探究UF-5000 尿液有形成分分析儀在快速篩查ICU 患者疑似尿路感染中的應(yīng)用價(jià)值

龔虹，黃程勇

(1.福建省邵武市立醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建 邵武 354000；2.福建省立醫(yī)院檢驗(yàn)科，福州 350001)

尿路感染（Urinary tract infection，UIT）被視為醫(yī)院感染的常見(jiàn)獲得性感染之一，通常由患者自身的常居菌上行至膀胱導(dǎo)致，如不能及時(shí)診斷治療將可導(dǎo)致患者上升成為難治性復(fù)發(fā)性UIT，不僅嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，還會(huì)增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[1]。重癥監(jiān)護(hù)室(ICU)患者由于存在侵入性操作(如導(dǎo)尿)多，普遍免疫力低，年齡相對(duì)偏大，UIT 發(fā)生率高于普通病房患者[2]。

目前，診斷UIT 的金標(biāo)準(zhǔn)仍然是尿培養(yǎng)，但其出報(bào)告時(shí)間偏長(zhǎng)，故能夠有及時(shí)、準(zhǔn)確的診斷ICU 患者UIT 的手段顯得尤為重要。隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，新的檢測(cè)技術(shù)和檢測(cè)設(shè)備應(yīng)運(yùn)而生。日本希森美康（Sysmex）公司UF-5000 尿液有形成分分析儀基于熒光流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)原理，具有細(xì)菌計(jì)數(shù)（BACT）、真菌計(jì)數(shù)、細(xì)菌提示等功能，在檢測(cè)尿沉渣顆粒計(jì)數(shù)、細(xì)菌分類(lèi)方面體現(xiàn)出良好性能，但用于評(píng)價(jià)其在篩查ICU 患者疑似UIT 性能情況的報(bào)道很少[3]。

基于此，本研究旨在探討和評(píng)估UF-5000 分析系統(tǒng)對(duì)ICU 疑似UIT 患者快速篩查的應(yīng)用價(jià)值，從而為UF-5000 分析系統(tǒng)的臨床推廣，提高臨床UIT 的診斷效率提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2020 年8 月至2021 年4 月于本院ICU住院臨床懷疑為UIT 的患者438 例為研究對(duì)象，其中男性276 例，女性162 例，中位數(shù)年齡為67歲，按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第4 版）》[4]標(biāo)準(zhǔn)，留取中段尿或?qū)蚍? 份，各10mL，一份做尿液有形成分分析，一份做尿培養(yǎng)，于30 min 內(nèi)同時(shí)送檢，2 h 內(nèi)完成常規(guī)檢查和細(xì)菌培養(yǎng)接種工作。納入標(biāo)準(zhǔn)：ICU 住院患者；留取的尿液為中段尿；尿液在2 h 內(nèi)完成常規(guī)檢查和細(xì)菌培養(yǎng)接種。排除標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)法取出尿液；尿液受到污染。全部患者均知情同意，并經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器和試劑

Sysmex 公司UF-5000 尿液有形成分分析儀、法國(guó)生物梅里埃公司的VITEK2-Compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀、哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱平板、真菌顯色平板、CO2 培養(yǎng)箱、10uL定量接種環(huán)。UF-5000 所使用的試劑都來(lái)源于Sysmex 公司。VITEK2-Compac 使用的細(xì)菌和真菌鑒定卡均由法國(guó)生物梅里埃公司生產(chǎn)。質(zhì)控菌株：大腸埃希菌（ATCC25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC29213）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、銅綠假單胞菌（ATCC27853）均來(lái)源于衛(wèi)生部臨檢中心。

1.2.2 UF-5000 分析

按UF-5000 的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程檢測(cè)尿液標(biāo)本，每天標(biāo)本檢測(cè)前做室內(nèi)質(zhì)控，在控后方可進(jìn)行標(biāo)本分析。收集UF-5000 尿液有形成分分析儀的WBC、BACT、細(xì)菌提示、真菌計(jì)數(shù)。

1.2.3 尿液培養(yǎng)

