豬旋毛蟲病檢疫檢驗(yàn)與防治措施

摘要：旋毛蟲病是重要的食源性人畜共患寄生蟲病之一，該病對人的致病性比對生豬的影響大，生豬感染后短期內(nèi)不出現(xiàn)明顯的臨床癥狀，通常在屠宰檢疫中被發(fā)現(xiàn)；嚴(yán)重病例早期表現(xiàn)為腹瀉，中后期表現(xiàn)為肌肉疼痛、消瘦等癥狀。感染生豬被視為我國旋毛蟲病的主要傳染源，威脅人民健康和社會穩(wěn)定。屠宰檢疫時(shí)可通過肌肉壓片、消化法進(jìn)行診斷，養(yǎng)殖環(huán)節(jié)可結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查，采用PCR、ELISA等檢測方法進(jìn)行診斷。該病的防治采取“以治滅源，治、檢、管結(jié)合”的綜合性措施，降低生豬旋毛病的發(fā)病率，保障生豬和人類健康。

關(guān)鍵詞：豬旋毛蟲；食源性；檢疫檢驗(yàn)；防治措施

旋毛蟲病是由旋毛蟲感染哺乳動物導(dǎo)致的一種世界范圍的食源性人畜共患寄生蟲病，旋毛蟲的宿主范圍廣泛，人、豬、犬、貓、野豬等哺乳動物均可感染旋毛蟲，食用未經(jīng)煮熟的肉類和來自含有感染性幼蟲的家豬和野豬的肉是人類感染該病的主要原因。

旋毛蟲對豬的致病作用要比對人和鼠小得多，大多數(shù)生豬感染旋毛蟲后沒有臨床癥狀，因此通過臨床癥狀進(jìn)行診斷是很難發(fā)現(xiàn)的，豬旋毛病多在屠宰檢疫時(shí)被發(fā)現(xiàn)。近年來我國采取嚴(yán)格的屠宰檢疫、養(yǎng)殖環(huán)節(jié)監(jiān)測、提升生物安全水平等一系列措施，養(yǎng)殖環(huán)節(jié)中重點(diǎn)加強(qiáng)對豬飼喂泔水的管理，屠宰環(huán)節(jié)重點(diǎn)加強(qiáng)旋毛蟲的視檢和鏡檢，屠宰檢疫時(shí)經(jīng)確診為旋毛蟲病肉時(shí)，嚴(yán)格執(zhí)行無害化處理規(guī)定。以上措施使豬旋毛蟲的發(fā)病率大幅度下降，旋毛蟲病防治工作取得良好成效，但少數(shù)地區(qū)還存在散發(fā)。本文對豬旋毛蟲的流行、生活史、檢疫檢驗(yàn)、防治措施等進(jìn)行回顧總結(jié)，以期為豬旋毛蟲病的防治提供理論依據(jù)。

1 旋毛蟲病的流行與危害

1.1 流行情況

旋毛蟲最早是在1835年被英國學(xué)者James Panes Paget在人類尸體中發(fā)現(xiàn)的。旋毛蟲分布于世界各地，宿主范圍廣泛，幾乎所有哺乳動物均可感染，甚至某些昆蟲也可感染帶蟲，因此旋毛蟲的流行存在自然疫源性。我國生豬養(yǎng)殖仍然以中小型養(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶居多，特別是在少數(shù)民族地區(qū)，生豬放牧以及飼養(yǎng)環(huán)境較差等因素，導(dǎo)致豬旋毛蟲檢出率較高。旋毛蟲對環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)，肉類的不同加工方法，通常不足以完全殺死肌肉中的旋毛蟲，在低溫零下12 ℃環(huán)境中可存活2個(gè)月，食鹽浸泡和煙熏只能殺死肉類表層包囊中的幼蟲，而深層的可存活一年以上，肌纖維細(xì)胞可為第一期幼蟲提供營養(yǎng)。旋毛蟲與肌纖維的共生機(jī)制還不明確，有待進(jìn)一步研究。

1.2 旋毛蟲的危害

豬感染旋毛蟲病通常沒有明顯的臨床癥狀，但會導(dǎo)致生豬肌肉功能障礙、營養(yǎng)不良等，嚴(yán)重的導(dǎo)致貧血、消瘦，嚴(yán)重影響生豬養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)。值得注意的是豬肉是人類肉類食物的重要來源，豬旋毛蟲病是人類旋毛病的重要傳染源，該病具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。

2 生豬旋毛蟲病檢疫技術(shù)

2.1 屠宰檢疫

生豬屠宰檢疫旋毛蟲常用的方法為肌肉壓片法和消化法。消化法是世界動物衛(wèi)生組織公認(rèn)的診斷旋毛蟲病的最佳方法。由于旋毛蟲幼蟲具有組織嗜性，生豬感染后幼蟲主要出現(xiàn)在膈肌中，所以肌肉壓片法和消化法通常僅限于生豬宰后的檢疫，肌肉壓片鏡檢法和消化法也可用于養(yǎng)殖環(huán)節(jié)非活豬的檢驗(yàn)。

