宮腔粘連患者血清雌激素水平及其臨床意義*

王燕青,張 瑩,陳海燕,韓秋峪

徐州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇徐州 22000

宮腔粘連是全球范圍內(nèi)女性生殖系統(tǒng)子宮的常見疾病,多因?qū)m腔介入性操作而發(fā)病,常見臨床表現(xiàn)為子宮內(nèi)膜基底受損導(dǎo)致宮腔部分粘連,甚至閉塞,腹痛、月經(jīng)量減少、閉經(jīng)、不孕等[1-2]。目前,宮腔粘連的確切病因仍不清楚,除宮腔介入性操作外,可能與肥胖、性激素刺激、高血壓、遺傳等因素相關(guān),其中包括孕激素受體(PR)和雌激素受體(ER)的雌激素受體蛋白陽(yáng)性表達(dá)或異常高表達(dá),均可能在宮腔粘連的發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用[3-4]。但是,雌激素受體蛋白在宮腔粘連患者中的表達(dá)特點(diǎn)及其與預(yù)后的相關(guān)性尚少見報(bào)道。鑒于此,本研究收集了本院宮腔粘連患者的病歷資料,觀察宮腔粘連患者雌激素的表達(dá)特點(diǎn),研究雌激素表達(dá)與宮腔粘連臨床治療預(yù)后的相關(guān)性,從而判斷雌孕激素受體蛋白在宮腔粘連中的生物學(xué)行為,為宮腔粘連的臨床治療及預(yù)后評(píng)估提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 采用巢式病例對(duì)照研究法,選取2018年1月至2019年5月于徐州市第一人民醫(yī)院經(jīng)宮腔鏡檢查確診為宮腔粘連的54例患者納入宮腔粘連組,同時(shí)選取54例基線資料相匹配的體檢健康者納入宮腔正常組。納入標(biāo)準(zhǔn):年齡≥18歲。排除標(biāo)準(zhǔn):生殖器發(fā)育異常、惡性腫瘤及自身免疫性疾病;絕經(jīng)期。宮腔粘連組年齡22～64歲,平均(36.7±3.3)歲;體重指數(shù)21～29 kg/m2,平均(25.8±1.7)kg/m2;月經(jīng)周期22～32 d,平均(26.6±3.9)d;生育43例,未生育11例。宮腔正常組年齡22～64歲,平均(36.8±3.4)歲;體重指數(shù)21～29 kg/m2,平均(25.6±1.8)kg/m2;月經(jīng)周期21～34 d,平均(26.8±3.8)d;生育44例,未生育10例。兩組基線資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究獲得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),兩組受試者均簽署知情同意書。

1.2方法 宮腔粘連組患者手術(shù)后接受西藥治療,即口服結(jié)合雌激素片(倍美力,惠氏制藥,批號(hào)H20130230,規(guī)格0.625 mg),每天1粒(0.625 mg),21 d為1個(gè)療程,每個(gè)療程間隔5日,并服用黃體酮膠囊(益瑪欣,批號(hào)H20041902,規(guī)格50 mg)口服,每天2粒(100 mg)。藥物應(yīng)用避開月經(jīng),月經(jīng)來潮前3 d停藥,月經(jīng)后5 d繼續(xù)服藥,共治療3個(gè)療程后評(píng)估臨床療效。