將每一份尿標(biāo)本用10 μL 定量接種環(huán)取一環(huán)接種于哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱平板、真菌顯色平板。培養(yǎng)18～24 h 看結(jié)果，無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)或細(xì)菌生長(zhǎng)＜104CFU·mL-1的標(biāo)本判斷為培養(yǎng)陰性，培養(yǎng)出1 種或2 種細(xì)菌且菌落計(jì)數(shù)＞104CFU·mL-1的判斷為培養(yǎng)陽(yáng)性。將陽(yáng)性的標(biāo)本通過(guò)VITEK2-Compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀鑒定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

運(yùn)用SPSS26.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。選用百分比（%）表示計(jì)數(shù)資料。以尿培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，采用受試者工作特性（ROC）曲線對(duì)WBC、BACT進(jìn)行分析。對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，正態(tài)分布的組間數(shù)據(jù)采用ANOVA 分析。P＜0.05 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 尿液培養(yǎng)結(jié)果

本研究收集到的有1027 份尿標(biāo)本，其中被判為污染重送的標(biāo)本103 份，占10.0%（103/1 027)、培養(yǎng)為陰性585 份，占57.0%、培養(yǎng)為陽(yáng)性339份，占33.0%。

在339 份尿培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果中，總的陽(yáng)性菌株為385 株，其中細(xì)菌有237 株，革蘭陽(yáng)性菌（GP）101 株中主要為屎腸球菌、糞腸球菌；革蘭陰性菌（GN）136 株中主要為肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、奇異變形桿菌、大腸埃希菌。真菌生長(zhǎng)的有148 株中主要為白念珠菌。

見(jiàn)表1-3。

表1 革蘭陽(yáng)性病原菌分布表

表2 革蘭陰性病原菌分布表

表3 真菌分布表

2.2 WBC、BACT 診斷ICU UIT 的性能情況

以尿培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)，將UF-5000 分析儀的WBC、BACT 和尿培養(yǎng)結(jié)果作ROC 曲線分析比較。如圖1，WBC 的曲線下面積（AUC）為0.794，95%的置信區(qū)間(CI)為0.763-0.825，尤登指數(shù)（YI）最大為0.505，臨界（Cutoff）值為58.8 μL-1，敏感性為81.4%，特異性為69.1%,；BACT 的AUC為0.981，95%的置信區(qū)間(CI)為0.973-0.989，YI最大為0.870，Cutoff 值為119.7 μL-1，敏感性為94.9%，特異性為92.1%。

圖1 UF-5000 WBC 和BACT 與尿培養(yǎng)的ROC 曲線分析

2.3 真菌計(jì)數(shù)與尿真菌培養(yǎng)結(jié)果的比較分析

以尿真菌培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)的ROC 曲線得出UF-5000 的真菌計(jì)數(shù)敏感性為87.2%，特異性為91.8%，Cutoff 值為6.1 μL-1。如圖2。

圖2 UF-5000 真菌計(jì)數(shù)與尿真菌培養(yǎng)的ROC 曲線分析

2.4 UF5000 分析儀判斷GP、GN 的能力分析

UF-5000 的細(xì)菌提示信息與尿培養(yǎng)結(jié)果相比，總的診斷準(zhǔn)確度（AC）為85.5%；GP 的AC 為76.8%，靈敏度為84.5%，特異性為98.1%；GN 的AC 為77.5%，靈敏度為86.2%，特異性為99.2；GP+GN 的AC 為70.8%，靈敏度為60.0%，特異性為95.3%。如表4。

表4 尿培養(yǎng)結(jié)果與UF-5000 細(xì)菌提示結(jié)果的相關(guān)表

2.5 BACT 值、WBC 值與尿細(xì)菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)的關(guān)系分析

UF-5000 的BACT 與尿細(xì)菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)存在一定的等級(jí)相關(guān)性，菌落計(jì)數(shù)高者BACT 也較高（P 值為0.006），而UF-5000 WBC 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 值為0.919），見(jiàn)表5、圖3、表6 和圖4。

