寧夏桶裝飲用水中銅綠假單胞菌污染情況分析及預(yù)防控制措施研究

◎ 馮秀娟，高俊峰，蘇 洋，吳 明

（寧夏回族自治區(qū)食品檢測(cè)研究院，寧夏 銀川 750000）

近年來(lái)，隨著生活水平的提高，人們對(duì)自身健康越來(lái)越重視，對(duì)水的質(zhì)量要求不斷提高。目前，包裝飲用水已在人們的日常生活中得到普及[1]。然而，桶裝水也存在眾多問(wèn)題，相關(guān)的質(zhì)量安全問(wèn)題報(bào)道層出不窮[2-4]。2014 年出臺(tái)的《食品安全標(biāo)準(zhǔn) 包裝飲用水》規(guī)定，在被抽檢的5 份樣品中，不允許任一件樣品檢出銅綠假單胞菌[5]。隨著《包裝飲用水》（GB 19298—2014）實(shí)施后，多地對(duì)桶裝水的監(jiān)督抽檢中，屢有檢出銅綠假單胞菌的報(bào)告[6-8]。目前，桶裝水中銅綠假單胞菌污染問(wèn)題不斷凸顯[9]，成為公眾飲水衛(wèi)生的重大隱患，給人們的身體健康帶來(lái)危害。

銅綠假單胞菌是一種食源性和水源性致病菌，能夠以群體感應(yīng)生成生物膜來(lái)保護(hù)菌體和促進(jìn)菌體適應(yīng)不良環(huán)境[10-14]，對(duì)抵抗力較弱的老弱病幼孕等人群具有較大的潛在健康風(fēng)險(xiǎn)。因此，探討銅綠假單胞菌產(chǎn)生的原因，并提出解決方法，對(duì)預(yù)防銅綠假單胞菌污染尤為重要[9]。為了充分掌握寧夏包裝飲用水中銅綠假單胞菌的污染情況。本文著重分析了2017—2022 年寧夏食品監(jiān)督抽檢包裝飲用水抽檢信息，采集了不同飲用水生產(chǎn)企業(yè)各個(gè)環(huán)節(jié)的水樣，進(jìn)行銅綠假單胞菌檢測(cè)，找到了銅綠假單胞菌污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，討論了企業(yè)現(xiàn)存的問(wèn)題，并提出了預(yù)防控制措施，旨在為市場(chǎng)監(jiān)管部門重點(diǎn)監(jiān)管，桶裝飲用水企業(yè)生產(chǎn)工藝改進(jìn)、產(chǎn)品質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 樣品樣本采集自寧夏省內(nèi)部分包裝飲用水生產(chǎn)企業(yè)的各個(gè)環(huán)節(jié)以及市場(chǎng)抽檢環(huán)節(jié)的各批次樣品。

1.1.2 培養(yǎng)基與試劑

CN 瓊脂、綠農(nóng)菌素測(cè)定用培養(yǎng)基、金氏B 培養(yǎng)基、鈉氏試劑、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、氧化酶試劑、乙酰胺液體培養(yǎng)基等均購(gòu)自北京路橋；銅綠假單胞菌LAMP 檢測(cè)試劑盒購(gòu)自廣東迪奧生物科技有限公司；VITEK2 GN卡（梅里埃）。

1.2 儀器與設(shè)備

恒溫培養(yǎng)箱、生物安全柜、過(guò)濾裝置、VITEK2微生物全自動(dòng)鑒定系統(tǒng)和熒光定量PCR 儀。

1.3 試驗(yàn)方法

根據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》（GB 8538—2016）中57 要求進(jìn)行試驗(yàn)，同時(shí)采用《包裝飲用水中銅綠假單胞菌的快速檢測(cè)方法》（DB64/T 1682—2019）同步驗(yàn)證。

2 結(jié)果與分析

2.1 基本概況

通過(guò)分析總結(jié)2017—2022 年寧夏包裝飲用水監(jiān)督抽檢情況可知，近6 年來(lái)銅綠假單胞菌均有檢出。為探討銅綠假單胞菌的污染與產(chǎn)品包裝方式是否存在關(guān)聯(lián)，對(duì)2017—2022 年數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總，2017 年銅綠假單胞菌的總批次檢出率最高，為5.1%，之后呈逐年下降趨勢(shì)；歷年抽檢中瓶裝水抽檢數(shù)量占比較高，但其銅綠假單胞菌的檢出率為0%；每年桶裝水均有檢出，其檢出率最高達(dá)16.7%，結(jié)果如表1 所示。由表1 可知，經(jīng)過(guò)近幾年的嚴(yán)格把關(guān)，寧夏的包裝飲用水總體品質(zhì)改善明顯，各廠家對(duì)產(chǎn)品的品質(zhì)管控意識(shí)提高，監(jiān)督效果明顯；桶裝飲用水是銅綠假單胞菌污染的關(guān)鍵點(diǎn)，桶裝水包裝容器一直在重復(fù)利用，每次要進(jìn)行消毒處理，該過(guò)程會(huì)存在微生物污染，因此可將桶裝水生產(chǎn)企業(yè)作為重點(diǎn)研究對(duì)象。

