• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    臨床特征聯(lián)合血清標(biāo)志物檢測預(yù)警模型在肺癌骨轉(zhuǎn)移診斷中的臨床價值

    2023-05-24 02:42:28馬海洋吳瓊張勇
    中國骨與關(guān)節(jié)雜志 2023年5期
    關(guān)鍵詞:膠原標(biāo)志物肺癌

    馬海洋 吳瓊 張勇

    隨著社會經(jīng)濟的不斷發(fā)展,國民的生活水平得到一定程度的提升,但隨即產(chǎn)生的環(huán)境污染問題更加嚴重,在一定程度上造成了空氣污染以及空氣質(zhì)量下降的問題,大大提升了我國呼吸道疾病以及肺部疾病的發(fā)生比例,間接增加了患者發(fā)生肺癌等惡性疾病的發(fā)生以及死亡風(fēng)險[1]。臨床中肺癌是發(fā)生率較高的惡性腫瘤,支氣管黏膜上皮發(fā)生嚴重病變是引發(fā)肺癌的主要原因,因此常稱為支氣管肺癌[2]。臨床中肺癌發(fā)生后,病情進展較快,臨床癥狀較為嚴重,包括對患者的生命安全以及健康造成嚴重威脅,使肺癌成為臨床惡性腫瘤中致死率最高的惡性腫瘤疾病。已有相關(guān)數(shù)據(jù)證實,惡性腫瘤患者中發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的比例在 20%~60% 左右,其中老年肺癌患者是骨轉(zhuǎn)移的高危人群,因此在患有肺癌后及時進行骨轉(zhuǎn)移診斷并采取針對性的有效治療措施是降低患者骨轉(zhuǎn)移發(fā)生風(fēng)險以及改善患者預(yù)后的關(guān)鍵[3]。骨轉(zhuǎn)移主要指的是患者的骨結(jié)構(gòu)發(fā)生異常導(dǎo)致骨損傷以及骨性破壞等,人類骨質(zhì)主要由 Ⅰ 型膠原構(gòu)成,Ⅰ 型膠原主要由成骨細胞合成,并且合成以及分解的代謝產(chǎn)物會進入血液循環(huán),通過臨床多種試劑檢測后可以有效反映機體的骨代謝水平,同時對骨基質(zhì)礦化具有重要作用。目前雖有相關(guān)研究是以肺癌患者骨轉(zhuǎn)移的血清標(biāo)志物以及骨代謝指標(biāo)診斷價值為中心進行深入分析,但因為研究樣本量相對較少以及單一血清標(biāo)志物的診斷敏感度、特異度較差等導(dǎo)致獲得的研究數(shù)據(jù)參考價值較低,使相關(guān)研究結(jié)論仍存在一定爭議[4]。本次通過臨床基線特征聯(lián)合骨特異性堿性磷酸酶 (bALP)、癌胚抗原(CEA)、Ⅰ 型原膠原氨基端 (N 端) 延長肽 (PINP)、Ⅰ 型膠原交聯(lián)羧基端 (C 端) 肽 (CTx)、糖鏈抗原125 (CA125) 等血清標(biāo)志物和骨代謝指標(biāo)構(gòu)建預(yù)測模型并應(yīng)用于患者骨轉(zhuǎn)移診斷中,為后續(xù)提升臨床肺癌骨轉(zhuǎn)移診斷以及及時預(yù)測預(yù)防奠定研究基礎(chǔ)。

    資料與方法

    一、納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)

    1.納入標(biāo)準(zhǔn):(1) 2018 年 6 月至 2020 年 5 月,我院經(jīng)治的肺癌骨轉(zhuǎn)移患者;(2) 結(jié)合病理學(xué)檢查結(jié)果以及臨床影像結(jié)果確診,病理類型均為非小細胞肺癌者;(3) 篩選的患者資料具有較高完整度,年齡 ≤ 70 歲者;(4) ECOG 評分 ≤ 2 分,肝、腎等重要器官的功能運行無異常者;(5) 骨轉(zhuǎn)移診斷時檢測血清標(biāo)志物、骨代謝指標(biāo)水平者;(6) 診斷前未接受任何可能影響研究結(jié)果的干預(yù)治療者。

    2.排除標(biāo)準(zhǔn):(1) 無外傷骨折者;(2) 有高鈣血癥者;(3) 有甲狀腺功能亢進或減低病史者;(4) 有其它惡性腫瘤病史者。

    二、一般資料

    本研究共納入 206 例。男 112 例、女 94 例;年齡 32~70 歲,平均 (57.99±3.52) 歲。腺癌 139例、鱗癌 67 例。176 例的 ECOG 評分為 0~1 分,30 例 ECOG 評分為 2 分。肺癌分期標(biāo)準(zhǔn)[5]:Ⅰ 期屬于早期,是腫瘤位于肺組織中尚未發(fā)生轉(zhuǎn)移。Ⅱ期屬于中期,指癌細胞已轉(zhuǎn)移到了肺門附近的淋巴結(jié)。Ⅲ 期屬于局部晚期,指癌細胞已經(jīng)進一步轉(zhuǎn)移到縱隔或肺外淋巴結(jié),還包括少部分病灶非常大或侵犯腫瘤器官不利于手術(shù)的情況。Ⅳ 期屬于晚期,指腫瘤出現(xiàn)胸膜轉(zhuǎn)移,胸腔積液或者全身多處臟器的轉(zhuǎn)移 (表1)。

