RGD和泊洛沙姆F127共修飾載多西紫杉醇脂質(zhì)體的制備及體外抗卵巢癌的初步研究

馬寧珠，王振霖，張建國，齊娜，2*（. 桂林醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，廣西 桂林 54004；2. 南方醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，廣州 5035）

卵巢癌是危及女性健康和生命的惡性腫瘤之一，其病死率居婦科腫瘤之首[1]。2020年數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示，全球卵巢癌新增患者約31萬人，死亡人數(shù)約20萬，具有明顯的上升趨勢[2]。卵巢癌發(fā)病隱匿，臨床確診多為晚期，對于早期癌癥手術(shù)治療有效，但中晚期手術(shù)治療不能完全切除，預(yù)后不良，且易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移[3]，在臨床治療中化療藥物發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。

大多數(shù)化療藥物存在水溶性差、生物相容性低、體內(nèi)分布廣等問題[4]。此外，化療藥物生物選擇性差，進(jìn)入體內(nèi)后殺傷腫瘤細(xì)胞的同時會對正常細(xì)胞、組織機(jī)體造成巨大的毒副作用，降低患者的生活質(zhì)量，制約了其臨床應(yīng)用[5]。為解決這一系列問題，需要尋找合適的藥物遞送系統(tǒng)降低不良反應(yīng)。脂質(zhì)體是由膽固醇和磷脂及其衍生物在體外自我組裝形成的囊泡，其結(jié)構(gòu)類似于細(xì)胞膜的磷脂雙分子層，具有良好的生物相容性和細(xì)胞親和力[6]，同時，納米脂質(zhì)體通過注射能夠滲透、滯留于腫瘤部位，將藥物帶入腫瘤細(xì)胞內(nèi)，是一種優(yōu)良穩(wěn)定的藥物遞送系統(tǒng)。

腫瘤細(xì)胞增殖快，與正常組織有較大差異，其組織內(nèi)血管間隙大、淋巴管不完整，脂質(zhì)體因其獨(dú)特的尺寸和結(jié)構(gòu)，以及具有高滲透和滯留效應(yīng)（EPR效應(yīng)），能通過被動靶向作用積聚于腫瘤組織，但是其腫瘤富集是有限的[7]。為實現(xiàn)藥物精準(zhǔn)給藥，單靠EPR效應(yīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，主動靶向是解決藥物腫瘤富集率低和降低正常細(xì)胞的毒副作用的有效方案[8]。腫瘤微環(huán)境復(fù)雜，與正常細(xì)胞相較，整合素家族在腫瘤細(xì)胞中過度表達(dá)[9]。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列（RGD）可以與細(xì)胞膜表面的跨膜黏附蛋白整合素特異性結(jié)合[10]。經(jīng)聚乙二醇化（PEG）和RGD修飾后，脂質(zhì)體可以延長體內(nèi)循環(huán)時間，具有相關(guān)腫瘤新生血管和腫瘤細(xì)胞的主動靶向能力[11]。泊洛沙姆是由聚環(huán)氧乙烷（PEO）和聚環(huán)氧丙烷（PPO）組成的兩親性三嵌段共聚物，具有無毒性和良好的生物相容性等優(yōu)點[12-13]，是一種可靜脈注射的高分子非離子表面活性劑，其兩端的親水嵌段可以抑制血小板聚集，延長體內(nèi)循環(huán)時間[14]。中間的疏水嵌段可以嵌入磷脂雙分子層，不同嵌段的泊洛沙姆可以調(diào)控脂質(zhì)體形態(tài)結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)脂質(zhì)體的穩(wěn)定性和細(xì)胞內(nèi)化水平[15]。本研究選取多西紫杉醇（DTX）為模型藥物，DTX可影響腫瘤細(xì)胞微管蛋白聚合和解聚，使細(xì)胞G2/M期受到阻滯，達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞生長作用[16]。DTX包載于脂質(zhì)體疏水域，RGD修飾在表面，泊洛沙姆F127鑲嵌其中，以期增加藥物溶解性，延長循環(huán)時間，提高內(nèi)化水平，實現(xiàn)藥物靶向遞送，降低全身毒副作用，提高生存期和抗腫瘤效果。

