液氮冷凍療法在老齡犬體表增生的臨床應(yīng)用

李岳奇，張 毅，趙國春，費(fèi)思菡，王菊梅

（新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，烏魯木齊 830052）

犬腫瘤類疾病是臨床上寵物高發(fā)的一類疾病，引起犬腫瘤的病因與犬品種、性別、年齡、機(jī)體免疫力以及遺傳等因素有關(guān)，老齡犬腫瘤發(fā)病率是幼齡和成年的3 倍［1］。動(dòng)物臨床上主要通過病理組織學(xué)方法進(jìn)行診斷，治療方面根據(jù)腫瘤性質(zhì)及生長部位多采用外科手術(shù)切除、放療、化療等方法。液氮冷凍法是指通過-196 ℃的液氮對患病的組織進(jìn)行反復(fù)冷凍，促使冷凍部位的皮膚或組織長期處于冰晶狀態(tài)，導(dǎo)致組織內(nèi)細(xì)胞蛋白質(zhì)變性，組織結(jié)構(gòu)破壞，誘發(fā)組織細(xì)胞逐漸死亡后萎縮或壞死而被機(jī)體清除。液氮冷凍治療有療效良好、不良反應(yīng)輕微、易于操作和價(jià)格低廉等優(yōu)勢，有廣泛的臨床應(yīng)用報(bào)道。液氮冷凍療法也廣泛應(yīng)用于臨床治療人類各類疾病，如面部廣泛性扁平疣、傳染性軟疣、跖疣、斑禿、雀斑、外耳道乳頭狀瘤、嬰兒皮膚草莓狀血管瘤以及牙髓炎等疾病均有相關(guān)報(bào)道［2-9］。因液氮具有一定的揮發(fā)性，且需要在專門的容器中保存，需要相應(yīng)的液氮冷凍儀器治療，在寵物臨床上應(yīng)用較少。2022 年7月，新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物中心醫(yī)院接診1 例13 歲老齡犬，該犬體表有多處大小不一的增生物，肩胛處增生物發(fā)生潰爛，破潰處流出新鮮血液，該犬有心臟疾病，全身麻醉風(fēng)險(xiǎn)較大，為解決體表增生物問題，綜合評估，選擇了液氮冷凍方法進(jìn)行治療，取得了較好的臨床效果。

1 基本信息及病史

13 歲土種犬，已絕育，10.6 kg，定期免疫及驅(qū)蟲，中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)后有張嘴喘氣現(xiàn)象。2021 年7 月，該犬肩胛部發(fā)現(xiàn)黃豆樣大增生物，未到醫(yī)院治療。2022 年5 月發(fā)現(xiàn)增生物在不斷變大，且在腰部皮膚發(fā)現(xiàn)3 處黃豆樣大小增生物，到醫(yī)院進(jìn)行治療。經(jīng)醫(yī)院初步診斷為腫瘤，但考慮到該犬年齡大，聽診心音異常，增生物生長較為緩慢，且不影響正常吃喝，建議寵物主人繼續(xù)觀察，未進(jìn)行任何治療。2022 年7 月12 日，該犬肩胛部位腫塊及皮膚部近期增生物均生長較快，且肩胛部腫塊發(fā)生了破潰，流鮮紅血液，遂來醫(yī)院就診。

2 臨床檢查

2.1 體格檢查

患犬體溫38.3 ℃，呼吸32 次/min，心跳120 次/min。精神狀態(tài)良好，無脫水，肩胛周圍有鮮紅色血液污染，肩胛處可見突出于體表4 cm×3 cm×3 cm 腫塊，邊緣有破潰。背部有3 處2 cm×2 cm×1 cm 腫塊，觸診所有腫塊均在皮膚及皮下，未見深部生長跡象。聽診心音有雜音，可視黏膜淡粉色，其余未見明顯異常。

