• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    石榴離體再生體系建立及遺傳轉(zhuǎn)化技術研究進展

    2023-05-18 11:59:07劉春儲思媛李錦錦
    安徽農(nóng)學通報 2023年4期
    關鍵詞:遺傳轉(zhuǎn)化石榴

    劉春 儲思媛 李錦錦

    摘要 石榴果實營養(yǎng)豐富,樹形優(yōu)美,花色鮮艷,果形奇特,是一種兼具食用觀賞價值的經(jīng)濟樹種,在國內(nèi)深受大眾喜愛。我國石榴種質(zhì)資源豐富,栽培歷史悠久。然而近年來由于栽培技術落后,生產(chǎn)管理粗放,導致品種退化、樹勢減退。隨著生活水平提高和經(jīng)濟的發(fā)展,人們對石榴的品質(zhì)要求日益提高,因而培育優(yōu)質(zhì)果苗,篩選優(yōu)良品種成為石榴生產(chǎn)的必然趨勢。采用離體培養(yǎng)技術及構(gòu)建遺傳轉(zhuǎn)化體系,對培育脫毒苗和選育優(yōu)良品種提供了技術手段。通過對國內(nèi)外研究成果進行收集分析,對石榴離體培養(yǎng)及遺傳轉(zhuǎn)化技術、現(xiàn)狀、問題分析及未來研究發(fā)展趨勢等進行闡述,以期為開展石榴的科學研究和生產(chǎn)實踐提供理論基礎和科學依據(jù)。

    關鍵詞 石榴;離體培養(yǎng);再生體系;遺傳轉(zhuǎn)化

    中圖分類號 S665.4? ?文獻標識碼 A

    文章編號 1007-7731(2023)04-0017-05

    Research Progress on Establishment of in Vitro Regeneration System and Genetic

    Transformation Technology of Pomegranate

    LIU Chun? ?CHU Siyuan? ?LI Jinjin

    (College of Life Sciences, Huaibei Normal University, Huaibei Anhui 235000)

    Abstract Pomegranate has rich nutrition, beautiful tree shape, bright colors and peculiar fruit shape.It is an economic tree species with edible and ornamental value. It is deeply loved by the public in China.China is rich in pomegranate germplasm resources and has a long history of cultivation.However, in recent years, due to backward cultivation techniques and extensive production management, varieties have degenerated and tree vigor has decreased.With the improvement of living standards and economic development, people's requirements for the quality of pomegranate are increasing.Cultivating high quality seedlings and screening excellent varieties have become the inevitable trend of pomegranate production. In vitro culture technology and genetic transformation system were used to provide technical means for cultivating virus-free seedlings and breeding excellent varieties. By collecting and analyzing the research results at home and abroad, this paper expounds the in vitro culture and genetic transformation technology, current situation, problem analysis and future research development trend of pomegranate, in order to provide theoretical basis and basis for scientific research and production practice of pomegranate.

    Keywords pomegranate; in vitro culture; regeneration system; genetic transformation

    石榴(Punica granatum L.)屬石榴科石榴屬植物,是一種深受人們喜愛的水果,綜合應用價值極高[1]。其花期一般在5—6月,果期大多為9—10月。適應于溫暖的環(huán)境,對土壤要求不嚴,總體生存能力較強,在溫帶與熱帶地區(qū)均有種植。我國栽培歷史可上溯至漢代,據(jù)陸鞏記載是張騫從西域引入。在中國以江蘇、河南等地種植面積較大,有一些廣為人知的優(yōu)良品種,如“紅石榴”“河陰石榴”“黃里石榴”等。其中,“黃里石榴”是安徽省淮北市的特產(chǎn),色澤光鮮,味道鮮美可口,深受人們歡迎。

    石榴是一種漿果,果實晶瑩剔透,顆粒飽滿,宛如紅寶石,味道酸甜可口,含有豐富的糖類、維生素C等,可以為人們補充身體所需能量。石榴中還富含多酚類與黃酮類物質(zhì),具有一定的抗衰老和抗氧化功效。石榴全身是寶,花、葉、果、果皮、果核均可入藥。相關研究表明,石榴對提高老年人的免疫力,維持身體健康具有一定的作用。同時,石榴花、果、葉優(yōu)美,具有較高的觀賞價值。

    過去由于國內(nèi)長期關注蘋果、梨等大宗水果的發(fā)展,而對石榴的研究起步較晚,所以總體水平相對落后,影響了石榴優(yōu)良品種的合理開發(fā)和資源的優(yōu)化配置。此外,在石榴栽培過程中由于栽培技術落后,管理粗放,樹體易感染病害,主要包括白腐病、黑痘病、炭疽病,從而導致樹勢減退,品種退化。隨著我國經(jīng)濟的發(fā)展和人們生活水平的提高,對石榴的品質(zhì)需求日益增加,培育壯苗和篩選優(yōu)良品種已成為石榴生產(chǎn)的必然趨勢。采用離體培養(yǎng)技術及構(gòu)建遺傳轉(zhuǎn)化體系,對培育脫毒苗和選育優(yōu)良品種具有重要的意義。筆者通過查閱相關文獻資料,對近年來有關石榴離體培養(yǎng)及遺傳轉(zhuǎn)化的研究了進行總結(jié)分析,并對其發(fā)展前景做出了展望,以期為石榴育種研究提供一定的理論基礎和科學依據(jù)。

