珊瑚菜鹽脅迫相關(guān)GlRTH 基因的克隆和表達(dá)量分析

徐 瑤，任宏偉，張馨方，王 芳，朱 丹，譚玲玲，袁 濤，高 婷*

1. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 山東省高校植物生物技術(shù)重點實驗室，山東 青島 266109

2. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)建筑工程學(xué)院，山東 青島 266109

珊瑚菜GlehnialittoralisFr. Schmidt ex Miq.是傘形科（Umbelliferae）珊瑚菜屬GlehniaF. Schmidt的多年生草本植物[1]。其干燥根稱為北沙參，是我國重要的傳統(tǒng)中藥材，藥用價值較高，具有益胃生津、養(yǎng)陰清肺、鎮(zhèn)咳祛痰等功效[2-3]。珊瑚菜屬于鹽生植物，生長地主要在中國山東、福建、遼寧、河北省以及俄羅斯、朝鮮、日本、北美等的沿海沙灘和沙堤上，對于海岸固沙及鹽堿地改良均發(fā)揮了重要的作用[4-5]。目前珊瑚菜野生資源越來越少，已經(jīng)列為我國漸危物種、國家二級重點保護(hù)植物[1-2]。此外，珊瑚菜的莖和根有很高的食用價值，隨著市場需求的不斷擴(kuò)大，受到了越來越多的關(guān)注。

土壤鹽堿化是目前人類面臨的重要環(huán)境問題，根據(jù)2015 年聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織發(fā)布的世界土壤資源狀況報告，全球受鹽堿影響的土壤總面積達(dá)10 億hm2，對農(nóng)牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展構(gòu)成了嚴(yán)重威脅[6-7]，耐鹽堿作物資源對扼制土地的鹽漬化和提高鹽荒地的利用具有重要意義，培育耐鹽堿性的植物資源就成為了當(dāng)下急需解決的問題之一。目前，對于耐鹽堿植物的研究主要圍繞著植物耐鹽堿反應(yīng)機(jī)制以及在抗逆反應(yīng)機(jī)制有作用的因子[8]，珊瑚菜中抗鹽相關(guān)的基因尚未被研究。

植物激素乙烯影響著許多植物生長發(fā)育過程中的生物學(xué)過程[9]。RTE1（reversal to ethylenesensitivity 1）基因是近年來發(fā)現(xiàn)的一個在植物、動物和某些原生生物中保守的新基因[10]。研究表明乙烯受體ETR1 存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（endoplasmic reticulum，ER）膜上，跨膜蛋白RTE1 定位于ER 和高爾基體，且 ETR1 受到 RTE1 的負(fù)調(diào)控[11-12]。RTE1-HOMOLOG（RTH）是擬南芥RTE1基因家族中唯一的同源蛋白，RTH 突變體對外源乙烯具有不敏感性，過表達(dá)可導(dǎo)致乙烯過敏感[12-13]。同時，乙烯作為一種植物脅迫激素，也可以提高植物的抗逆性。有研究顯示水稻和擬南芥外施乙烯和乙烯前體ACC后對鹽脅迫的敏感性明顯降低，顯著增加了野生型擬南芥幼苗在高鹽環(huán)境下的抗鹽能力及成活率[12]。通過擬南芥鹽脅迫下的轉(zhuǎn)錄組分析表明：大量乙烯應(yīng)答基因的表達(dá)量均發(fā)生了顯著變化[14]。大量研究顯示：乙烯信號途徑中的重要組分EIN3 等均參與了植物的鹽脅迫反應(yīng)[15-17]。RTH 蛋白響應(yīng)乙烯信號，可能也在植物抗鹽過程中發(fā)揮重要作用。

本研究在前期已完成的珊瑚菜轉(zhuǎn)錄組高通量測序數(shù)據(jù)（GenBank 號PRJNA387325）的基礎(chǔ)上，使用關(guān)鍵詞RTE1-HOMOLOG（RTH）對珊瑚菜轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫進(jìn)行篩選，篩選到1 條轉(zhuǎn)錄組序列（c48547g1）?？寺～@得了珊瑚菜GlRTH基因序列，對分析了該基因在珊瑚菜不同部位及在NaCl 和1-氨基環(huán)丙烷羧酸（1-aminocyclopropanecarboxylic acid，ACC）不同處理時間的表達(dá)量變化。該研究結(jié)果有助于揭示乙烯信號通路分子和植物響應(yīng)高鹽脅迫的關(guān)系。