    表1 研究對象基線資料Tab.1 Baseline data of subjects

    三、方法

    1.肺癌骨轉(zhuǎn)移的診斷標(biāo)準(zhǔn):以骨顯像以及臨床癥狀為金標(biāo)準(zhǔn)[6],診斷內(nèi)容如下:(1) 排除良性病變與其它外傷因素影響,骨顯像結(jié)果中超過 3 處的放射性核素出現(xiàn)大量聚集;(2) 骨顯像結(jié)果中 ≤ 2 處的放射性核素出現(xiàn)大量聚集并存在骨痛、病理性骨折等骨轉(zhuǎn)移臨床癥狀確診發(fā)生轉(zhuǎn)移;(3) 放射性核素檢查陰性,但存在骨痛、病理性骨折等骨轉(zhuǎn)移臨床癥狀則為發(fā)生骨轉(zhuǎn)移;(4) 骨顯像結(jié)果中出現(xiàn)大量聚集放射性核素且存在骨痛、病理性骨折等骨轉(zhuǎn)移癥狀。存在以上 4 條中任何一條均可確診。

    2.標(biāo)本采集與檢測:晨起時間段內(nèi)采集 3 ml 研究對象的空腹靜脈血,按照轉(zhuǎn)速 2000 r / min 設(shè)定參數(shù)離心 8 min,取上清液并保存在 -20 ℃ 環(huán)境中。由專業(yè)人員嚴格按照操作流程對樣本進行批量檢驗,檢測方法為電化學(xué)發(fā)光免疫分析法 (ECLIA)。

    3.外周血循環(huán)腫瘤細胞 (CTC) 數(shù)量測定方法:外周血 CTC 數(shù)量檢測采用 Cyttel-CTC-imFish 技術(shù)完成,收集患者 3.2 ml 晨起空腹前臂靜脈血,為防止血液被上皮細胞污染,取中段血 3.2 ml,按照3000 r / min 轉(zhuǎn)速以及 20 cm 離心半徑進行離心,去除上層清液并加入細胞裂解液,免疫磁珠包被特異性抗體后吸附白細胞并分離富集腫瘤細胞。用 CD45以及 8 號探針作為細胞熒光原位雜交反應(yīng)檢測的工具,鏡檢計數(shù),出現(xiàn) 3 倍體及以上信號同時 CD45陰性為腫瘤細胞。

    四、統(tǒng)計學(xué)處理

    對研究出現(xiàn)的數(shù)據(jù)進行有效處理的軟件是運用SPSS 22.0,計量資料進行正態(tài)性檢驗,計量資料中正態(tài)分布以x-±s形式表現(xiàn),采用t檢驗,使用 (%)表示計數(shù)資料并進行χ2檢驗,多因素 Logistic 回歸法分析肺癌骨轉(zhuǎn)移的影響因素,P< 0.05,數(shù)據(jù)有統(tǒng)計學(xué)意義,制訂肺癌骨轉(zhuǎn)移的預(yù)測模型并進行驗證。

    結(jié) 果

    一、骨顯像結(jié)果

    肺癌患者共計 206 例,99mTe-MDP 診斷結(jié)果中骨轉(zhuǎn)移確診例數(shù)共計 67 例,骨轉(zhuǎn)移病灶中 1 個熱區(qū)、2 個熱區(qū)、熱區(qū) ≥ 3 個的例數(shù)分別為 10 例、23 例、34 例,共計 171 個;1.94% 的肺癌患者為 1 個熱區(qū)可疑骨轉(zhuǎn)移,共計 4 例;65.53% 的骨顯像未存在異常濃聚,共計 135 例。后經(jīng)確診,43 例骨顯像陽性患者確診發(fā)生骨轉(zhuǎn)移,假陽性例數(shù)為 24 例;可疑病例中骨轉(zhuǎn)移的例數(shù)為 1 例;9.63% 骨掃描陰性患者為假陰性,共計 13 例。27.67% 為骨轉(zhuǎn)移確診比例,共計 57 例;骨顯像診斷的特異性為 81.88%、敏感度為 75.44%、漏診率為 22.81%、假陽性率為35.82%。骨轉(zhuǎn)移組與無骨轉(zhuǎn)移組的骨顯像陽性檢出率存在統(tǒng)計學(xué)意義 (χ2= 66.497,P< 0.001)。42.11%患者的骨轉(zhuǎn)移灶累及肋骨或胸骨,共計 24 例;脊柱 19 例 (33.33%),骨盆 15 例 (26.32%),長骨 9 例(15.79%),顱骨 5 例 (8.77%)。

