水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物檢測(cè)技術(shù)及其質(zhì)量控制研究

賀莉明

（山西來澤檢測(cè)技術(shù)有限公司，山西 太原 030006）

引言

微生物檢測(cè)技術(shù)作為水質(zhì)環(huán)境檢測(cè)中常用檢測(cè)技術(shù)，其在具體應(yīng)用中仍然存在諸多檢測(cè)質(zhì)量影響因素，如樣品采樣技術(shù)、實(shí)驗(yàn)設(shè)備及器材、實(shí)驗(yàn)工作人員、材料品質(zhì)、分析測(cè)試步驟等。針對(duì)此種情況，應(yīng)對(duì)微生物檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行全方位質(zhì)量控制，進(jìn)而保障水質(zhì)環(huán)境檢測(cè)中微生物檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)性。因此，對(duì)水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物檢測(cè)技術(shù)及其質(zhì)量控制進(jìn)行研究分析，將有著一定的現(xiàn)實(shí)意義。

1 水質(zhì)環(huán)境檢測(cè)中微生物樣品采集階段的質(zhì)量控制

在不同的時(shí)間及空間范圍內(nèi)，水質(zhì)環(huán)境檢測(cè)中采集的水體樣品也存在一定差異，所以為保障所采集的水樣具有較強(qiáng)的代表性，應(yīng)在水樣采集前合理設(shè)置固定取水點(diǎn)和取樣時(shí)間。水樣采集過程中應(yīng)確保所采集水量為容量瓶容量的80%，盡可能避免水樣量過多或者過少，以便于檢測(cè)時(shí)水樣的充分混勻，提高水樣微生物檢測(cè)質(zhì)量。具體水樣采集方法應(yīng)為直接采集，嚴(yán)禁使用采集點(diǎn)水樣清洗無菌采樣瓶，避免其他物品對(duì)采樣瓶進(jìn)行污染。采樣過程中應(yīng)保證水樣的清澈，盡可能采集上層水樣[1-2]。

供水管網(wǎng)水樣采集前應(yīng)對(duì)取水點(diǎn)的金屬水龍頭進(jìn)行火燒灼3～5 s，然后放水5～10 min，完成以上操作后再進(jìn)行水樣采集。農(nóng)村生活用水采集則應(yīng)采用清潔干凈水桶進(jìn)行提水，此過程中盡可能不取表面水，提水后將水樣灌入采樣瓶中，并注意勿用手指或者其他物品接觸采樣瓶瓶口，避免對(duì)水樣造成污染。所有采集的水樣均需要在有效固定條件下低溫冷藏保存，并在采集后立即運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。

2 水質(zhì)環(huán)境檢測(cè)中實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段質(zhì)量控制

2.1 儀器設(shè)備校檢

水質(zhì)環(huán)境檢測(cè)中微生物檢測(cè)技術(shù)常用儀器設(shè)備包括溫度計(jì)、pH 計(jì)、天平、滅菌箱、濾膜裝置、培養(yǎng)箱、紫外燈以及其他儀器設(shè)備等。為保障各類儀器設(shè)備的精準(zhǔn)性，避免因儀器設(shè)備精準(zhǔn)性問題而導(dǎo)致的檢測(cè)精度下降情況，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)開始前定期對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行校檢，若是發(fā)現(xiàn)儀器設(shè)備存在精度問題，應(yīng)對(duì)問題進(jìn)行及時(shí)解決。此外，在日常保管過程中應(yīng)重視儀器設(shè)備的保養(yǎng)處理。例如，針對(duì)紫外燈保養(yǎng)，應(yīng)每間隔一個(gè)月使用紫外光度計(jì)對(duì)紫外燈進(jìn)行測(cè)量，保證紫外燈所釋放出的紫外光強(qiáng)度可以達(dá)到紫外燈出廠時(shí)紫外光強(qiáng)度的70%以上，確保紫外燈的殺菌使用效果；再比如，針對(duì)培養(yǎng)箱，應(yīng)以每天兩次的頻率對(duì)培養(yǎng)箱的使用溫度進(jìn)行檢驗(yàn)，最佳使用溫度應(yīng)控制在16～27 ℃區(qū)間范圍內(nèi)。若是在儀器設(shè)備校檢中發(fā)現(xiàn)儀器設(shè)備存在損壞、老化以及其他無法使用情況，應(yīng)及時(shí)對(duì)問題設(shè)備進(jìn)行及時(shí)檢修和更換，避免后續(xù)使用精度受到影響[3]。