1 材料與儀器、試劑

1.1 材料

實驗室培養(yǎng)的開花期珊瑚菜以及2 個月珊瑚菜幼苗。由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)高婷副教授鑒定為珊瑚菜G.littoralisFr. Schmidt ex Miq.。

1.2 儀器

SIM-F140AY65 型制冰機(jī)（日本三洋公司），G154TW 型滅菌鍋（AUTO CLAVE 公司），Anke GL-20C-II 低溫冷凍離心機(jī)（飛鴿），DV215CD 型電子天平（Ohaus Discovery），Tanon 500 凝膠成像分析系統(tǒng)（上海領(lǐng)成公司），核酸電泳系統(tǒng)（美國Bio-RAD 公司），S1000PCR 儀（美國伯樂公司），小型臺式離心機(jī)（德國Eppendorff Centrifuge 5424），Milli-Q 型超純水儀，Stratagene Mx3000P 實時熒光定量PCR 儀（美國安捷倫），超微量分光光度計（美國Thermo NanoDropOne 公司）。

1.3 試劑

TaKaRa Ex Taq 酶，TaKaRa TaqTM試劑盒，膠回收試劑盒，pMD?18-T 質(zhì)粒載體，大腸桿菌DH5α 感受態(tài)，天根多糖多酚植物總RNA 提取試劑盒，諾唯贊反轉(zhuǎn)錄試劑盒，TaKaRa SMARTer RACE 5’/3’ Kit試劑盒，諾唯贊TB Green?Premix Ex Taq? II 熒光定量試劑盒。

2 方法

2.1 GlRTH 基因開放閱讀框(open reading frame，ORF)的克隆和測序

以新鮮珊瑚菜幼苗為材料，使用多糖多酚植物總RNA 提取試劑盒提取珊瑚菜幼苗總RNA，使用超微量分光光度計檢測RNA 濃度及其在260、280 nm 下的吸光度值（A）比值（A260/A280），并進(jìn)行記錄。通過反轉(zhuǎn)錄試劑盒對珊瑚菜幼苗總RNA 進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，從而獲得珊瑚菜cDNA。使用1%瓊脂糖凝膠進(jìn)行cDNA 檢測，并放-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

在前期已完成的珊瑚菜轉(zhuǎn)錄組高通量測序數(shù)據(jù)（GenBank 號PRJNA387325）的基礎(chǔ)上，使用關(guān)鍵詞RTE1-HOMOLOG（RTH）進(jìn)行篩選得到的1 條轉(zhuǎn)錄組序列（c48547g1）。以此為模板設(shè)計引物，送青島擎科生物技術(shù)公司合成引物GlRTH-F 和GlRTH-R。使用Ex Taq 酶通過qRT-PCR 進(jìn)行克隆，TaKaRaTaqTM試劑盒對PCR 產(chǎn)物末端加入A 尾，電泳后使用膠回收試劑盒對擴(kuò)增正確的目的片段進(jìn)行膠回收。將回收片段連接到18-T 載體上。將構(gòu)建完畢的18-T 載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞中，隨后涂布在氨芐青霉素（AMP）抗性的LB 固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，37 ℃倒置黑暗培養(yǎng)過夜。次日挑取飽滿圓形的大腸桿菌菌斑放入AMP抗性的LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)6 h，使用Ex Taq 酶對挑取的大腸桿菌進(jìn)行菌液PCR 電泳檢測。選取與目標(biāo)基因片段處對應(yīng)的菌液送至生物工程股份有限公司測序，引物見表1。

表1 GlRTH 基因克隆及qRT-PCR 所用的引物序列Table 1 Primer sequences of GlRTH gene cloning and qRT-PCR