    1 石榴的離體培養(yǎng)研究

    1.1 外植體選擇

    在石榴組培生產(chǎn)過程中,外植體的選擇非常廣泛,目前國內(nèi)外以莖尖、莖段、葉柄、成熟葉片、嫩葉等為外植體進行組織離體培養(yǎng),先后獲得了成功。閆志佩[2]以新梢莖尖為外植體快速繁殖獲得無毒試管苗,成功挽救了軟籽石榴瀕危品種;程江華[3]通過對莖尖、莖段、成熟葉片、真葉、上胚軸、種子7種外植體的試驗得出葉片是最佳的外植體;陳海燕[4]以靠近基部的萌生枝條、根蘗等作為外植體培養(yǎng)建立了泰山紅石榴快速繁殖體系。外植體的選擇對試驗結(jié)果有著關鍵作用,必須按照一定的依據(jù)選擇合適的外植體進行試驗。

    1.2 外植體存活

    影響外植體存活的因素有很多,如光照、溫度、濕度、試驗操作技術、培養(yǎng)基等培養(yǎng)條件。研究表明,光照在石榴的組織培養(yǎng)中起著至關重要的作用,不同光照條件下,外植體的生理狀態(tài)表現(xiàn)出顯著差異,直接影響后續(xù)的生長分化;溫度決定了外植體的呼吸速率,溫度過高或者過低都會使其組織代謝紊亂,試驗中須根據(jù)實際情況合理調(diào)控溫度;濕度的影響主要在于培養(yǎng)容器和培養(yǎng)室的濕度條件,濕度過大會引起外植體發(fā)生褐變,濕度過低會導致外植體生理性脫水,根據(jù)生長環(huán)境適度的調(diào)整適度對外植體的培養(yǎng)至關重要。

    此外,試驗員的操作技術也影響著外植體的生長,如切取外植體的過程中,應盡可能地減少傷口面積,從而有效防止褐變的產(chǎn)生[5];對外植體的消毒是否徹底,也決定了培養(yǎng)的效果。研究表明,試驗前應先將外植體用流水沖洗30 min,再使用70%~75%乙醇浸泡1~2 min,最后用0.1%氯化汞或0.5%NaClO等進行處理,達到消毒作用[6]。材料不同,消毒的方法有所變化。

    1.3 愈傷組織的誘導分化

    在石榴的離體培養(yǎng)中,愈傷組織的形成與分化尤為重要。其中最關鍵的影響因素是植物生長調(diào)節(jié)劑,不同種類、濃度與配比的生長調(diào)節(jié)劑對愈傷組織的誘導與分化作用差異性較大。目前,誘導愈傷組織常用的植物生長調(diào)節(jié)劑是生長素和細胞分裂素。生長素一般使用NAA、IBA、IAA等,而細胞分裂素一般有KT、ZT、6-BA等,其中以6-BA的應用最為廣泛,常用濃度為1.0~3.0 mg/L[7]。

    篩選合適的培養(yǎng)基在一定程度上影響了愈傷組織的分化,程江華[3]通過試驗得出結(jié)論,石榴愈傷組織誘導的最佳激素組合是:MS(基本培養(yǎng)基)+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA。除此之外,蔗糖濃度、pH、滅菌措施、溫度、光照等因素也在不同程度上影響著愈傷組織的誘導與分化。如果培養(yǎng)基中沒有蔗糖,一般情況下就不能誘導產(chǎn)生愈傷組織,通常蔗糖濃度在30~40 g/L,其生長狀況良好,濃度過大或過小都會產(chǎn)生不良后果;pH大小會導致細胞滲透壓發(fā)生變化,從而影響愈傷組織的生長。較多相關文獻表明,乙醇與升汞的有機組合是非常有效的滅菌方法,合理的滅菌組合將有利于石榴愈傷組織的誘導與分化;培養(yǎng)溫度一般設置在25 ℃左右有利于愈傷組織的形成[8]。

    1.4 組培苗誘導生根

    在石榴的生根誘導階段,培養(yǎng)基的選擇至關重要,相關文獻報道,試驗中采用較多的為MS基本培養(yǎng)基,細胞分裂素和生長素的濃度要根據(jù)不同的情況適當控制。培養(yǎng)基中的激素濃度變化對生根率產(chǎn)生了一定的影響。生長素對外植體的生長可以起到促進作用,其濃度一般比細胞分裂素濃度低。陶秀冬等[9]在石榴試管苗的生根誘導試驗中發(fā)現(xiàn),當IBA的濃度較低時,生根率也較低,所以應該適當增加培養(yǎng)基中IBA的濃度,以提高石榴的生根率。張愛民[10]試驗發(fā)現(xiàn),試管苗的生根率和培養(yǎng)基中的NAA濃度相關,若培養(yǎng)基中無NAA或NAA濃度過低,生根數(shù)也會相對較少。同時,大量研究表明,如果能在培養(yǎng)基中加入一些低濃度的蔗糖,將有利于生根,其濃度范圍一般在1.0%~3.0%。整個生根誘導過程也受到諸多因素的影響,如溫度、光照等。一般情況下,石榴組培苗的誘導生根會采用黑暗交替培養(yǎng)的方式,黑暗下培養(yǎng)可以刺激生根,也有利于植株內(nèi)源生長素合成,培養(yǎng)溫度大多控制在25 ℃左右。

