急性腦梗死病人血清CXCL1、CCL4表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系

位慧芳,張珍珍,曾 芳,張 輝

急性腦梗死(acute cerebral infarction,ACI)又稱急性缺血性腦卒中,指腦血供中斷后出現(xiàn)的腦組織壞死,一般是由于腦動(dòng)脈出現(xiàn)血栓或粥樣硬化,引起血管腔狹窄或阻塞,進(jìn)而導(dǎo)致局灶性腦缺血[1-2]。1990年—2016年,ACI的年齡標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)病率和死亡率分別降低了36.2%和8.1%,ACI是世界范圍內(nèi)僅次于心血管疾病的第二大死因[3]。對(duì)ACI病人來(lái)說(shuō),目前仍需準(zhǔn)確、科學(xué)、靈敏的預(yù)后生物標(biāo)志物進(jìn)行探討。CXC趨化因子配體1(C-X-C motif chemokine ligand 1,CXCL1)作為重要的趨化因子之一,在炎癥反應(yīng)中升高,是參與炎癥性疾病發(fā)展的重要細(xì)胞因子[4]。CC趨化因子配體4(CC motif chemokine ligand 4,CCL4)是CC亞族趨化因子之一,對(duì)多種細(xì)胞有趨化作用[5]。鄭詩(shī)豪等[6]研究顯示,CXCL1、CCL4均是腦出血后參與腦組織繼發(fā)性腦損傷進(jìn)程的關(guān)鍵因素,且相較于正常腦組織,血腫周圍腦組織CXCL1、CCL4表達(dá)上調(diào)。關(guān)于CXCL1、CCL4在ACI病人中的研究較少。本研究通過(guò)檢測(cè)ACI病人血清CXCL1、CCL4水平,探討兩項(xiàng)指標(biāo)在ACI病人中的表達(dá)及與疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后的關(guān)系,以期為ACI臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 納入2018年12月—2021年12月我院神經(jīng)內(nèi)科收治的98例ACI病人作為ACI組,同時(shí)選取我院94名健康體檢者作為對(duì)照組。根據(jù)ACI病人治療后90 d改良Rankin量表[7]評(píng)分評(píng)估預(yù)后,將病人分為預(yù)后不良組30例(評(píng)分>2分)和預(yù)后良好組68例(評(píng)分≤2分)。ACI病人入院后均完成腦部磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)掃描,根據(jù)MRI擴(kuò)散加權(quán)成像(diffusion weighted imaging,DWI)上單個(gè)病灶最大徑(d)(多個(gè)病灶時(shí)以各個(gè)病灶直徑相加數(shù)值作為病灶直徑)分為大面積組25例(d>5.0 cm)、中面積組45例(d為1.5～5.0 cm)和小面積組28例(d<1.5 cm)。收集ACI病人性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)(body mass index,BMI)、吸煙史、飲酒史、冠心病、高血壓、糖尿病等臨床資料。

納入標(biāo)準(zhǔn)：ACI病人均符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[8],入院24 h內(nèi)經(jīng)腦CT、MRI等影像檢查確診;臨床資料完整,病人自愿參與本研究,并配合完成所有檢查;發(fā)病至入院時(shí)間<24 h。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病、感染性疾病;近3個(gè)月內(nèi)有腦部外科手術(shù)史;近3個(gè)月內(nèi)使用過(guò)抗凝血相關(guān)藥物;既往有ACI史。

1.2 血清CXCL1、CCL4表達(dá)水平測(cè)定 收集病人入院24 h及健康體檢者體檢當(dāng)日內(nèi)5 mL肘靜脈血樣置于干燥離心管內(nèi),4 ℃條件下,以3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心15 min,收集上層血清,保存于-80 ℃冰箱。冰上凍融后采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)試劑盒檢測(cè)血清CXCL1(武漢伊艾博科技股份有限公司生產(chǎn))、CCL4(上海廣銳生物科技有限公司生產(chǎn))表達(dá)水平,嚴(yán)格按照相關(guān)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1 對(duì)照組與ACI組血清CXCL1、CCL4表達(dá)水平比較 ACI組血清CXCL1、CCL4表達(dá)水平高于對(duì)照組(P<0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 對(duì)照組與ACI組血清CXCL1、CCL4表達(dá)水平比較(±s)