1.3觀察指標(biāo) 檢測(cè)兩組血清雌激素水平,包括雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)。(1)蘇木素-伊紅染色:子宮內(nèi)膜石蠟包埋后,切成 4 μm連續(xù)切片,使用二甲苯溶液、乙醇脫蠟,蒸餾水沖洗,蘇木素染色,水洗,伊紅乙醇溶液浸染,水洗,脫水,透明,封片觀察。(2)免疫組化法檢測(cè):使用0.01 mol/L 枸櫞酸微波修復(fù)15 min,冷卻后,使用3% 過氧化氫溶液封閉10 min,滴入PR或ER工作液,置于 4 ℃環(huán)境中,使用磷酸緩沖液(PBS)沖洗,滴入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記羊抗鼠IgG,DNA 顯色,蘇木素復(fù)染。以陽(yáng)性細(xì)胞百分比進(jìn)行統(tǒng)計(jì),陽(yáng)性細(xì)胞<50%的為低表達(dá);陽(yáng)性細(xì)胞 >50% 的為高表達(dá)。顯微鏡下觀察ER、PR陽(yáng)性表達(dá),細(xì)胞核內(nèi)棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)。高倍顯微鏡下(×400)隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)視野,每個(gè)視野讀取200個(gè)組織細(xì)胞,計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目。以陽(yáng)性細(xì)胞染色<5%作為ER或PR表達(dá)陰性,以陽(yáng)性細(xì)胞染色≥5%作為ER或PR表達(dá)陽(yáng)性[5]。

1.4預(yù)后判定標(biāo)準(zhǔn)[6]痊愈:月經(jīng)量恢復(fù)正常,且宮腔鏡檢查無異常粘連情況;有效:月經(jīng)量有所增加,但仍小于既往正常月經(jīng)量,宮腔鏡檢查仍存在少量的宮腔粘連狀況;無效:月經(jīng)量無改變或減少,甚至閉經(jīng),宮腔鏡檢查宮腔粘連狀況無改善。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清ER、PR陽(yáng)性表達(dá)情況比較 免疫組化染色結(jié)果顯示,宮腔粘連組的血清ER、PR陽(yáng)性率高于宮腔正常組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1及圖1。

表1 兩組血清ER、PR陽(yáng)性表達(dá)情況

注:A為血清ER陽(yáng)性表達(dá);B為血清PR陽(yáng)性表達(dá)。

2.2兩組血清ER、PR水平比較 宮腔粘連組的血清ER、PR水平低于宮腔正常組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組血清ER、PR的表達(dá)水平

2.3宮腔粘連患者預(yù)后分析 54例宮腔粘連患者中,臨床治療有效36例(66.67%),無效18例(33.33%)。有效組血清ER水平[(3.37±0.66)U/mL]、ER表達(dá)陽(yáng)性率(0%)低于無效組[(2.77±0.47)U/mL和27.78%(5/18)],差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=12.034,P<0.001 和χ2=9.162,P=0.002)。有效組血清PR水平[(4.53±0.49)U/mL)]、血清PR陽(yáng)性表達(dá)率(0%)低于無效組[(3.27±0.68)U/mL和22.22%(4/18)],差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=11.884,P<0.001和χ2=8.012,P=0.005)。

2.4血清ER、PR表達(dá)與宮腔粘連患者預(yù)后的相關(guān)性 Spearman秩相關(guān)分析結(jié)果顯示,血清ER、PR表達(dá)與宮腔粘連患者預(yù)后呈正相關(guān)(r=0.032、0.026,均P<0.05)。

3 討 論

絕大多數(shù)宮腔粘連的發(fā)生均與宮腔介入性操作有關(guān),其發(fā)生的主要原因是子宮內(nèi)膜基底受損[7]。近年隨著人工流產(chǎn)、不良生活習(xí)慣等宮腔介入性操作增加,導(dǎo)致了宮腔粘連組發(fā)生率升高,影響了患者的生活質(zhì)量[8]。在宮腔粘連臨床治療方案上,手術(shù)中粘連切開和術(shù)后再粘連預(yù)防是兩個(gè)重要環(huán)節(jié),第1個(gè)環(huán)節(jié)手術(shù)粘連分離手術(shù)可在恢復(fù)患者宮腔結(jié)構(gòu)上具有重要作用,但第2個(gè)環(huán)節(jié)再粘連預(yù)防才是最為關(guān)鍵的環(huán)節(jié)[9-10]。研究數(shù)據(jù)顯示,宮腔粘連分離手術(shù)后的宮腔再粘連發(fā)生率可高達(dá)30%～40%[11-12]。有研究表明,宮腔粘連分離手術(shù)后予以患者大量雌孕激素治療可使術(shù)后宮腔再粘連發(fā)生率降低,使大量雌孕激素應(yīng)用成為宮腔粘連分離手術(shù)后預(yù)防宮腔再粘連發(fā)生的常規(guī)方式[13]。