表1 2017—2022 年寧夏瓶裝水、桶裝水抽檢批次與銅綠假單胞菌檢出率表

2.2 不同生產(chǎn)環(huán)節(jié)桶裝水銅綠假單胞菌檢出結(jié)果分析

選擇桶裝水企業(yè)不同生產(chǎn)環(huán)節(jié)，即水源水、沖洗容器水、清洗后容器、精濾后水及罐裝口等部位采集水樣，共計(jì)129 份樣品。采用國(guó)標(biāo)方法檢測(cè)129 份樣，共檢出銅綠假單胞菌30 份，同時(shí)經(jīng)VITEK2 與熒光定量PCR 法驗(yàn)證，確定為銅綠假單胞菌（圖1）。由表2 可知，銅綠假單胞菌陽(yáng)性率為23.3%，各生產(chǎn)環(huán)節(jié)銅綠假單胞菌的檢出率分別是水源水16.7%，沖洗容器水25.0%，清洗后容器40.0%，灌裝口水11.1%。5 個(gè)環(huán)節(jié)中所用容器的清洗環(huán)節(jié)是污染的關(guān)鍵點(diǎn)。30 份檢出的銅綠假單胞菌有1 株為典型的淺藍(lán)色（圖2a），1 株為深綠色（圖2b），其余菌落均為淺綠色，30 株菌均產(chǎn)熒光，未檢出紅褐色與非藍(lán)色產(chǎn)熒光菌。分析數(shù)據(jù)可知，清洗后容器銅綠假單胞菌的檢出率最高，涉及的企業(yè)達(dá)到63.6%，由此可知容器清洗環(huán)節(jié)較易出現(xiàn)問(wèn)題，值得所有企業(yè)重點(diǎn)關(guān)注、重點(diǎn)把控。

圖1 部分樣品熒光PCR 檢測(cè)結(jié)果圖

圖2 CN 平板上生長(zhǎng)的銅綠假單胞菌圖

表2 桶裝飲用水各環(huán)節(jié)銅綠假單胞菌檢測(cè)結(jié)果表

3 討論

3.1 污染原因分析

桶裝飲用水生產(chǎn)企業(yè)的流程一般為水源水→粗濾→精濾→[離子交換、反滲透（適用于純凈水）]→殺菌→灌裝封蓋[瓶（桶）及其蓋的清洗消毒]→燈檢→成品[15]。整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程中水源水、管道及設(shè)備等的維護(hù)及清洗消毒、桶及其蓋的清洗消毒、灌裝車間環(huán)境衛(wèi)生和潔凈度的控制、人員管理等環(huán)節(jié)容易出現(xiàn)質(zhì)量安全問(wèn)題。

（1）水源水污染。本次試驗(yàn)中有兩家企業(yè)水源水出現(xiàn)問(wèn)題，一家水源為山泉水，一家為自來(lái)水。采集水樣時(shí)，企業(yè)均在停產(chǎn)維修階段，所以試驗(yàn)結(jié)果不具有代表性，從另一角度看，水源水存在污染的可能性，一旦水源污染，在后續(xù)的生產(chǎn)中無(wú)法去除，會(huì)造成持續(xù)污染。

（2）桶及其蓋的清洗消毒不徹底。該環(huán)節(jié)是本次試驗(yàn)中最關(guān)鍵的污染源。企業(yè)為節(jié)省成本，一般對(duì)水桶進(jìn)行回收再利用，回收的桶在用前要清洗消毒。因桶的特殊構(gòu)造，不利于清洗消毒，部分企業(yè)沒(méi)有配備清洗水桶的專用設(shè)備，致使桶消毒不徹底，微生物殘留造成交叉污染。同時(shí)，某些企業(yè)也配備了清洗水桶的專用設(shè)備，但設(shè)置的清洗程序以及所用的消毒劑的濃度達(dá)不到清洗要求，清洗桶用的水沒(méi)有嚴(yán)格把控，自身就是污染源。