2.2 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有良好的通風(fēng)措施，并且能夠有效避免實(shí)驗(yàn)室內(nèi)存在灰塵、溫度以及濕度變化，為實(shí)驗(yàn)中微生物培養(yǎng)提供最佳環(huán)境支持，減少環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)中微生物培養(yǎng)穩(wěn)定性的影響，提高實(shí)驗(yàn)精度。其次，在實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室工作特點(diǎn)，合理設(shè)置人員管理原則，并由此保障所有實(shí)驗(yàn)室進(jìn)出人員均按照要求進(jìn)行消毒殺菌處理，避免人員進(jìn)出所導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染問題。再次，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)墻壁應(yīng)遵循光滑、易于清洗和消毒等要求，并且地面、工作臺(tái)均需要采用實(shí)驗(yàn)室專用材料，其中工作臺(tái)還需要落實(shí)光滑、無縫、抗?jié)B透、不透水等要求。最后，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)采用RODAC 平皿、細(xì)菌密度平皿等多種方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部空氣質(zhì)量以及臺(tái)桌面污染情況進(jìn)行檢測(cè)分析，確保空氣及臺(tái)桌面污染問題的及時(shí)發(fā)現(xiàn)和解決。

3 水質(zhì)環(huán)境檢測(cè)中實(shí)驗(yàn)階段質(zhì)量控制

3.1 已制培養(yǎng)基控制

微生物水樣在采集后應(yīng)立即送至水質(zhì)檢測(cè)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)中所采用的各類儀器設(shè)備均需要在使用前進(jìn)行徹底清洗及殺菌，然后嚴(yán)格按照操作流程要求進(jìn)行水質(zhì)微生物樣品檢測(cè)操作。此過程中所涉及的培養(yǎng)基和稀釋液均需要通過高壓蒸汽滅菌，避免雜余細(xì)菌對(duì)整個(gè)培養(yǎng)基環(huán)境造成污染。針對(duì)已制成培養(yǎng)基，應(yīng)通過標(biāo)簽在培養(yǎng)基上直接注明培養(yǎng)基的配制人、配置時(shí)間、配置批次、配置數(shù)量、滅菌溫度、滅菌時(shí)間、培養(yǎng)基、pH 值名稱等諸多信息，為后續(xù)培養(yǎng)基檢驗(yàn)匹配提供重要信息支持[4-5]。

3.2 檢測(cè)菌落總數(shù)控制

在對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行菌落接種前，應(yīng)將待檢測(cè)水樣進(jìn)行充分搖勻，促使水樣中細(xì)菌能夠均勻分布在水中。水樣稀釋過程中，應(yīng)將水樣沿管壁進(jìn)行緩慢加入，并且水樣加入過程中要避免吸管端部與管內(nèi)稀釋液接觸，以此來避免吸管沾有管內(nèi)檢液。在將水樣注入到培養(yǎng)皿中時(shí)，應(yīng)確保水樣在培養(yǎng)皿側(cè)邊處加入，并且加入時(shí)僅需要揭開一部分培養(yǎng)皿蓋，不應(yīng)完全揭開培養(yǎng)皿蓋，然后將吸管以直立滴入方式保證吸管內(nèi)水樣完全排空，并且此過程中應(yīng)避免吸管出現(xiàn)吹出等情況，避免后續(xù)培養(yǎng)皿培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)片狀菌落。在水樣加入培養(yǎng)皿中20 min 后，應(yīng)在培養(yǎng)皿中加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂，并立即對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行混勻處理。待培養(yǎng)皿中營(yíng)養(yǎng)瓊脂完全凝固后，將培養(yǎng)皿進(jìn)行翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)，避免培養(yǎng)皿中細(xì)菌培養(yǎng)過程中出現(xiàn)蔓延生長(zhǎng)情況。針對(duì)菌落質(zhì)量控制，則應(yīng)在培養(yǎng)后的菌落中合理挑取典型菌落，若是沒有典型菌落，則應(yīng)合理選擇多個(gè)菌落進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)分析，避免實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陰性情況。

