態(tài)制劑對云斑尖塘鱧肌肉不飽和脂肪酸的含量影響較大，其中n-3系多不飽和脂肪酸含量試驗(yàn)組顯著低于對照組。試驗(yàn)組和對照組云斑尖塘鱧∑PUFA n-3/∑PUFA n-6值分別為4.152和5.875，都比FAO/WHO推薦的日常膳食要高得多［26］，因此，試驗(yàn)組與對照組云斑尖塘鱧分別可作為n-6系和n-3系多不飽和脂肪酸的補(bǔ)充途徑之一。試驗(yàn)組和對照組云斑尖塘鱧肌肉中IA分別為0.340和0.320；IT分別為0.026和0.024，比牛肉和羊肉相關(guān)指標(biāo)要低得多［27］。這說明經(jīng)常食用云斑尖塘鱧，對治療心血管疾病有較大益處。

4 結(jié)論

該試驗(yàn)研究了添加微生態(tài)制劑和碳源對云斑尖塘鱧生長性能及肌肉品質(zhì)的影響，結(jié)果表明：在水體中添加微生態(tài)制劑和碳源顯著促進(jìn)了云斑尖塘鱧生長，試驗(yàn)組增重率比對照組提高了19.75%；添加微生態(tài)制劑和碳源顯著提高了云斑尖塘鱧肌肉中灰分含量，試驗(yàn)組比對照組提高了11.38%；同時(shí)顯著降低了粗脂肪含量，試驗(yàn)組比對照組降低了39.74%；添加微生態(tài)制劑和碳源顯著降低了云斑尖塘鱧肌肉中脂肪酸的含量（P<0.05），試驗(yàn)組飽和脂肪酸與多不飽和脂肪酸均顯著低于對照組（P<0.05），其中n-3系多不飽和脂肪酸差異顯著，降低了37.23%。

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