乳腺癌手術(shù)切除患者放療前后外周血單個核細胞中Survivin、OTUD3 mRNA變化及與預后的關(guān)系

張 蕾 趙 嬋 王海蕊 張曉霞

乳腺癌是指發(fā)生在乳腺的良性或惡性腫瘤,根據(jù)其發(fā)病情況可分為早、中、晚三個階段[1]。早期乳腺癌癥狀體現(xiàn)為患側(cè)乳房出現(xiàn)無痛、單發(fā)的小腫塊;中期癥狀體現(xiàn)為鄰近乳頭或乳暈的癌腫因侵入乳管使之縮短,可把乳頭牽向癌腫一側(cè),進而可使乳頭扁平、回縮、凹陷;晚期乳房因腫塊的浸潤、收縮而變形[2],可使上臂淋巴回流障礙而引起上肢水腫。乳腺癌通常高發(fā)于40～60歲的女性群體,男性患者較為少見[3]。乳腺良性腫瘤患者一般通過手術(shù)治療,惡性腫瘤患者早期首選手術(shù)治療,中晚期患者手術(shù)加藥物或放療、化療等綜合治療[4]。有研究發(fā)現(xiàn)對于癌細胞與機體生物指標之間的關(guān)系的研究可以幫助癌癥患者建立個體化治療,對提高放化療療效和疾病預后有著重大影響[5]。Survivin和OTUD3分別屬于凋亡抑制因子和去泛素化酶中的一種,與癌細胞之間存在著密切聯(lián)系,為明確兩者表達情況與疾病的預后關(guān)系,特選取79例乳腺癌患者作為觀察對象,具體研究報告內(nèi)容如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取我院2019年1月至2021年1月收錄的79例乳腺癌并行擴大根治術(shù)的患者作為觀察組,另選取同期健康體檢志愿者55例作為對照組。納入標準:①觀察組患者經(jīng)檢查均符合乳腺癌診斷標準[6];②無術(shù)前癌細胞遠處轉(zhuǎn)移;③無家族遺傳性精神疾病者;④年齡20～65歲。排除標準:①合并有神經(jīng)系統(tǒng)疾病者;②合并有心臟、腎臟等功能性疾病者;③合并有免疫系統(tǒng)疾病者;④男性患者。觀察組79例,年齡20～65(42.63±1.22)歲,病程1～6(3.14±0.65)年。對照組納入標準:①X光照射檢查結(jié)果正常;②核磁共振檢查結(jié)果正常。對照組55例,年齡18～57(41.14±1.06)歲。2組研究對象一般資料對比無統(tǒng)計學意義(P>0.05)

1.2 方法

1.2.1 放射治療 采用6 MV的電子線對患者胸壁上區(qū)進行照射治療,使用9 MV的電子線在鎖骨上區(qū)照射治療,均行18次照射治療,照射治療結(jié)束后在患者胸壁處使用0.5組織等效膜,2 Gy/次,5次/周,總量50 Gy,以21天為1個完整療程,共進行3個療程的治療。

1.2.2 外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況檢測 收集對照組和觀察組患者放療前后外周靜脈血3 mL進行低溫冷凍保存,淋巴細胞分離液對單個核細胞進行分析,按照50∶1的比例加入Trizol試劑,并按照標準步驟提取RNA,提取出的RNA用100%的去離子甲酰胺溶解,-70 ℃環(huán)境下保存,對RNA進行逆錄轉(zhuǎn)并且進行PCR擴增,最后使用2-ΔΔct計算出Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量。所有RNA提取試劑盒、PCR試劑盒均從武漢默沙克生物科技有限公司采購。

1.3 觀察指標

(1)2組人員外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況對比,觀察組包括放療前后;(2)觀察組人員的一般資料和病理特征與Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況的關(guān)系,包括年齡、腫瘤大小、腫瘤分期、腫瘤分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等;(3)觀察組放療前后Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況與病理特征的相關(guān)關(guān)系;(4)Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對放療的預后價值評估。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 2組人員外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況對比

觀察組放療前后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量均高于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);觀察組放療后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA低于放療前,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。如表1。

2.2 觀察組人員的一般資料和病理特征與Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況的關(guān)系

表1 2組人員外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況對比

放療前后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達與年齡、腫瘤大小無關(guān)(P>0.05),與腫瘤分期、腫瘤分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)(P<0.05)。如表2。

表2 觀察組人員的一般資料和病理特征與Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況的關(guān)系

2.3 觀察組放療前后Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況與病理特征的相關(guān)關(guān)系

