CYP2C19 基因多態(tài)性與急性腦梗死及病灶面積的相關性

龔曉芹，鐘 平

(安徽醫(yī)科大學附屬宿州醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，安徽 宿州 234000)

近年來，我國每年因腦梗死（cerebral infarction）死亡的人數(shù)高達200 萬，其高復發(fā)率、高致殘率、高死亡率足以與癌癥比肩[1]。腦梗死的面積是決定患者病情嚴重程度及預后的關鍵因素之一，其中大面積腦梗死占所有腦梗死的3%～15%，且該病發(fā)病突然，病情嚴重，即使搶救成功后生活質量仍然低下，是腦卒中較為嚴重的一類[2]。目前已有國內(nèi)外研究證實CYP2C19 基因多態(tài)性與腦梗死的發(fā)生、發(fā)展有著密切聯(lián)系。然而，現(xiàn)階段對于CYP2C19 基因多態(tài)性與急性腦梗死病情嚴重程度的關系尚不明確，對此研究也較少?；诖耍狙芯恐饕接慍YP2C19基因多態(tài)性與急性腦梗死及其病灶面積大小的相關性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021 年11 月-2022 年6 月在安徽醫(yī)科大學附屬宿州醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科就診的無血緣關系的漢族患者213 例，根據(jù)磁共振表現(xiàn)、臨床表現(xiàn)分為急性腦梗死組（142 例）及對照組（非急性腦梗死組71 例）。對照組納入標準：與急性腦梗死組年齡、性別匹配的，經(jīng)病史、體格檢查、頭顱CT 和/或頭顱核磁共振均無新發(fā)腦梗死的住院患者。排除標準：嚴重心力衰竭、凝血功能障礙、惡性腫瘤、嚴重感染等。將142 例急性腦梗死患者按照梗死面積分為大面積梗死組（直徑≥4 cm）和非大面積梗死組（直徑＜4 cm）。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法 收集兩組人口統(tǒng)計學資料，包括年齡、性別、BMI、個人史、既往史等；常規(guī)相關檢查：頭顱MRI、頸動脈彩超；外周血檢查：血糖、血脂；相關量表：ADL 評分。采用CYP2C19 基因芯片檢測系統(tǒng)檢測目的基因和位點突變情況。基因檢測儀購自陜西西安市天隆科技有限公司，試劑盒購自陜西西安市天隆科技有限公司。從EDTA 抗凝管采集血樣（靜脈血，不少于2 ml）送檢，從外周血提取的基因組DNA中檢測CYP2C19 基因型。在該試劑盒中，CYP2C19基因特異性對引物1 和2 通過聚合酶鏈反應擴增，在用生物素標記的擴增產(chǎn)物和固定在醛底物上的CYP2C19 基因類型檢測探針之間進行特異性雜交反應。特異性雜交信號通過酶促顯色反應進行顯色。通過掃描芯片，獲得樣品DNA 擴增產(chǎn)物與每個基因位點的野生型和突變型探針的雜交圖像。通過軟件分析圖像來判斷待測樣品的基因型。

1.3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS 26.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以（P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 急性腦梗死組和對照組臨床資料比較 急性腦梗死組血糖、低密度脂蛋白、頸動脈硬化例數(shù)高于對照組，ADL 評分低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 急性腦梗死組和對照組臨床資料比較[（%）,]

表1 急性腦梗死組和對照組臨床資料比較[（%）,]

2.2 急性腦梗死組和對照組CYP2C19 基因型比較CYP2C19 G681A 和G636A 在急性腦梗死組（P＞0.05）；急性腦梗死組與對照組中兩位點GG 型、AG 型、AA 型頻率分布比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 急性腦梗死組和對照組CYP2C19 基因型比較[（%）]

表2 急性腦梗死組和對照組CYP2C19 基因型比較[（%）]

2.3 急性腦梗死組與對照組CYP2C19 基因型及等位基因分布頻率比較 急性腦梗死組與對照組基因型分布均以CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2 為主，未檢測出CYP2C19*3/*3 純合突變型，兩組基因型分布頻率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；急性腦梗死組與對照組等位基因分布均以CYP2C19*1、CYP2C19*2 為主，兩組等位基因分布頻率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 兩組基因型及等位基因分布頻率比較[（%）]

表3 兩組基因型及等位基因分布頻率比較[（%）]

2.4 急性腦梗死不同梗死面積患者基因型和等位基因分布頻率比較 大面積梗死組CYP2C19*1/*1 基因型分布頻率低于非大面積梗死組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；大面積梗死組CYP2C19*1 等位基因分布頻率低于非大面積梗死組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表4。

表4 急性腦梗死不同梗死面積患者基因型和等位基因分布頻率比較[（%）]

表4 急性腦梗死不同梗死面積患者基因型和等位基因分布頻率比較[（%）]

2.5 急性期腦梗死影響因素的Logistic 多因素回歸分析 將是否發(fā)生急性腦梗死作為因變量，血糖、低密度脂蛋白、頸動脈彩超、ADL 評分、CYP2C19 基因型作為自變量，采用Logistic 多因素回歸分析，結果顯示，血糖、低密度脂蛋白、頸動脈彩超、ADL 評分是急性腦梗死發(fā)病的獨立危險因素，CYP2C19 基因型與急性腦梗死的發(fā)病無明顯相關性，見表5。