    1.5 組培苗移栽

    組培苗在移栽過程中,其成活率的高低受到不同因素的影響,如組培苗的質(zhì)量、移栽的基質(zhì)、移栽技術管理等。苗質(zhì)量越好,成活率越高;移栽基質(zhì)不同,成活率也有差異,移栽前可先進行試驗。大量研究表明,基質(zhì)的透氣性將影響栽培苗的移栽成活率。除此之外,試管苗的移栽成活率與水分、溫度、光照等外界環(huán)境關系密切,移栽最適溫度大多在25 ℃左右,若光照過強會灼燒幼苗,應適當進行遮陰處理[11]。栽培基質(zhì)需事先消毒,一般可噴施5%高錳酸鉀溶液,盡可能防止病蟲害發(fā)生。移栽之前可先進行煉苗,讓植株逐漸適應外部環(huán)境,期間給予適當?shù)臓I養(yǎng)液,待幼苗強壯后再進行移栽,可大幅度提高存活率[12]。因此,試管苗移栽過程應綜合考慮各方面因素,以保證苗木的成活率。

    2 石榴的遺傳轉(zhuǎn)化研究

    2.1 石榴遺傳轉(zhuǎn)化的方法

    遺傳轉(zhuǎn)化技術在石榴育種方面應用廣泛,試驗中常用的遺傳轉(zhuǎn)化方法主要有農(nóng)桿菌介導與DNA直接導入2種,后者又能細分為物理誘導法(基因槍法、注射法、花粉管通道法等)與化學誘導法(如PEG)[13]。

    現(xiàn)階段,農(nóng)桿菌介導法在石榴的遺傳轉(zhuǎn)化方面應用最廣,技術成熟,受到研究者的青睞。應用最多的是根癌農(nóng)桿菌,其作用原理是將農(nóng)桿菌中的Ri質(zhì)?;騎i質(zhì)粒當作基因轉(zhuǎn)化載體,繼而將外源基因?qū)нM植物體基因組,完成轉(zhuǎn)化過程。影響根癌農(nóng)桿菌介導的遺傳轉(zhuǎn)化效率的因素眾多,如菌株的類型、菌液的濃度、外植體的生理狀態(tài)等。通常情況下,農(nóng)桿菌菌株侵染力表現(xiàn)為:農(nóng)桿堿型菌株>胭脂堿型菌株>章魚堿型菌株;農(nóng)桿菌菌液的濃度視具體情況而定;在石榴的遺傳轉(zhuǎn)化中,培養(yǎng)的時間一般為3~4 d,溫度在20~25 ℃;處于發(fā)育幼年期的組織細胞轉(zhuǎn)化能力更強,采用該方法的轉(zhuǎn)化頻率很高,同時轉(zhuǎn)化質(zhì)量也最好。

    基因槍法是一種物理誘導法,利用超速運動的金屬微粒直接將核酸分子引入受體細胞,然后通過離體培養(yǎng)來獲取完整植株。通過這種方法獲取的植株變異率較低,操作方法較為簡便,但也存在一定的缺陷,如費用昂貴,轉(zhuǎn)化效率通常較低等。

    注射法就是利用注射器,在細胞中注射試驗需要的遺傳物質(zhì),再通過組織離體培養(yǎng)獲得植株,這有利于克服遠緣雜交困難,同時能夠保證注射的準確性,但是轉(zhuǎn)化效率低下。該方法在基因槍法出現(xiàn)后已較少應用。

    花粉管通道法的工作原理是將外源DNA注入到子房中,然后進一步進行轉(zhuǎn)化。該方法不需要進行細胞或組織培養(yǎng),但是操作手續(xù)極為嚴格,在試驗中應用不多[14-15]。

    此外,物理誘導還可通過電擊、激光等方式來實現(xiàn),它們之間工作原理相似,都是利用細胞膜將DNA等遺傳物質(zhì)導入細胞中完成轉(zhuǎn)化。這2種方法對于單子葉植物與雙子葉植物均能適用,但也存在較多的問題,現(xiàn)階段應用很少。

    聚乙二醇(PEG)是一種化學物質(zhì),它的作用主要是使細胞膜通透性發(fā)生變化,繼而達到轉(zhuǎn)化目的。這種方法費用較低,結(jié)果精準,不需要復雜精密的儀器,主要缺點是轉(zhuǎn)化植株的變異率高,轉(zhuǎn)化率相對較低。