2.2 cDNA 末端快速擴(kuò)增（rapid amplification of cDNA ends，RACE）

參考TaKaRa SMARTer RACE 5’/3’ Kit 試劑盒說明書進(jìn)行操作。使用DNAMAN6.0 軟件對已知GlRTH基因的部分序列分別設(shè)計3’RACE 特異性引物，GlRTH-3'RACE long 和GlRTH-3'RACE short。對已知GlRTH基因的部分序列的3’端進(jìn)行3’ Race PCR。隨后進(jìn)行電泳、膠回收、連接、轉(zhuǎn)化以及測序，與“2.1”項中的步驟一致。使用DNAMAN 6.0軟件，將測序結(jié)果與原序列進(jìn)行拼接，從而獲得GlRTH基因的全長ORF 序列。

2.3 GlRTH 基因熒光定量檢測

2.3.1 樣品的處理以及cDNA 獲取 選取開花期珊瑚菜植株的根、葉和花各3 份，將樣品迅速放于液氮中。從種植苗圃中挑選健康的剛生長出真葉的珊瑚菜幼苗以及一年生珊瑚菜全株，用蒸餾水洗凈表面泥沙，吸干多余水分，分為2 份備用。在培養(yǎng)皿中鋪上干凈的濾紙，并倒入200 mmol/L 的NaCl 溶液，另一份倒入100 mmol/L 的ACC 溶液，蓋好培養(yǎng)皿蓋子，放入黑暗培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。NaCl 處理樣本在0、3、6、12、24、36 h 各取樣1 次，每個樣本3份重復(fù)，ACC 處理樣本在0、3、6、12 h 各取樣1次，每個樣品3 份重復(fù)，樣品全株及時放入液氮中，-80 ℃保存。根據(jù)“2.1”項中的步驟對所取得不同珊瑚菜樣本進(jìn)行RNA 的提取以及反轉(zhuǎn)錄。

2.3.2 目的基因熒光定量PCR 以高通量測序獲得的序列為依據(jù)，以珊瑚菜Actin作為內(nèi)參基因，利用NCBI 軟件設(shè)計熒光定量PCR 的正反向引物c48547g1-F 、 c48547g1-R 、GlActin-F 以 及GlActin-R。構(gòu)建qRT-PCR 體系，以不同部位的即花、葉和根中提取出的RNA 以及200 mmol/L NaCl 處理0、3、6、12、24、36 h 以及100 mmol/L ACC 處理0、3、6、12 h 的幼苗得到的cDNA 為模板，每組3 個重復(fù)。利用熒光定量PCR 獲得Ct值，使用2-ΔΔCt數(shù)據(jù)分析法對熒光定量數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2.4 生物信息學(xué)分析

使用生物信息學(xué)相關(guān)網(wǎng)站以及軟件：NCBI，DNAMAN、Protparam、ProtScale、TMHMM、SOPMA、SWISS-MODLE、ClustalX、MEGA6 等，對目的基因GlRTH進(jìn)行ORF 的識別和保守結(jié)構(gòu)域分析、蛋白質(zhì)理化性質(zhì)及跨膜結(jié)構(gòu)域分析、蛋白質(zhì)二級及三級結(jié)構(gòu)預(yù)測、同源蛋白比對以及分子發(fā)育系統(tǒng)分析。

3 結(jié)果與分析

3.1 GlRTH 基因的擴(kuò)增檢測和測序結(jié)果

為了獲得珊瑚菜GlRTH基因全長ORF 序列，通過轉(zhuǎn)錄組已有GlRTH序列設(shè)計引物，對珊瑚菜GlRTHORF 序列進(jìn)行PCR 擴(kuò)增以及克隆、測序，如圖1 電泳圖GlRTH電泳條帶位置與轉(zhuǎn)錄組GlRTHORF 長度相一致，對GlRTH電泳條帶進(jìn)行回收測序，測序結(jié)果顯示與轉(zhuǎn)錄組序列一致，表明獲得了珊瑚菜GlRTH的ORF 序列，見圖1。

圖1 GlRTH 的ORF 克隆電泳 (A) 及GlRTH 的ORF 克隆測序比對結(jié)果 (B)Fig. 1 Electrophoresis of GlRTH ORF cloning (A) and GlRTH ORF cloning sequencing comparison results (B)