大量雌孕激素應(yīng)用對(duì)于部分宮腔粘連分離手術(shù)患者而言效果微小甚至是無效,且雌、孕激素應(yīng)用也存在較多并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn),當(dāng)子宮內(nèi)膜基底層中雌激素受體飽和后繼續(xù)增加雌激素用量并不能增加子宮內(nèi)膜的修復(fù)功能,相反大劑量雌激素會(huì)增加肝臟負(fù)荷,引起水鈉潴留和乳房脹痛等不適,如引發(fā)乳腺癌、宮頸血栓、肝腎功能損傷等[14]。因此,尋找可對(duì)宮腔粘連分離術(shù)治療效果進(jìn)行預(yù)測(cè)的生物學(xué)指標(biāo)具有重要的臨床意義。在解剖結(jié)構(gòu)上,子宮內(nèi)膜可分為功能層和基地層,其中子宮內(nèi)膜功能層受到性激素水平的調(diào)節(jié),具有周期性增殖、分泌及脫落等臨床特性,而子宮內(nèi)膜基底層可在月經(jīng)周期后再生并轉(zhuǎn)化為子宮內(nèi)膜功能層[15]。ER和PR均是重要雌激素,ER和PR高表達(dá)可促進(jìn)子宮內(nèi)膜上皮、子宮內(nèi)膜腺體改變。通常在子宮內(nèi)膜受損狀態(tài)下,ER和PR均呈高表達(dá)或陽(yáng)性表達(dá)[16-17]。

本研究結(jié)果顯示,宮腔粘連組的血清ER、PR的陽(yáng)性表達(dá)率高于宮腔正常組(P<0.05),提示宮腔粘連患者血清ER、PR水平異常,分析原因在于子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞表達(dá),破壞了子宮內(nèi)膜基底層,減少殘留子宮內(nèi)膜,而導(dǎo)致ER、PR表達(dá)逐漸降低,此外靶細(xì)胞中雌孕激素受體水平與靶細(xì)胞效應(yīng)強(qiáng)弱存在密切關(guān)聯(lián),當(dāng)ER、PR表達(dá)下降時(shí),子宮內(nèi)膜雌孕激素作用下修復(fù)和增生受到了限制,導(dǎo)致宮腔粘連治療效果受到影響[18]。因此,宮腔粘連分離術(shù)后給予雌激素調(diào)節(jié),對(duì)于改善臨床治療效果具有重要意義。本研究結(jié)果還顯示,有效組的血清ER水平和ER陽(yáng)性表達(dá)率、血清PR水平和PR陽(yáng)性表達(dá)率均低于無效組(P<0.05),提示血清雌激素(包括ER、PR)表達(dá)異常與臨床預(yù)后密切相關(guān)。究其原因在于宮腔粘連分離術(shù)后給予結(jié)合雌激素藥物,可結(jié)合子宮內(nèi)大量游離受體蛋白(ER、PR),從而起到促進(jìn)子宮內(nèi)膜生長(zhǎng)和修復(fù),改善宮腔粘連處纖維瘢痕,提升宮腔粘連臨床治療效果[19-20]。理論上,長(zhǎng)期服用雌激素可能會(huì)增加患者發(fā)生乳腺癌、子宮內(nèi)膜增生的風(fēng)險(xiǎn),本研究認(rèn)為短期內(nèi)給予適量的雌激素治療是有效且安全的,但在患者接受治療前應(yīng)先排除乳腺病變、下肢靜脈血栓、吸煙史等,以減少因雌激素使用導(dǎo)致的各類并發(fā)癥發(fā)生。

綜上所述,宮腔粘連患者存在明顯的血清雌激素(包括ER、PR)水平異常,且其表達(dá)異常與臨床預(yù)后密切相關(guān),因此對(duì)宮腔粘連血清雌激素水平檢測(cè),并制訂個(gè)性化的雌激素治療方案,以提升宮腔粘連患者臨床治療效果。