    二、單因素分析骨轉(zhuǎn)移組與無骨轉(zhuǎn)移組血清標(biāo)志物水平比較

    骨轉(zhuǎn)移組的血清標(biāo)志物 CTC、CEA、CA125、PINP、bALP、CTx 水平均高于無骨轉(zhuǎn)移組 (P<0.001) (表2)。

    表2 比較兩組患者血清骨轉(zhuǎn)移標(biāo)志物變化差異 ( x-±s )Tab.2 Comparison of changes in serum bone metastasis markers between the two groups (x- ± s)

    三、單因素分析骨轉(zhuǎn)移組與無骨轉(zhuǎn)移組肺癌的臨床病理特征

    Ⅰ 期、Ⅱ 期、Ⅲ 期、Ⅳ 期的占比分別為10.19%、7.28%、36.89%、45.64%,例數(shù)分別為21 例、15 例、76 例、94 例。骨轉(zhuǎn)移組的臨床分期、腺癌病理類型占比明顯高于無骨轉(zhuǎn)移組,兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P< 0.05) (表3)。

    表3 單因素分析骨轉(zhuǎn)移組與無骨轉(zhuǎn)移組肺癌的臨床病理特征Tab.3 Univariate analysis of clinicopathological characteristics of lung cancer in the bone metastasis group and the non bone-metastasis group

    四、多因素分析肺癌骨轉(zhuǎn)移的影響因素及建立預(yù)測模型

    將P< 0.05 的 CEA、骨顯像、臨床病理分期、CA125、PINP、bALP 作為肺癌骨轉(zhuǎn)移變量為自變量,肺癌患者發(fā)生骨轉(zhuǎn)移為因變量,數(shù)據(jù)提示病理類型、病理分期、CEA、CA125、CTC、PINP、bALP為肺癌患者發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的危險因素 (表4,5)。

    表4 變量賦值表Tab.4 Variable assignment table

    表5 多因素分析肺癌患者骨轉(zhuǎn)移的影響因素Tab.5 Multivariate analysis of the influencing factors of bone metastasis in lung cancer patients

    以上回歸分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠,回歸方程的擬合度R2= 0.271,擬合度顯著 (F= 4.012,P< 0.05),說明本回歸模型存在有顯著意義,即自變量中至少有一個可以顯著影響?;貧w方程的殘差情況如圖1。

    圖1 多元線性回歸方程標(biāo)準(zhǔn)化殘差直方圖Fig.1 Histogram of normalized residuals of multiple linear regression equations

    五、臨床特征聯(lián)合血清標(biāo)志物肺癌骨轉(zhuǎn)移預(yù)測模型在肺癌骨轉(zhuǎn)移診斷中的價值驗證

    根據(jù)以上的危險因素結(jié)果繪制列線圖構(gòu)建肺癌患者骨轉(zhuǎn)移的預(yù)測模型,模型為 0.469 + CEA×0.481 +病理類型×0.544 + 臨床病理分×0.088 + CA125×0.318 + PINP×0.363 + bALP×0.439 + CTx×0.467 +CTC×0.476。將驗證組的肺癌數(shù)據(jù)代入列線圖中計算概率值。以 50% 為預(yù)測概率驗證的分界值,≥ 50%是骨轉(zhuǎn)移高危患者,< 50% 是骨轉(zhuǎn)移低危患者。臨床特征聯(lián)合血清標(biāo)志物肺癌骨轉(zhuǎn)移預(yù)測模型診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)確率為 92.23,AUC 為 0.916,敏感度與特異度均在 90% 左右 (表6、7,圖2、3)。

    圖2 肺癌患者骨轉(zhuǎn)移預(yù)測模型列線圖Fig.2 Prediction model of bone metastasis in patients with lung cancer

    圖3 預(yù)測模型在肺癌患者骨轉(zhuǎn)移中的診斷效能 ROC 曲線Fig.3 ROC curve of the predictive model for the diagnosis of bone metastasis in lung cancer patients

    表6 肺癌患者骨轉(zhuǎn)移預(yù)測模型檢出結(jié)果Tab.6 Detection results of bone metastasis prediction model in lung cancer patients

    表7 預(yù)測模型在肺癌患者骨轉(zhuǎn)移中的診斷效能Tab.7 Diagnostic efficacy of prediction model in bone metastasis of lung cancer patients

