基于Hedgehog信號通路探討補(bǔ)腎中藥靶向治療骨質(zhì)疏松癥的機(jī)制研究進(jìn)展

楊軍 鄧強(qiáng) 李軍杰 喬小萬

【摘 要】 中醫(yī)學(xué)將骨質(zhì)疏松癥歸于“骨痹”“骨痿”等范疇，并認(rèn)為腎精不足、骨髓生化乏源、骨骼失養(yǎng)是“骨痿”等疾病的主要病機(jī)。近年來，隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)的發(fā)展，對骨代謝信號通路和相關(guān)作用靶點(diǎn)基因的認(rèn)識不斷深入，研究發(fā)現(xiàn)Hedgehog信號通路在骨骼發(fā)育中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，其傳導(dǎo)異常可導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥等骨代謝疾病的發(fā)生。以Hedgehog信號通路在骨質(zhì)疏松癥發(fā)病過程中的作用機(jī)制為基礎(chǔ)，探討經(jīng)典補(bǔ)腎中藥及中藥復(fù)方通過此通路治療骨質(zhì)疏松的具體機(jī)制，從而為具有補(bǔ)腎功效的單味中藥及復(fù)方臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)研究支撐，為今后相關(guān)中藥的研發(fā)提供參考。

【關(guān)鍵詞】 骨質(zhì)疏松癥；Hedgehog信號通路；補(bǔ)腎中藥；機(jī)制；研究進(jìn)展；綜述

骨質(zhì)疏松癥（osteoporosis，OP）是多種病因共同作用于人體導(dǎo)致的骨密度和骨質(zhì)量下降，骨微結(jié)構(gòu)破壞，造成骨脆性增加，從而容易發(fā)生骨折為特征的全身性骨代謝性疾病，已成為全球患病率、致殘率最高，治療費(fèi)用最昂貴的疾病之一，嚴(yán)重威脅中老年男性、絕經(jīng)后婦女、部分青少年等群體骨骼健康［1-2］。流行病學(xué)研究顯示，我國年齡 > 50歲人群OP患病率為19.2%，年齡 > 65歲人群患病率為32.0%［3］。我國低骨量人群數(shù)量巨大，年齡 > 50歲的人群低骨量率高達(dá)46.4%，是未來患OP的高危人群［4-5］。OP在中老年骨病中居首位［6］，造成的骨折嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量及老年人壽命，醫(yī)療承受了巨大負(fù)擔(dān)。

中醫(yī)學(xué)將OP歸屬于“骨痹”“骨痿”等范疇，中醫(yī)理論認(rèn)為“腎為先天之本”“腎生骨髓”“五藏所主，……腎主骨”“其充在骨”，骨骼的生長發(fā)育、強(qiáng)勁、衰弱與腎精盛衰關(guān)系密切，腎精充足則骨髓生化有源，骨骼得以滋養(yǎng)而強(qiáng)健有力；腎精虧虛則骨髓生化乏源，骨骼失養(yǎng)而萎弱無力?！鹅`樞·經(jīng)脈》指出：“足少陰氣絕則骨枯……骨不濡則肉不能著也，骨肉不相親則肉軟卻發(fā)無澤者骨先死?！敝赋瞿I虛是引起骨痿的主要病機(jī)，說明幾千年前中醫(yī)學(xué)就確立了“腎主骨”的指導(dǎo)思想，建立了“腎-精-髓-骨”骨骼內(nèi)在化生體系，即腎精對骨的充實(shí)與濡養(yǎng)發(fā)揮著重要作用，主導(dǎo)著骨的生長發(fā)育、生理功能的發(fā)揮，是人體骨代謝的內(nèi)環(huán)境［7-9］，從而為補(bǔ)腎填精法治療OP提供了最基本的理論依據(jù)。近年來臨床以骨吸收抑制劑、骨形成促進(jìn)劑和膳食補(bǔ)充劑等西藥治療為主，在緩解或消除疼痛、改善骨代謝的同時，具有胃腸道不良反應(yīng)多、治療費(fèi)用高昂等缺點(diǎn)。而中醫(yī)藥在慢性代謝性疾病的臨床應(yīng)用中緩解了西藥諸多不良反應(yīng)，且價(jià)格低廉，臨床效果良好［10］。Hedgehog信號通路在骨代謝過程中起重要調(diào)控作用，近年在骨科研究中備受關(guān)注。該通路主要對骨形成和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）的成骨進(jìn)行調(diào)控［11］。本文在查閱大量國內(nèi)外文獻(xiàn)后就補(bǔ)腎中藥基于Hedgehog信號通路靶向治療OP的機(jī)制研究作一綜述，以期為治療OP的中藥研發(fā)及臨床診療提供參考。

