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    甘露寡糖對(duì)波紋龍蝦葉狀幼體生長(zhǎng)的影響

    2023-05-30 13:05:44何藝賓黃標(biāo)武林金華
    江西水產(chǎn)科技 2023年2期
    關(guān)鍵詞:生長(zhǎng)發(fā)育

    何藝賓 黃標(biāo)武 林金華

    摘要:為探索甘露寡糖(mannose-oligosaccharides,MOS) 對(duì)波紋龍蝦葉狀幼體生長(zhǎng)的促進(jìn)作用,本研究設(shè)置3個(gè)試驗(yàn)組,分別投喂用不同濃度甘露寡糖強(qiáng)化的鹵蟲,統(tǒng)計(jì)各試驗(yàn)組培養(yǎng)3d、5d、7d后波紋龍蝦葉狀幼體的成活率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,1#餌料組(0.4 %甘露寡糖強(qiáng)化)培養(yǎng)3d、5d、7d的成活率分別為(72.5±2.5)%、(57.5±2.5)%、(42.5±2.5)%,明顯高于其它試驗(yàn)組。餌料中添加甘露寡糖可提高波紋龍蝦葉狀幼體的成活率,甘露寡糖最佳添加濃度為0.4 %。

    關(guān)鍵詞:甘露寡糖;波紋龍蝦;葉狀幼體;生長(zhǎng)發(fā)育

    中圖分類號(hào):S962 ????文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

    基金項(xiàng)目:廈門海洋職業(yè)技術(shù)學(xué)院海洋生物學(xué)院2019年高層次人才科研專項(xiàng)。

    作者簡(jiǎn)介:何藝賓(1981-),男,講師。研究方向: 海洋生物技術(shù), E-mail: 59948397@qq.com.

    波紋龍蝦 (Panulirus homarus)屬于節(jié)肢動(dòng)物門,甲殼綱,十足目, 龍蝦科, 龍蝦屬,分布于印度洋-西太平洋海域,常棲息在水質(zhì)清新的巖礁有沙地帶。波紋龍蝦不僅肉味鮮美具有極高的食用價(jià)值 , 而且在工業(yè)、醫(yī)藥及工藝欣賞等方面也具有一定的價(jià)值,深受人們的喜愛(ài)。近年來(lái),波紋龍蝦的人工養(yǎng)殖越來(lái)越引起人們的關(guān)注,然而中國(guó)海區(qū)龍蝦資源缺乏,以捕撈天然龍蝦苗種進(jìn)行人工養(yǎng)殖無(wú)法滿足長(zhǎng)期需求[1]。

    波紋龍蝦的幼體分為葉狀幼體和游龍蝦幼體。由于葉狀幼體期較長(zhǎng),餌料組成較復(fù)雜,葉狀幼體人工培育迄今還是世界難題[2]。目前國(guó)內(nèi)關(guān)于波紋龍蝦人工繁殖的報(bào)道較少,陳昌生等(2003年)對(duì)波紋龍蝦早期葉狀幼體培育進(jìn)行了初步研究,經(jīng)過(guò) 69 d培育獲得了蛻皮8次的幼體。劉慧玲等(2008年)研究發(fā)現(xiàn)將藻類與鹵蟲作為餌料喂食波紋龍蝦早期葉狀幼體,培育效果較好,經(jīng)過(guò) 54 d培育獲得了脫皮9次的葉狀幼體[3]。波紋龍蝦人工育苗技術(shù)迄今仍未突破,嚴(yán)重阻礙了波紋龍蝦人工養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。

    甘露寡糖是從酵母培養(yǎng)細(xì)胞壁中提取的一類新型抗原活性物質(zhì),具有提高成活率、促進(jìn)生長(zhǎng)和提高免疫力等作用,已作為飼料添加劑廣泛用于飼料工業(yè)[4-5]。張炎灼[6]等(2014年)報(bào)道在大黃魚飼料中添加0.2 %甘露寡糖能有效促進(jìn)大黃魚幼魚生長(zhǎng)并提高幼魚的抗病能力。Sang[7]等(2010年)報(bào)道餌料中添加甘露寡糖不僅能夠促進(jìn)錦繡龍蝦幼體的生長(zhǎng),而且還能提高波紋龍蝦幼體的成活率。本研究中先用甘露寡糖對(duì)鹵蟲幼體進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化,進(jìn)而喂食波紋龍蝦葉狀幼體,研究甘露寡糖對(duì)波紋龍蝦葉狀幼體生長(zhǎng)發(fā)育的影響,為波紋龍蝦的人工繁育提供一種新的思路。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    波紋龍蝦:由廈門海滄某水產(chǎn)種苗有限公司提供。

    主要實(shí)驗(yàn)試劑:甘露寡糖購(gòu)自Sigma公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 抱卵波紋龍蝦培育