    討 論

    肺癌骨轉(zhuǎn)移是肺癌患者在中后期常出現(xiàn)的一類疾病,病情嚴重者如不能及時發(fā)現(xiàn)并治療,極易對患者生命造成影響,嚴重威脅人類健康。對于此,加強監(jiān)測與早期治療至關(guān)重要[7]。隨著臨床檢測醫(yī)學(xué)中廣泛應(yīng)用放射性免疫技術(shù)以及肺癌血清標(biāo)志物研究深度的不斷增加,血清標(biāo)志物在肺癌診斷中的應(yīng)用效能得到進一步挖掘的同時提升了腫瘤診斷結(jié)果準(zhǔn)確率,而臨床相關(guān)檢測技術(shù)在腫瘤臨床療效以及預(yù)后診斷中的應(yīng)用價值也為惡性腫瘤研究發(fā)展提供數(shù)據(jù)支持。

    骨形成、骨吸收標(biāo)志物較多,主要有未羧化骨鈣素 (ucOC)、抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)、CTx[8]。通過生物化學(xué)方法檢測血清或尿液的骨代謝指標(biāo)水平能有效反映骨代謝以及骨轉(zhuǎn)換狀態(tài),對腫瘤的療效評估具有一定的指導(dǎo)意義。已有研究實驗結(jié)果表示骨代謝水平在一定程度上會影響骨轉(zhuǎn)移以及預(yù)后結(jié)局,但乳腺癌、前列腺癌是骨轉(zhuǎn)移相關(guān)研究的集中點,關(guān)于肺癌骨轉(zhuǎn)移的研究案例鮮少且研究結(jié)論尚未統(tǒng)一[9]。

    成浩等[10]針對 143 例 Ⅰ~Ⅳ 期肺癌患者進行了深入研究,根據(jù)單因素以及多因素分析結(jié)果指出患者 PINP 或 PICP 升高發(fā)生預(yù)后不良的比例更高,但 PINP 和 PICP 并不是影響預(yù)后的獨立因素,在一定程度上可以說明 PINP、PICP 與肺癌患者骨轉(zhuǎn)移預(yù)后結(jié)局存在關(guān)聯(lián)。本研究中骨轉(zhuǎn)移組患者的 PINP明顯更高,PINP 是肺癌患者骨轉(zhuǎn)移的獨立影響因素并被納入預(yù)測模型中,與以上研究結(jié)果相符,提示PINP 在肺癌骨轉(zhuǎn)移中具有較高診斷價值,分析其原因可能是在 Ⅰ 型前膠原、Ⅰ 型膠原的衍化過程中切斷氨基末端結(jié)構(gòu),因此血清 Ⅰ 型前膠原水平可作為反映 Ⅰ 型膠原合成狀態(tài)以及骨形成的良好指標(biāo),提示 Ⅰ 型膠原合成速度隨著 Ⅰ 型前膠原升高而增快,骨轉(zhuǎn)換活躍,因此在骨轉(zhuǎn)移時 PINP 會對應(yīng)發(fā)生變化[11]。成骨細胞分泌產(chǎn)生的 bALP 是一種 ALP同工酶,在成骨細胞活性中具有較高的敏感性。Vimalraj 等[12]指出肺癌患者的 bALP 高水平表達是促進疾病進展對危險因素 (RR:1.77;95%CI:1.19~2.64;P= 0.005),死亡危險是正常者的 1.5倍 (RR:1.53;95%CI:1.15~2.03;P= 0.003),證實預(yù)后不良因素中不包括 bALP,本研究中相比于骨轉(zhuǎn)移組,無骨轉(zhuǎn)移組的 bALP 水平更低,并且作為獨立影響因素被納入肺癌骨轉(zhuǎn)移預(yù)測模型中,提示 bALP 是可以反映肺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)生情況的敏感指標(biāo)。其主要原因是在惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移的細胞生理進程中血清 bALP 均有參與,因此在肺癌患者的骨轉(zhuǎn)移發(fā)生中 bALP 會出現(xiàn)較明顯的變化。本研究中 CTx在骨轉(zhuǎn)移組水平更高并且是影響因素之一,其主要是因為 CTx、NTx 等標(biāo)志物主要由 Ⅰ 型膠原降解產(chǎn)生,二者均具有較高的特異性,CTx 相比于 NTx,CTx 診斷骨吸收的特異性差,但在骨吸收診斷中具有較高的敏感性,因此在肺癌患者的骨轉(zhuǎn)移時具有較高的診斷價值[13]。

    肺癌預(yù)后臨床研究中腫瘤標(biāo)志物是重點方向。多項研究數(shù)據(jù)顯示腫瘤標(biāo)志物會影響肺癌患者的預(yù)后,但研究對象具有一定局限性,多為早期肺癌,針對晚期肺癌患者的研究案例鮮少,腫瘤標(biāo)志物對肺癌骨轉(zhuǎn)移患者預(yù)后的評估價值尚未明確。腫瘤標(biāo)志物之一的 CEA 在診斷肺癌中的靈敏度、特異度一般,與早期肺癌患者的預(yù)后結(jié)局存在密切關(guān)聯(lián),但有研究不認同該觀點[14]。本研究結(jié)果顯示 CEA 是診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的敏感指標(biāo),分析其原因是 CEA 為臨床常用的腫瘤敏感標(biāo)志物,主要形成于細胞漿,經(jīng)細胞膜傳遞分泌于細胞外以及周圍體液中,在血清、胃液等體液中均可檢出,隨著患者病情的加重,患者的 CEA 水平會相應(yīng)增加[15]。早期 CA125在臨床診斷卵巢癌、預(yù)后判斷以及疾病復(fù)發(fā)預(yù)測中較為常用并且具有較高的敏感性和陽性率。已有研究發(fā)現(xiàn) CA125 在肺癌患者血清中呈高水平表達。近幾年 CA125 已成為肺癌的臨床標(biāo)志物研究重點,但多數(shù)研究是以 CA125 預(yù)測早期肺癌患者預(yù)后為切入點,關(guān)于晚期肺癌預(yù)后的研究案例較少。

