支氣管擴張癥患者血清鎖鏈素、炎性指標表達水平及其與部分臨床表型的相關(guān)性研究

李 進，孟凡亮

（安徽醫(yī)科大學(xué)附屬巢湖醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，安徽 合肥 238000）

支氣管擴張癥（bronchiectasis，BE）是由多種病因引起的中小支氣管反復(fù)化膿性感染、損傷，最終引起支氣管持久性擴張[1]。一般認為酶、感染、炎癥是主要病因，三者相互作用造成氣道的持續(xù)破壞[2]，最終造成肺功能下降，生活質(zhì)量降低。氣道炎癥在慢性呼吸道疾病中起著核心作用，特別是在BE 中[3，4]。蛋白酶機制與支氣管擴張癥的嚴重程度、臨床表現(xiàn)相關(guān)，并且是目前治療的靶點[3，4]。蛋白酶通過多種機制包括對抗感染、調(diào)節(jié)炎癥、組織重構(gòu)等參與BE的發(fā)生發(fā)展[5]。中性粒細胞彈性蛋白酶（neutrophil elastase，NE）是其中關(guān)鍵生物標志物，已有研究表明[6，7]，支氣管擴張患者支氣管肺泡灌洗液中活性NE 水平高于健康對照組。NE 降解彈性蛋白產(chǎn)生的鎖鏈素和異鎖鏈素[8]，通過測量血清鎖鏈素的水平可以評估NE 活性及彈性蛋白的降解程度。感染是引起B(yǎng)E 的常見原因，IL-6、hs-CRP、PCT 是臨床上常用來反映免疫炎癥損傷和和感染嚴重程度的指標[9]，而這些炎癥指標與BE 嚴重程度及臨床表型間是否存在關(guān)聯(lián)報道少見。支氣管擴張癥存在異質(zhì)性，不同臨床表型間特征和療效亦存在差異，區(qū)分臨床表型將為個體化治療提供幫助。本研究根據(jù)Aliberti S 等[10]研究選取合并COPD、檢出銅綠假單胞菌這兩種常見臨床表型進行分析，旨在探討不同表型間酶及炎癥標志物表達水平是否存在差異，并評估患者的生活質(zhì)量及預(yù)后情況，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021 年1 月-2022 年3 月就診于安徽醫(yī)科大學(xué)附屬巢湖醫(yī)院呼吸與危重癥科的BE 患者128 例，根據(jù)BSI 評分（0～4 分為輕度、5～8 分為中度、≥9 分為重度）、是否合并COPD、是否檢出銅綠假單胞菌，其中30 例輕度組、30 例中度組、30 例重度組、20 例為合并COPD 組、18 例為銅綠假單胞菌組。選取30 例同期在本院體檢的健康者為對照組。輕、中、重度組的納入標準為：①符合《中國成人支氣管擴張癥診斷與治療專家共識》中的診斷標準[1]；②經(jīng)HRCT 確診；③臨床資料完整。排除標準：①合并其他肺部疾?。虎诿庖呦到y(tǒng)存在異常者；③合并腫瘤者。銅綠假單胞菌組，需痰標本檢測出銅綠假單胞菌。合并COPD 組患者，需符合《慢性阻塞性肺疾病診治指南》[11]的診斷標準。本研究經(jīng)倫理委員會批準，患者及家屬知情同意，簽署知情同意書。各組年齡、性別、BMI 比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1，研究可行。

表1 各組一般資料比較（n，）

表1 各組一般資料比較（n，）

1.2 方法 收集研究對象一般資料，包括性別、年齡、體重指數(shù)。所有患者采集入院當(dāng)天（對照組患者采集體檢當(dāng)天）空腹靜脈血5 ml，靜置30 min，3000 r/min 離心，取上層血清，-80 ℃保存?zhèn)錂z。采用雙抗體夾心法檢測DES，試劑盒由江蘇酶免實業(yè)有限公司生產(chǎn)。hs-CRP 采用免疫比濁法檢測，IL-6采用上轉(zhuǎn)發(fā)光檢測，PCT 采用酶聯(lián)免疫吸附法測定。所有操作嚴格按照試劑說明進行。采集患者痰標本5 ml 進行細菌檢測。檢測所有入組患者肺功能（包括FEV1%pred、FEV1/FVC 等），評測CAT 量表（包括是否存在咳嗽咳痰、胸悶等8 項指標，分值范圍0～40 分，其中0～10 分為輕度影響生活，11～20 分為中度影響，20～30 分為重度影響，＞30 分為非常嚴重影響）。采用支擴嚴重程度指數(shù)（bronchiectasis severity index，BSI）評估患者病情，評分共8 個項目?？偟梅州p度0～4 分，中度5～8分，≥9 分為重度。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 22.0 進行分析。計量資料符合正態(tài)分布采用（）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗；兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以（n）表示，組間比較采用χ2檢驗；正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用Pearson 相關(guān)性分析。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清DES、炎性指標、肺功能、BSI、CAT 評分比較 BSI 分數(shù)越高，血清DES、hs-CRP、PCT、IL-6表達水平越高，CAT 評分越高，肺功能越差，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2、表3。

表2 對照組、輕、中、重組患者血清DES、IL-6、hs-CRP、PCT 表達水平比較（）

表2 對照組、輕、中、重組患者血清DES、IL-6、hs-CRP、PCT 表達水平比較（）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與輕度組比較，bP＜0.05；與中度組比較，cP＜0.05

