關(guān)鍵詞:工業(yè)園區(qū);培養(yǎng)基;重金屬污染廢水;低溫細(xì)菌;真菌
中圖分類號(hào):X703.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B
前言
重金屬廢水是對(duì)人類危害最大、對(duì)生態(tài)污染最嚴(yán)重的一種工業(yè)廢水,其排放不僅危害人類、其他生物以及水環(huán)境等,也會(huì)造成嚴(yán)重的資源浪費(fèi)。其中重金屬主要包括有顯著生物毒性的金屬以及有顯著毒性的金屬。其中汞、鎘、鎳、銅、鉛已被列入優(yōu)先控制污染物的名單,這是由于蛋白質(zhì)與以上重金屬結(jié)合后會(huì)導(dǎo)致生物中毒,同時(shí)能夠在生物體內(nèi)不斷積累,帶來更大危害。因此對(duì)該問題十分關(guān)注,一直在對(duì)重金屬污染廢水的排放量進(jìn)行控制。然而由于重金屬污染廢水的毒性較大,能夠在底泥、藻類中積累,或與其他毒素結(jié)合形成更大毒性的有機(jī)物,同時(shí)危害持續(xù)時(shí)間極大,排放具備動(dòng)態(tài)性等,因此不僅需要對(duì)其進(jìn)行排放量的控制,更要對(duì)其進(jìn)行積極地處理,重金屬污染問題已經(jīng)日益嚴(yán)重,尋找環(huán)保、有效的處理方法變得十分重要。
目前在重金屬污染廢水的處理中,通常應(yīng)用兩大類處理方式,一種是溶解狀態(tài)轉(zhuǎn)變方法,一種是濃縮和分離方法。很多學(xué)者都在對(duì)更加簡(jiǎn)單、環(huán)保的方式進(jìn)行探索,提出了一些新的處理方式。如石通杉等人提出一種重金屬吸附方法,主要通過原位合成法對(duì)S-MnO2吸附劑進(jìn)行制備,并通過BET/BJH、SEM、FT -IR、XRD等方法來表征,考察反應(yīng)溶液酸堿度、水浴溫度、吸附劑用量、反應(yīng)時(shí)間對(duì)S-MnO吸附劑吸附能力的影響。劉金香等人對(duì)改性微生物吸附劑與微生物改性方法等進(jìn)行研究,并對(duì)微生物吸附劑的相關(guān)問題進(jìn)行了討論?,F(xiàn)綜合各種目前取得的研究成果,提出一種工業(yè)園區(qū)重金屬污染廢水生物法處理技術(shù)。
1試驗(yàn)材料與方法
1.1試驗(yàn)設(shè)備與儀器
在試驗(yàn)中,使用的設(shè)備與儀器具體名稱、型號(hào)和廠家信息分別如下:(1)pH計(jì)、MT-5000、聚創(chuàng)設(shè)備儀器制造有限公司;(2)滅菌鍋、MVS-83、宏藝設(shè)備制造有限公司;(3)恒溫培養(yǎng)箱、HWS-1000、宏藝設(shè)備制造有限公司;(4)分光光度計(jì)、OIL8C、立辰科技裝備制造有限公司;(5)無菌操作臺(tái)、SW-CJ-2D、立辰科技裝備制造有限公司;(6)電子天平、DE-123RT、豪奧儀器制造有限公司;(7)壓力蒸汽消毒器、TY-200、申才醫(yī)療器械有限公司;(8)冷凍恒溫振蕩器、PX-100、東南儀器制造有限公司;(9)熒光電子顯微鏡、BX51、奧林巴斯公司;(10)臺(tái)式離心機(jī)、TGL-16G、安亭科學(xué)儀器制造廠。其中分光光度計(jì)擁有1cm的比色皿光程。
1.2試驗(yàn)試劑
試驗(yàn)中使用的試劑包括鉛離子標(biāo)準(zhǔn)液、鋅離子標(biāo)準(zhǔn)液。
鉛離子標(biāo)準(zhǔn)液的制備方法如下:在去離子水中加入硝酸鉛,將其配制為鉛離子標(biāo)準(zhǔn)液,鉛離子含量為10g/L。鉛離子標(biāo)準(zhǔn)液的作用為調(diào)節(jié)吸附體系與培養(yǎng)基的鉛離子濃度。
鋅離子標(biāo)準(zhǔn)液的制備方法如下:在去離子水中加入硫酸鋅七水,將其配制為鋅離子標(biāo)準(zhǔn)液,鋅離子含量為10g/L。鋅離子標(biāo)準(zhǔn)液的作用為調(diào)節(jié)吸附體系與培養(yǎng)基的鋅離子濃度。