圖3 UF-5000 BACT 和尿細(xì)菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)關(guān)系圖

圖4 UF-5000 WBC 和尿細(xì)菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)關(guān)系圖

表5 UF-5000 BACT 和尿細(xì)菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)相關(guān)指標(biāo)

表6 UF-5000 WBC 和尿細(xì)菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)相關(guān)指標(biāo)

3 討論

UIT 是臨床常見(jiàn)的感染性疾病，主要因感染細(xì)菌、真菌等病原體而致病。如果患者不能得到早期診斷，往往會(huì)導(dǎo)致病情遷延，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡[1,2]。ICU 患者發(fā)生UIT 幾率高于普通病房患者。UF-5000 尿液有形成分分析儀在檢測(cè)尿沉渣顆粒計(jì)數(shù)、細(xì)菌分類(lèi)方面體現(xiàn)出良好性能，但用于評(píng)價(jià)其在篩查ICU 患者疑似UIT 性能情況的報(bào)道很少[3]。本研究中發(fā)現(xiàn)本院ICU UIT 病原菌所占比例中真菌(39%)＞GN(35%)＞GP 占(26%)。

本研究中以尿培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)的ROC 曲線得出UF-5000 分析儀BACT 的AUC、YI、敏感性、特異度均遠(yuǎn)高于WBC，表明在篩查ICU UIT 中UF-5000 的WBC 有一定的診斷意義，BACT 則具有很高的診斷價(jià)值。同時(shí)得出UIT 的WBC Cutoff 值為58.8 μL-1，BACT Cutoff 值為119.7 μL-1，與馮敏亞報(bào)道[8]存在差異，分析原因是本次標(biāo)本來(lái)源是ICU 疑似UIT 患者，其很多是導(dǎo)尿標(biāo)本，可能會(huì)比清潔中段尿的白細(xì)胞和細(xì)菌較多，導(dǎo)致提示UIT 的臨界值更低。UF-5000 具有真菌定量檢測(cè)的功能，本研究以尿真菌培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)作ROC 曲線得出UF-5000 的真菌計(jì)數(shù)敏感性為87.2%，特異性為91.8%，Cutoff 值為6.1 μL-1。說(shuō)明其在診斷真菌性UIT 方面也具有較高的應(yīng)用價(jià)值。UF-5000 還具有細(xì)菌提示的作用。本研究以尿培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)UF-5000 的細(xì)菌提示功能在診斷ICU UIT 患者中有較高的價(jià)值，判斷單獨(dú)GN 或GP UIT 比GN 混合GP 感染的診斷效能更高。本研究UF-5000 提示GN、GP、以及GN 混合GP 的敏感性和特異性與之相近。在假陰性和假陽(yáng)性的原因分析中，本研究發(fā)現(xiàn)5例尿培養(yǎng)為GN混合GP，而UF-5000只提示GN，有可能是腸球菌等GP 菌因?yàn)樯L(zhǎng)速度較慢、營(yíng)養(yǎng)要求更高，未達(dá)到儀器檢測(cè)時(shí)菌量未能被分類(lèi)。64 例尿培養(yǎng)結(jié)果為陰性，而UF-5000 細(xì)菌提示分別為47 例GP、10 例GN 和7 例GP 混合GN。分析原因可能是ICU UIT 的患者，病情重、留置導(dǎo)尿時(shí)間偏長(zhǎng)、存在廣泛激素以及廣譜抗菌藥物應(yīng)用的現(xiàn)象，會(huì)使細(xì)菌失去活性，造成傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為假陰性。本研究發(fā)現(xiàn)UF-5000 的BACT 值與尿細(xì)菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)之間存在一定的等級(jí)相聯(lián)性，即UF-5000 BACT 高的尿細(xì)菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)也較高。綜上所述，尿液有形成分儀UF5000 所具有的WBC、BACT、真菌計(jì)數(shù)和細(xì)菌提示功能在ICU 患者疑似UIT 中具有較高的快速篩查作用，其BACT 的診斷效能優(yōu)于WBC。