表5 急性腦梗死影響因素的Logistic 多因素回歸分析

3 討論

目前，已知人類一些基因多態(tài)性與腦梗死的遺傳易感性相關[3]。而從分子遺傳學水平解釋腦梗死的發(fā)病本質和遺傳規(guī)律是國內(nèi)外腦血管疾病的研究熱點[4]。CYP2C19 基因多態(tài)性與腦血管病的發(fā)生發(fā)展有著密切關系，攜帶CYP2C19 LOF 基因患者較未攜帶CYP2C19 LOF 基因的患者更容易發(fā)生血管不良事件[5，6]。有研究顯示[7，8]，CYP2C19 LOF 等位基因攜帶者較非攜帶者卒中風險增加，復合血管事件的發(fā)生也更頻繁。其中CYP2C19*2 及CYP2C19*3等位基因功能性缺失可導致一系列的表達產(chǎn)物改變，如酶的功能活性下降、表氧化二十碳三烯酸水平下降，從而激活炎癥反應、微循環(huán)發(fā)生障礙，導致腦梗死的發(fā)生率增加。大面積的腦梗死病因是心源性的栓子脫落，或大動脈的血管狹窄嚴重閉塞。已有研究表明[9，10]，攜帶CYP2C19 LOF 基因的患者發(fā)生血栓栓塞事件概率較高，患者攜帶CYP2C19 LOF 基因是產(chǎn)生各類血栓的一大高危因素，也間接導致大面積腦梗死的發(fā)生概率增加。另外導致大面積腦梗死的原因在于CYP2C19 基因多態(tài)性與氯吡格雷藥效反應的關系，攜帶LOF 基因的患者發(fā)生大面積腦梗死的風險較大，可能與遺傳變異導致個體的血小板反應性差異有關[11，12]。CYP2C19 LOF 攜帶者血小板抑制率較低[13]，血小板聚集率增高，導致其形成血栓體積增加，以至于腦梗死病灶面積更大，病情發(fā)展更為嚴重。

本研究結果表明，急性腦梗死組與對照組基因型及等位基因分布頻率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表明CYP2C19 基因型與病灶面積大小有一定的相關性，攜帶CYP2C19 LOF 等位基因的患者較未攜帶者患大面積腦梗死的風險更大，與王娜娜等[6]的研究結果基本一致。在臨床工作中，應重視CYP2C19 基因型與病灶面積及病情嚴重程度的關系，對于攜帶CYP2C19 LOF 基因的急性腦梗死患者，需要更加謹慎、持續(xù)地觀察患者的療效，及早評估患者出現(xiàn)大面積腦梗死的可能性，降低其病情惡化的風險。因此，有必要采用個體化抗血小板治療來克服氯吡格雷在CYP2C19 LOF 等位基因患者中藥效明顯降低的作用[16]，對于減少心腦血管不良事件及抗血小板治療的管理具有指導意義。

本研究通過Logistic 多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)，頸動脈粥樣斑塊形成、日常自主活動能力降低、低密度脂蛋白及血糖升高是急性腦梗死發(fā)病的獨立危險因素。低密度脂蛋白的升高與急性腦梗死的發(fā)病有一定相關性，通過“脂質浸潤學說”可以解釋其原理，這與膽固醇在動脈壁局部聚集、形成粥樣斑塊及動脈狹窄有關，所以血漿中低密度脂蛋白水平是提示心腦血管疾病發(fā)病的重要指標[17]，降低低密度脂蛋白的水平被認為是預防心腦血管事件再發(fā)的重要治療措施[18]。同時，本研究表明，頸動脈粥樣硬化形成與急性腦梗死的發(fā)生的也有相關性，對高危人群進行頸動脈粥樣硬化斑塊及其穩(wěn)定性的篩查在急性腦梗死的一級預防中具有重要的意義[19]。另外，ADL 評分降低也可能是急性腦梗死發(fā)病的一大危險因素，ADL 評分反映患者自主生活活動能力[20]，ADL 評分越低，患者自主活動能力及活動耐受力越差，長期臥床風險越高，由于軀體的重壓和摩擦而引起血液循環(huán)不良，血液流速減慢。血液粘滯會加快動脈血管粥樣硬化，引起急性腦梗死的風險增大。最后，血糖升高也是急性腦梗死的一大危險因素，高血糖使血漿處于較高的滲透壓，水分相對較少，血液粘稠度增高，腦梗死風險增加。

本研究存在以下局限性：研究的樣本量較少、選擇偏倚及單中心住院患者。因此，未來還需擴大樣本量，并通過多中心研究來進一步證實該結論，為臨床提供更有力的數(shù)據(jù)支持。

綜上所述，頸動脈粥樣斑塊形成、日常自主活動能力降低、低密度脂蛋白及血糖升高都是導致急性腦梗死的危險因素，對于急性腦梗死患者，建議常規(guī)行CYP2C19 基因多態(tài)性檢測，若為CYP2C19 LOF基因攜帶者，則大面積腦梗死的風險較大，臨床應重視對此類患者的監(jiān)測。