    2.2 石榴遺傳轉(zhuǎn)化的受體材料

    試驗中不同類型的受體轉(zhuǎn)化率效果差別較大,試驗過程應根據(jù)具體情況,對不同的受體材料進行合理選擇與優(yōu)化。若外植體的生理狀態(tài)活躍,那么轉(zhuǎn)化效率會更高。一般而言,子葉、愈傷組織、上下胚軸、葉片等都是試驗中常用到的受體材料。郭曉麗[16]曾以突尼斯軟籽石榴的葉片愈傷組織作為受體材料進行遺傳轉(zhuǎn)化試驗,成功獲得了抗性愈傷組織并且分化出抗性芽。李躍霞[17]曾對石榴遺傳轉(zhuǎn)化的侵染材料進行篩選,試驗結(jié)果顯示,在試驗條件完全相同的情況下,葉片褐化較嚴重,而愈傷組織的褐化率較低,生長狀態(tài)也良好。石榴遺傳轉(zhuǎn)化受體材料選擇通常需滿足一些條件,如穩(wěn)定的再生體系與來源,并且需要對農(nóng)桿菌侵染有一定的敏感性。

    2.3 遺傳轉(zhuǎn)化植株的鑒定方法

    當前,試驗中遺傳轉(zhuǎn)化的植株鑒定最常用的方法有3種:免疫技術鑒定、標記基因的篩選鑒定與分子水平上的鑒定。

    免疫技術有很多種類型,常見的有免疫熒光法和酶聯(lián)免疫法。前者必須以抗體為基礎進行檢測,利用顯微鏡觀察檢測抗體發(fā)出的熒光;后者是利用加上酶的抗體去檢測抗原,這種方法目前也被廣泛使用。

    標記基因主要可以分成選擇標記基因和報告基因2種。選擇標記基因是一種已知功能或序列的基因,并與受體細胞的遺傳背景存在很大區(qū)別,因此非常有利于篩選鑒定。石榴遺傳轉(zhuǎn)化經(jīng)常使用的選擇標記基因是NPTⅡ,標記基因具有遺傳片段小、易于檢測的優(yōu)點。報告基因通常情況下是酶的基因,可以在試驗中加入相應的底物,觀察酶是否還具有活性,繼而判斷基因是否完成轉(zhuǎn)化?,F(xiàn)階段經(jīng)常利用的報告基因有抗生素轉(zhuǎn)化酶類、有光學性質(zhì)的酶類、熒光素酶類等,它們具有無毒、表達水平穩(wěn)定、快速靈活、可重復等優(yōu)點,在石榴的遺傳轉(zhuǎn)化試驗中經(jīng)常用到。

    分子水平上的鑒定主要包括分子標記與分子雜交2種。分子標記又名DNA標記,這種檢測手段簡單快速,成本不高。分子雜交可以與分子標記同步配合進行檢測,它可用于檢測轉(zhuǎn)基因植株是否在相應水平上表達,如PCR-Southern 雜交、PCR-Western雜交、PCR-Northern雜交等,每一種雜交方式的原理和鑒定水平都各有不同。此前,Terakami[18]等曾以矮化石榴nana為受體材料,進行遺傳轉(zhuǎn)化的研究,他們運用PCR-Southern 的雜交方法,并檢測到目的基因整合到石榴的基因組中。

    2.4 石榴遺傳轉(zhuǎn)化的基因類型

    相關研究表明,在較早時期石榴遺傳轉(zhuǎn)化中,基因類型主要是目的基因如NPTⅡ、Kan以及報告基因GUS。近幾年來,生物科學及遺傳轉(zhuǎn)化相關技術在不斷發(fā)展,有一些新的基因也相繼出現(xiàn),轉(zhuǎn)基因類型更加多樣化,如抗寒相關基因、抗病相關基因、改變生長習性的相關基因等[19]。

    3 存在問題

    影響石榴的離體培養(yǎng)因素較多,如外植體的選擇、石榴愈傷組織誘導分化率、各類激素與培養(yǎng)基的選擇、人為的操作技術、室外移栽的環(huán)境及設施等都是影響石榴離體的關鍵因素,且亟待解決。目前,石榴的遺傳轉(zhuǎn)化技術雖然在技術與應用上已有了一定的突破,但大規(guī)模應用在生產(chǎn)實踐中仍有差距,需要繼續(xù)進行探索和研究,建立一個較完善、穩(wěn)定的遺傳轉(zhuǎn)化體系。

    4 展望

    現(xiàn)階段,石榴是深受大眾喜愛的一種水果,在市場上供不應求,但傳統(tǒng)的扦插、壓條等繁殖方式技術相對落后,在一定程度上限制了石榴的示范推廣。通過離體培養(yǎng)技術,可以在較短時間內(nèi)獲取大量的優(yōu)質(zhì)種苗,且繁殖速度快、效率高,可以為石榴育種提供技術支撐,解決石榴發(fā)展的瓶頸問題[20]。

    石榴的遺傳轉(zhuǎn)化技術對改良品種性狀具有重要作用,對理論研究和生產(chǎn)實踐有一定的價值,具有廣闊的應用前景。利用遺傳轉(zhuǎn)化技術,可以有目的性、有針對性地創(chuàng)造具有優(yōu)良性狀的品種,豐富石榴種植質(zhì)資源。現(xiàn)階段,園藝工作者不僅要挖掘利用好已掌握的遺傳轉(zhuǎn)化技術,也要加快對石榴各品種資源的收集,建立種質(zhì)資源庫,開展基因工程育種工作,為后期的良種選育奠定基礎。相信未來隨著各項園藝栽培技術的發(fā)展以及園藝設施的完善,會進一步加大石榴品種改良的進度。

    5 參考文獻

    [1] 陳延惠,譚彬,李洪濤,等.石榴2種外植體再生方法在遺傳轉(zhuǎn)化研究中的優(yōu)勢比較[J].果樹學報,2012(4):598-604.