    從養(yǎng)殖池中將抱卵的波紋龍蝦挑選出來(lái),放入網(wǎng)箱暫養(yǎng)于水泥池(約 30 m2)中,鹽度 30 ‰,水溫保持在28~29℃,早晚各投喂新鮮花蛤 1次,花蛤投喂前先用高猛酸鉀中浸泡10 min,充氣,隔天清理花蛤殼并更換10 %的水,暫養(yǎng)過(guò)程中注意觀察卵的顏色變化。

    1.2.2 葉狀幼體培育

    從暫養(yǎng)池中將卵的顏色為棕紅色的波紋龍蝦挑選出來(lái),放入新的水泥池繼續(xù)培養(yǎng)7~10 d后可孵出葉狀幼體,燈誘收集龍蝦幼體,培養(yǎng)于新的水泥池中,密度:2萬(wàn)~3萬(wàn)尾/m3,鹽度 30 ‰,水溫保持在28~29℃,pH保持在8.0~8.2,第一天投喂鹵蟲幼體,第二天投喂鹵蟲和豐年蟲各半,第三天以后投喂豐年蟲,早晚各投喂2次,定期觀察葉狀幼體的形態(tài)變化并記錄各期所用時(shí)間。

    1.2.3 甘露寡糖對(duì)波紋龍蝦葉狀幼體成活率的影響

    設(shè)置3個(gè)試驗(yàn)組,每組1個(gè)重復(fù),投喂餌料分別為1#餌料:鹵蟲,0.4 %甘露寡糖強(qiáng)化;2#餌料:鹵蟲,0.2 %甘露寡糖強(qiáng)化;3#餌料:鹵蟲。各隨機(jī)選取20尾剛孵化出來(lái)的葉狀幼體,移入5 L的容量瓶中充氣培養(yǎng),鹽度 30 ‰。每天投喂餌料2次早上9∶00和 下午17∶00,分別培養(yǎng)3d、5d、7d后統(tǒng)計(jì)各試驗(yàn)組的存活率。

    1.2.4 數(shù)據(jù)處理

    采用GraphPad Prism 5軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理分析。

    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    2.1 波紋龍蝦受精卵顏色變化觀察

    波紋龍蝦受精卵發(fā)育過(guò)程中會(huì)發(fā)生顏色變化,培養(yǎng)初期為橘黃色,隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,卵的顏色逐漸加深,變?yōu)樽丶t色,如圖1所示。

    2.2 葉狀幼體形狀觀察

    波紋龍蝦葉狀幼體每蛻皮1次即為一個(gè)新的發(fā)育時(shí)期,其肝胰臟、第 1步足外肢羽狀剛毛的對(duì)數(shù)等形態(tài)特征會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化。本研究以第 1足外肢羽狀剛毛的對(duì)數(shù)為分期標(biāo)準(zhǔn), 5對(duì)羽狀剛毛時(shí)期為發(fā)育Ⅰ期,6對(duì)羽狀剛毛時(shí)期為發(fā)育Ⅱ期,以此類推。隨著發(fā)育時(shí)期的進(jìn)行,葉狀幼體肝胰臟逐漸變大、中葉瓣?duì)钸吘墐?nèi)陷程度也逐漸加深。不同發(fā)育時(shí)期的第 1步足外肢羽狀剛毛對(duì)數(shù),如圖2所示。

    2.3 甘露寡糖對(duì)波紋龍蝦葉狀幼體成活率的影響

    分別統(tǒng)計(jì)用3種不同餌料投喂3d、5d、7d后,各試驗(yàn)組中波紋龍蝦葉狀幼體的成活個(gè)數(shù),并計(jì)算各試驗(yàn)組的存活率。從如圖3可知:投喂3天后,1#餌料組的成活率為(72.5±2.5)%,2#餌料組的成活率為(62.5±2.5)%,3#餌料組的成活率為(57.5±2.5)%;投喂5d后,1#餌料組的成活率為(57.5±2.5)%,2#餌料組的成活率為(47.5±2.5)%,3#餌料組的成活率為(37.5±2.5)%;投喂7d后,1#餌料組的成活率為(42.5±2.5)%,2#餌料組的成活率為(32.5±2.5)%,3#餌料組的成活率為(22.5±2.5)%;與其它試驗(yàn)組相比較,1#餌料組的成活率明顯高于2#餌料組和對(duì)照組。