1 材料

1.1 試藥

蛋黃卵磷脂（Epc，美國SBTI公司）；膽固醇（Chol，上海行知化工廠）；DTX（北京諾瑞醫(yī)藥技術(shù)有限公司）；泊洛沙姆F127（德國BASF公司）；RGD-DSPE-PEG2000（上海芃碩生物科技有限公司）；DMEM高糖培養(yǎng)基（美國Gibco公司）；胎牛血清（FBS）、PBS緩沖液、青鏈霉素混合液、0.25%胰蛋白酶細(xì)胞消化液（北京索萊寶科技有限公司）；香豆素-6（廣州日化化工有限公司）；Hoechst 33342染色劑、抗熒光萃滅封片液（碧云天生物技術(shù)有限公司）；4%多聚甲醛（上海如吉生物科技發(fā)展有限公司）；SKOV3卵巢癌細(xì)胞（桂林醫(yī)學(xué)院科學(xué)實驗中心惠贈）。

1.2 儀器

R-1001W旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；DZF-300真空干燥箱（上海喆鈦機(jī)械制造有限公司）；20-AT高效液相色譜儀（日本島津公司）；2D-85恒溫振蕩器（常州國華儀器）；UV-1800 PC紫外可見分光光度計（上海美普達(dá)儀器有限公司）；Nano ZSE粒徑電位分析儀（英國馬爾文儀器公司）；AXio Imager z2倒置熒光顯微鏡（日本ZEISS公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 DTX分析方法學(xué)

配制50 μg·mL－1的DTX溶液，以甲醇為溶劑作為空白，在200～800 nm波長內(nèi)進(jìn)行紫外掃描[17]，結(jié)果DTX在230 nm處有最大吸收峰，后續(xù)實驗選擇230 nm作為其檢測波長。分別配制20.0、40.8、61.2、81.6、102.0、204.0 μg·mL－1的DTX對照品溶液進(jìn)樣，記錄峰面積，以DTX質(zhì)量濃度C為橫坐標(biāo)，峰面積A為縱坐標(biāo)，得到線性回歸方程A＝1.277×104C－1.970×104，r＝0.997，結(jié)果顯示DTX在20～ 204 μg·mL－1與峰面積線性關(guān)系良好。配制30.6 μg·mL－1DTX對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積并計算日內(nèi)精密度[18-19]，結(jié)果顯示，RSD值為0.5%，說明實驗測量準(zhǔn)確，儀器精密度高，可用于分析結(jié)果。取載DTX脂質(zhì)體樣品、DTX對照品以及空白脂質(zhì)體樣品進(jìn)樣，記錄峰面積，考察專屬性[20]，結(jié)果如圖1所示，DTX的HPLC色譜圖基線平穩(wěn)，峰形穩(wěn)定。圖1B顯示DTX的保留時間為6.520 min，結(jié)合圖1A中空白脂質(zhì)體甲醇溶液僅有溶劑峰，并不影響DTX出峰及峰形，專屬性良好。

圖1 HPLC專屬性實驗Fig 1 HPLC specific experimental

2.2 脂質(zhì)體的制備

采用薄膜水化法制備脂質(zhì)體，按摩爾比95∶20∶5∶0.1∶2精確稱量Epc、Chol、DTX、RGD-DSPE-PEG2000、泊洛沙姆F127溶于5 mL氯仿中，轉(zhuǎn)移至250 mL圓底燒瓶，37℃水浴中減壓蒸發(fā)15 min使有機(jī)溶劑揮發(fā)成膜（90 r·min－1），37℃真空干燥2 h后，加入5 mL pH為7.4的PBS溶液水化30 min（90 r·min－1），水化完成后轉(zhuǎn)移至西林瓶，150 W下超聲3 min得到RGD和泊洛沙姆F127共修飾的載多西紫杉醇脂質(zhì)體（DTX-F127-RGD-LP），封口后于4℃冰箱冷藏[21-22]。DTX-LP、DTX-F127-LP和DTX-RGD-LP根據(jù)上述方法進(jìn)行制備。用香豆素-6（C6）代替DTX，根據(jù)上述方法制備載香豆素-6熒光探針的脂質(zhì)體C6-LP、C6-F127-LP、C6-RGD-LP和C6-F127-RGD-LP，全程注意避光。

