喉癌組織中FBXW7、SCC-Ag表達(dá)與臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系

鄺 林 趙 靜 張 靜 倫巍巍

受空氣污染、吸煙飲酒、燙食辣食等不良因素的影響,近年來喉癌的發(fā)病率一直居高不下[1]。喉癌患者早期多無明顯特異性癥狀,僅表現(xiàn)為咳嗽聲嘶、喉部異物感等癥狀,而隨著癌腫的進(jìn)一步發(fā)展,可逐漸出現(xiàn)頸部腫塊、嗆咳、吞咽困難以及呼吸困難等癥狀,嚴(yán)重者還可出現(xiàn)惡病質(zhì)表現(xiàn)。喉癌的臨床治療主要以手術(shù)切除輔以放、化療的綜合性治療,而實(shí)際治療方案的選擇則需結(jié)合癌腫分期、分化等多方面因素進(jìn)行綜合考量,因而對于喉癌患者癌腫發(fā)展情況的早期評估亦是其臨床治療中的重要一環(huán)。F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)是近年發(fā)現(xiàn)的抑癌基因,其在正常生理狀態(tài)下高表達(dá)以誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡,其低表達(dá)或表達(dá)缺失均對機(jī)體癌腫發(fā)展變化有一定的提示作用[2]。鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC-Ag)異常表達(dá)多與肺癌、卵巢癌以及部分消化系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切聯(lián)系[3]?；诖?本院選取83例喉癌患者資料進(jìn)行研究,探討喉癌組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)與臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2016年1月至2022年1月本院收治的83例喉癌患者資料,其中男性62例,女性21例;年齡37～75歲,平均年齡(58.87±6.53)歲。

1.2 入組條件

納入標(biāo)準(zhǔn):①病理學(xué)檢測確診為喉癌[4];②提取病理標(biāo)本前未接受過放、化療;③無喉部手術(shù)史;④臨床及隨訪資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并不典型增生;②合并聲帶息肉;③合并重要臟器功能障礙;④合并其他腫瘤疾病;⑤合并全身感染性疾病。

1.3 方法

所有研究樣本均通過手術(shù)獲取喉癌組織及癌旁正常組織(距癌組織邊緣>3.0 cm,且經(jīng)病理學(xué)檢測確定無癌細(xì)胞浸潤),以多聚甲醇固定,無水乙醇脫水浸泡2 h后進(jìn)行石蠟包埋,切片后以60 ℃進(jìn)行烘烤,脫蠟水化后以抗原修復(fù)液進(jìn)行抗原修復(fù)。自然冷卻至室溫后以磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗3次,每次沖洗持續(xù)5 min,而后以3%的過氧化氫溶液孵育0.5 h,再次以PBS沖洗3次,每次沖洗持續(xù)5 min。以山羊血清封閉后于37 ℃恒溫水浴箱內(nèi)孵育0.5 h,去除封閉液,加入稀釋后的FBXW7、SCC單克隆抗體,低溫濕盒過夜。次日復(fù)溫至室溫以PBS沖洗3次,每次沖洗持續(xù)5 min,以辣根過氧化物酶標(biāo)記后于37 ℃恒溫水浴箱內(nèi)孵育0.5 h,再次以PBS沖洗3次,每次沖洗持續(xù)5 min,滴加二氨基聯(lián)苯胺顯色劑,通過顯微鏡觀察切片染色情況,直至染色滿意后以自來水沖洗,再以蘇木精復(fù)染,沖洗脫水后以中性樹膠封片,于顯微鏡下觀察FBXW7、SCC-Ag表達(dá)情況。

1.4 FBXW7、SCC-Ag表達(dá)情況

所有病理標(biāo)本均由兩位病理醫(yī)師進(jìn)行雙盲閱片和評分,以二者評分均值為最終評估結(jié)果。于顯微鏡下隨機(jī)去5個(gè)高倍視野,評估染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞占比:染色強(qiáng)度:無著色記0分,黃色記1分,棕黃色記2分,棕褐色記3分。陽性細(xì)胞占比:無陽性細(xì)胞記0分,≤24%記1分,>24%～50%記2分,>50%～75%記3分,>75%記4分。計(jì)算兩項(xiàng)總分,總分≥4分提示為陽性表達(dá)。

1.5 觀察指標(biāo)

①比較癌組織及癌旁組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)陽性率;②比較不同癌組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)情況患者基礎(chǔ)(性別、年齡、吸煙飲酒史)及臨床病理資料(癌腫分期、分化、浸潤深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)。③患者出院后通過門診、電話等形式進(jìn)行隨訪,評估患者6個(gè)月內(nèi)預(yù)后(復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或死亡記為預(yù)后不良,反之為預(yù)后良好),比較不同預(yù)后患者癌組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)情況。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 癌組織及癌旁組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)陽性率比較

癌組織FBXW7表達(dá)陽性率為22.89%,低于癌旁組織的90.36%;癌組織SCC-Ag表達(dá)陽性率為72.29%,高于癌旁組織的20.48%(P<0.05),見表1。

表1 癌組織及癌旁組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)陽性率比較(例,%)

2.2 FBXW7、SCC-Ag表達(dá)與患者臨床病理情況的關(guān)系

單因素分析顯示,腫瘤病理分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與喉癌組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)情況具有密切聯(lián)系(P<0.05),見表2、3。