    目前,已文獻報道 CTC 在 PCa 患者中表達水平明顯高于正常人群,提示其可能對 PCa 診斷具有一定的應(yīng)用價值[16]。本研究結(jié)果顯示,CTC 是肺癌骨轉(zhuǎn)移的危險因素,并在呈高水平表達,與以上研究結(jié)果相符,提示 CTC 檢測能有效反映原發(fā)腫瘤的轉(zhuǎn)移,從而起到輔助判斷病情進展的作用,主要是因為 CTC 是從機體腫瘤原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶中脫落進入循環(huán)系統(tǒng)的腫瘤細胞,大部分 CTC 在短時間內(nèi)可經(jīng)機體免疫系統(tǒng)清除或因自身循環(huán)周期而死亡,但依然存在少部分細胞聚集生長形成癌栓,并在患者組織中進展為轉(zhuǎn)移灶,從而參與了惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移[17]。因 CTC 細胞在不同人群中的水平存在一定差異,所以在后續(xù)的不同人群的肺癌骨轉(zhuǎn)移臨床診斷中應(yīng)通過優(yōu)化 CTC 檢測技術(shù)以及納入 CTC 變量校正因素等方式提升一致性。

    許玉炫等[18]研究指出肺癌患者若是 N 期就更容易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移。已有研究表示相比于腺鱗癌、小細胞癌,肺腺癌是骨轉(zhuǎn)移風(fēng)險最高的肺癌病理類型,與本研究的結(jié)果是一致的,原因分析如下:腺癌多發(fā)于黏液腺,多數(shù)為血液轉(zhuǎn)移,可通過向血管外生長對患者的肋骨、脊椎部位進行直接侵犯,同時經(jīng)脊柱、肺部的靜脈循環(huán)向全身的骨骼轉(zhuǎn)移,而臨床分期越高,表示患者的病情越嚴重,因此發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的風(fēng)險越高[19]。

    本研究的不足:(1) 通過邏輯回歸分析結(jié)果構(gòu)建研究模型的相關(guān)文獻較少;(2) 納入的研究樣本量相對較少;這可能會影響模型的應(yīng)用準(zhǔn)確性。所以后續(xù)研究中應(yīng)擴大樣本量并探尋其它的模型構(gòu)建優(yōu)化方案,以待進一步深入分析臨床特征聯(lián)合血清標(biāo)志物檢測預(yù)警模型能提升肺癌骨轉(zhuǎn)移的實際診斷價值。

    綜上所述,診斷腫瘤骨轉(zhuǎn)移中,臨床特征聯(lián)合血清標(biāo)志物檢測預(yù)警模型對于診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移擁有較高的診斷功能,可視為肺癌骨轉(zhuǎn)移的一種篩查方法,擁有較高的臨床實用價值。采取臨床特征聯(lián)合血清標(biāo)志物檢測預(yù)警模型能提升肺癌骨轉(zhuǎn)移的實際檢出率,在臨床中具有非常強的實用性。