    3討論

    由于波紋龍蝦葉狀幼體期較長(zhǎng),餌料組成較復(fù)雜,波紋龍蝦人工育苗迄今仍未取得突破,未能形成產(chǎn)業(yè)化。波紋龍蝦葉狀幼體每蛻皮1次即為一個(gè)新的發(fā)育時(shí)期,但養(yǎng)殖水體不同、投喂的餌料不同,各發(fā)育時(shí)期的時(shí)間長(zhǎng)短也不相同。適合的餌料、合理的養(yǎng)殖密度是幼體人工培育成功的關(guān)鍵 。陳昌生等用魚油強(qiáng)化過(guò)的豐年蟲幼體投喂龍蝦幼體,經(jīng)過(guò) 69 d培育獲得了蛻皮 8 次的幼體。劉慧玲等扁藻加鹵蟲作為餌料投喂喂龍蝦幼體,經(jīng)過(guò) 54 d培育獲得了脫皮 9 次的幼體。本研究利用水泥池(約30 m2)進(jìn)行幼體培育,用 0.4 % 甘露寡糖、小球藻強(qiáng)化過(guò)的豐年蟲幼體投喂龍蝦幼體,經(jīng)過(guò) 37 d培育獲得了蛻皮 6 次的幼體,幼體的生長(zhǎng)速度介于陳昌生和劉慧玲報(bào)道的生長(zhǎng)速度之間,后續(xù)研究中將繼續(xù)對(duì)葉狀幼體的餌料組成進(jìn)行優(yōu)化。

    近年來(lái),甘露寡糖作為一種功能性寡糖,具有提高養(yǎng)殖動(dòng)物的生產(chǎn)性能、改善腸道微生物區(qū)系以及提高免疫功能等功能,已被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)動(dòng)物飼料中。甘露寡糖對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)的促進(jìn)作用也越來(lái)越引起廣大科研工作者的興趣。于艷梅[8]等報(bào)道在黃顙魚飼料中添加甘露寡糖可顯著提高黃顙魚血液白細(xì)胞吞噬活性,降低餌料系數(shù)進(jìn)而促進(jìn)黃顙魚的生長(zhǎng)。胡凌豪[9]等(2019年)報(bào)道斜帶石斑魚飼料中添加寡聚糖通過(guò)提高腸道絨毛高度、絨毛寬度,改善幼魚腸道形態(tài),促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)吸收、消化,促進(jìn)幼魚的生長(zhǎng)。Lu z y[10]等(2020年)報(bào)道草魚飼料中添加甘露寡糖可顯著提升頭腎和脾臟的免疫功能,提高草魚的抗病能力。本研究發(fā)現(xiàn)甘露寡糖能提高波紋龍蝦葉狀幼體的成活率,甘露寡糖對(duì)龍蝦幼體生長(zhǎng)的促進(jìn)作用機(jī)理有待進(jìn)一步深入研究。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 沈銘輝,范薇.波紋龍蝦工廠化養(yǎng)殖技術(shù)[J].中國(guó)水產(chǎn),2008,05:52,59.

    [2] 陳昌生,紀(jì)德華,吳坤杰,等.波紋龍蝦人工繁殖及早期葉狀幼體培育的初步研究[J].集美大學(xué)學(xué)報(bào),2003,08(03):197-202.

    [3] 劉慧玲,李長(zhǎng)玲,黃翔鵠,等. 波紋龍蝦早期葉狀幼體的培育及其形態(tài)觀察[J].漁業(yè)現(xiàn)代化,2008,35(04):36-40.

    [4] Dimitroglou A, Merrifield D L, Spring P, etal. Effects of mannan oligosaccharide (MOS) supplementation on growth performance, feed utilisation, intestinal histology and gut microbiota of gilthead sea bream (Sparus aurata). Aquaculture,2010,300:182-188.

    [5] 翟浩杰.飼料中添加甘露寡糖對(duì)刺參生長(zhǎng)性能、腸道及免疫功能的影響[D].大連海洋大學(xué),2022.

    [6] 張炎灼,張蕉南,胡兵.飼料中添加甘露寡糖對(duì)大黃魚幼魚生長(zhǎng)性能的影響[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖,2014,35(18):30-33.

    [7] Sang H M, Fotedar R. Effects of mannan oligosaccharide dietary supplementation on performances of the tropical spiny lobsters juvenile (Panulirus ornatus, Fabricius 1798). Fish & Shellfish Immunology,2010,28:483-489.

    [8] 于艷梅,吳志新,陳孝煊,等.魔芋甘露寡糖對(duì)黃顙魚非特異性 免疫功能及生長(zhǎng)的影響[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2010,29(3):351-355.

    [9] 胡凌豪,楊紅玲,趙蕓,等.果寡糖對(duì)斜帶石斑魚免疫功能和腸道形態(tài)的影響[J].水產(chǎn)科學(xué),2019,3(05):499-594.

    [10] Lu Z Y, Jiang W D, Wu P, et al. Mannan oligosaccharides supplementation enhanced head kidney and spleen immune function in on-growing grass carp (Ctenopharyngodon idella)[J]. Fish & Shellfish Immunology, 2020, 106(4): 596-608.

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