1 OP與Hedgehog通路

破骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)失衡，骨代謝紊亂，從而導(dǎo)致OP［12］。治療上主要為抑制骨吸收、促進(jìn)骨形成及膳食補(bǔ)充等手段，達(dá)到緩解或消除疼痛，增加骨密度，進(jìn)而降低骨折的風(fēng)險(xiǎn)。Hedgehog信號通路調(diào)控成骨細(xì)胞的分化增殖，提升骨量，達(dá)到防治OP的作用。Hedgehog通路由Hedgehog蛋白、Gli蛋白、Ptched（Ptc）、Smoothened（Smo）抗體以及下游靶基因組成［13］。Hedgehog信號通路是通過Hedgehog蛋白促進(jìn)成骨細(xì)胞的骨形成功能，達(dá)到骨形成與骨吸收之間的平衡。Gli蛋白在脊椎動物骨骼中主要有Gli1、Gli2和Gli3三型（Gli1和Gli2蛋白主要為激活下游靶基因而活化Hedgehog通路，Gli3為抑制因子，可阻礙通路傳導(dǎo)）。首先，當(dāng)該通路Hedgehog蛋白匱乏時，Ptc直接與Smo聯(lián)結(jié)，使其活性降低，并抑制下游靶基因的轉(zhuǎn)錄過程。若Hedgehog蛋白表達(dá)正常則與Ptc結(jié)合，消除Ptc對Smo活性的抑制作用，從而促進(jìn)Gli1蛋白激活下游靶基因的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，從而促進(jìn)受損骨組織的修復(fù)［14］，達(dá)到抗OP的作用。其次，Runx2和Osx是骨形成過程中的重要轉(zhuǎn)錄因子，其表達(dá)過程多個階段中都受到Hedgehog蛋白影響，并可以促進(jìn)BMSCs向成骨分化增殖（BMSCs主要依靠Runx2因子向成骨前體細(xì)胞分化，進(jìn)一步促進(jìn)Osx因子分化為成熟的成骨細(xì)胞）［15］。最后，PPARγ是促進(jìn)BMSCs成脂分化的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，同時也能負(fù)反饋于Runx2，而抑制骨形成［16-17］。C/EBPα也可以在PPARγ的輔助下用來評估BMSCs成脂分化情況［18］。骨代謝過程中涉及到眾多生長因子，骨吸收和骨形成過程在不斷地進(jìn)行，不同生長因子在不同階段的成骨過程中發(fā)揮著不同作用，在促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖、成骨及骨吸收等方面作用顯著。然而，目前Hedgehog信號通路在OP中的作用機(jī)制尚未完全明確，仍然需要繼續(xù)探究，進(jìn)一步挖掘補(bǔ)腎中藥基于Hedgehog信號通路靶向治療OP等骨代謝疾病的潛力。

2 中藥調(diào)控Hedgehog通路治療OP的研究

2.1 單味中藥 近年對于中藥有效成分的研究進(jìn)展迅猛，已進(jìn)入分子水平。補(bǔ)腎中藥的有效成分能調(diào)節(jié)骨吸收與骨形成的平衡，使骨形成大于骨吸收，而延緩或防止OP的發(fā)生。