    猜你喜歡
    膠原標(biāo)志物肺癌
    中醫(yī)防治肺癌術(shù)后并發(fā)癥
    對比增強磁敏感加權(quán)成像對肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤檢出的研究
    膿毒癥早期診斷標(biāo)志物的回顧及研究進展
    膠原無紡布在止血方面的應(yīng)用
    冠狀動脈疾病的生物學(xué)標(biāo)志物
    microRNA-205在人非小細胞肺癌中的表達及臨床意義
    紅藍光聯(lián)合膠原貼治療面部尋常痤瘡療效觀察
    基于肺癌CT的決策樹模型在肺癌診斷中的應(yīng)用
    腫瘤標(biāo)志物在消化系統(tǒng)腫瘤早期診斷中的應(yīng)用
    MR-proANP:一種新型心力衰竭診斷標(biāo)志物
    国产片特级美女逼逼视频| 少妇人妻精品综合一区二区| 在线看a的网站| 国产免费一级a男人的天堂| 国产精品久久久久久久电影| 日本免费在线观看一区| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 日本免费在线观看一区| 中文天堂在线官网| 日韩视频在线欧美| 18禁动态无遮挡网站| 精品久久久精品久久久| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久ye,这里只有精品| 视频中文字幕在线观看| 欧美精品国产亚洲| 精品一区在线观看国产| 久久久国产一区二区| 亚洲伊人久久精品综合| 中文欧美无线码| 久久99精品国语久久久| 日本午夜av视频| 成人国产麻豆网| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 亚洲精品自拍成人| 2022亚洲国产成人精品| 日本av免费视频播放| 五月伊人婷婷丁香| av片东京热男人的天堂| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 激情五月婷婷亚洲| 免费观看性生交大片5| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 丝袜美足系列| 国产精品熟女久久久久浪| 水蜜桃什么品种好| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 日韩免费高清中文字幕av| 9热在线视频观看99| a级毛色黄片| 秋霞在线观看毛片| 一二三四在线观看免费中文在 | 日韩一区二区三区影片| 九色亚洲精品在线播放| 男人爽女人下面视频在线观看| 美国免费a级毛片| 曰老女人黄片| 又黄又粗又硬又大视频| 精品一区二区三区视频在线| 大片电影免费在线观看免费| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 永久网站在线| 边亲边吃奶的免费视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产熟女午夜一区二区三区| av播播在线观看一区| 成人手机av| 中文欧美无线码| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 亚洲伊人久久精品综合| 国产成人aa在线观看| a级毛片黄视频| 18禁在线无遮挡免费观看视频| av在线观看视频网站免费| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 日本黄色日本黄色录像| 蜜桃在线观看..| 日韩成人伦理影院| 免费大片黄手机在线观看| 99国产精品免费福利视频| 尾随美女入室| 日本黄色日本黄色录像| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 女的被弄到高潮叫床怎么办| 精品亚洲成国产av| 午夜免费观看性视频| 热99久久久久精品小说推荐| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产免费福利视频在线观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| av免费观看日本| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 国产高清三级在线| 国产xxxxx性猛交| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 成年人午夜在线观看视频| 一二三四在线观看免费中文在 | 妹子高潮喷水视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 91成人精品电影| 免费人成在线观看视频色| 成年动漫av网址| 岛国毛片在线播放| 黄片无遮挡物在线观看| 少妇人妻久久综合中文| 色视频在线一区二区三区| 欧美xxxx性猛交bbbb| 亚洲国产精品国产精品| 久久久精品免费免费高清| 不卡视频在线观看欧美| videosex国产| av网站免费在线观看视频| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲av.av天堂| 丰满迷人的少妇在线观看| 久久午夜福利片| a 毛片基地| 亚洲精品中文字幕在线视频| av在线app专区| 国产毛片在线视频| 久久久久久久久久久久大奶| 制服诱惑二区| 男女国产视频网站| 欧美人与性动交α欧美软件 | freevideosex欧美| 2022亚洲国产成人精品| 成人国产av品久久久| 午夜免费鲁丝| av卡一久久| 99久久精品国产国产毛片| 麻豆乱淫一区二区| 激情视频va一区二区三区| 亚洲av综合色区一区| 18禁动态无遮挡网站| 伊人久久国产一区二区| 久久亚洲国产成人精品v| 国产成人精品无人区| 成人毛片60女人毛片免费| 大香蕉久久成人网| 一级毛片 在线播放| av一本久久久久| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 午夜激情av网站| 久久久久久人人人人人| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 成年人免费黄色播放视频| 人成视频在线观看免费观看| 日本午夜av视频| 五月玫瑰六月丁香| 国产av国产精品国产| 三级国产精品片| 精品一区二区三卡| 久久久久久久久久人人人人人人| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲国产看品久久| 女人久久www免费人成看片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 国产精品偷伦视频观看了| av一本久久久久| 99久久精品国产国产毛片| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 国产极品粉嫩免费观看在线| 免费大片18禁| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久久久久久精品精品| 激情视频va一区二区三区| 日韩视频在线欧美| 熟女电影av网| 精品一区二区免费观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 亚洲情色 制服丝袜| 高清欧美精品videossex| 亚洲成人一二三区av| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 超色免费av| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产激情久久老熟女| 日韩欧美精品免费久久| 最近的中文字幕免费完整| 日本欧美视频一区| 午夜福利网站1000一区二区三区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产片内射在线| av天堂久久9| 视频中文字幕在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 熟女人妻精品中文字幕| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产深夜福利视频在线观看| 色5月婷婷丁香| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲av中文av极速乱| 不卡视频在线观看欧美| 大话2 