干擾素在動物疫病預(yù)防及治療中的應(yīng)用

武喜強(qiáng)

（臨潭縣新城畜牧獸醫(yī)站，甘肅 臨潭 747502）

為切實做好全國動物疫病強(qiáng)制免疫工作，各級、各地區(qū)不斷強(qiáng)化免疫指導(dǎo)，根據(jù)當(dāng)?shù)匦竽琉B(yǎng)殖情況和所管轄區(qū)內(nèi)動物疫病流行情況，制定針對性動物疫病預(yù)防及治療方案。其中，干擾素防治就是其中之一，通過細(xì)胞表面受體作用使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋，最終起到調(diào)節(jié)免疫、增強(qiáng)動物抗病毒能力的作用，在動物疫病防控方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

1 干擾素應(yīng)用背景

在十四五規(guī)劃期間，各地區(qū)堅持防疫優(yōu)先，立足維護(hù)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展安全，切實筑牢動物防疫屏障，持續(xù)跟蹤病原變化和流行趨勢，并制定綜合性、全面性、針對性想措施，防控動物疫病出現(xiàn)，抑制疫病大規(guī)模暴發(fā)和蔓延。近年來隨著動物病原菌新毒株的流行，如H5N1 高致病性禽流感病、狂犬病病毒、豬瘟病毒、藍(lán)耳病病毒等，變異株不斷出現(xiàn)，加重人畜共患病的出現(xiàn)。傳統(tǒng)防控措施多采用抗生素治療，并加以中藥輔助，不能否認(rèn)的是這種用藥措施可以有效控制患病畜禽繼發(fā)性感染，但是只能從“按癥給藥”，而不能從根本上實現(xiàn)抵抗病毒作用，臨床應(yīng)用效果不佳，難以實現(xiàn)病毒、病原、支原體的徹底根治。而干擾素是一種高活性、多功能的糖蛋白，由巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及體細(xì)胞產(chǎn)生。經(jīng)過干擾素誘生劑刺激后，可直接應(yīng)用于圓環(huán)病毒II 型感染、細(xì)小病毒病、偽狂犬病、輪狀病毒感染等多種疾?。ㄒ陨细蓴_素屬于重組豬干擾素α），對犬貓疫病，如狂犬病、傳染性肝炎、偽狂犬病、犬冠狀病毒病等可直接用重組干擾素ω 進(jìn)行防控。

2 干擾素特點(diǎn)和基本功能

干擾素是一種廣譜抗病毒制劑，可分為三類，即：淋巴細(xì)胞型（γ 型）、成纖維細(xì)胞型（β 型）、白細(xì)胞（α 型）。其中α 型和β 型被稱為Ⅰ型干擾素，IFN-α/β 二者結(jié)合相同受體，γ 型干擾素也被稱為Ⅱ型干擾素，由活化TH1 細(xì)胞、T 細(xì)胞產(chǎn)生，以細(xì)胞外基質(zhì)相連的形式存在，3 種干擾素的理化及生物學(xué)性質(zhì)有明顯差異，生物學(xué)作用也不盡相同，但是在動物疫病防治中均通過細(xì)胞表面受體作用，在不直接殺傷或抑制病毒的基礎(chǔ)上，增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞活力，使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白，起到免疫調(diào)節(jié)作用。

干擾素基本功能為：（1） 抗菌作用，比如IFN-γ 可增加單核巨噬細(xì)胞的吞噬小體，下調(diào)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體減少細(xì)菌供鐵量，凸顯溶酶體溶解細(xì)菌作用，并誘導(dǎo)產(chǎn)生內(nèi)源性NO 直接抑制細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌，通過以上途徑共同達(dá)到抗菌作用。（2）抗病毒作用，α 型和β 型干擾素可間接抑制病毒的復(fù)制過程，在抗病毒的同時防御和調(diào)節(jié)因子，可控制病毒的生長和增殖，還具有活化自然殺傷細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，防止誘導(dǎo)抗體細(xì)胞死亡的功能。同時，經(jīng)相關(guān)研究報道，IFN-γ 與IFN-β 共同使用，有相互加強(qiáng)抗病毒的作用。（3）參與免疫調(diào)節(jié)，有利于巨噬細(xì)胞對抗原的吞噬作用，尤其在IFN-γ 型干擾素的使用下，可對IgG 的Fc 受體表達(dá)，增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答能力，通過增強(qiáng)巨噬細(xì)胞表面表達(dá)Fc 受體，增加巨噬細(xì)胞表面MHCⅡ類分子的表達(dá)，以此活化細(xì)胞，起到免疫調(diào)節(jié)作用。（4）抗寄生蟲作用，IFN-γ 刺激微血管內(nèi)皮細(xì)胞，γ 型干擾素可激活巨噬細(xì)胞，能抑制弓形蟲生長，并催化畜禽體內(nèi)的L- 精氨酸，巨噬細(xì)胞發(fā)揮作用后產(chǎn)生NO，可有效滅殺寄生蟲。