2.1.1 杜仲 杜仲在我國已有超過兩千年的應(yīng)用歷史，并出現(xiàn)于眾多經(jīng)典方劑?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》記載：“主腰脊痛，益精氣，強(qiáng)筋骨。”《日華子本草》中記載杜仲具有“治腎勞，腰脊攣”的作用?，F(xiàn)代藥理研究表明，杜仲提取物中主要的活性物質(zhì)有木質(zhì)素類和環(huán)烯醚萜類，其水、醇提物和藥物血清能促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖分化，促進(jìn)骨重建，改善骨代謝紊亂，防止OP的發(fā)生［19］。堿性磷酸酶、骨鈣素、骨保護(hù)素及Ⅰ型前膠原C-端前肽/N-端前肽為骨形成的標(biāo)識，對成骨細(xì)胞的活性有很好的反映作用［20］。HA等［21］通過杜仲皮活性成分干預(yù)小鼠骨髓細(xì)胞來研究其對成骨細(xì)胞的增殖作用及對破骨細(xì)胞的抑制作用，發(fā)現(xiàn)其部分提取物甲醇提取物、三氯甲烷等可誘導(dǎo)釋放生長激素，從而促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖，少數(shù)成分對破骨細(xì)胞有抑制作用，由此促進(jìn)骨重建。研究發(fā)現(xiàn)，杜仲通過影響PTH、RUNX2、PPAR等因子的表達(dá)調(diào)控BMSCs分化，促進(jìn)骨穩(wěn)態(tài)的平衡，治療OP［22］。其中，Runx2屬于Runt基因家族中的重要轉(zhuǎn)錄因子，聯(lián)結(jié)成骨細(xì)胞后可以激活骨鈣蛋白、骨橋素等影響成骨細(xì)胞分化和骨重建，骨代謝達(dá)到最佳平衡狀態(tài)［23］。Hedgehog通路中多個階段有Runx2的參與，并且其蛋白的表達(dá)在各階段受Hedgehog蛋白影響。

2.1.2 補(bǔ)骨脂 補(bǔ)骨脂作為補(bǔ)腎壯陽類中藥廣泛應(yīng)用于骨科臨床實(shí)踐中?！端幮哉摗酚涊d補(bǔ)骨脂有補(bǔ)腎壯陽強(qiáng)骨的功效。《方外奇方》云：“……元陽堅(jiān)固，骨髓充實(shí)，澀以治脫。”現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，該藥主要活性成分為類黃酮、香豆素及萜類酚類化合物［24］。補(bǔ)骨脂素是香豆素中活性成分，韓宇等［25］通過給大鼠灌服補(bǔ)骨脂素制劑，配制含藥血清并用之干預(yù)大鼠BMSCs，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測大鼠BMSCs中堿性磷酸酶蛋白含量，實(shí)時定量PCR法檢測Shh、Ptch1、Gli1 mRNA及蛋白表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)骨脂素能減弱Ptch1 mRNA及蛋白表達(dá)，提升Shh、Gli1 mRNA及蛋白的表達(dá)。Ptch1屬于Ptc，是Hedgehog通路轉(zhuǎn)錄過程中的重要因子，Shh是通路中關(guān)鍵啟動蛋白。Gli1刺激下游轉(zhuǎn)錄基因而活化Hedgehog通路，使大鼠BMSCs向成骨分化，為轉(zhuǎn)錄過程中的激化因子。Ptch1與Shh結(jié)合消除了Ptc對Smo活性的抑制，誘導(dǎo)下游轉(zhuǎn)錄基因的表達(dá)，使Hedgehog通路正常發(fā)揮作用，以調(diào)控骨密度。Shh促進(jìn)骨礦化，促進(jìn)堿性磷酸酶活性及表達(dá)，也可誘導(dǎo)Gli1表達(dá)而增強(qiáng)成骨細(xì)胞增殖。補(bǔ)骨脂能通過調(diào)控Hedgehog通路中Shh、Ptch1、Gli1 mRNA及蛋白的表達(dá)促進(jìn)BMSCs成骨分化，維持骨代謝平衡，提高骨密度，防治OP。