3.2 RACE 結(jié)果

為了確定GlRTH基因的全長ORF 序列，對其進(jìn)行3’RACE PCR，結(jié)果如圖2 所示，推測PCR 正確片段長度大約在500～750 bp，因此對圖中正確的DNA 條帶（箭頭所指）進(jìn)行回收并測序。將3’RACE測序結(jié)果與ORF 測序結(jié)果進(jìn)行比對，結(jié)果一致最終確定了GlRTH基因的全長ORF 序列進(jìn)行后續(xù)分析。

圖2 GlRTH 3’RACE PCR 電泳圖Fig. 2 Electrophoresis of GlRTH gene 3’ RACE PCR

3.3 生物信息學(xué)分析

3.3.1 ORF 的識別 利用NCBI 提供的ORF Finder對得到的GlRTH序列進(jìn)行分析，如圖3 可知該序列ORF 長為690 bp，共編碼229 個氨基酸。

圖3 GlRTH 基因序列與氨基酸序列Fig. 3 GlRTH gene sequence and amino acid sequence

3.3.2 保守結(jié)構(gòu)域分析 將GlRTH 蛋白序列于NCBI在線網(wǎng)站進(jìn)行保守結(jié)構(gòu)域預(yù)測。預(yù)測結(jié)果如圖4 所示，40～173 氨基酸編碼區(qū)屬于DUF778 超家族保守結(jié)構(gòu)域。推測GlRTH 蛋白行使轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的作用。

圖4 GlRTH 蛋白的保守結(jié)構(gòu)預(yù)測Fig. 4 Prediction of conserved structure of GlRTH protein

3.3.3 蛋白質(zhì)理化性質(zhì)及跨膜結(jié)構(gòu)域分析 使用ExPASy 對GlRTH 蛋白進(jìn)行了親疏水性預(yù)測以及蛋白跨膜結(jié)構(gòu)域預(yù)測，如圖5 所示，GlRTH 蛋白相對分子質(zhì)量為26 150.28，等電點為6.05。不穩(wěn)定系數(shù)為30.08，從而說明該蛋白穩(wěn)定?？偲骄H水性為0.145，為疏水性蛋白，GlRTH 蛋白在第6 個氨基酸位點出現(xiàn)最低峰值，最低峰值為-3.256，在第187個氨基酸位點，出現(xiàn)最高峰值，最高峰值為2.733。同時預(yù)測GlRTE1 蛋白存在跨膜結(jié)構(gòu)域。蛋白進(jìn)行三級結(jié)構(gòu)預(yù)測。結(jié)果如圖6-B 所示，預(yù)測AtRTH 蛋白使用模體為4q95.1.B，預(yù)測GlRTE1 蛋白使用模體為4q95.1.A，GlRTH 蛋白三級結(jié)構(gòu)包含了103 個氨基酸，占編碼氨基酸總數(shù)的44.98%可信度較高。通過比對發(fā)現(xiàn)GlRTH 與AtRTH 預(yù)測蛋白空間結(jié)構(gòu)較為相似，普遍包含空間結(jié)構(gòu)相似的無規(guī)則卷曲、β-片層、α-螺旋3 種空間結(jié)構(gòu)，推測兩者蛋白在功能上可能存在一定的保守型與相似性。

圖5 GlRTH 蛋白質(zhì)親疏水性預(yù)測 (A) 以及GlRTH 蛋白質(zhì)跨膜結(jié)構(gòu)域分析 (B)Fig. 5 Prediction of hydrophilicity and hydrophobicity of GlRTH protein (A) and GlRTH protein transmembrane domain (B)

圖6 GlRTH 蛋白的二級結(jié)構(gòu)預(yù)測 (A) 以及GlRTH 與AtRTH 蛋白三級結(jié)構(gòu)預(yù)測 (B)Fig. 6 Prediction of secondary structure of GlRTH protein (A) and tertiary structure of GlRTH protein and AtRTH protein (B)