男鬼变身卡| 久久99精品国语久久久| 午夜久久久在线观看| 久久 成人 亚洲| 在线 av 中文字幕| 免费黄色在线免费观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 韩国高清视频一区二区三区| 久久这里有精品视频免费| 91aial.com中文字幕在线观看| 免费大片18禁| 成年动漫av网址| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 欧美国产精品一级二级三级| 日本av手机在线免费观看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 婷婷色综合www| 久久久欧美国产精品| 大香蕉久久成人网| 最近手机中文字幕大全| 少妇的逼水好多| 亚洲国产av影院在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| av有码第一页| 七月丁香在线播放| 中文字幕制服av| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久99热6这里只有精品| 在线天堂最新版资源| √禁漫天堂资源中文www| 国产爽快片一区二区三区| 黄色一级大片看看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 妹子高潮喷水视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 天美传媒精品一区二区| 97超碰精品成人国产| 男人操女人黄网站| 最近的中文字幕免费完整| 色5月婷婷丁香| 五月玫瑰六月丁香| 蜜桃国产av成人99| 伊人亚洲综合成人网| 毛片一级片免费看久久久久| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 国产黄色视频一区二区在线观看| www.av在线官网国产| www.色视频.com| 久久人人爽人人片av| 十八禁网站网址无遮挡| 午夜激情久久久久久久| 国产成人欧美| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 精品少妇内射三级| 高清视频免费观看一区二区| 七月丁香在线播放| 飞空精品影院首页| 日本黄大片高清| 午夜福利视频精品| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲图色成人| 午夜av观看不卡| av卡一久久| 免费在线观看完整版高清| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久青草综合色| 日本91视频免费播放| 1024视频免费在线观看| 在线 av 中文字幕| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 久久精品国产a三级三级三级| 在线看a的网站| 美女福利国产在线| 人妻 亚洲 视频| 一级毛片 在线播放| 一二三四在线观看免费中文在 | av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 五月开心婷婷网| 国产亚洲最大av| 午夜免费鲁丝| h视频一区二区三区| 国产成人91sexporn| 国产片特级美女逼逼视频| 国产男女超爽视频在线观看| 国产高清国产精品国产三级| 国产乱人偷精品视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国精品久久久久久国模美| 18禁国产床啪视频网站| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲av日韩在线播放| 2018国产大陆天天弄谢| 日本欧美视频一区| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产精品一二三区在线看| 亚洲av电影在线进入| 久久青草综合色| 日韩视频在线欧美| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久久久久久亚洲中文字幕| av免费观看日本| 少妇熟女欧美另类| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 日日摸夜夜添夜夜爱| 成年女人在线观看亚洲视频| 最新中文字幕久久久久| 在线观看www视频免费| 99视频精品全部免费 在线| av一本久久久久| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 视频在线观看一区二区三区| 美女内射精品一级片tv| 午夜福利,免费看| √禁漫天堂资源中文www| av线在线观看网站| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 免费日韩欧美在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 高清av免费在线| 丁香六月天网| 午夜av观看不卡| av不卡在线播放| 欧美人与善性xxx| 精品久久蜜臀av无| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 免费黄色在线免费观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 成年动漫av网址| 草草在线视频免费看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 大话2 男鬼变身卡| 久久韩国三级中文字幕| 久久av网站| 十分钟在线观看高清视频www| 久久久久久人妻| 1024视频免费在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 久久久久国产网址| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产xxxxx性猛交| 又大又黄又爽视频免费| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 男的添女的下面高潮视频| 国产成人a∨麻豆精品| 午夜免费男女啪啪视频观看| 女人精品久久久久毛片| 久热久热在线精品观看| 18在线观看网站| 亚洲欧美清纯卡通| 日本黄大片高清| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 香蕉精品网在线| 人成视频在线观看免费观看| 婷婷色综合www| 考比视频在线观看| 欧美国产精品一级二级三级| 国产xxxxx性猛交| 成人手机av| 国产69精品久久久久777片| 亚洲av电影在线进入| 青青草视频在线视频观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产国语露脸激情在线看| 97人妻天天添夜夜摸| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产精品久久久久久av不卡| 十八禁网站网址无遮挡| 久久久久人妻精品一区果冻| 熟女av电影| 午夜激情久久久久久久| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲av.av天堂| 美女视频免费永久观看网站| 久久久亚洲精品成人影院| 91精品伊人久久大香线蕉| videosex国产| 国精品久久久久久国模美| 午夜免费男女啪啪视频观看| 人人澡人人妻人| 两个人免费观看高清视频| 亚洲国产精品专区欧美| 天堂俺去俺来也www色官网| 久久99蜜桃精品久久| 下体分泌物呈黄色| 亚洲第一区二区三区不卡| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 欧美另类一区| 欧美精品高潮呻吟av久久| 成人国语在线视频| 高清毛片免费看| 成人手机av| 国产一级毛片在线| freevideosex欧美| 春色校园在线视频观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| av卡一久久| 亚洲精品美女久久av网站| 最近中文字幕高清免费大全6| 考比视频在线观看| 视频中文字幕在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 另类精品久久| 久久精品国产自在天天线| 成年av动漫网址| 