2.3 脂質(zhì)體的初步表征

2.3.1 形態(tài)觀察 取適量DTX-F127-RGD-LP脂質(zhì)體用1%磷鎢酸負(fù)染滴入銅網(wǎng)，放入干燥皿中過夜，干燥后使用透射電子顯微鏡觀察形態(tài)[23]。DTX-F127-RGD-LP透射電子顯微鏡圖片如圖2所示，脂質(zhì)體呈球形囊泡狀，大小基本均一。

圖2 DTX-F127-RGD-LP脂質(zhì)體透射電子顯微鏡圖Fig 2 Transmission electron micrograph of DTX-F127-RGD-LP liposomes

2.3.2 電位與粒徑的測定 各組脂質(zhì)體稀釋10倍后，置于比色皿中，使用馬爾文粒徑電位測量儀測量脂質(zhì)體粒徑與電位。結(jié)果如表1和圖3所示，各組脂質(zhì)體粒徑均在200 nm以下，多分散指數(shù)（PDI）在0.23左右，脂質(zhì)體分散良好，符合制劑要求。DTX-F127-RGD-LP粒徑和電位，近似正態(tài)分布。粒徑為（107.2±0.67）nm，電位為－（19.7±0.4）mV，脂質(zhì)體表面帶負(fù)電荷更具有穩(wěn)定性。

表1 各組脂質(zhì)體的粒徑和電位Tab 1 Particle size and potential of liposomes in each group

圖3 DTX-F127-RGD-LP的粒徑分布（A）和Zeta電位（B）Fig 3 Particle size distribution（A）and Zeta potential（B）of DTXF127-RGD-LP

2.3.3 包封率和載藥量的測定 取DTX-LP、DTXRGD-LP、DTX-F127-RGD-LP各1 mL于透析袋中，置于pH 7.4（0.01 mol·L－1）的PBS緩沖溶液中，使用恒溫振蕩器透析8 h（37℃，130 r·min－1），透析后轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶定容，超聲破乳，過0.22 μm微孔濾膜，另取1 mL未透析過的脂質(zhì)體按以上方法處理，進(jìn)樣測定其含藥量。按下述公式計算各組脂質(zhì)體中藥物的包封率和載藥量[22]：包封率（EE，%）＝（包封于脂質(zhì)體內(nèi)的藥量/藥物投料量）×100%，載藥量（DL，%）＝（包封于脂質(zhì)體內(nèi)的藥量/載藥脂質(zhì)體的總重量）×100%。

結(jié)果如表2所示，DTX-LP包封率為82.7%，載藥量為2.5%，DTX-RGD-LP包封率為80.5%，載藥量為2.4%，DTX-F127-RGD-LP包封率為86.4%，載藥量為2.7%。泊洛沙姆F127的鑲嵌增加了DTX在脂質(zhì)體中的包封率。

表2 多西紫杉醇的包封率和載藥量Tab 2 Entrapment efficiency and loading efficiency of docetaxel

2.4 脂質(zhì)體穩(wěn)定性實驗

將制備好的各組脂質(zhì)體于4℃避光保存，檢測保存33 d脂質(zhì)體的平均粒徑，并根據(jù)粒徑變化來評價其長期穩(wěn)定性[24]。采用FBS模擬血漿環(huán)境。將各組含DTX質(zhì)量濃度為200 μg·mL－1的脂質(zhì)體與10%FBS等體積混合，置于振蕩器內(nèi)，37℃、150 r·min－1振搖24 h，定時取樣測其粒徑變化來評價其血清穩(wěn)定性[25]。