3 干擾素的類型與應(yīng)用方法

本文主要以生豬養(yǎng)殖為例，分析豬瘟、豬輪狀病毒病、豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒病中的應(yīng)用方法。

3.1 干擾素在豬瘟防治中的應(yīng)用豬瘟俗稱“爛腸瘟”，是豬的一種傳染病，該病在自然條件下只感染豬，不是人畜共患病，但該病發(fā)病快、蔓延快，且家豬野豬均易感染，以內(nèi)臟器官嚴(yán)重出血和高死亡率為特征，潛伏期一般為5～7 d，發(fā)病初期病豬精神差，發(fā)熱，喜臥，弓背，后續(xù)隨著病情的逐漸加劇，體溫在40～42 ℃，結(jié)膜發(fā)炎，流膿性分泌物，食欲減退或廢絕，后期腹瀉，糞便惡臭，腹部及四肢內(nèi)側(cè)伴有出血點(diǎn)，經(jīng)過病理檢驗和實驗室診斷發(fā)現(xiàn)，粘膜和內(nèi)臟器官有不同程度的出血，如果是慢性型，主要表現(xiàn)為壞死性腸炎。豬瘟病毒的基因組是單股正鏈RNA，病毒先與細(xì)胞表面的受體結(jié)合，經(jīng)過內(nèi)吞作用后，病毒粒子裂解將其RNA 釋放到胞質(zhì)中，單核巨噬細(xì)胞受到豬瘟病毒感染后，健康豬前列腺素E2可引起機(jī)體的炎癥反應(yīng)，在單核巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)下，最終損傷機(jī)體的淋巴細(xì)胞，病毒粒子吸附在細(xì)胞表面，最終導(dǎo)致抵抗力弱的病豬死亡。

自從2018 年非洲豬瘟傳入后，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所研制出α 型白細(xì)胞干擾素可刺激PK-15 細(xì)胞，對豬瘟病毒的抑制作用顯著。還可使用豬白細(xì)胞干擾素（凍干型），20000U/支，10支/盒，對乳豬（10 日齡以內(nèi)），注射劑量為10 頭/支，1 次/d，連用2～3 d；對10～50 kg 仔豬，注射劑量為3 頭/支，1 次/d，連用2～3 d；對50 kg 以上仔豬，注射劑量為1 頭/支，1 次/d，連用2～3 d；對150 kg 及以上育肥豬，注射劑量為2 頭/支，1 次/d，連用2～3 d。但在用藥過程中，技術(shù)人員應(yīng)該注意到，該α 型白細(xì)胞干擾素應(yīng)該在豬瘟病毒感染前使用，不能在確診后注射，否則療效降低。為響應(yīng)國家畜禽疫病防控相關(guān)政策規(guī)定，一旦發(fā)現(xiàn)豬瘟病例應(yīng)第一時間撲殺，以減低病毒傳播風(fēng)險，因此在使用豬白細(xì)胞干擾素（凍干型）時，應(yīng)該前置，充分發(fā)揮豬白細(xì)胞干擾素（凍干型）的預(yù)防作用，同時在給藥過程中，可以利用5 mL 生理鹽水、雙黃連、黃芪多糖等中藥稀釋，方便注射，可抑制病毒RNA 的合成復(fù)制。