4 水質(zhì)環(huán)境檢測(cè)中結(jié)果評(píng)價(jià)系統(tǒng)質(zhì)量控制

4.1 操作方法精度控制

在某批次水樣中，優(yōu)先選擇若干個(gè)巖性水樣進(jìn)行雙樣分析。在對(duì)數(shù)據(jù)的對(duì)數(shù)進(jìn)行計(jì)算分析時(shí)，若某一雙樣分析結(jié)果存在任一為零情況，則需要在該雙樣分析結(jié)果所對(duì)應(yīng)的雙樣進(jìn)行加1 處理，然后再進(jìn)行對(duì)數(shù)值計(jì)算。在計(jì)算出對(duì)數(shù)值以后，對(duì)每一雙對(duì)數(shù)的差域進(jìn)行計(jì)算，此差域值可采用R 進(jìn)行表示，并計(jì)算出相關(guān)對(duì)數(shù)差域的平均值。此外，精度控制中還需要取10%左右的例行水樣中進(jìn)行雙樣分析，若是例行水樣的雙樣分析結(jié)果差域平均值大于3.27R，則說明實(shí)驗(yàn)中化驗(yàn)員的操作精度控制不足，需要分析實(shí)驗(yàn)操作中存在的問題，并對(duì)問題進(jìn)行及時(shí)應(yīng)對(duì)解決，避免重新實(shí)驗(yàn)后再出現(xiàn)同樣問題。

4.2 無菌性檢查

每完成一次實(shí)驗(yàn)以后，化驗(yàn)員應(yīng)以滅菌水為水樣，對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的培養(yǎng)基、濾膜、稀釋水、沖洗用水等諸多儀器設(shè)備及材料進(jìn)行無菌性檢查，若是發(fā)現(xiàn)相關(guān)儀器設(shè)備及采用存在雜菌感染情況，則應(yīng)否定以上過程實(shí)驗(yàn)中所獲取的數(shù)據(jù)信息結(jié)果，保障研究的精準(zhǔn)性和有效性。此外，原則上來說，為保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性，在下一次實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)對(duì)上一次實(shí)驗(yàn)中所采用的水樣中的10%水樣進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，并通過重復(fù)檢測(cè)結(jié)果與上一次檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行匹配對(duì)比，以此來檢驗(yàn)上一次分析結(jié)果的精準(zhǔn)性。

5 結(jié)語

近些年來，隨著社會(huì)對(duì)于水質(zhì)環(huán)境安全問題的日益關(guān)注，如今水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)相關(guān)技術(shù)得到快速發(fā)展，提高監(jiān)測(cè)精度及效率的同時(shí)，也逐步開始實(shí)現(xiàn)智能化、自動(dòng)化發(fā)展。但無論如何發(fā)展，為保障水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用效果，就必須要提高微生物檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用時(shí)的質(zhì)量控制工作，具體質(zhì)量控制內(nèi)容包括微生物樣品采集階段的質(zhì)量控制、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段質(zhì)量控制、實(shí)驗(yàn)階段質(zhì)量控制以及結(jié)果評(píng)價(jià)系統(tǒng)質(zhì)量控制，相關(guān)質(zhì)量控制成效將會(huì)直接影響到水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用成效，所以必須要提高相關(guān)重視，最終為后續(xù)水質(zhì)環(huán)境安全保障提供重要支持。