2.3 FBXW7、SCC-Ag表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系

6個(gè)月內(nèi)預(yù)后良好患者54例,預(yù)后不良患者29例。預(yù)后良好患者癌組織FBXW7表達(dá)陽性率為29.63%,高于預(yù)后不良患者的10.34%;預(yù)后良好患者癌組織SCC-Ag表達(dá)陽性率為62.96%,低于預(yù)后不良患者的89.66%(P<0.05),見表4。

表2 FBXW7、SCC-Ag表達(dá)與患者臨床病理資料的關(guān)系(例,%)

表3 FBXW7、SCC-Ag表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系(例,%)

3 討論

喉癌是咽喉部最常見的惡性腫瘤,其發(fā)病原理尚不明確,但與吸煙飲酒、不良飲食習(xí)慣等因素密切相關(guān)。喉癌患者早期多無明顯癥狀,中晚期則可逐漸出現(xiàn)聲音嘶啞、咳痰咳血、喉部異物等癥狀,如腫瘤表面破潰還易并發(fā)感染出現(xiàn)呼氣惡臭味等癥狀[5]。臨床對于喉癌的治療多以手術(shù)根治切除為主,但受癌腫分期及分化等情況的影響,其術(shù)后的抗腫瘤治療方案具有較大差異。對于中、晚期喉癌患者,在手術(shù)治療后仍需長期進(jìn)行放、化療輔助治療,而放化療方案的制定亦需結(jié)合患者實(shí)際癌腫分期分化、浸潤程度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等情況進(jìn)行綜合評估。因此,找到更多輔助早期評估喉癌發(fā)展的參考指標(biāo),對其抗腫瘤治療方案的制定、延長患者生存期、改善其生活質(zhì)量均有重要意義[6]。

近年來,分子生物技術(shù)逐漸成為臨床研究的重點(diǎn),其在疾病的評估及治療中均起到了極大的輔助作用,而其中生物標(biāo)志物在各類腫瘤疾病的診斷評估和用藥指導(dǎo)中起到不容忽視的作用。FBXW7是近年新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因,其與卵巢癌、乳腺癌以及消化道惡性腫瘤的癌腫細(xì)胞增殖、侵襲以及轉(zhuǎn)移發(fā)展均有一定聯(lián)系,作為機(jī)體潛在的標(biāo)靶基因,其在多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中均起到部分調(diào)控作用[7-8]。SCC-Ag屬鱗狀上皮癌標(biāo)志物,是絲氨酸蛋白酶抑制劑家族成員,主要分布于各類鱗狀細(xì)胞癌癌腫細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi),既往多用于鱗癌的診斷評估,隨著近年對相關(guān)腫瘤標(biāo)志物的研究發(fā)展,SCC-Ag在卵巢癌、肺癌、消化道惡性腫瘤的早期診斷評估中亦有較高的應(yīng)用價(jià)值[9]。此次研究結(jié)果顯示,所有研究樣本中患者癌組織FBXW7表達(dá)陽性率為22.89%,低于癌旁組織的90.36%;癌組織SCC-Ag表達(dá)陽性率為72.29%,高于癌旁組織的20.48%,且單因素分析顯示,癌腫病理分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與喉癌組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)情況具有密切聯(lián)系。正常生理狀態(tài)下,FBXW7高表達(dá)可誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡,抑制癌腫細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移,以達(dá)到控制癌腫發(fā)展的效果,而喉癌組織中FBXW7多呈低表達(dá)或缺失表達(dá),無法抑制c-Myc等原癌基因的表達(dá)而導(dǎo)致c-Myc蛋白蓄積,癌細(xì)胞的增殖能力增強(qiáng)而凋亡減少,癌細(xì)胞大量擴(kuò)增,其侵襲性明顯增加,癌腫轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)更高[10]。假復(fù)層柱狀上皮及鱗狀上皮在正常生理狀態(tài)下雖能表達(dá)SCC-Ag,但表達(dá)水平極低,而在喉癌組織中,異常增殖的鱗狀細(xì)胞內(nèi)則多見大量酸性SCC蛋白表達(dá),尤以低分化癌細(xì)胞更為明顯,本次研究結(jié)果亦與王劍等[11]的臨床研究相印證。此次研究中,隨訪6個(gè)月內(nèi)預(yù)后良好患者癌組織FBXW7表達(dá)陽性率為29.63%,高于預(yù)后不良患者的10.34%;癌組織SCC-Ag表達(dá)陽性率為62.96%,低于預(yù)后不良患者的89.66%,提示癌組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)對喉癌患者預(yù)后情況亦有提示作用。因此,臨床可根據(jù)癌組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)情況結(jié)合其具體病情評估其癌腫發(fā)展情況,并參考評價(jià)結(jié)果制定針對性的術(shù)后抗癌腫治療方法,以盡可能保證患者預(yù)后,延長患者生存期。

綜上所述,喉癌患者癌組織中FBXW7多呈低表達(dá)或表達(dá)缺陷,而SCC-Ag多呈高表達(dá),同時(shí),患者病理分期、分化、浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均與癌組織FBXW7和SCC-Ag的表達(dá)密切相關(guān),且患者預(yù)后情況亦與二者表達(dá)有一定關(guān)聯(lián),因此在早期評估喉癌患者癌腫發(fā)展時(shí),可將癌組織FBXW7、SCC-Ag表達(dá)情況作為輔助參考,并結(jié)合具體病情制定相應(yīng)的抗癌腫治療方案,以延長患者生存期,提升其生存質(zhì)量。