2.1.3 淫羊藿 淫羊藿很早被廣泛應(yīng)用于治療OP的復(fù)方中，近年來對其作用機(jī)制的研究越來越深入。《玉楸藥解》記載味辛、苦，微溫，入肝、腎經(jīng)，有榮筋強(qiáng)骨之功?！侗静輦湟费裕骸把a(bǔ)命門，益精氣，堅(jiān)筋骨?！痹撍幓钚猿煞种饕獮橐蜣娇傸S酮（TFE），TFE通過多種信號通路促進(jìn)成骨細(xì)胞分化，從而在OP的治療中發(fā)揮作用［26］。Hedgehog蛋白在多個階段影響Runx2和Osx的表達(dá)，以促進(jìn)BMSCs分化，TFE可能通過激活該信號通路中的特定靶基因增強(qiáng)Runx2和Osx的表達(dá)，最終發(fā)揮治療OP的作用。目前，對于TFE在Hedgehog信號通路上的具體靶點(diǎn)基因的研究極為少見。TFE的主要活性成分為淫羊藿苷（ICA），ICA能溫腎補(bǔ)脾，是一類活性程度較高的多酚類物質(zhì)，能夠很好地提高骨質(zhì)的重構(gòu)率，抑制骨吸收，從而提高骨密度和骨質(zhì)量，并對OP起到很好的防治作用［27］。ICA可以在骨重建過程中影響多種骨骼細(xì)胞的功能，以達(dá)到增強(qiáng)骨質(zhì)，防治OP的作用，如ICA促進(jìn)BMSCs向成骨細(xì)胞分化［28］。

2.2 中藥復(fù)方 “腎主骨”理論在OP的防治上展現(xiàn)出中醫(yī)獨(dú)有的特色和優(yōu)勢。人體骨骼的變化是腎中精氣盛衰的外在體現(xiàn)，人體骨骼只有在腎精的滋養(yǎng)下才能正常生長并保持堅(jiān)固，腎中精氣虧損，骨骼無以充養(yǎng)而失堅(jiān)固［29］。補(bǔ)腎填精類中藥復(fù)方很早便應(yīng)用于臨床對慢性骨代謝性疾病的治療，特別是對OP的預(yù)防和治療，具有良好的臨床效果。中藥復(fù)方則通過激活Hedgehog通路中的Shh、Gli1蛋白，從而控制下游基因的表達(dá)，以促使新骨生成，抑制骨骼吸收，達(dá)到預(yù)防OP的效果。

