姬松茸F1代篩選低富鎘高產(chǎn)型菌株研究

邱春錦

摘要 從菌絲生長(zhǎng)、農(nóng)藝性狀、平均產(chǎn)量以及鎘含量等指標(biāo)，挖掘雜交F1代低富鎘、高產(chǎn)潛力菌株。結(jié)果表明，A13、A14菌絲特征為粗壯、密集、菌索多，生長(zhǎng)階段污染率低；子實(shí)體單朵重量分別達(dá)25.7、15.9 g/朵，為大粒型、中粒型；菌柄直徑為2.2、2.1 cm，占子實(shí)體比重54.09%、59.75%；平均產(chǎn)量達(dá)8.52、7.84 kg/m2，與出發(fā)菌株均達(dá)顯著水平；鎘含量為2.1、5.9 mg/kg，與出發(fā)菌株均達(dá)極顯著水平。A13、A14 2個(gè)菌株具有同時(shí)滿(mǎn)足高產(chǎn)、粗柄、低富鎘的特征特性。

關(guān)鍵詞 姬松茸；雜交；高產(chǎn)；粗柄；低富鎘；菌株

中圖分類(lèi)號(hào) S646? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2023）10-0040-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.10.009

Abstract From mycelial growth，agronomic characters，average yield and Cd content，the hybrid F1 generation strains with low Cd rich and high yield potential were excavated.The results showed that the mycelia of A13 and A14 were characterized by thick and dense mycelia，abundant rhizomorph，and low contamination rate in growth stage.The fruit body single weight were 25.7 and 15.9 g，respectively，which were largegrained and mediumgrained.The stipe diameter were 2.2 and 2.1 cm，accounting for 54.09% and 59.75% of fruit body.The average yield were 8.52 and 7.84 kg/m2，which were significantly higher than those of the original strain.The Cd content were 2.1 and 5.9 mg/kg，which were significantly higher than those of the original strain.A13 and A14 strains had the characteristics of high yield，thick stipe，low Cd content.

Key words Agaricus blazei;Hybridization;High yield;Thick stipe;Low cadmium content;Strains

姬松茸，別稱(chēng)巴西蘑菇、巴氏蘑菇、小松菇，屬真菌界、真菌門(mén)、擔(dān)子菌亞門(mén)、層菌綱、傘菌目、蘑菇科、蘑菇屬，是一種珍貴的食藥兼用的真菌，菌肉脆味美有杏仁味，營(yíng)養(yǎng)豐富［1］。李開(kāi)本等［2］對(duì)中國(guó)福建、日本和巴西等地的姬松茸子實(shí)體中重金屬元素進(jìn)行測(cè)定發(fā)現(xiàn)鎘含量為13.0～23.1 mg/kg，具有富鎘的特性。黃建成等［3-4］、劉朋虎等［5-7］、龔光祿等［8］開(kāi)展了鎘對(duì)姬松茸的脅迫及富集規(guī)律，推測(cè)半胱氨酸為親鎘蛋白體，菌蓋鎘含量是菌柄的3倍以上，提出粗柄型姬松茸品種可以有效降低鎘富集。劉朋虎等［9］、陳華等［10］、Jiang等［11-12］通過(guò)誘變輻射，選育出低富鎘菌株J77、J37、J5。李碧瓊等［13-14］利用廢菌渣開(kāi)展了姬松茸優(yōu)良菌株篩選和配方優(yōu)化研究。筆者以莆田市目前主栽品種A2、廢菌渣栽培獲得的姬松茸高產(chǎn)菌株A8作為出發(fā)菌株，通過(guò)孢子有性雜交，獲得F1代新菌株12個(gè)，其中能正常出菇的有6個(gè)。通過(guò)系統(tǒng)觀察F1代6個(gè)菌株在菌絲生長(zhǎng)、農(nóng)藝性狀、產(chǎn)量以及鎘含量等指標(biāo)篩選出適宜廢菌渣栽培的低富鎘高產(chǎn)型菌株，以期為姬松茸新品種選育及其綠色生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株。

A2菌株由福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所引進(jìn)保藏；A8菌株為從雙孢蘑菇廢菌渣連栽姬松茸中組織分離獲得；A12、A13、A14、A15、A16、A17為A2、A8孢子有性雜交的F1代可形成子實(shí)體的菌株。

1.1.2 培養(yǎng)料配方。栽培種培養(yǎng)料配方參照李碧瓊等［13］的方法進(jìn)行。栽培料配方參照李碧瓊等［13］、陳政明等［15］、黃建成等［3-4］的栽培料配方進(jìn)行改良，確定栽培配方為廢菌渣45%、巨菌草30%、牛糞18%、磷酸二氫鉀2%、石灰3%、輕質(zhì)碳酸鈣2%、含水量65%。