2.2 實(shí)驗(yàn)室檢查

2.2.1 血常規(guī)及C-反應(yīng)蛋白檢查 結(jié)果顯示血常規(guī)結(jié)果在正常范圍內(nèi)（表1）。C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）檢測結(jié)果為154.9 mg/L（參考值0～10 mg/L，＜10 mg/L 為正常，10～35 mg/L 為偏高或輕度炎癥，＞35 mg/L 明顯炎癥）。

表1 血液常規(guī)檢查結(jié)果

2.2.2 血生化檢查 血液生化檢查結(jié)果未見明顯異常（表2）。

表2 血液生化檢查結(jié)果

2.2.3 X 光檢查 X 光檢查顯示椎膈區(qū)肺紋理增粗，心臟影像增大，胸腔、腹腔未見明顯類似腫瘤類影像，其余未見明顯異常。

3 診斷

根據(jù)體表多處增生，判斷為犬體表增生物引起，因?qū)櫸镏魅瞬煌膺M(jìn)行病理切片檢查及犬身體等原因，無法進(jìn)一步診斷。

4 治療

按寵物主人意愿，不進(jìn)行全身麻醉，以止血、控制腫塊為根本原則進(jìn)行治療。

在寵物主人安撫情況下對肩胛部及背部剃毛，在所有腫塊周圍用鹽酸利多卡因局部封閉，動(dòng)物趴臥于手術(shù)臺(tái)上，腫塊周圍由外向內(nèi)碘伏消毒3 次，后用75%乙醇脫碘。增生物周圍皮膚用脫脂棉和滅菌紗布隔離，露出增生物，術(shù)者帶上棉手套，將液氮冷凍治療儀中注滿液氮，將液氮噴出口對準(zhǔn)增生物正中心，可見增生處變白，結(jié)冰，待冷凍處周圍1 mm結(jié)冰變白時(shí)，暫停冷凍，有解凍跡象時(shí)再次冷凍，持續(xù)時(shí)間2 min 左右。等完全解凍5 min 后再次按照上述程序進(jìn)行冷凍，共進(jìn)行3 次冷凍后結(jié)束治療。

術(shù)后2 d 冷凍組織周圍用1.0 g 頭孢曲松鈉、5 mg 地塞米松磷酸鈉注射液、4 mL 鹽酸普魯卡因及滅菌用水封閉治療，2 mL 酚磺乙胺注射液頸部皮下注射，45 mg 卡洛夫注射液皮下注射。1 次/d，連續(xù)3 d。匹莫苯丹5 mg 口服，2 次/d。佩戴伊莉莎脖圈，用碘伏消毒冷凍處，2 次/d。

5 轉(zhuǎn)歸及預(yù)后

治療第二天，患犬冷凍組織周圍出現(xiàn)水泡，碘伏消毒后干燥，大小未見明顯變化，冷凍增生物表面發(fā)黑，較大冷凍腫塊周圍有少量粉紅色滲出液。第三天冷凍組織周圍縮小約1/3，表面干燥，發(fā)黑。第七天，小的冷凍組織周圍痂皮脫落。第九天，較大冷凍組織脫落萎縮，形成新的瘢痕，逐漸愈合。15 d 后回訪，冷凍部位皮膚恢復(fù)正常，原腫塊周圍有類似瘢痕組織樣凸起。5 個(gè)月后回訪，該犬原冷凍部位恢復(fù)良好，冷凍組織周圍及全身皮膚無新發(fā)的增生物，冷凍治療效果良好。

6 討論

腫瘤類疾病已經(jīng)成為世界各地引發(fā)犬死亡的重要原因，其中位于皮膚的腫瘤發(fā)生率達(dá)40%～50%，乳腺類腫瘤、血管瘤、骨瘤等腫瘤也可在軟組織、造血組織、淋巴組織、消化器官、骨骼等［10］處發(fā)生。該病例從最初肩胛部發(fā)現(xiàn)小增生物到腰薦部逐漸出現(xiàn)多個(gè)增生物，且存在逐漸變大的現(xiàn)象，雖沒有進(jìn)行病理學(xué)檢查，無法確診，但由于一處增生物增大發(fā)生破潰出血后不得不進(jìn)行治療，該犬心臟功能不好，寵物主人不同意進(jìn)行麻醉手術(shù)切除，選擇液氮冷凍方法進(jìn)行治療具有現(xiàn)實(shí)意義，能為類似病例的治療提供一種新的治療思路。