2.2 不同腦梗死面積ACI病人血清CXCL1、CCL4表達(dá)水平比較 大面積組血清CXCL1、CCL4表達(dá)水平高于小面積組、中面積組,中面積組血清CXCL1、CCL4表達(dá)水平高于小面積組(P<0.05)。詳見(jiàn)表2。

表2 不同腦梗死面積ACI病人血清CXCL1、CCL4表達(dá)水平比較(±s)

2.3 預(yù)后不良組與預(yù)后良好組臨床資料比較 預(yù)后不良組與預(yù)后良好組性別、年齡、BMI、吸煙史、飲酒史、冠心病、糖尿病比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。預(yù)后不良組血清CXCL1、CCL4表達(dá)水平及高血壓比例高于預(yù)后良好組(P<0.001)。詳見(jiàn)表3。

表3 預(yù)后不良組與預(yù)后良好組臨床資料比較

2.4 血清CXCL1、CCL4水平對(duì)ACI病人預(yù)后不良的預(yù)測(cè)價(jià)值 繪制ROC曲線分析血清CXCL1、CCL4水平對(duì)ACI病人預(yù)后不良的預(yù)測(cè)價(jià)值,結(jié)果顯示,CXCL1、CCL4及其聯(lián)合預(yù)測(cè)ACI病人預(yù)后不良的AUC分別為0.757[95%CI(0.645,0.869)]、0.765[95%CI(0.652,0.879)]、0.863[95%CI(0.774,0.952)],其中聯(lián)合預(yù)測(cè)AUC高于二者單獨(dú)檢測(cè)(Z值分別為2.342,2.166,P<0.05),當(dāng)二者臨界值為1.54 ng/mL、383.85 pg/mL時(shí),二者單獨(dú)檢測(cè)的靈敏度分別為70.0%、56.7%,特異度分別為73.5%、91.2%,二者聯(lián)合的靈敏度、特異度分別為85.3%、89.7%。詳見(jiàn)圖1。

2.5 ACI病人預(yù)后不良的影響因素分析 以ACI病人是否預(yù)后不良作為因變量,以單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)(高血壓、CXCL1、CCL4)及既往研究中ACI病人預(yù)后不良的影響因素(年齡、腦梗死面積)為自變量進(jìn)行多因素Logistic回歸分析,結(jié)果顯示,腦梗死面積、CXCL1、CCL4是ACI病人預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.01)。詳見(jiàn)表4。