1.2 方法

將巨菌草粉碎至5 mm以下的小料，預(yù)濕并建堆，24 h后，加入廢菌渣、磷酸二氫鉀、石灰拌勻，水分調(diào)節(jié)至70%左右，分別在第4天、第8天、第12天進(jìn)行翻堆，第12天，加入輕質(zhì)碳酸鈣，于建堆15 d，將發(fā)酵好的培養(yǎng)料移入栽培房的床架上，進(jìn)行巴氏滅菌。菌絲部分長(zhǎng)透料層，即可進(jìn)行覆土管理［16］。

1.3 觀測(cè)項(xiàng)目與方法

1.3.1 菌絲生長(zhǎng)情況。巴氏滅菌后，直至料溫降低至自然溫后，每個(gè)菌株播種8 m2，隨機(jī)抽取面積為1 m2作為試驗(yàn)區(qū)，重復(fù)3次，觀察不同菌株菌種萌發(fā)長(zhǎng)滿(mǎn)料面天數(shù)、菌絲長(zhǎng)透料層天數(shù)、覆土至開(kāi)采天數(shù)、播種至開(kāi)采天數(shù)、菌絲生長(zhǎng)形態(tài)、污染率，其余面積按照保護(hù)行功能進(jìn)行管理。

1.3.2 不同姬松茸菌株農(nóng)藝性狀。在3個(gè)試驗(yàn)小區(qū)內(nèi)分別挑取10朵作為觀察個(gè)體，觀測(cè)菌柄的直徑、長(zhǎng)度、顏色、重量，菌蓋的直徑、厚度、顏色，記錄不同菌株的子實(shí)體風(fēng)味、粒型。粒型以單朵重量分為3個(gè)等級(jí)，大于20 g為大粒型，大于15 g小于20 g為中粒型，小于15 g為小粒型。

1.3.3 不同菌株產(chǎn)量及鎘含量。

在“1.3.1”試驗(yàn)區(qū)中，分別采摘統(tǒng)計(jì)每個(gè)菌株前3潮的產(chǎn)量，烘干后采用原子吸收分光光度計(jì)進(jìn)行鎘含量檢測(cè)，檢查方法按照《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鎘的測(cè)定》（GB 5009.15—2014）進(jìn)行。

1.3 數(shù)據(jù)分析 采用7.05 DPS軟件進(jìn)行新復(fù)極差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同姬松茸菌株菌絲生長(zhǎng)狀況比較

從表1可以看出，不同菌株菌種萌發(fā)長(zhǎng)滿(mǎn)料面天數(shù)在5～6 d，可以正常萌發(fā)。根據(jù)新復(fù)極差法分析，A13菌絲長(zhǎng)透料面所需時(shí)間最短，為21.33 d；A16最慢，為32.00 d，均與其他菌株達(dá)極顯著水平。A12覆土至開(kāi)采天數(shù)最長(zhǎng)，達(dá)24.00 d，與出發(fā)菌株及其他菌株達(dá)極顯著差異。A13、A14播種至開(kāi)采所需時(shí)間最短，分別為47.33、49.67 d；A16最慢，達(dá)59.33 d，與出發(fā)菌株達(dá)極顯著水平。A13污染率最低，僅為0.1%；其次為A15、A12、A14，污染率分別為0.2%、0.3%、0.3%，4個(gè)菌株菌絲生長(zhǎng)都表現(xiàn)出粗壯、密集、菌索多，A16污染率最高，達(dá)2.1%，有4個(gè)菌株污染率大幅度下降。綜上所述，在雜交F1代，菌絲長(zhǎng)透料層階段有2個(gè)菌株發(fā)生變異；覆土至開(kāi)采階段有1個(gè)菌株發(fā)生變異；播種至開(kāi)采全過(guò)程，有4個(gè)菌株發(fā)生變異，污染率大幅度下降的有4個(gè)菌株，雜交有利于菌絲生長(zhǎng)狀況優(yōu)化。

2.2 不同姬松茸菌株農(nóng)藝性狀

從表2可知，菌柄重量占子實(shí)體重量達(dá)50%及以上的有3個(gè)菌株，分別是A13、A14、A16，其菌柄直徑分別為2.2、2.1、1.7 cm；遠(yuǎn)高于出發(fā)菌株1.2 cm，風(fēng)味上均表現(xiàn)為淡杏仁味。子實(shí)體平均重量達(dá)20 g以上的有2個(gè)菌株，分別為A13、A8，其平均重量分別為25.7、20.3 g/朵，均表現(xiàn)為大粒型。由表1、2可知，A13、A14 這2個(gè)菌株菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)出粗壯、密集、菌索多，菌絲長(zhǎng)透料層天數(shù)短，為粗菌柄的菌株，同時(shí)伴有風(fēng)味為淡杏仁味的特點(diǎn)。