液氮冷凍療法在人類醫(yī)學(xué)上應(yīng)用較為廣泛。自19 世紀(jì)以來，低溫冷凍技術(shù)就開始應(yīng)用于如肺癌、肝癌等各類良性和惡性腫瘤的治療［11］。王莉娜［12］報(bào)道超低溫冷凍對低位直腸癌安全有效，尤其是對中晚期患者，不愿接受傳統(tǒng)手術(shù)和不耐受手術(shù)的患者，能很好地減輕患者痛苦，提高患者生命質(zhì)量。超低溫冷凍消融技術(shù)可作為肉瘤患者無法再次手術(shù)的有效治療手段。姜淑敏等［13］報(bào)道采用液氮冷凍術(shù)治療眼部腫瘤良性31 例（32 只眼），惡性3 例（3 只眼）?；颊邆谟虾?，觀察6～12 個(gè)月惡性腫瘤均無復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，總有效率為100%。采用液氮治療時(shí)，因液氮溫度低至-196 ℃，且在一般情況下很容易揮發(fā)，需要進(jìn)行多次操作，持續(xù)時(shí)間較長。本次治療使用的是人用500 mL 液氮冷凍治療儀，根據(jù)冷凍直徑可選擇1.0、1.8、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mm 的冷凍槍頭，能保證最佳冷凍范圍。

冷凍消融技術(shù)不僅可以對腫瘤組織進(jìn)行反復(fù)凍融循環(huán)造成局部損傷，而且可引起機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)，在治療中發(fā)揮著越來越重要的作用［14］。對腫瘤組織進(jìn)行低溫冷凍，可以促進(jìn)腫瘤釋放大量抗原，有效激活T 細(xì)胞對腫瘤的識(shí)別；利用冷凍消融除了可以控制原發(fā)腫瘤，還可增強(qiáng)全身抗腫瘤免疫反應(yīng)，在機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生原位腫瘤疫苗，進(jìn)而抑制殘留腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)［15］。該病例雖然未能確定是否與皮膚類腫瘤發(fā)病相關(guān)，但采用液氮冷凍治療，增生物脫落，6 個(gè)月后回訪未出擴(kuò)散，恢復(fù)良好，為寵物臨床上部分惡行腫瘤提供一個(gè)輔助治療的思路，對腫瘤進(jìn)行冷凍或?qū)η谐[瘤部位進(jìn)行淺冷凍，有效激活T 細(xì)胞，增強(qiáng)全身抗腫瘤免疫反應(yīng)。

翟翊然等［16］報(bào)道用液氮冷凍輔助治療皮膚鱗狀細(xì)胞癌時(shí)，會(huì)出現(xiàn)水腫、疼痛、局部潰瘍等不良反應(yīng)。超低溫冷凍治療后可能出現(xiàn)的并發(fā)癥有冷休克、出血、多器官衰竭及冷凍臨近器官組織損傷等［17］。本次治療過程中，無論從冷凍時(shí)間和冷凍次數(shù)來看都相對較長、較多，但該病例第2 天冷凍部位均較為干燥，且隨著時(shí)間推移，冷凍組織逐漸萎縮變小，可能因?yàn)樾g(shù)后連續(xù)3 d 在冷凍組織周圍用頭孢曲松鈉、地塞米松、鹽酸普魯卡因進(jìn)行封閉治療，并用碘伏消毒，2 次/d，局部封閉消炎后，控制冷凍組織周圍的炎癥，防止冷凍部位出現(xiàn)水泡。