3.2 干擾素在輪狀病毒病防治中的應(yīng)用輪狀毒病在臨床診斷與治療中，被定義為急性腸道傳染病，由豬輪狀病毒引起，中豬和大豬為隱性感染，而仔豬臨床表征更為明顯，主要癥狀為厭食、嘔吐，病初精神沉郁，食欲減退，繼而腹瀉，為水樣或糊狀。糞便為灰黑色或黃色，通常10～21 日齡仔豬的癥狀顯著。解剖病死豬其病理變化病變主要在消化道，小腸壁變薄呈半透明，有時小腸出血，腸內(nèi)容物充滿凝乳塊和乳，腸系淋巴結(jié)腫大，用熒光抗體檢查可以直接診斷為輪狀病毒感染。由于該病病原為豬輪狀病毒，病毒腸毒素以NSP4 基因為主，NSP4是非結(jié)構(gòu)糖蛋白（由第10 段基因編碼），可以破壞細(xì)胞間的緊密連接，在病毒感染后，從腸上皮細(xì)胞頂端釋放繼而引起腹瀉癥，加劇病毒感染，在胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上作為病毒雙層顆粒受體，幫助病毒脫殼和進(jìn)入細(xì)胞過程，通過劫持自噬機(jī)制促進(jìn)病毒粒子成熟，抑制天然免疫發(fā)應(yīng)，抑制下游抗病毒細(xì)胞因子產(chǎn)生，且病毒蛋白與宿主間關(guān)系十分復(fù)雜，在病毒與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合之后，病毒受體被病毒劫持以協(xié)助其感染，再加之病毒在不斷變異，當(dāng)前臨床投入藥物雖然可以增強(qiáng)某些病毒代謝過程，但在給藥的同時，也意味著細(xì)胞淘汰。

對此，可利用I 型干擾素，如植物血凝素，該藥劑屬于I 型干擾素系列，在治療病毒性腹瀉、病毒型呼吸道疾病、傳染性胃腸炎、多系統(tǒng)衰竭綜合征、藍(lán)耳病等方面功效顯著，用法用量為：肌肉注射0.01 mL/kg.bw，用5 mL 生理鹽水稀釋，對機(jī)體免疫力不足的仔豬，可用5 mL 黃芪多糖注射液稀釋，1次/d，連用2～3 d，也可以通過混飲方式，將藥液稀釋后溶于水（按照1：10 的比例勾兌），1 次/d，連用3～5 d。該藥劑可刺激T 細(xì)胞增殖分化，可刺激B 細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞，同時產(chǎn)生大量效應(yīng)T 細(xì)胞，對病毒起到殺滅作用，也產(chǎn)生細(xì)胞毒T 細(xì)胞，殺毒作用更為顯著，也可以增殖分化為漿細(xì)胞，干擾素的誘生能力是聚肌胞苷酸的30 倍，并產(chǎn)生大量非特異性抗體。技術(shù)人員也應(yīng)注意到，可以視病豬身體情況，可用干擾素配合雙黃連注射液使用，尤其對癥狀較為嚴(yán)重的豬，可用復(fù)方穿心蓮注射液，有良好的預(yù)防和治療作用。

3.3 干擾素在偽狂犬病防治中的應(yīng)用偽狂犬病屬于豬的急性傳染病，由豬偽狂犬病病毒引起，其基因組是線狀雙鏈DNA 分子，是皰疹病毒科中抵抗力較強(qiáng)的一種，可引起妊娠母豬流產(chǎn)和仔豬生長停滯，病毒粒子為圓形，在pH4～9 保持穩(wěn)定，通過已感染豬排毒而傳給健康豬，傳播途徑多為鼻分泌、乳汁和精液，幼齡豬感染偽狂犬病毒后病情最重。在發(fā)病初期，病豬昏睡、嗚叫、嘔吐，有時見到肺水腫，精神極度委頓，這一階段死亡率在10%～20%，成年豬臨床癥狀多表現(xiàn)為體溫上升達(dá)41 ℃以上，懷孕母豬可發(fā)生流產(chǎn)，沒有明顯的季節(jié)性特征。病理檢測發(fā)現(xiàn)，病死豬腦膜明顯充血，淋巴細(xì)胞內(nèi)可見核內(nèi)嗜酸性包涵，中樞神經(jīng)系統(tǒng)有明顯的血管套，有時可見肝臟小葉周邊出現(xiàn)凝固性壞死。