肌肉壓片鏡檢法具體步驟：①生豬屠宰后，優(yōu)先選擇豬胴體兩側(cè)的橫膈膜肌腳部各采一塊50 g及以上的肉樣，如果是不完整的胴體，可從肋間肌、咬肌、腰肌、舌肌取樣；②剝離脂肪和結(jié)締組織，用組織剪順著肌纖維方向隨機(jī)剪28粒燕麥粒大?。?.2～1 cm）的肉樣，將樣品均勻放在夾壓玻璃板上，排列整齊；③將另一夾壓玻璃板蓋上，加壓使樣品壓成半透明薄片；④將制備好的壓片放在低倍鏡下進(jìn)行鏡檢，放大倍數(shù)為4×10，鏡檢時(shí)從壓片一端邊沿開始查找，直到另一端為止?？吹娇梢?、不清晰的地方可加大放大倍數(shù)進(jìn)行觀察（10×10）；⑤結(jié)果判定。發(fā)現(xiàn)包囊蟲體或無包囊蟲體均判定為旋毛蟲感染。旋毛蟲包囊圓形或橢圓形，包囊中央可看到蜷曲的蟲體。無包囊的旋毛蟲可觀察到直桿狀或略蜷曲狀態(tài)蟲體。如果觀察到數(shù)量不等、濃淡不均的黑色鈣化物可打開壓片，加入適量10%鹽酸溶液后靜置1～2 min再進(jìn)行觀察。

消化法具體操作步驟：①肌肉樣品采集：生豬屠宰后采集豬舌肌或膈肌組織5 g左右，可將20頭生豬肌肉樣本混合為100 g，通常低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)混合數(shù)應(yīng)少于30頭，該病的高發(fā)地區(qū)混合數(shù)少于20頭；②用組織剪去除脂肪和結(jié)締組織，將相同體積的37%鹽酸水溶液與樣品混合，再用碎肉機(jī)或絞肉機(jī)將其攪碎，加入適量消化液（含胃蛋白酶、37%鹽酸，現(xiàn)配現(xiàn)用，用前加熱至45 ℃）后在加熱磁力攪拌器上加熱攪拌至無肉眼可見碎肉；③用孔徑為180 μm的不銹鋼網(wǎng)篩進(jìn)行過濾，若有未完全消化的碎肉殘?jiān)枰M(jìn)行重新消化；④采用沉淀法使旋毛蟲沉到底部。將濾清的沉淀物倒入有標(biāo)尺的培養(yǎng)皿中，在倒置顯微鏡4×10或10×10的放大倍數(shù)下查找蟲體或鈣化包囊；⑤發(fā)現(xiàn)旋毛蟲或鈣化包囊可判定為旋毛蟲感染。

2.2 養(yǎng)殖環(huán)節(jié)診斷

1）臨床診斷 生豬感染旋毛蟲后臨床癥狀不明顯，在蟲體大量感染早期，感染生豬可出現(xiàn)食欲差、腹瀉、嘔吐等癥狀，中后期會出現(xiàn)肌肉疼痛或麻痹、咀嚼與吞咽障礙、聲音嘶啞等癥狀。因大多數(shù)生豬沒有明顯的癥狀，通常需要借助實(shí)驗(yàn)室的診斷技術(shù)進(jìn)行確診。

豬旋毛蟲病臨床診斷還可使用皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)。該方法需要豬旋毛蟲病皮試變應(yīng)原，取該檢測試劑0.2 mL，待檢豬的耳后頸部皮內(nèi)注射，正確操作后會在注射部位形成一個(gè)豆粒大小的水皰，然后觀察皮膚反應(yīng)。在注射后10～20 min判定結(jié)果。注射局部的水皰變紅、變暗，形成直徑1 cm以上的暗紫紅色斑點(diǎn)并保持30 min以上為陽性反應(yīng)。注射局部的水皰無變化，在10 min左右消失或出現(xiàn)淡紅色斑點(diǎn)在30 min內(nèi)消失則為陰性反應(yīng)。

2）實(shí)驗(yàn)室診斷 生豬旋毛蟲的實(shí)驗(yàn)室診斷方法包括酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）、熒光免疫層析、多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（多重PCR）及環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）等方法。多重PCR方法需要PCR儀、離心機(jī)等精密儀器，在基層很少使用。

旋毛蟲ELISA試驗(yàn)是養(yǎng)殖環(huán)節(jié)豬群活體篩查最常用的方法，采用旋毛蟲的分泌抗原檢測正處于感染階段豬的血清樣品。

熒光免疫層析是將免疫層析原理和膠體金標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合，用提純的ES抗原建立膠體金快速診斷的方法。例如，吉林大學(xué)任科研[1]建立的旋毛蟲免疫膠體金試紙條敏感性高，特異性強(qiáng)。免疫膠體金試紙條檢測方法不需要特殊儀器、操作簡單，很適合在基層進(jìn)行推廣使用，作為旋毛蟲的初篩?，F(xiàn)已有相應(yīng)產(chǎn)品用于豬旋毛蟲抗體快速檢測，通常將待檢血清按照說明書稀釋后直接檢測，如果是肌肉組織，需要將其剪碎或勻漿后稀釋，靜置后取上清進(jìn)行檢測。