脂質(zhì)體放置33 d的體外長期穩(wěn)定性結(jié)果如圖4A所示，DTX-LP和DTX-RGD-LP隨時間變化粒徑略微增大，而加入泊洛沙姆F127的脂質(zhì)體不同時間粒徑幾乎不變。結(jié)果表明，制備的脂質(zhì)體在33 d內(nèi)相對穩(wěn)定。脂質(zhì)體在體內(nèi)容易與血清白蛋白等大分子蛋白結(jié)合形成蛋白冠，影響其在體內(nèi)的預(yù)期功能，無法發(fā)揮治療作用。各組脂質(zhì)體與含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基共同孵育24 h，結(jié)果如圖4B所示，各脂質(zhì)體粒徑在前4 h略有波動，但在合理范圍內(nèi)。在之后的20 h內(nèi)，粒徑無明顯變化，也未見沉淀物，表明幾乎沒有血清白蛋白吸附在脂質(zhì)體上，PEG有效避免了蛋白冠的形成，脂質(zhì)體在血液中具有良好的穩(wěn)定性。

圖4 各組脂質(zhì)體的穩(wěn)定性Fig 4 Stability of liposomes in each group

2.5 細(xì)胞攝取實驗

攝取定性：實驗分為5組，分別為Control組、C6-LP組、C6-F127-LP組、C6-RGD-LP組和C6-F127-RGD-LP組。細(xì)胞爬片放置于6孔板中，取2 mL細(xì)胞懸液按2×105個/孔將SKOV3細(xì)胞接種至6孔板中，5%CO2、37℃條件下孵育24 h。細(xì)胞單層覆蓋至70%時，分別加入2 mL培養(yǎng)基和香豆素-6質(zhì)量濃度為2 μg·mL－1的脂質(zhì)體（即C6-LP、C6-F127-LP、C6-RGD-LP和C6-F127-RGD-LP），37℃條件下孵育4 h后吸出培養(yǎng)基，PBS緩沖溶液洗滌3次，4%多聚甲醛固定20 min，PBS洗滌多余固定液。加入2 mL Hoechst 33342（15 μg·mL－1）核染色劑染色10 min，PBS洗滌3次，晾干，抗熒光淬滅封片液封片，熒光顯微鏡觀察細(xì)胞熒光情況[26-27]。

攝取定量：實驗分為4組，分別為C6-LP組、C6-F127-LP組、C6-RGD-LP組和C6-F127-RGD-LP組。將SKOV3細(xì)胞按5000個/孔密度接種至96孔黑板，分別加入100 μL C6-LP、C6-F127-LP、C6-RGD-LP和C6-F127-RGD-LP（2 μg·mL－1），按上述孵育條件孵育4 h，洗滌后加入150 μL 二甲基亞砜（DMSO）裂解細(xì)胞，靜置15 min，使用全波長熒光酶標(biāo)儀（Ex＝466 nm，Em＝504 nm）檢測熒光強(qiáng)度[28]。

SKOV3對細(xì)胞的攝取如圖5A所示，Control組幾乎沒有熒光，C6-LP具有微弱熒光，C6-RGD-LP顯示中等強(qiáng)度的熒光，C6-F127-RGD-LP熒光強(qiáng)度最強(qiáng)。由圖5B熒光定量可知，與C6-LP相比，C6-RGD-LP熒光強(qiáng)度明顯增加，說明RGD修飾脂質(zhì)體后選擇性提高了SKOV3細(xì)胞對熒光脂質(zhì)體的攝取。與C6-RGD-LP相比，C6-F127-RGD-LP的熒光強(qiáng)度增加，表明泊洛沙姆F127鑲嵌于RGD脂質(zhì)體后，SKOV3細(xì)胞對其攝取量增加，推測泊洛沙姆F127鑲嵌磷脂雙分子層后選擇性提高了腫瘤細(xì)胞對目標(biāo)性脂質(zhì)體的攝取。RGD和泊洛沙姆F127修飾脂質(zhì)體后，促進(jìn)SKOV3細(xì)胞攝取脂質(zhì)體的機(jī)制如圖5C所示，推測其原因為RGD與腫瘤細(xì)胞表面過表達(dá)的αvβ3整合素蛋白結(jié)合，通過受體與配體結(jié)合促進(jìn)細(xì)胞攝取脂質(zhì)體，泊洛沙姆F127促進(jìn)細(xì)胞膜流動，增加細(xì)胞內(nèi)化作用。