此時，對偽狂犬病，養(yǎng)殖技術(shù)人員可采用誘導(dǎo)白細(xì)胞介素，促進(jìn)誘導(dǎo)I 型干擾素的表達(dá)，如用白細(xì)胞介素-2，該藥物具有雙重藥理作用，臨床主要用于治療由豬附紅細(xì)胞體、大腸桿菌病、偽狂犬病、弓形體病、原蟲病等，即能抗菌，又能抗病毒，可有效對肺炎球菌、沙門氏菌、巴氏桿菌、布魯氏菌、豬痢疾螺旋體等病原有較好的抑制作用。預(yù)防時，可以將本品100 g 兌水300 kg，讓健康豬每次灌服250 mL，并在30 min 內(nèi)飲用完畢，1 次/d，若拌料，可以將本品100 g 拌料150 kg，連用3～5 d；用于治療時，可以將本品100 g 兌水200 kg，讓病豬每次灌服300 mL，并在50 min 內(nèi)飲用完畢，1 次/d，治療拌料，可以將本品100 g 拌料100 kg，連用5～7 d。服藥之后，由于白細(xì)胞介素是T 細(xì)胞分泌的一種生長因子，可以提高臨床免疫效果，通過特異性誘導(dǎo)機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫，增強(qiáng)健康豬大腸桿菌病、支原體病等疫苗的免疫力，顯著提高免疫水平，高機(jī)體抗應(yīng)激能力，發(fā)病情況下與藥物或疫苗配合使用能在短時間內(nèi)控制疾病。

3.4 干擾素在豬圓環(huán)病毒病防治中的應(yīng)用

豬圓環(huán)病毒粒子直徑約為17 nm，在pH3 的酸性環(huán)境中很長時間不被滅，可能引發(fā)病豬繁殖障礙、先天性顫抖。感染豬可自鼻液、體液、糞便中排出病毒，懷孕豬可經(jīng)胎盤垂直傳播感染仔豬，且病毒可水平傳播，病理變化為患豬消瘦，內(nèi)臟和外周淋巴結(jié)腫大，肺部有灰褐色炎癥和腫脹，肝小葉間結(jié)締組織增生，且組織學(xué)病變廣泛分布于全身器官，淋巴細(xì)胞缺失，心臟有多灶性心肌炎。

此時，技術(shù)人員可以利用干擾素，如三防四聯(lián)工程干擾素，也被稱為1FNa+IFNp，每2 g 含1500萬活性單位（超濃縮型），該干擾素主要用于豬病毒性疾病的有效預(yù)防和治療，同時本品通過競爭體內(nèi)組胺受體，對母畜因生產(chǎn)所引起的免疫功能下降起到控制作用，對多種革蘭氏陽性菌及支原體均有強(qiáng)大的殺滅作用。用法用量為肌肉注射，1 mL/30 kg，1 次/d，如果是應(yīng)用于預(yù)防，肌肉注射，0.5 mL/30 kg，若病重豬或陽性病例的同群豬，給藥量為2 mL/30 kg，連用3 d 為一個療程，必要時可結(jié)合中醫(yī)治療手段，比如使用扶正解毒散，本品主要成分為板藍(lán)根、黃芪、淫羊藿可通過中藥誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生干擾素,在宿主細(xì)胞作用下而產(chǎn)生抗病毒蛋白,起到扶正祛邪、清熱解毒效果，抑制病毒蛋白合成,影響病毒釋放，在增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的同時抑制豬圓環(huán)病毒病，緩解臨床癥狀。

4 干擾素應(yīng)用時常見不良反應(yīng)和規(guī)避措施

在使用干擾素時，不能與含有氯離子的消毒劑共用，且食槽、水盆不能含有氯離子。給病豬注射干擾素后禁止使用磺胺類藥物，同時養(yǎng)殖技術(shù)人員和基層獸醫(yī)技術(shù)人員應(yīng)該注意到，病豬在使用干擾素之后可能出現(xiàn)惡心、食欲不振、興奮、心律失常等副作用，通常情況下以上癥狀將在1 d 內(nèi)消失，后續(xù)可繼續(xù)給藥，給藥劑量和頻次不變，否則可適當(dāng)降低給藥量或者停藥，尋求新的防治措施，以避免病情進(jìn)一步惡化。