（3）灌裝車間環(huán)境衛(wèi)生和潔凈度的控制同樣影響水的質(zhì)量。部分企業(yè)的灌裝車間的潔凈度并未達(dá)到萬(wàn)級(jí)要求，環(huán)境潮濕、常有積水，銅綠假單胞菌在潮濕環(huán)境下容易滋生。試驗(yàn)顯示在此類企業(yè)采集的樣品中銅綠假單胞菌的檢出率普遍較高，平板上生長(zhǎng)的微生物種類較多，嚴(yán)重影響水的質(zhì)量。

（4）生產(chǎn)設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)不及時(shí)、貯水罐和管道無(wú)沖洗消毒設(shè)施、人員管理松散未洗手消毒就進(jìn)入生產(chǎn)車間，操作人員缺乏工作防護(hù)用品。貯水罐沒(méi)有樣品采集口，無(wú)法做到該過(guò)程的水質(zhì)監(jiān)測(cè)。有些生產(chǎn)企業(yè)未設(shè)置化驗(yàn)室，有化驗(yàn)室的企業(yè)檢驗(yàn)條件又十分簡(jiǎn)陋，最終導(dǎo)致桶裝水檢驗(yàn)形同虛設(shè)。大多數(shù)的生產(chǎn)企業(yè)主要靠政府監(jiān)督抽檢發(fā)現(xiàn)其產(chǎn)品問(wèn)題，都是被動(dòng)檢驗(yàn)，企業(yè)自我防控意識(shí)不強(qiáng)[9]。

3.2 預(yù)防污染控制措施

①政府要嚴(yán)把準(zhǔn)入關(guān)。嚴(yán)格控制桶裝水企業(yè)的發(fā)證審核，對(duì)不滿足審查許可準(zhǔn)則的企業(yè)決不發(fā)證，杜絕不符合要求的產(chǎn)品流入市場(chǎng)。②定期監(jiān)測(cè)水源水[16]。企業(yè)所用源水要定期進(jìn)行檢測(cè)，確保源水不受污染；在水源水進(jìn)入粗濾前配備裝置進(jìn)行紫外殺菌可提高源水質(zhì)量。③加強(qiáng)環(huán)境衛(wèi)生管理。按照規(guī)定將生產(chǎn)區(qū)域劃分為一般作業(yè)區(qū)、非潔凈區(qū)、潔凈區(qū)，操作人員穿戴符合要求才可進(jìn)入相應(yīng)的工作區(qū)域。生產(chǎn)前，車間及設(shè)備設(shè)施要進(jìn)行消毒處理，地面積水及時(shí)處理，操作間保持干燥整潔。④重視回收桶及其蓋的清洗消毒?？胀盎厥蘸笠庞诟稍餄崈舻膮^(qū)域中，桶的清洗消毒極為重要，該環(huán)節(jié)控制到位，能大大提高產(chǎn)品質(zhì)量。生產(chǎn)企業(yè)采用市面上銷售的次氯酸鈉、二氧化氯、過(guò)氧乙酸、過(guò)氧化氫等消毒劑盡可能探索出最佳的消毒條件及消毒劑種類，防止因消毒不徹底而出現(xiàn)交叉污染。同時(shí)，要控制清洗流程，做到預(yù)清洗、洗滌劑/消毒劑清洗、沖洗、成品水沖洗等環(huán)節(jié)，避免洗滌劑、消毒劑殘留。⑤加強(qiáng)人員管理。人員的衛(wèi)生狀況直接影響水的質(zhì)量，尤其在灌裝口，操作人員的手未經(jīng)消毒直接抓瓶口加蓋蓋子，造成二次污染。因此，應(yīng)做好人員教育與培訓(xùn)，強(qiáng)化操作人員安全意識(shí)、衛(wèi)生意識(shí)，加大對(duì)技術(shù)人員的培養(yǎng)力度，做好出廠檢驗(yàn)。

3.3 消費(fèi)提醒

雖然包裝飲用水備受人們青睞，但安全意識(shí)應(yīng)提高。消費(fèi)者購(gòu)買桶裝水時(shí)，要盡量選擇規(guī)模大、知名度高、售后服務(wù)好、社會(huì)口碑好的桶裝水企業(yè)。此外，桶裝水量大，時(shí)間長(zhǎng)會(huì)滋生細(xì)菌，無(wú)論是家用還是公共場(chǎng)所，都要燒開(kāi)再飲用。