表3 輕、中、重組患者FEV1/FVC（%）、BSI 及CAT 評分比較（）

表3 輕、中、重組患者FEV1/FVC（%）、BSI 及CAT 評分比較（）

注：與輕度組比較，*P＜0.05；與中度組比較，#P＜0.05

2.2 重度組、合并COPD 組、銅綠假單胞菌組血清DES、hs-CRP、PCT、IL-6 表達水平，CAT 評分，F(xiàn)EV1/FVC 比較 合并COPD 組血清DES、CAT 評分高于重度組、FEV1/FVC 低于重度組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而血清PCT、IL-6、hs-CRP 及BSI 評分與重度組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；銅綠假單胞菌組血清DES、hs-CRP、PCT、CAT 評分高于重度組，F(xiàn)EV1/FVC 低于重度組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而血清IL-6、BSI 評分與重度組差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表4。

表4 銅綠假單胞菌組、合并COPD 組與重度組患者各項數(shù)據(jù)比較（）

表4 銅綠假單胞菌組、合并COPD 組與重度組患者各項數(shù)據(jù)比較（）

注：t、P 為重度組與銅綠假單胞菌組t 檢驗結(jié)果；t′、P′為重度組與合并COPD 組t 檢驗結(jié)果

2.3 所有患者血清DES 與BSI、FEV1/FVC、CAT 評分的相關(guān)性 血清DES 與BSI 評分呈正相關(guān)（r=0.672，P＜0.05），與FEV1/FVC 呈負相關(guān)（r=-0.724，P＜0.05），與CAT 分數(shù)呈正相關(guān)（r=0.794，P＜0.05），見圖1～圖3。

圖1 DES 與BSI 相關(guān)性

圖2 DES 與FEV1/FVC 相關(guān)性

圖3 DES 與CAT 評分相關(guān)性

3 討論

支氣管擴張癥（BE）是一種異質(zhì)性較大的慢性呼吸系統(tǒng)疾病，把握病情的嚴重程度、探索其表型對個體化治療及改善預(yù)后具有重要意義。相關(guān)研究表明[12]，蛋白酶活性的增加可能有助于支氣管擴張癥的發(fā)生和進展。有學(xué)者認為蛋白酶-抗蛋白酶平衡機制是治療支氣管擴張癥[13，14]的靶點。中性粒細胞彈性蛋白酶（NE）通過損害機體的正常免疫反應(yīng)、降解肺組織彈性蛋白及纖維蛋白、募集炎癥因子等途徑參與BE 的發(fā)病過程[12，15]。DES 是NE 水解成熟彈性蛋白產(chǎn)物之一，當(dāng)患者肺部發(fā)生感染或者炎癥時，血液中性粒細胞及巨噬細胞會釋放大量彈性蛋白酶導(dǎo)致富含彈性蛋白的組織結(jié)構(gòu)破壞與功能障礙，血液中DES 水平升高[16]。

本研究結(jié)果顯示，輕、中、重度組患者血清DES、hs-CRP、PCT、IL-6 表達水平明顯升高，且隨病情加重而增加；CAT 評分與FEV1/FVC 檢測結(jié)果提示，患者肺功能與生活質(zhì)量隨病情增加而下降。這其中存在的原因和機制可能是：肺組織中具有極其豐富的彈性纖維，而彈性蛋白是成熟彈性纖維的主要成分，NE 能降解彈性蛋白進而破壞肺組織，反復(fù)發(fā)生的支氣管炎癥刺激并提高NE 的活性，致使支氣管壁破壞，引起支氣管異常和持久性的擴張。

合并COPD 組血清DES 水平高于重度組，而炎癥指標與重度組未見明顯差異，CAT 評分與FEV1/FVC 顯示合并COPD 的患者肺功能更差。COPD 本身是一個慢性炎癥性疾病，長期的炎癥環(huán)境刺激NE 加速破壞肺組織可能是合并COPD 的BE 患者肺功能更差的原因。銅綠假單胞菌組患者血清DES、hs-CRP、PCT、IL-6 均高于重度組，其CAT 評分與FEV1/FVC 結(jié)果亦提示肺功能更差，推測有以下原因，一是革蘭陰性菌可以釋放大量脂多糖類內(nèi)毒素，而內(nèi)毒素可以明顯促進一些炎癥標志物的表達[17]。二是銅綠假單胞菌可以促進中性粒細胞聚集和NE 釋放[18]，而NE 可以上調(diào)多種炎癥趨化因子[19]。

另外，所有患者血清DES 與BSI、CAT 評分、FEV1/FVC 的相關(guān)性分析結(jié)果提示：血清DES 水平與病情嚴重程度呈正相關(guān)，與肺功能呈負相關(guān)。印證了蛋白酶-抗蛋白酶機制失衡、NE 活性增加，致使肺彈性組織的破壞，是支氣管擴張癥進展的一個重要原因。

綜上所述，支氣管擴張癥患者血清DES、hs-CRP、PCT、IL-6 水平明顯升高，且血清DES 與病情呈正相關(guān)，提示血清DES 與病情發(fā)展有重要關(guān)聯(lián)，血清DES 可作為評估病情的參考指標，也為支氣管擴張癥的靶向治療提供新思路。支氣管擴張癥不同臨床表型血清DES 與炎癥指標存在差異，區(qū)分支氣管擴張癥臨床表型可為個體化治療提供新策略。本研究存在樣本量過少，檢測病原菌方法過于單一，未能進行療效分析，對臨床上的指導(dǎo)治療意義有限，需要增大樣本量，細化臨床分型，增加肺泡灌洗液細菌檢測等進一步研究。