    [2] 閆志佩.瀕危品種軟籽石榴的組織培養(yǎng)和快速繁殖[J].植物生理學通訊,2004,40(3):1.

    [3] 程江華.石榴愈傷組織的誘導和細胞懸浮培養(yǎng)體系的建立[D].合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學,2009.

    [4] 陳海燕.泰山紅石榴組織培養(yǎng)再生體系的研究[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學,2006.

    [5] 陳延惠,劉麗,李洪濤,等.突尼斯軟子石榴組織培養(yǎng)快繁體系的建立[J].河南農(nóng)業(yè)大學學報,2010(2):4.

    [6] 楊選文,石亞芬,李好先,等.‘中農(nóng)紅石榴組織培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化葉片受體材料的獲得[C]// 第二屆中國石榴博覽會暨第七屆全國石榴生產(chǎn)與科研研討會.2017.

    [7] 吳亞君.石榴不同外植體再生體系建立及遺傳轉(zhuǎn)化體系初探[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學,2015.

    [8] 張曉申,王慧瑜,李曉青.突尼斯軟籽石榴組培快繁技術研究[J].陜西農(nóng)業(yè)科學,2008,54(3):3.

    [9] 陶秀冬,楊文忠,王玉蘭,等.石榴組織培養(yǎng)技術研究[J].新疆農(nóng)業(yè)科學,2002(3):155-156.

    [10] 張愛民.降低軟籽石榴組織培養(yǎng)過程中外植體褐化的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2011,39(6):3182-3183.

    [11] 李佳娣.軟籽石榴組織培養(yǎng)再生體系的研究[D].淮北:淮北師范大學,2011.

    [12] 蔣琴.葉城甜石榴莖尖組織培養(yǎng)試驗初報[J].新疆林業(yè),2003(6):18-19.

    [13] 趙玉潔.‘突尼斯軟子石榴遺傳轉(zhuǎn)化體系建立及轉(zhuǎn)化ICE1基因的研究[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學,2017.

    [14] 李好先,牛娟,曹秋芬,等.花粉管通道法遺傳轉(zhuǎn)化石榴的研究[C]//第二屆中國園藝學會石榴分會會員代表大會暨第五屆全國石榴生產(chǎn)與科研研討會.2014.

    [15] 唐麗穎,陳利娜,敬丹,等.采用花粉管通道法遺傳轉(zhuǎn)化月季石榴的研究[J].江西農(nóng)業(yè)學報,2021,33(3):8.

    [16] 郭曉麗.根癌農(nóng)桿菌介導的抗寒基因轉(zhuǎn)化突尼斯軟籽石榴研究[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學,2013.

    [17] 李躍霞.‘突尼斯軟籽石榴遺傳轉(zhuǎn)化體系的構(gòu)建和ISSR-PCR反應體系的優(yōu)化[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學,2012.

    [18] TERAKAMI S,MATSUTA N,YAMAMOTO T,et al.Agrobacterium-mediated transformation of the dwarf pomegranate (Punica granatum L.var. nana)[J].Plant Cell Reports,2007,26(8):1243-1251.

    [19] 趙玉潔,譚彬,李洪濤,等.石榴組織培養(yǎng)及遺傳轉(zhuǎn)化技術研究進展[J].河南農(nóng)業(yè)科學,2017,46(4):5.

    [20] 李佳娣,張愛民,薛建平,等.石榴組織培養(yǎng)研究進展[J].生物學雜志,2011,28(5):4.

    (責編:張宏民)