3.3.4 蛋白質(zhì)二級、三級結(jié)構(gòu)預(yù)測 對GlRTH 蛋白二級結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測。結(jié)果如圖6-A 所示，GlRTH 二級結(jié)構(gòu)中有70 個氨基酸參與形成了α-螺旋，占30.57%。55 個氨基酸參與了延伸鏈的形成，占24.02%。95 個氨基酸參與了無規(guī)卷曲的形成，占41.48%。GlRTH主要結(jié)構(gòu)均為α-螺旋和無規(guī)卷曲，α-螺旋是最為穩(wěn)定的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)，其中α-螺旋的比例僅為30.57%，因此推測此蛋白穩(wěn)定性一般。對GlRTH蛋白與AtRTH

3.3.5 GlRTH 蛋白系統(tǒng)進(jìn)化分析與氨基酸比對對不同物種的RTH 蛋白進(jìn)行了氨基酸序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化樹分析，如圖7-A 所示，GlRTH 蛋白與在這些序列中珊瑚菜的 RTH 蛋白與黃胡蘿卜Daucuscarotasubsp.sativus的RTH 蛋白親緣關(guān)系最近，而與豇豆VignaunguiculateL.、鐵皮石斛DendrobiumcatenatumL.、擬南芥Arabidopsis thaliana(L.) Heynh.的RTH 蛋白親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，因此符合進(jìn)化關(guān)系。

通過GlRTH 蛋白與其他物種RTH 蛋白氨基酸比對結(jié)果圖7-B 發(fā)現(xiàn)，圖中所有物種的RTH 蛋白存在部分保守性基序，從而說明圖中各個物種的RTH 蛋白存在一定的同源性。對圖中所有物種RTH 蛋白進(jìn)行三級結(jié)構(gòu)及保守結(jié)構(gòu)域預(yù)測，結(jié)果顯示各蛋白結(jié)構(gòu)均與GlRTH 蛋白結(jié)構(gòu)相似，各蛋白氨基酸序列均包含1 個DUF778 超家族的蛋白保守結(jié)構(gòu)域。

3.4 GlRTH 基因的表達(dá)量分析

3.4.1 不同部位的表達(dá)量分析 以珊瑚菜花為對照，分析根、葉、花不同部位的GlRTH基因表達(dá)量差異。圖8 可以看出，在珊瑚菜的不同部位GlRTH基因的表達(dá)量存在明顯差異，該基因在花中的表達(dá)要明顯高于葉和根，而在根和葉中的表達(dá)沒有顯著差異。以上結(jié)果表明，GlRTH在不同的部位功能有所差異。

圖8 珊瑚菜GlRTH 基因組織表達(dá)分析Fig. 8 Differential expression analysis of GlRTH gene in leaves, roots and flowers of G. littoralis

3.4.2 鹽脅迫和ACC 處理后表達(dá)量分析 不同時間200 mmol/L NaCl以及100 mmol/L ACC處理葉片后得到的GlRTH基因表達(dá)結(jié)果如圖9 所示：經(jīng)過200 mmol/L NaCl 處理后，珊瑚菜GlRTH基因表達(dá)量有明顯的變化，整體均為上調(diào)趨勢，36 h 最為顯著。由圖9-B 可以看出ACC 處理3 h 時GlRTH基因表達(dá)量上調(diào)顯著，而在6 h 和12 h 時GlRTH基因表達(dá)量下調(diào)，整體呈先上升再下降的趨勢。

圖9 NaCl (A) 以及ACC (B) 處理不同時間GlRTH基因表達(dá)Fig. 9 GlRTH gene expression at different NaCl (A) and ACC (B) treatment time

4 討論

珊瑚菜作為我國重要的傳統(tǒng)中藥材，具有養(yǎng)陰清肺、鎮(zhèn)咳祛痰等功效，同時作為主要生長于沙質(zhì)環(huán)境的鹽生植物，珊瑚菜在鹽堿地改良上也起到了不容忽視的作用。本研究篩選得到了藥用鹽生植物珊瑚菜中響應(yīng)鹽脅迫的乙烯信號分子GlRTH基因，首次克隆得到該基因的ORF 全長，并通過生物信息學(xué)以及表達(dá)量分析對該基因進(jìn)行了初步研究，為后續(xù)的研究奠定了基礎(chǔ)。