圖5 細(xì)胞攝取結(jié)果Fig 5 Cell uptake

2.6 攝取抑制實驗

將SKOV3細(xì)胞按照5000/孔接種至96孔黑板，孵育24 h后棄去培養(yǎng)基，對照組用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)2 h，實驗組加入攝取抑制劑阿米洛利（15 μg·mL－1）、氯丙嗪（10 μg·mL－1）、菲律平（5 μg·mL－1）、秋水仙堿（5 μg·mL－1）以及RGD（200 μg·mL－1），37℃條件下孵育2 h，PBS洗滌3次，加入含C6質(zhì)量濃度為1.5 μg·mL－1的C6-F127-RGD-LP孵育4 h，PBS洗滌3次，加入150 μL DMSO裂解細(xì)胞，靜置15 min。使用全波長熒光酶標(biāo)儀（Ex＝466 nm，Em＝504 nm）檢測熒光強(qiáng)度[29]。

結(jié)果如圖6所示，SKOV3細(xì)胞與攝取抑制劑孵育后封閉攝取受體，能夠降低對C6-F127-RGD-LP的攝取。與對照組相比，巨胞飲抑制劑秋水仙堿和小窩蛋白抑制劑菲律平攝取率下降較明顯，與對照組存在統(tǒng)計學(xué)差異。Na＋/H＋交換體抑制劑阿米洛利和網(wǎng)格蛋白抑制劑氯丙嗪攝取率無明顯降低。SKOV3細(xì)胞主要通過小窩蛋白途徑和巨胞飲途徑攝取脂質(zhì)體。此外，靶向阻斷劑RGD也抑制C6-F127-RGD-LP的攝取，其攝取率降低，與對照組差異存在統(tǒng)計學(xué)意義。

圖6 C6-F127-RGD-LP對SKOV3細(xì)胞攝取機(jī)制結(jié)果Fig 6 Uptake mechanism of C6-F127-RGD-LP to SKOV3 cells

2.7 細(xì)胞毒性實驗

SKOV3細(xì)胞以1×104個/孔密度接種于96孔板，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。吸去培養(yǎng)基，加入100 μL質(zhì)量濃度為0.2、0.4、0.08、0.016 μg·mL－1的DTX原料藥或各組脂質(zhì)體，孵育48 h后每孔加入10 μL 噻唑藍(lán)（MTT）孵育4 h，孵育結(jié)束后，加入150 μL DMSO，孵育15 min，560 nm處測量吸光度，計算細(xì)胞存活率，細(xì)胞存活率（%）＝（實驗組吸光度/空白組吸光度）×100%[30-31]。

如表3所示，DTX、DTX-LP、DTX-F127-LP、DTX-RGD-LP和DTX-F127-RGD-LP的IC50值分別為0.210、0.152、0.109、0.079、0.039 μg·mL－1，IC50值越小代表對細(xì)胞的毒性越強(qiáng)。細(xì)胞存活率如圖7所示，各組脂質(zhì)體對SKOV3細(xì)胞的毒性呈現(xiàn)濃度依賴性，隨著濃度的增加，與DTX原料藥相比毒性效果明顯。藥物質(zhì)量濃度在0.04 μg·mL－1時，與DTX組相比，包載DTX的脂質(zhì)體對細(xì)胞的毒性顯著增強(qiáng)。在0.2 μg·mL－1時，泊洛沙姆F127或RGD的加入進(jìn)一步增強(qiáng)了細(xì)胞的毒性，且DTX-RGD-LP比DTX-F127-LP有更強(qiáng)的細(xì)胞殺傷效果，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。泊洛沙姆F127和RGD共同修飾后，可協(xié)同增強(qiáng)細(xì)胞毒性，有最小的IC50值，與細(xì)胞攝取實驗結(jié)果一致，可能與卵巢癌細(xì)胞對脂質(zhì)體的攝取量增加有關(guān)。

表3 各組脂質(zhì)體對SKOV3細(xì)胞的IC50值Tab 3 IC50 value of liposomes and DTX to SKOV3 cells

圖7 SKOV3細(xì)胞存活率（＊P＜0.05，＊＊P＜0.01）Fig 7 Viability rate of SKOV3 cells（＊P＜0.05，＊＊P＜0.01）