    猜你喜歡
    遺傳轉(zhuǎn)化石榴
    五月石榴紅似火
    石榴紅了
    石榴籽
    草原歌聲(2021年1期)2021-07-16 06:58:06
    緊緊抱在一起的“石榴籽”
    少先隊活動(2021年1期)2021-03-29 05:27:06
    憤怒的“石榴”
    石榴
    多毛番茄冷誘導轉(zhuǎn)錄因子CBF1轉(zhuǎn)化番茄的研究
    番茄黃化曲葉病毒Rep基因植物表達載體的構(gòu)建及對番茄的遺傳轉(zhuǎn)化
    蘸花法在植物遺傳轉(zhuǎn)化上的應用研究進展
    農(nóng)桿菌介導的旱稻遺傳轉(zhuǎn)化主要影響因素
    高清视频免费观看一区二区 | kizo精华| ponron亚洲| 只有这里有精品99| 亚洲av福利一区| 最近视频中文字幕2019在线8| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 97超视频在线观看视频| 一区二区三区四区激情视频| 青春草国产在线视频| 亚洲精品一区蜜桃| 岛国毛片在线播放| 人人妻人人澡欧美一区二区| 九色成人免费人妻av| 丝袜美腿在线中文| 一级av片app| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 91久久精品电影网| 99热网站在线观看| 国内精品宾馆在线| 观看免费一级毛片| 国产毛片a区久久久久| 亚洲欧美精品专区久久| 国产视频首页在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 国产毛片a区久久久久| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲伊人久久精品综合 | 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲av二区三区四区| 久久99精品国语久久久| 亚洲av成人av| 国内精品宾馆在线| 国产乱人偷精品视频| 国产精品99久久久久久久久| 欧美日韩精品成人综合77777| 一级毛片电影观看 | 国产午夜精品论理片| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 婷婷色综合大香蕉| 国产精品爽爽va在线观看网站| 午夜老司机福利剧场| 99热全是精品| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲中文字幕日韩| 在线免费观看的www视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 欧美成人免费av一区二区三区| 色5月婷婷丁香| 91久久精品电影网| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 看十八女毛片水多多多| 少妇被粗大猛烈的视频| 一级毛片我不卡| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 内射极品少妇av片p| av在线观看视频网站免费| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产91av在线免费观看| 如何舔出高潮| 中文资源天堂在线| 国产精品福利在线免费观看| 一级毛片久久久久久久久女| 桃色一区二区三区在线观看| 九草在线视频观看| 少妇丰满av| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产乱来视频区| 青春草视频在线免费观看| 一个人看的www免费观看视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 我要搜黄色片| 国产视频内射| 九草在线视频观看| 亚洲精品,欧美精品| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 简卡轻食公司| 男女那种视频在线观看| 精品不卡国产一区二区三区| 日本色播在线视频| 精品免费久久久久久久清纯| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲最大成人中文| 最近最新中文字幕免费大全7| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 嫩草影院精品99| 久久人人爽人人片av| 日本av手机在线免费观看| 亚洲精品456在线播放app| 中国美白少妇内射xxxbb| 少妇人妻一区二区三区视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产片特级美女逼逼视频| 成人一区二区视频在线观看| 久久久亚洲精品成人影院| 国产亚洲91精品色在线| 少妇熟女欧美另类| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产免费一级a男人的天堂| 免费观看a级毛片全部| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 久久亚洲国产成人精品v| 国产一区二区三区av在线| 我要看日韩黄色一级片| 麻豆av噜噜一区二区三区| 99久久人妻综合| 精品酒店卫生间| 91av网一区二区| 99九九线精品视频在线观看视频| 欧美成人午夜免费资源| 九九在线视频观看精品| 美女国产视频在线观看| 日本欧美国产在线视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲最大成人中文| 色吧在线观看| 久久久久网色| 中文在线观看免费www的网站| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 一级毛片我不卡| 亚洲精品一区蜜桃| 在线天堂最新版资源| 欧美精品国产亚洲| 桃色一区二区三区在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 欧美日韩精品成人综合77777| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产高潮美女av| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 午夜激情欧美在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 哪个播放器可以免费观看大片| 一个人免费在线观看电影| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产精品国产高清国产av| 欧美日韩精品成人综合77777| 美女内射精品一级片tv| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲国产高清在线一区二区三| 99久久精品热视频| 国产片特级美女逼逼视频| 欧美潮喷喷水| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产黄片视频在线免费观看| 国产在线一区二区三区精 | 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 欧美一区二区精品小视频在线| 嫩草影院精品99| 久久99热6这里只有精品| 国产伦理片在线播放av一区| 国产亚洲5aaaaa淫片| 乱人视频在线观看| 日韩一区二区三区影片| 色网站视频免费| 久久久成人免费电影| 老司机影院成人| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产精品无大码| 亚洲欧洲国产日韩| 日日啪夜夜撸| 日韩欧美国产在线观看| 国产免费又黄又爽又色| 人人妻人人看人人澡| 九九在线视频观看精品| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 成人三级黄色视频| 久久99精品国语久久久| 日韩精品有码人妻一区| 国产成人精品婷婷| 深爱激情五月婷婷| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 午夜精品在线福利| 久久久国产成人免费| 