在補(bǔ)腎填精中藥復(fù)方左歸丸治療OP的實(shí)驗(yàn)研究中，通過去除大鼠雙側(cè)卵巢建立絕經(jīng)后OP模型，給予中藥復(fù)方左歸丸灌服，發(fā)現(xiàn)大鼠股骨和腎組織中Ptch1和Gli3 mRNA表達(dá)及其蛋白含量顯著降低，股骨骨密度升高［11］。中藥復(fù)方左歸丸通過下調(diào)PTCH1和Gli3 mRNA表達(dá)，促進(jìn)Hedgehog信號通路中下游靶點(diǎn)基因轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)骨形成，以提高骨密度。說明補(bǔ)腎填精中藥復(fù)方左歸丸能有效提高骨密度，具有防治OP的作用。在右歸丸治療OP的研究中，體外分離培養(yǎng)大鼠BMSCs，給予大鼠灌服右歸丸，制備含藥血清，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞培養(yǎng)液中混合含藥血清連續(xù)培養(yǎng)15 d，酶聯(lián)免疫吸附法檢測出大鼠BMSCs中Shh、Ptc、Gli1含量均升高，表明右歸丸可能通過調(diào)控Hedgehog通路中某些特定基因來影響OP發(fā)展過程［30］。研究發(fā)現(xiàn)，右歸丸通過上調(diào)大鼠BMSCs中Shh含量，活化Hedgehog通路，Shh也可以促進(jìn)Gli1及Ptc轉(zhuǎn)錄，進(jìn)一步加快Hedgehog通路的轉(zhuǎn)錄過程，促使BMSCs向成骨分化。這可能是中藥復(fù)方右歸丸在預(yù)防治療OP中的重要機(jī)制。梁學(xué)振等［31］采用培養(yǎng)液混合補(bǔ)腎活血膠囊含藥血清干預(yù)大鼠股骨BMSCs，藥物介導(dǎo)Shh和Gli1活化Hedgehog信號通路，以上調(diào)Runx2、Col1a1兩個因子的表達(dá)，推動大鼠BMSCs向成骨分化；下調(diào)PPARγ、C/EBPα兩個因子的表達(dá)，抑制大鼠BMSCs的成脂分化，繼而調(diào)控大鼠BMSCs成骨與成脂分化之間的平衡，以加快新骨生成。

3 小 結(jié)

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，OP的基本病機(jī)為肝腎虧虛、氣滯血瘀，并通過應(yīng)用補(bǔ)腎強(qiáng)骨、活血化瘀類中藥取得了良好的臨床效果。對OP病理分子機(jī)制的深入研究更加明確藥物作用的信號通路及靶點(diǎn)，為中醫(yī)防治OP提供基礎(chǔ)研究和臨床治療的理論依據(jù)。在分子機(jī)制及信號通路層面研究發(fā)現(xiàn)，中藥活性提取物通過對Wnt、OPG/RANK/RANKL、MAPKs、PI3K/Akt、BMPs、GABA、Hedgehog等多條信號通路中一條或多條通路的交叉調(diào)控，激活或抑制相關(guān)靶點(diǎn)基因，從而促進(jìn)成骨功能或抑制破骨功能［13］，以達(dá)到骨代謝的最佳平衡，發(fā)揮抗OP的作用。本綜述通過總結(jié)影響OP骨代謝的Hedgehog信號通路的某些補(bǔ)腎中藥及復(fù)方的作用機(jī)制，認(rèn)為中藥對OP的干預(yù)過程可以做到一藥多通路，一藥多靶點(diǎn)來精準(zhǔn)、有效地發(fā)揮調(diào)控作用。中藥復(fù)方以君、臣、佐、使多元用藥的方式相互輔助，又相互制約，從多通路、多靶點(diǎn)交叉調(diào)控影響成骨過程。

目前對于中藥活性成分防治OP在信號通路層面的機(jī)制研究還存在局限，首先，中醫(yī)用藥是在中醫(yī)基礎(chǔ)理論、中醫(yī)辨證論治的指導(dǎo)下進(jìn)行的，而單純的藥理學(xué)研究并沒有結(jié)合中醫(yī)理論及辨證，只是分析藥物中活性成分的作用。如果在藥理學(xué)研究過程中結(jié)合中醫(yī)理論及辨證，可能會對于中西醫(yī)結(jié)合用藥更有價(jià)值。其次，目前中藥信號通路大多是基于一藥一通路的研究，中藥復(fù)方以多藥多通路交叉調(diào)控為主，因此，對中醫(yī)臨床應(yīng)用的研究要以中藥調(diào)控不同通路之間的聯(lián)系以及各通路之間是否有促進(jìn)或抑制作用為主。此外，對于Hedgehog等保守信號通路的研究較少，缺少相關(guān)中藥對其影響的實(shí)驗(yàn)研究，未來可以進(jìn)一步深入研究保守通路作用機(jī)制及是否對其他相關(guān)通路有促進(jìn)或抑制作用，以便于指導(dǎo)臨床中醫(yī)用藥。