男人操女人黄网站| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲国产精品一区三区| 久久久久久久久久成人| 男女高潮啪啪啪动态图| 久久精品国产亚洲av涩爱| 丰满乱子伦码专区| 欧美+日韩+精品| 九色成人免费人妻av| 18禁观看日本| 成人黄色视频免费在线看| 日韩一区二区三区影片| 国产精品偷伦视频观看了| 如何舔出高潮| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 你懂的网址亚洲精品在线观看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲成色77777| 久久青草综合色| 国产成人精品在线电影| 嫩草影院入口| 高清视频免费观看一区二区| 精品少妇内射三级| 大香蕉久久网| 最近手机中文字幕大全| 男的添女的下面高潮视频| 国产精品熟女久久久久浪| 日韩人妻精品一区2区三区| 日韩 亚洲 欧美在线| 精品福利永久在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 天天操日日干夜夜撸| 狂野欧美激情性bbbbbb| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 久久精品久久久久久久性| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 如何舔出高潮| 国产一区二区在线观看日韩| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 香蕉精品网在线| 亚洲综合色惰| 久久精品国产亚洲av天美| 日韩中文字幕视频在线看片| 曰老女人黄片| 国产精品一国产av| 久久午夜福利片| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 18禁观看日本| 一本色道久久久久久精品综合| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| av免费在线看不卡| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美xxⅹ黑人| a级片在线免费高清观看视频| 中文字幕人妻熟女乱码| 卡戴珊不雅视频在线播放| 18+在线观看网站| 26uuu在线亚洲综合色| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 丁香六月天网| 只有这里有精品99| 在现免费观看毛片| 色5月婷婷丁香| 日本vs欧美在线观看视频| 一二三四在线观看免费中文在 | 久久av网站| 青春草亚洲视频在线观看| 亚洲中文av在线| 美女福利国产在线| 人成视频在线观看免费观看| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲人成77777在线视频| 最近中文字幕高清免费大全6| 欧美97在线视频| 中国国产av一级| 欧美日韩av久久| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 午夜激情av网站| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产精品免费大片| 国产精品久久久av美女十八| 欧美精品国产亚洲| 新久久久久国产一级毛片| 青春草视频在线免费观看| 亚洲性久久影院| 久久久久精品久久久久真实原创| 一级毛片我不卡| 亚洲,欧美,日韩| 99热国产这里只有精品6| 欧美少妇被猛烈插入视频| 久久人人97超碰香蕉20202| 伊人亚洲综合成人网| 在线观看免费高清a一片| 精品亚洲成国产av| 99香蕉大伊视频| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲精品一二三| 女人久久www免费人成看片| 精品国产一区二区久久| 热re99久久国产66热| 日韩电影二区| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲欧美清纯卡通| 国产探花极品一区二区| 色吧在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 国产成人精品久久久久久| 国产精品女同一区二区软件| 国产又爽黄色视频| 婷婷色综合大香蕉| 国产 精品1| 亚洲成人av在线免费| 黄色怎么调成土黄色| 国产精品久久久久久av不卡| 天堂俺去俺来也www色官网| 熟女电影av网| 欧美性感艳星| 免费黄频网站在线观看国产| 久久久久久久久久久久大奶| 91精品国产国语对白视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 街头女战士在线观看网站| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 九九在线视频观看精品| 亚洲精品国产色婷婷电影| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产一区二区三区av在线| 老司机影院成人| 精品人妻在线不人妻| 日本wwww免费看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 韩国av在线不卡| 久久久亚洲精品成人影院| 丝瓜视频免费看黄片| 免费观看a级毛片全部| 黄色 视频免费看| 一级毛片 在线播放| 午夜免费观看性视频| 国产精品久久久久久av不卡| 欧美xxⅹ黑人| 秋霞在线观看毛片| 成人国产av品久久久| 亚洲国产日韩一区二区| 在线观看免费高清a一片| 久久国产精品大桥未久av| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 一级片免费观看大全| 成人无遮挡网站| 性色av一级| 国产午夜精品一二区理论片| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产精品女同一区二区软件| 自线自在国产av| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲精品一二三| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产熟女午夜一区二区三区| 啦啦啦啦在线视频资源| 插逼视频在线观看| 天堂8中文在线网| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲国产av新网站| 国产亚洲一区二区精品| 成人毛片60女人毛片免费| 美女福利国产在线| 亚洲经典国产精华液单| 制服人妻中文乱码| 亚洲av在线观看美女高潮| 69精品国产乱码久久久| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲第一区二区三区不卡| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 搡女人真爽免费视频火全软件| 黄色视频在线播放观看不卡| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲 欧美一区二区三区| 午夜免费男女啪啪视频观看| 午夜久久久在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 最新的欧美精品一区二区| 日韩 亚洲 欧美在线| 永久免费av网站大全| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 精品久久久久久电影网| 国产乱来视频区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| videossex国产| 黄色配什么色好看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 日韩欧美一区视频在线观看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 久久毛片免费看一区二区三区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 成年美女黄网站色视频大全免费| 亚洲国产色片| 成年美女黄网站色视频大全免费| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 咕卡用的链子| www.av在线官网国产| 国产综合精华液|