十八禁国产超污无遮挡网站| 一个人看的www免费观看视频| 波多野结衣高清无吗| 九九热线精品视视频播放| 久久久久性生活片| 亚洲国产精品合色在线| 国产成人91sexporn| 久久久色成人| 一个人看视频在线观看www免费| 2022亚洲国产成人精品| 久久6这里有精品| 一级黄片播放器| a级一级毛片免费在线观看| 国产精品一区二区在线观看99 | 国产激情偷乱视频一区二区| 日韩欧美 国产精品| 国产男人的电影天堂91| 精品欧美国产一区二区三| av在线老鸭窝| 中文字幕av成人在线电影| 免费大片18禁| 亚洲不卡免费看| 欧美人与善性xxx| 亚洲成色77777| 亚洲欧洲国产日韩| 男人的好看免费观看在线视频| 级片在线观看| 日本熟妇午夜| 天堂√8在线中文| 亚洲欧美一区二区三区国产| 久久鲁丝午夜福利片| 欧美bdsm另类| 免费大片18禁| 亚洲欧美精品综合久久99| 久久草成人影院| 九草在线视频观看| 亚洲自偷自拍三级| 精品欧美国产一区二区三| 99热精品在线国产| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲高清免费不卡视频| 国产淫语在线视频| 日韩欧美精品v在线| 国产伦精品一区二区三区四那| 久久久亚洲精品成人影院| 中文字幕熟女人妻在线| 麻豆av噜噜一区二区三区| www.av在线官网国产| 亚洲中文字幕日韩| 成人漫画全彩无遮挡| 色视频www国产| 国产精品不卡视频一区二区| av在线亚洲专区| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 夜夜爽夜夜爽视频| 日韩视频在线欧美| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 99久久人妻综合| 国产在线男女| 国产精品一二三区在线看| 国产单亲对白刺激| 99久久人妻综合| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 少妇熟女aⅴ在线视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 日韩强制内射视频| 午夜精品国产一区二区电影 | 国产国拍精品亚洲av在线观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 日本爱情动作片www.在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久久午夜欧美精品| 久久久久性生活片| 高清视频免费观看一区二区 | 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产探花极品一区二区| 国产极品精品免费视频能看的| 欧美日本亚洲视频在线播放| 日韩精品有码人妻一区| 一级毛片电影观看 | 美女cb高潮喷水在线观看| 国产精品国产三级国产专区5o | 亚洲精品aⅴ在线观看| 欧美区成人在线视频| 欧美最新免费一区二区三区| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 九草在线视频观看| 亚洲欧洲日产国产| 99久久成人亚洲精品观看| 村上凉子中文字幕在线| 久久久色成人| 欧美三级亚洲精品| 丝袜美腿在线中文| 老女人水多毛片| 神马国产精品三级电影在线观看| 美女内射精品一级片tv| 国产伦一二天堂av在线观看| 97在线视频观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 国产 一区 欧美 日韩| 成人毛片a级毛片在线播放| 成年女人永久免费观看视频| 亚洲国产精品国产精品| 国产精品无大码| 国产精品熟女久久久久浪| 天堂影院成人在线观看| 久久久午夜欧美精品| 亚洲国产最新在线播放| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产亚洲91精品色在线| 99热这里只有精品一区| 国产精品福利在线免费观看| 国产精品一区www在线观看| 大香蕉久久网| 亚洲av熟女| av专区在线播放| 国产成年人精品一区二区| 国产一级毛片在线| 亚洲乱码一区二区免费版| 99久久精品国产国产毛片| 久久精品国产亚洲av涩爱| 久久精品影院6| 亚洲久久久久久中文字幕| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国内精品宾馆在线| av天堂中文字幕网| 亚洲五月天丁香| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲18禁久久av| 久久久久久久国产电影| 只有这里有精品99| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲电影在线观看av| 日韩成人av中文字幕在线观看| 免费av观看视频| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 亚洲经典国产精华液单| 国产黄片视频在线免费观看| 国产激情偷乱视频一区二区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 精品久久久久久成人av| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产淫片久久久久久久久| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 免费观看性生交大片5| 婷婷色麻豆天堂久久 | 级片在线观看| 在线a可以看的网站| 最新中文字幕久久久久| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲久久久久久中文字幕| 黄色日韩在线| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚州av有码| av卡一久久| 内地一区二区视频在线| 亚洲精品456在线播放app| 国产亚洲精品av在线| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲av免费在线观看| 老司机影院成人| 国产av一区在线观看免费| 在线播放无遮挡| 日韩中字成人| 美女高潮的动态| 午夜福利高清视频| 亚洲欧美清纯卡通| 久久久久久久久久久免费av| 日韩成人av中文字幕在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 我要看日韩黄色一级片| 精品酒店卫生间| 国产成人91sexporn| 一级毛片我不卡| 内地一区二区视频在线| 国产精品乱码一区二三区的特点| 免费看a级黄色片| 一个人免费在线观看电影| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产成人freesex在线| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 淫秽高清视频在线观看| 亚洲五月天丁香| 日韩视频在线欧美| 成年版毛片免费区| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 又爽又黄a免费视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 中文字幕熟女人妻在线| av黄色大香蕉| 97超视频在线观看视频| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 熟女电影av网| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 欧美不卡视频在线免费观看| 青春草亚洲视频在线观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 九九热线精品视视频播放| 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久久久久久午夜电影| 乱码一卡2卡4卡精品| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产一级毛片在线| 