綜上所述，補(bǔ)腎中藥作用于Hedgehog信號通路在防治OP的發(fā)生中有重要的意義，對于臨床中醫(yī)用藥有很好的指導(dǎo)意義。隨著現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)研究方式的不斷創(chuàng)新，并不斷融入中醫(yī)理論及辨證論治的理念，不斷突破中藥對于分子機(jī)制和信號通路影響的研究，更加合理地指導(dǎo)OP在臨床實(shí)踐中的用藥，OP的中藥治療將有重大突破。

參考文獻(xiàn)

［1］ 陳翔，林燕萍，賈曉康.口服類西藥及中藥復(fù)方治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥進(jìn)展［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2016，5（3）：59-62.

［2］ 張志宏，邢娜，彭東輝，等.中藥抗骨質(zhì)疏松作用及機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.中國藥房，2021，32（3）：374-379.

［3］ 陳鏡，馮正平.骨質(zhì)疏松癥治療藥物研究進(jìn)展［J］.中國骨質(zhì)疏松雜志，2021，27（5）：776-780.

［4］ 茍玲，張亞斌，南銳伶，等.基于德爾菲法的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥高危人群自我管理行為量表?xiàng)l目篩選［J］.廣西醫(yī)學(xué)，2020，42（24）：3248-3252.

［5］ 中國骨質(zhì)疏松癥與骨礦物研究學(xué)會.男性骨質(zhì)疏松癥診療指南［J］.中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志，2020，13（5）：381-395.

［6］ 劉云，李培嶺，郭永杰，等.中老年骨質(zhì)疏松癥患者腰1～3椎體骨密度值與CT值相關(guān)性研究［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2021，10（6）：29-31.

［7］ 李佳凌，高明利.補(bǔ)腎中藥及方劑對骨質(zhì)疏松OPG/RANK/RANKL系統(tǒng)作用的研究進(jìn)展［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2019，8（2）：72-76.

［8］ 李焱，竇群立，楊鋒.“腎為封藏之本”理論與原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥發(fā)病機(jī)制的研究［J］.中國骨質(zhì)疏松雜志，2021，27（9）：1369-1372.

［9］ 李威，楊文龍，夏漢庭，等.腎陽虛大鼠血清對OB-OC共育體系中β-catenin/OPG/RANKL表達(dá)的影響及淫羊藿苷的調(diào)控作用［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2020，26（13）：118-124.

［10］ 樊梅，唐芳，馬武開，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討桃紅四物湯治療骨質(zhì)疏松癥的主要活性成分及藥理作用機(jī)制［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2020，9（12）：4-8，22.

［11］ 鄧洋洋，劉明欣，孫鑫，等.Hedgehog信號通路與“腎虛血瘀”骨代謝失常的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國骨質(zhì)疏松雜志，2021，27（8）：1112-1116.

［12］ 劉艷，胡赟，張夏，等.雙磷酸鹽對高糖環(huán)境下BMSCs自噬相關(guān)因子Beclin1和LC3Ⅱ影響的研究［J］.四川大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2018，49（5）：694-699.

［13］ 趙金龍，曾令烽，梁桂洪，等.基于信號通路的中藥有效成分治療骨質(zhì)疏松機(jī)制研究進(jìn)展［J］.中草藥，2020，51（23）：6084-6094.

［14］ 王雨荷，劉紅，李艷，等.Hedgehog-Gli信號通路在骨質(zhì)疏松發(fā)生中作用的研究進(jìn)展［J］.中國骨質(zhì)疏松雜志，2021，27（10）：1550-1553.

［15］ 高雪琴，陳菲菲，唐芳，等.Hedgehog信號通路在風(fēng)濕病中的研究進(jìn)展［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2022，11（4）：62-66.

［16］ MAJOR LG，HOLLE AW，YOUNG JL，et al.Volume adaptation controls stem cell mechanotransduction［J］.ACS Appl Mater Interfaces，2019，11（49）：45520-45530.