圖1 血清CXCL1、CCL4水平預(yù)測(cè)ACI病人預(yù)后不良的ROC曲線圖

表4 ACI病人預(yù)后不良的影響因素分析

3 討 論

ACI起病急驟,一般無(wú)前驅(qū)癥狀,給人類生命健康造成了極大威脅[9-10]。目前研究認(rèn)為ACI的發(fā)病機(jī)制可能是腦組織缺氧缺血后,神經(jīng)細(xì)胞無(wú)法正常維持跨膜離子梯度,引起氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡等一系列病理生理過(guò)程[11-12]。ACI的危險(xiǎn)因素主要包括高齡、吸煙、高血壓、糖尿病等,有研究顯示控制好相關(guān)危險(xiǎn)因素后,ACI仍有較高的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[13]。尋找準(zhǔn)確、有效的預(yù)后檢測(cè)指標(biāo),及時(shí)干預(yù)治療對(duì)ACI的臨床診治工作意義重大。CXCL1主要在中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞中表達(dá),是一種有效的促炎因子,在介導(dǎo)中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)及誘導(dǎo)血管生成中發(fā)揮著重要作用,血清CXCL1水平升高認(rèn)為是機(jī)體的促炎癥反應(yīng)[14-15]。張皓春等[16]研究結(jié)果顯示,預(yù)后不良的自發(fā)性腦出血病人血清CXCL1水平高于預(yù)后良好的病人。本研究結(jié)果顯示,ACI病人血清CXCL1水平高于健康人群,表明高水平CXCL1可能提示ACI疾病發(fā)生及預(yù)后不良。CXCL1水平升高的可能原因?yàn)檠葱灾行粤＜?xì)胞、白細(xì)胞等深入腦實(shí)質(zhì)造成血腦屏障受損,加重炎癥反應(yīng),血清CXCL1水平升高。CCL4主要由腫瘤細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等表達(dá),且主要由巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、單核細(xì)胞分泌,可介導(dǎo)細(xì)胞遷移、促進(jìn)炎癥細(xì)胞因子生成及淋巴細(xì)胞分化,誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生炎癥損傷[17-18]。本研究結(jié)果顯示,ACI病人血清CCL4水平升高,且預(yù)后不良的ACI病人血清CCL4高于預(yù)后良好的ACI病人。推測(cè)腦缺血后梗死病灶及周邊組織伴有嚴(yán)重的炎癥浸潤(rùn),進(jìn)而導(dǎo)致全腦炎癥環(huán)境形成,CCL4快速增加將中性粒細(xì)胞等免疫細(xì)胞遷移至受損的腦組織,且隨著血腦屏障受損滲漏及微血管內(nèi)皮細(xì)胞被激活,各類炎癥介質(zhì)擴(kuò)散至血清,導(dǎo)致血清CCL4檢測(cè)水平顯著增加。

本研究將ACI病人根據(jù)腦梗死面積亞組分析發(fā)現(xiàn),血清CXCL1、CCL4隨著ACI病人腦梗死面積增大呈升高趨勢(shì)。提示血清CXCL1、CCL4可能參與ACI病人腦組織損傷過(guò)程,對(duì)評(píng)估ACI病人病情嚴(yán)重程度有重要的臨床價(jià)值。腦梗死面積與神經(jīng)功能損傷是ACI發(fā)生發(fā)展過(guò)程中相互影響且同時(shí)存在的兩個(gè)病理生理特征,因此血清CXCL1、CCL4水平可能一定程度反映ACI病人神經(jīng)功能損傷。本研究進(jìn)一步采用ROC曲線分析血清CXCL1、CCL4對(duì)ACI病人預(yù)后的評(píng)估價(jià)值,結(jié)果顯示,二者聯(lián)合后可較好地預(yù)測(cè)ACI病人預(yù)后不良,其預(yù)測(cè)靈敏度和特異度分別為83.3%、89.7%,且預(yù)測(cè)AUC為0.863,有較高的預(yù)測(cè)效能,對(duì)指導(dǎo)臨床治療有重要作用。本研究多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示,血清CXCL1、CCL4、腦梗死面積均是ACI病人預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素。提示ACI病人可能會(huì)隨著腦梗死面積增大,血清CXCL1、CCL4水平增加出現(xiàn)預(yù)后不良。

綜上所述,血清CXCL1、CCL4水平對(duì)ACI病人預(yù)后不良均有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值,二者聯(lián)合后預(yù)測(cè)價(jià)值更高。本研究可指導(dǎo)臨床醫(yī)師治療ACI病人并評(píng)估其預(yù)后,在疾病治療中給予適當(dāng)預(yù)防。然而由于納入的樣本量有限,結(jié)果可能存在一定的偏倚,關(guān)于CXCL1、CCL4準(zhǔn)確性和轉(zhuǎn)化為臨床實(shí)踐的問(wèn)題需進(jìn)一步深入探討。