3 旋毛蟲病的防治

3.1 疫苗預(yù)防

旋毛蟲病作為一種幾乎呈全球性分布的食源性人獸共患寄生蟲病，目前對旋毛蟲病尚無有效的預(yù)防疫苗和控制方法。因此，各國每年投入大量人力、物力及財(cái)力用于動物肉類中旋毛蟲的檢疫與獸用疫苗的研究，以此阻斷旋毛蟲病由動物向人類的傳播。近年來，預(yù)防性DNA疫苗和治療性DNA疫苗的研究取得了快速發(fā)展。DNA疫苗在接種后，能夠與病毒自然感染的免疫過程類似，促進(jìn)黏膜免疫的發(fā)生，并誘導(dǎo)免疫記憶反應(yīng)和交叉保護(hù)反應(yīng)[2]。此外，DNA疫苗中的外源基因能夠在機(jī)體內(nèi)不斷表達(dá)蛋白，從而刺激免疫系統(tǒng)，因此DNA疫苗可以誘發(fā)相對持久的免疫反應(yīng)。孫浩、劉珮分別使用旋毛蟲ES抗原43Ku基因、Nudix水解酶基因構(gòu)建的核酸疫苗，可保護(hù)小鼠抵抗旋毛蟲感染，為研制旋毛蟲病核酸疫苗奠定了基礎(chǔ)[2-3]。

3.2 生物安全措施

通過加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、定期消毒、病原篩查等措施提高生物安全水平是控制該病的有效措施。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理可以提高生豬的抗病能力，防止圈舍、飼料等被病原污染，切斷該病傳播途徑。開展定期消毒，并定期更換消毒藥。生產(chǎn)中通常使用2%氫氧化鈉溶液或4%碳酸鈉溶液對舍內(nèi)、墻壁、門窗及周邊環(huán)境進(jìn)行消毒后沖洗。開展病原篩查可以早發(fā)現(xiàn)病豬，早隔離治療，在進(jìn)行屠宰檢疫時(shí)經(jīng)確診為旋毛蟲病肉時(shí)，應(yīng)進(jìn)行化制或銷毀。

加強(qiáng)對泔水的運(yùn)輸和使用監(jiān)管，使用泔水、廢棄肉渣喂豬之前必須進(jìn)行煮沸處理。針對放牧豬，應(yīng)降低與野生動物接種的風(fēng)險(xiǎn)。

各環(huán)節(jié)的滅鼠工作十分重要。各養(yǎng)殖戶、養(yǎng)殖場和屠宰場要定期開展滅鼠工作，場內(nèi)應(yīng)避免犬、貓等嚙齒動物流動。養(yǎng)殖場、屠宰場廢水和污物等應(yīng)進(jìn)行無害化處理，避免污染水源、土壤、飼料和工具等。

人類旋毛蟲病的防治除了生豬養(yǎng)殖環(huán)節(jié)、屠宰環(huán)節(jié)的滅源工作，還應(yīng)改變不良的飲食習(xí)慣，提倡熟食，改變吃生肉或半生肉的習(xí)慣。

3.3 藥物防治

臨床上常使用廣譜、高效的驅(qū)線蟲藥用于豬旋毛蟲病的治療和預(yù)防。例如阿苯達(dá)唑、左旋咪唑等，前者是治療人和豬旋毛蟲病的首選藥物，阿苯達(dá)唑不僅可驅(qū)除腸內(nèi)脫囊幼蟲和成蟲，還可抑制雌蟲產(chǎn)出新生蚴，亦可殺死移行期及肌肉中的幼蟲。

4 小結(jié)

旋毛蟲病是重要的人獸共患病，其防治事關(guān)畜牧業(yè)高質(zhì)量發(fā)展和人民群眾健康，關(guān)系到社會公共衛(wèi)生安全和國家生物安全。我國對豬旋毛蟲病的防治以“以治滅源，治、檢、管結(jié)合”的綜合防治措施為主，以屠宰場為重點(diǎn)，嚴(yán)格宰后檢疫檢驗(yàn)，并嚴(yán)格對污染肉品進(jìn)行無害化處理，使人與豬旋毛蟲病發(fā)病率有所下降。

參考文獻(xiàn)：

[1] 任科研.應(yīng)用免疫膠體金技術(shù)對豬旋毛蟲病診斷方法的研究[D].吉林大學(xué)，2012.

[2] 劉珮.旋毛蟲Nudix水解酶DNA疫苗構(gòu)建及其誘導(dǎo)的免疫保護(hù)[D].鄭州大學(xué)，2015.

[3] 孫浩.旋毛蟲ES抗原43Ku基因核酸疫苗的構(gòu)建及免疫效果評價(jià)[D].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013.