［17］ WANG Y，PAN Z，CHEN F.Inhibition of PPARγ by bisphenol A diglycidyl ether ameliorates dexamethasone-induced osteoporosis in a mouse model［J］.J Int Med Res，2019，47（12）：6268-6277.

［18］ KOMATSU N，KAJIYA M，MOTOIKE S，et al.TypeⅠcollagen deposition via osteoinduction ameliorates YAP/TAZ activity in 3D floating culture clumps of mesenchymal stem cell/extracellular matrix complexes［J］.Stem Cell Res Ther，2018，9（1）：342-366.

［19］ 陽之韻，蘭波，劉亭，等.杜仲提取組分對MC3T3-E1Subclone14成骨細(xì)胞的影響［J］.貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，42（5）：553-556.

［20］ 趙繼榮，楊濤，趙寧，等.杜仲誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化防治骨質(zhì)疏松癥相關(guān)信號通路研究進(jìn)展［J］.中國骨質(zhì)疏松雜志，2020，26（12）：1868-1872.

［21］ HA H，HO J，SHIN S，et al.Effects of eucommiae cortex on osteoblast-like cell proliferation and osteoclast inhibition［J］.Arch Pharm Res，2003，26（11）：929-936.

［22］ 董航，嚴(yán)嬌，謝銥子，等.杜仲治療骨質(zhì)疏松的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)作用機(jī)制探討［J］.廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，36（9）：1413-1420.

［23］ 宋琪新，崔德芝.補(bǔ)腎益髓法干預(yù)RUNX2因子表達(dá)在骨質(zhì)疏松中的作用機(jī)制［J］.世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2016，16（18）：200-201.

［24］ 韓宇，郭晏華，于艷，等.補(bǔ)骨脂甲素介導(dǎo)cAMP/PKA/CREB信號通路調(diào)控促進(jìn)骨髓MSC成骨分化作用研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2019，37（7）：1597-1600.

［25］ 韓宇，郭晏華，于艷，等.補(bǔ)骨脂素介導(dǎo)Hedgehog信號通路促進(jìn)骨髓MSC成骨分化作用研究［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2019，46（6）：1133-1137.

［26］ 王潔，王蕭楓.淫羊藿總黃酮的抗骨質(zhì)疏松作用及其對調(diào)控成骨細(xì)胞分化及骨形成關(guān)鍵信號通路的影響［J］.中醫(yī)正骨，2017，29（1）：45-48.

［27］ 楊璐堯，劉翠蓮.中藥淫羊藿苷抗骨質(zhì)疏松的研究進(jìn)展［J］.產(chǎn)業(yè)與科技論壇，2021，20（1）：63-66.

［28］ 張騫予，楊鶇祥，樓家暉.補(bǔ)腎中藥誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化防治骨質(zhì)疏松的研究進(jìn)展［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2020，38（3）：193-195.

［29］ 鄧洋洋，李佳，孫鑫，等.Ang-1在去卵巢骨質(zhì)疏松癥大鼠骨組織中表達(dá)變化以及中醫(yī)不同治法對其影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國骨質(zhì)疏松雜志，2018，24（11）：1426-1428，1445.

［30］ 高舉會，林庶茹，尚德陽.右歸丸含藥血清對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Hedgehog信號通路影響［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，21（10）：44-46.

［31］ 梁學(xué)振，楊曦，李嘉程，等.補(bǔ)腎活血膠囊介導(dǎo)Hedgehog信號通路調(diào)控大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨成脂分化［J］.中國組織工程研究，2022，26（7）：1068-1074.

收稿日期：2022-12-05；修回日期：2023-01-27

基金項(xiàng)目：2021年甘肅省財(cái)政轉(zhuǎn)移支付地方項(xiàng)目（20210140305）；蘭州市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2022-3-30）

作者單位：1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅 蘭州 730000；2.甘肅省中醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050

通信作者：鄧強(qiáng)