2.3 不同菌株產(chǎn)量及鎘含量比較 從表3可以看出 A13鎘含量最低，為2.1 mg/kg，其次為A14、A12、A16、A17，分別為5.9、6.4、8.9、10.9 mg/kg，與出發(fā)菌株均達(dá)到極顯著水平。A13菌株平均產(chǎn)量最高，達(dá)8.52 kg/m2，與出發(fā)菌株及其他菌株均達(dá)極顯著水平；A14、A15、A17 3個(gè)菌株次之，平均產(chǎn)量分別為7.82、7.78、7.70 kg/m2；通過(guò)雜交的6個(gè)菌株平均產(chǎn)量均優(yōu)于出發(fā)菌株A2、A8，達(dá)顯著水平。綜上所述，A13、14菌株平均產(chǎn)量為8.52、7.82 kg/m2，鎘含量為2.1、5.9 mg/kg，均為理想的低富鎘高產(chǎn)菌株。

3 結(jié)論與討論

3.1 結(jié)論

結(jié)合菌絲生長(zhǎng)情況、農(nóng)藝性狀、平均產(chǎn)量及富鎘等特征特性，A13、A14菌絲特征為粗壯、密集、菌索多，生長(zhǎng)階段污染率低；子實(shí)體單朵重量分別達(dá)25.7、15.9 g/朵為大粒型、中粒型；菌柄直徑為2.2、2.1 cm，占子實(shí)體比重54.09%、59.75%；平均產(chǎn)量達(dá)8.52、7.82 kg/m2，與出發(fā)菌株均達(dá)顯著水平；鎘含量為2.1、5.9 mg/kg，與出發(fā)菌株均達(dá)極顯著水平。A13、A14 2個(gè)菌株具有同時(shí)滿(mǎn)足高產(chǎn)、粗柄、低富鎘的特征特性，符合篩選粗柄型菌株實(shí)現(xiàn)低富集鎘的育種目標(biāo)。

3.2 討論

李開(kāi)本等［2］對(duì)姬松茸鎘含量進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)姬松茸具有富鎘特性。黃建成等［4］通過(guò)不同濃度鎘脅迫其菌蓋鎘的富集量均比菌柄高3倍左右，提出選擇菌蓋與菌柄比為50：50粗柄型菌株應(yīng)用于生產(chǎn)栽培是實(shí)現(xiàn)低鎘栽培一重要措施。該研究通過(guò)雜交，在6株雜交F1代中菌柄重量占子實(shí)體重量50%以上的有3個(gè)菌株，其菌柄直徑分別為2.2、2.1、1.7 cm，遠(yuǎn)高于出發(fā)菌株1.2 cm，其鎘富集特征符合預(yù)期。但同時(shí)發(fā)現(xiàn)菌柄比重增加，風(fēng)味會(huì)明顯變淡。

A12菌絲粗壯、濃密、菌索多，菌柄重量占比重為 49.46％，前三潮平均產(chǎn)量6.94 kg/m2；Ａ15菌絲粗壯、濃密、菌索多，菌柄重量占比重為 38.79％，前三潮平均產(chǎn)量7.78 kg/m2；Ａ16菌株菌絲纖細(xì)、稀疏、菌索少，菌柄重量占比重達(dá)50％，前三潮平均產(chǎn)量6.82 kg/m2。A12、Ａ15菌絲生長(zhǎng)形態(tài)相同，但前三潮平均產(chǎn)量達(dá)極顯著水平，菌柄重量占比重差10.67%；A12、Ａ16菌絲生長(zhǎng)形態(tài)差異大，前三潮平均產(chǎn)量無(wú)顯著差異，菌柄重量占比重僅差0.52%，綜上所述，菌絲生長(zhǎng)形態(tài)、菌柄重量占比重、前三潮平均產(chǎn)量之間不存在必然的聯(lián)系，不能直接作為判斷依據(jù)，有待進(jìn)一步研究。

姬松茸因無(wú)鎖狀聯(lián)合，需要參照萬(wàn)誠(chéng)等［17］遺傳多樣性方法進(jìn)一步確定A13、A12、A14 3個(gè)菌株與出發(fā)菌株A2、A8之間的遺傳距離。進(jìn)一步開(kāi)展菌株多點(diǎn)試驗(yàn)，確定菌株的特異性、穩(wěn)定性和一致性，力求為姬松茸產(chǎn)業(yè)提供優(yōu)良菌株。

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