1.3低溫細(xì)菌與真菌的采集
進(jìn)行低溫細(xì)菌與真菌的采集,首先采集低溫細(xì)菌,分別在家用冰箱、食堂用冰箱、水池、冷庫中采集四種低溫細(xì)菌;接著進(jìn)行真菌采集,分別在污水管道、污水溝渠、林區(qū)、閣樓中采集四種真菌。
首先將采集的四種低溫細(xì)菌接種到四種培養(yǎng)基中,并在四種培養(yǎng)基中加入鋅離子標(biāo)準(zhǔn)液,調(diào)節(jié)其中的鋅離子濃度。接著在150 r/min、30℃的條件下對(duì)菌種進(jìn)行二十四小時(shí)的培養(yǎng),并觀察四種細(xì)菌的生長(zhǎng)狀況。然后將采集的四種真菌接種到四種培養(yǎng)基中,并在四種培養(yǎng)基中加入鉛離子標(biāo)準(zhǔn)液,調(diào)節(jié)其中的鉛離子濃度。接著在250 r/min、50℃的條件下對(duì)菌種進(jìn)行十六個(gè)小時(shí)的培養(yǎng),并觀察四種真菌的生長(zhǎng)狀況。
1.4誘變處理
使用紫外誘變處理方式對(duì)培養(yǎng)的四種細(xì)菌和真菌進(jìn)行紫外誘變處理。取出培養(yǎng)到對(duì)數(shù)期末期的細(xì)菌菌種與真菌菌種,加入無菌水將菌種稀釋到104、105、106倍,置于消毒后的無菌培養(yǎng)皿中。使用紫外燈進(jìn)行垂直照射,在照射時(shí)不斷進(jìn)行攪拌,使兩種菌體均懸浮于空中。
分別取100μL未誘變的菌液與100μL誘變后的菌液涂抹于平板上,在40℃的溫度下進(jìn)行三天的培養(yǎng),對(duì)菌落生長(zhǎng)情況進(jìn)行觀察與計(jì)數(shù)。在誘變處理前,需要打開紫外燈進(jìn)行二十分鐘的預(yù)熱。為防止誘變后出現(xiàn)菌種光復(fù)活的情況,在暗室中進(jìn)行誘變及培養(yǎng)。在各細(xì)菌與真菌的最佳誘變距離與最佳誘變時(shí)間下篩選比較理想的菌種作為實(shí)驗(yàn)菌種。
利用實(shí)驗(yàn)菌種對(duì)某工業(yè)園區(qū)重金屬污染廢水進(jìn)行處理,也就是將實(shí)驗(yàn)菌種投入到重金屬污染廢水中,觀察實(shí)驗(yàn)菌種的重金屬吸附能力。污染廢水重金屬原始最高運(yùn)行排放濃度見表1。
誘變處理技術(shù)主要是通過對(duì)現(xiàn)有的工藝技術(shù)進(jìn)行改進(jìn),減少或不使用毒性金屬的用量,在生產(chǎn)過程中,采取誘變處理、化學(xué)沉淀和離子交換等措施,經(jīng)處置后的水體中的重金屬含量低于排放標(biāo)準(zhǔn)就可以進(jìn)行回收利用。對(duì)新形成的重金屬濃縮產(chǎn)品進(jìn)行再利用或無害化處置。
2試驗(yàn)結(jié)果
2.1沉降效果測(cè)試
培養(yǎng)四種細(xì)菌和四種真菌作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,四種細(xì)菌、四種真菌的實(shí)驗(yàn)菌種菌落形態(tài)存在很大不同,產(chǎn)孢子、菌絲形態(tài)等特性都不相同。八種實(shí)驗(yàn)菌種的沉降效果測(cè)試結(jié)果見圖1。
根據(jù)圖1,實(shí)驗(yàn)細(xì)菌菌種1、2、4的沉降效果較好;實(shí)驗(yàn)真菌菌種1、2的沉降效果較好,說明以上菌種的重金屬污水凈化效果較好。
2.2不同誘變距離下的致死率計(jì)算結(jié)果
在最優(yōu)誘變條件的判定中,分別在不同誘變時(shí)間與誘變距離下實(shí)施誘變,計(jì)算菌種致死率,以對(duì)最優(yōu)誘變條件進(jìn)行判定。其中致死率的計(jì)算公式具體如式(1):