亚洲乱码一区二区免费版| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲欧美日韩东京热| 丝袜美腿在线中文| 免费看光身美女| 一级毛片久久久久久久久女| 18+在线观看网站| АⅤ资源中文在线天堂| 赤兔流量卡办理| АⅤ资源中文在线天堂| 少妇的逼水好多| 床上黄色一级片| 少妇的逼水好多| 床上黄色一级片| 天堂影院成人在线观看| 久久99热这里只有精品18| 中文字幕免费在线视频6| 一区二区三区高清视频在线| 国产人妻一区二区三区在| 小说图片视频综合网站| 1024手机看黄色片| 亚洲经典国产精华液单| 日日干狠狠操夜夜爽| 色综合色国产| 男女视频在线观看网站免费| 中文亚洲av片在线观看爽| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 网址你懂的国产日韩在线| 日本免费a在线| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 国产成人freesex在线| 嫩草影院精品99| av专区在线播放| 少妇的逼好多水| 欧美97在线视频| 精华霜和精华液先用哪个| 婷婷色av中文字幕| 日本与韩国留学比较| 久热久热在线精品观看| 国产精品一区二区性色av| 插阴视频在线观看视频| 国内精品美女久久久久久| 亚洲欧美清纯卡通| 日韩av不卡免费在线播放| 简卡轻食公司| 亚洲精品aⅴ在线观看| 好男人在线观看高清免费视频| 岛国毛片在线播放| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲国产精品成人综合色| 女人久久www免费人成看片 | 精品熟女少妇av免费看| 丰满少妇做爰视频| 日本免费在线观看一区| 大香蕉97超碰在线| 波野结衣二区三区在线| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产成人精品久久久久久| 亚洲欧美一区二区三区国产| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产成人午夜福利电影在线观看| or卡值多少钱| 老女人水多毛片| 99久久中文字幕三级久久日本| 精品久久久久久久久久久久久| 七月丁香在线播放| 亚洲在线自拍视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 免费人成在线观看视频色| 有码 亚洲区| 欧美人与善性xxx| 国产黄色小视频在线观看| 青春草视频在线免费观看| 欧美精品国产亚洲| 国产精品不卡视频一区二区| 视频中文字幕在线观看| 亚洲成人av在线免费| 亚洲高清免费不卡视频| 欧美一区二区精品小视频在线| 水蜜桃什么品种好| 午夜福利在线在线| 亚洲久久久久久中文字幕| 草草在线视频免费看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产成年人精品一区二区| 别揉我奶头 嗯啊视频| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 极品教师在线视频| 日本五十路高清| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产精品av视频在线免费观看| 中文字幕久久专区| 麻豆国产97在线/欧美| 国产成人午夜福利电影在线观看| 成人漫画全彩无遮挡| 国产免费男女视频| 久久久久九九精品影院| 日本黄大片高清| 青春草国产在线视频| 村上凉子中文字幕在线| 午夜福利成人在线免费观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 亚洲五月天丁香| 三级经典国产精品| 亚洲va在线va天堂va国产| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产人妻一区二区三区在| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲欧美一区二区三区国产| av在线观看视频网站免费| 久久久久性生活片| 少妇人妻一区二区三区视频| 日本一本二区三区精品| 高清av免费在线| 国产精品人妻久久久久久| 免费看美女性在线毛片视频| 伦理电影大哥的女人| 一区二区三区免费毛片| 插逼视频在线观看| 午夜爱爱视频在线播放| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 亚洲成人久久爱视频| 又粗又爽又猛毛片免费看| 少妇熟女欧美另类| av免费观看日本| 99久久人妻综合| 久久久久久国产a免费观看| 日韩成人伦理影院| 午夜老司机福利剧场| 人妻夜夜爽99麻豆av| 成人性生交大片免费视频hd| 蜜臀久久99精品久久宅男| 久热久热在线精品观看| 26uuu在线亚洲综合色| 精品久久久久久久久久久久久| 国产亚洲最大av| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 久久热精品热| 18禁动态无遮挡网站| 日韩制服骚丝袜av| 中文字幕久久专区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 高清午夜精品一区二区三区| 干丝袜人妻中文字幕| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 观看免费一级毛片| 欧美一区二区国产精品久久精品| 亚洲在久久综合| 欧美成人一区二区免费高清观看| 搞女人的毛片| 最近手机中文字幕大全| 国产高潮美女av| 桃色一区二区三区在线观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产三级在线视频| 极品教师在线视频| 精品久久国产蜜桃| 欧美+日韩+精品| 久久韩国三级中文字幕| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 2022亚洲国产成人精品| 桃色一区二区三区在线观看| 黑人高潮一二区| 午夜免费男女啪啪视频观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 好男人视频免费观看在线| av在线蜜桃| 久久精品久久久久久久性| 亚洲18禁久久av| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 免费观看的影片在线观看| av免费观看日本| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 91久久精品国产一区二区三区| 小说图片视频综合网站| 国产麻豆成人av免费视频| 精品人妻视频免费看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 在线免费观看的www视频| 亚洲成av人片在线播放无| 国产亚洲av嫩草精品影院| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 欧美高清性xxxxhd video| 九九热线精品视视频播放| 国内精品一区二区在线观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| av在线观看视频网站免费| 天堂影院成人在线观看| 天美传媒精品一区二区| 国产极品精品免费视频能看的| 国产精品一二三区在线看| 亚洲av福利一区| 尾随美女入室| 精品一区二区三区视频在线| 99久久精品热视频| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 欧美成人一区二区免费高清观看| av.在线天堂| 99热这里只有是精品在线观看| 97超视频在线观看视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产精品久久久久久精品电影| 国产乱人偷精品视频| 久久久精品94久久精品| 全区人妻精品视频| 韩国av在线不卡| 亚洲18禁久久av| av在线亚洲专区| 一本久久精品| 国产av在哪里看| 联通29元200g的流量卡| 麻豆国产97在线/欧美| 最近中文字幕2019免费版| 国产一级毛片在线| 国产精品人妻久久久影院| 网址你懂的国产日韩在线| 国产精品一区www在线观看| 欧美bdsm另类|