2.8 結(jié)晶紫染色觀察凋亡

SKOV3細(xì)胞以1×105個·mL－1密度接種于6孔板中，孵育24 h后加入2 mL含0.2 μg·mL－1DTX、DTX-LP、DTX-F127-LP、DTX-RGD-LP、DTX-F127-RGD-LP脂質(zhì)體的DMEM培養(yǎng)基孵育48 h，Control組只加入2 mL DMEM培養(yǎng)基，PBS清洗2次，細(xì)胞在4%多聚甲醛中固定20 min，用2 mL含0.5%結(jié)晶紫染色劑染色20 min，PBS清洗5次，顯微鏡下觀察實驗情況[32]。

結(jié)果如圖8所示，Control組細(xì)胞密度在70%左右，DTX原料藥使大部分細(xì)胞死亡，但存在一部分細(xì)胞團(tuán)；泊洛沙姆F127或RGD單獨(dú)修飾的脂質(zhì)體進(jìn)一步減小了細(xì)胞團(tuán)，細(xì)胞毒性增強(qiáng)；而DTX-F127-RGD-LP結(jié)果顯示視野中僅存在零星的細(xì)胞數(shù)，無細(xì)胞團(tuán)，細(xì)胞毒性效果顯著，其結(jié)果與細(xì)胞毒性實驗結(jié)果一致，說明DTX-F127-RGD-LP體外抗卵巢癌效果顯著。

圖8 SKOV3細(xì)胞結(jié)晶紫染色（比例尺：×200）Fig 8 Crystal violet dying of SKOV3 cells（scale bar：×200）

3 討論

DTX是臨床治療卵巢癌常用的化療藥物，屬于脂溶性藥物，薄膜分散法本身適合難溶性藥物，并且操作簡單，因此選用此法制備了DTX-F127-RGDLP[33]。其形態(tài)為球形囊泡狀，大小基本均一，分布較均勻，符合脂質(zhì)體的要求。泊洛沙姆F127嵌入后脂質(zhì)體的粒徑稍有下降，這與先前的報道一致，泊洛沙姆F127鑲嵌于磷脂雙分子層，可以減小脂質(zhì)體的粒徑[15]。RGD修飾在脂質(zhì)體上后，脂質(zhì)體的粒徑稍有增加，可能是因為RGD的頭部空間較大，形成的脂質(zhì)體較疏松，導(dǎo)致粒徑增大。DTX-F127-RGDLP的包封率為86.4%，載藥量為2.7%，包封率高于80%，對DTX的包載性能良好。脂質(zhì)體在4℃和血清條件下的穩(wěn)定性良好，且DTX-F127-LP和DTXF127-RGD-LP組粒徑幾乎不變，這可能是泊洛沙姆F127的嵌入增加了脂質(zhì)體的穩(wěn)定性[34-36]。

脂質(zhì)體因其獨(dú)特的尺寸與結(jié)構(gòu)以及EPR效應(yīng)，在腫瘤細(xì)胞中積聚，對腫瘤細(xì)胞的毒性作用增強(qiáng)[37]。DTX-RGD-LP與DTX-LP相比對腫瘤細(xì)胞有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性，這可能是RGD修飾脂質(zhì)體后，RGD與腫瘤細(xì)胞表面過表達(dá)的整合素家族結(jié)合，通過受體與配體介導(dǎo)的作用主動靶向腫瘤細(xì)胞，增加腫瘤細(xì)胞對脂質(zhì)體的攝取，藥物在細(xì)胞內(nèi)濃度增加，對腫瘤細(xì)胞的毒性增強(qiáng)。泊洛沙姆F127的添加使得DTX-RGD-LP對腫瘤細(xì)胞毒性增加，這可能得益于泊洛沙姆F127可以加速細(xì)胞膜的流動，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞對修飾脂質(zhì)體的攝取，提高細(xì)胞內(nèi)化水平，使得毒性增強(qiáng)，這表明RGD和泊洛沙姆F127修飾至脂質(zhì)體表面對增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞攝取脂質(zhì)體及脂質(zhì)體對腫瘤細(xì)胞的毒性具有協(xié)同作用[38]。

綜上所述，制備的DTX-F127-RGD-LP具有較好的主動靶向性及體外抗卵巢癌的能力，為卵巢癌的主動靶向治療提供了實驗依據(jù)。