式(1)中,P指的是致死率;W是指平板上誘變后的菌落數(shù);E指的是平板上未誘變的菌落數(shù)。其中各菌種的最佳致死率為80%~89%,當(dāng)致死率高于89%,存活的菌株較少,難以篩選比較理想的菌種;當(dāng)致死率低于80%,對(duì)遺傳物質(zhì)產(chǎn)生的影響較小,無法產(chǎn)生擁有良好遺傳性能的突變體。
不同誘變距離下四種細(xì)菌的致死率計(jì)算結(jié)果見表2。
根據(jù)表2的計(jì)算結(jié)果,細(xì)菌1與細(xì)菌2在誘變距離為40 cm時(shí),致死率分別為82.30%、84.20%,處于最佳致死率范圍內(nèi),因此細(xì)菌1與細(xì)菌2的最佳誘變距離是40 cm;細(xì)菌3與細(xì)菌4在誘變距離為50 cm時(shí),致死率分別為84.20%、87.20%,處于最佳致死率范圍內(nèi),因此細(xì)菌3與細(xì)菌4的最佳誘變距離是50 cm。
不同誘變時(shí)間下四種細(xì)菌的致死率計(jì)算結(jié)果見表3。在計(jì)算中分別取四種細(xì)菌對(duì)應(yīng)的最佳誘變距離,將照射時(shí)間分別定為40 s、50 s、60 s、70 s、80 s、90 s、100 s、110 s。
根據(jù)表3的計(jì)算結(jié)果,細(xì)菌1與細(xì)菌3在誘變時(shí)間為90 s時(shí)處于最佳致死率范圍內(nèi),因此二者的最佳誘變時(shí)間為90 s;細(xì)菌2與細(xì)菌4在誘變時(shí)間為100 s時(shí)處于最佳致死率范圍內(nèi),因此二者的最佳誘變時(shí)間為100 s。
2.3鉛離子吸附效果
實(shí)驗(yàn)菌種對(duì)于鉛離子的吸附效果見表4。
由表4的鉛離子吸附效果表明,實(shí)驗(yàn)細(xì)菌菌種對(duì)于鉛離子的去除率最高可達(dá)38.32%,對(duì)于鉛離子的吸附容量最高可達(dá)24.30 mg/g,為細(xì)菌2;實(shí)驗(yàn)真菌菌種對(duì)于鉛離子的去除率最高可達(dá)51.20%,對(duì)于鉛離子的吸附容量最高可達(dá)36.32 mg/g,為真菌2。整體來看實(shí)驗(yàn)真菌菌種對(duì)于鉛離子的吸附效果更好。
2.4鋅離子吸附效果
實(shí)驗(yàn)菌種對(duì)于鋅離子的吸附效果如表5所示。
根據(jù)表5的數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)細(xì)菌菌種對(duì)于鋅離子的去除率最高可達(dá)45.32%,對(duì)于鋅離子的吸附容量最高可達(dá)31.54mg/g,為細(xì)菌2;實(shí)驗(yàn)真菌菌種對(duì)于鋅離子的去除率最高可達(dá)62.30%,對(duì)于鋅離子的吸附容量最高可達(dá)45.63 mg/g,為真菌4。整體來看實(shí)驗(yàn)真菌菌種對(duì)于鋅離子的吸附效果更好。
3結(jié)語
工業(yè)園區(qū)一直是重金屬污染廢水排放的重災(zāi)區(qū),因此對(duì)工業(yè)園區(qū)重金屬污染廢水處理問題進(jìn)行研究。研究設(shè)計(jì)了一種工業(yè)園區(qū)重金屬污染廢水生物法處理技術(shù),培養(yǎng)了八個(gè)菌種,實(shí)現(xiàn)了重金屬污染廢水的環(huán)保處理,對(duì)于重金屬污染廢水治理有一定啟示意義。通過研究得到如下結(jié)論:實(shí)驗(yàn)菌種的重金屬污水凈化效果較好。細(xì)菌1與細(xì)菌2的最佳誘變距離是40 cm,細(xì)菌3與細(xì)菌4的最佳誘變距離是50 cm;細(xì)菌1與細(xì)菌3在誘變時(shí)間為90 s時(shí)處于最佳致死率范圍內(nèi),因此二者的最佳誘變時(shí)間為90 s;細(xì)菌2與細(xì)菌4在誘變時(shí)間為100 s時(shí)處于最佳致死率范圍內(nèi),因此二者的最佳誘變時(shí)間為100 s。整體來看實(shí)驗(yàn)真菌菌種對(duì)于鉛離子、鋅離子的吸附效果更好。