有研究表明，跨膜蛋白RTE1 負(fù)向調(diào)節(jié)乙烯信號受體蛋白ETR1 從而參與乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[18]，如在擬南芥中過表達(dá)月季的RhRTE1基因起到了降低乙烯敏感性的作用[19]。在擬南芥中，RTH 作為RTE1基因家族的唯一同源基因同樣是通過RTE1 在調(diào)節(jié)乙烯反應(yīng)和信號傳導(dǎo)方面發(fā)揮作用，RTH缺失突變體對外源性ACC 的敏感性較低，而RTH過表達(dá)導(dǎo)致乙烯超敏反應(yīng)[12]。水稻OsRTH 調(diào)節(jié)水稻的乙烯反應(yīng)，OsRTH1過表達(dá)回補(bǔ)了rte1-2 功能缺失突變，并以ETR1 依賴的方式導(dǎo)致植株乙烯不敏感[20]。

植物激素在抵御非生物脅迫中發(fā)揮了關(guān)鍵作用，乙烯作為一種氣態(tài)植物激素同樣參與到了植物應(yīng)對非生物脅迫中[18,21]，當(dāng)植物體接收到脅迫信號時，體內(nèi)乙烯含量發(fā)生改變，乙烯信號通過相應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑進(jìn)行傳遞后，可以對下游相關(guān)基因進(jìn)行調(diào)控，進(jìn)而使植物細(xì)胞在生理水平發(fā)生變化，以應(yīng)對脅迫[22]。乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的各個組分均參與植物的鹽脅迫反應(yīng)。如擬南芥中乙烯信號傳導(dǎo)的中心膜蛋白EIN2 的突變導(dǎo)致極端的鹽敏感性，而EIN2 的過表達(dá)抑制了ein2-5的鹽敏感性，這表明EIN2 參與了擬南芥耐鹽反應(yīng)[23]。EIN3 是乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的正調(diào)控因子，擬南芥中缺失突變體ein3-1對鹽的敏感性明顯增加而過表達(dá)株系則表現(xiàn)出低鹽敏感性[15]。擬南芥中乙烯信號通路下游組分AtNAC2 的表達(dá)量受到鹽和乙烯兩者同時誘導(dǎo)，而鹽對該基因的誘導(dǎo)依賴于乙烯信號途徑[24]。過表達(dá)乙烯受體NtHK1 使煙草對鹽脅迫更敏感[25]。ERFs作為EIN3 的下游調(diào)控因子，對植物響應(yīng)鹽脅迫也能起到一定的作用[26]。

對珊瑚菜進(jìn)行NaCl 和ACC 處理后表達(dá)量分析結(jié)果顯示，2 種處理后GlRTH基因表達(dá)量均變化明顯，在3 h 時均呈現(xiàn)上調(diào)趨勢，說明GlRTH 蛋白是乙烯的響應(yīng)因子，并且與珊瑚菜的耐鹽性相關(guān)。GlRTH基因的表達(dá)量在ACC 處理后先于NaCl 處理達(dá)到峰值。推測GlRTH可能通過響應(yīng)乙烯信號對下游基因進(jìn)行調(diào)控，從而影響珊瑚菜的耐鹽性。本實驗室前期在擬南芥中對AtRTH基因的表達(dá)、亞細(xì)胞定位、蛋白互作、作用機(jī)制開展了一系列研究[12]。根據(jù)前期研究，推測珊瑚菜中響應(yīng)鹽脅迫的乙烯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的大體途徑可能如下：RTH 接受乙烯信號繼而影響RTE1，RTE1 負(fù)向調(diào)節(jié)受體蛋白ETR1，然后將其傳遞給受體CTR1 和EIN3，最終影響下游ERFs 家族，誘導(dǎo)一些鹽脅迫相關(guān)的基因表達(dá)，從而引起珊瑚菜的耐鹽反應(yīng)。

本研究首次在藥用植物珊瑚菜中對該基因開展分析，有助于揭示乙烯信號通路和藥用植物抗鹽反應(yīng)的關(guān)系，后續(xù)將繼續(xù)對此基因的具體功能及其在植物抗鹽反應(yīng)中的分子及生化機(jī)制開展研究。本研究為提高鹽生植物珊瑚菜及其他藥用植物耐鹽性提供了一定研究依據(jù)。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突