放療前后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量與腫瘤分期都呈現(xiàn)顯著正相關(guān)關(guān)系(γ=0.622,γ=0.684,γ=0.705,γ=0.714;P<0.001);與腫瘤分化呈現(xiàn)顯著負相關(guān)關(guān)系(γ=-0.548,γ=-0.629,γ=-0.574,γ=-0.596;P<0.001);與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)顯著正相關(guān)關(guān)系(γ=0.685,γ=0.711γ=0.697γ=0.688;P<0.001)。如表3。

表3 觀察組放療前后Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況與病理特征的相關(guān)關(guān)系

2.4 Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對放療的預后價值評估

根據(jù)ROC 曲線獲得,最佳界限以Survivin-mRNA(1.67)、OTUD3-mRNA(0.49)可獲得ROC 曲線下最大面積,表明乳腺癌術(shù)后放療與Survivin-mRNA、OTUD3-mRNA密切相關(guān),且兩項聯(lián)合檢測的敏感度(81.0%)、特異度(83.6%)均高于單項檢測(P<0.05),見圖1,表4。

圖1 ROC曲線圖

3 討論

流行病學研究顯示,乳腺癌在全球女性癌癥中的發(fā)病率為24.2%,位居首位,其中52.9%發(fā)生在發(fā)展中國家[7]。在我國,每年有30余萬女性被診斷出乳腺癌。在東部沿海和經(jīng)濟發(fā)達地區(qū),發(fā)病率尤其上升[8]。從發(fā)病年齡看,我國乳腺癌發(fā)病率從20歲以后逐漸上升,40～50歲達到高值。隨著新的治療方法普及,全球乳腺癌死亡率逐步下降。然而在我國,特別是廣大農(nóng)村地區(qū),乳腺癌死亡率下降趨勢并不明顯[9]。近年來對于乳腺癌患者進行個體化治療,預測早期療效和預后效果的研究已經(jīng)成為癌癥治療的熱門話題[10]。放射治療在乳腺癌的術(shù)后治療方面占有重要地位,因此如果能夠?qū)Ψ派渲委煹寞熜Ш皖A后進行一定程度上的評估和預測,將對臨床癌癥治療方面起著重大影響[11]。目前來說,常用的形態(tài)影像學預測效果并不理想,而對于生物標志物方面的研究似乎可以作為新的方向,因此找到能夠預測評估癌癥術(shù)后放療和預后效果的生物標志物已成為目前研究的重要研究方向[12]。

表4 Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對放療的預后價值評估

本次研究結(jié)果顯示乳腺癌患者放療前后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量均高于正常人體細胞的表達量,且放療后的表達量比放療前有著明顯降低,這提示Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達情況與乳腺癌的疾病以及放療存在著密切關(guān)系。Survivin屬于20世紀初發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白中新的一員[13]。凋亡抑制蛋白可通過BIR 結(jié)構(gòu)域直接與Caspase 的IBM 結(jié)合,抑制Caspase3/7/9 的催化活性,阻斷細胞凋亡進程,同時在人體細胞漿、細胞核和染色體上也有表達,Survivin就屬于定位于細胞核上的一種[14-16]。國外學者研究[17]表明,凋亡抑制蛋白介導的凋亡抑制可能是腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥性的原因之一,是調(diào)控腫瘤細胞凋亡和對化療藥物敏感性的關(guān)鍵分子,有可能發(fā)展為逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞耐藥、提高療效的新靶點[18]。而OTUD3則是屬于去泛素化酶OTUDs家族中的一種,OTUD3的底物PTEN能夠與OTUD3之間直接進行相互作用,通過阻斷P13/Akt的信號通路來抑制癌細胞的發(fā)展進程并起到抑癌基因的作用。有研究[19]表明,OTUD3參與各種癌癥發(fā)展進程。本研究結(jié)果顯示放療前后外周血單個核細胞Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量與腫瘤分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移都呈現(xiàn)顯著正相關(guān)關(guān)系,而與腫瘤分化程度則是呈現(xiàn)負相關(guān)關(guān)系,與歷史研究資料的結(jié)果相一致[20]。對Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對放療的預后價值評估的研究結(jié)果顯示兩者AUC均大于0.7,提示Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對于乳腺癌患者術(shù)后放療短期預后都存在著一定評估價值。

綜上,對乳腺癌患者術(shù)后體內(nèi)Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況進行監(jiān)測對術(shù)后放療短期預后都存在著一定評估價值。因此Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA也許能夠作為評估癌癥術(shù)后放療預后的重要生物指標,具有重要臨床價值。