VitC 對運(yùn)輸應(yīng)激小鼠肺臟結(jié)構(gòu)的影響

賈 盟，鄒 駿，白瑩瑩，王金莉

（錦州醫(yī)科大學(xué)，遼寧 錦州 121000）

隨著人類生活的不斷發(fā)展，我們對肉制品的質(zhì)量也隨之提高，而運(yùn)輸應(yīng)激是影響畜禽肉質(zhì)和存活率的重要因素之一。動物機(jī)體在運(yùn)輸途中有很多影響的因素如高溫、晃動、環(huán)境變化和生理壓力等一些應(yīng)激源的共同作用后的反應(yīng)叫做運(yùn)輸應(yīng)激。運(yùn)輸應(yīng)激顯然已經(jīng)成為拖延中國畜牧養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素，例如豬在運(yùn)輸應(yīng)激過程中會感染副豬嗜血桿菌引發(fā)傳染性胸膜肺炎，其特征性剖檢變化為纖維素壞死性肺炎、纖維素性胸膜肺炎和慢性關(guān)節(jié)炎，對豬的肉質(zhì)和死亡有極大影響。

畜禽能量代謝、免疫能力和抗應(yīng)激能力等方面的提高，可使畜禽在運(yùn)輸應(yīng)激過程中能更好地生存，保證肉質(zhì)和存活率。VitC 可從抗氧化方面提高畜禽抗應(yīng)激的能力和機(jī)體免疫力，促進(jìn)動物腎上腺糖皮質(zhì)激素的合成，加快細(xì)胞新陳代謝，支持細(xì)胞的營養(yǎng)及維持其正常的工作。因此研究不同濃度的VitC 對運(yùn)輸過程中小鼠肺臟結(jié)構(gòu)的影響，具有重要意義。本實(shí)驗通過病例剖檢及石蠟切片的方法觀察肺臟的病理變化來確定不同濃度VitC 對運(yùn)輸應(yīng)激小鼠肺臟產(chǎn)生的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗動物與設(shè)計 5 周齡健康的小鼠30 只（購自錦州醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗中心），將小鼠隨機(jī)分為3 組，每組10 只小鼠，空白對照組、運(yùn)輸應(yīng)激組和1.5g/kgVitC 運(yùn)輸應(yīng)激藥物組?？瞻讓φ战M正常采食飲水，運(yùn)輸應(yīng)激組和1.5g/kgVitC 運(yùn)輸應(yīng)激藥物組在采食和飲水方面進(jìn)行控制，每天8：00 在37.5℃的搖床上進(jìn)行以50r/min 的速度下模擬運(yùn)輸應(yīng)激，時間為3h，連續(xù)搖3d，適當(dāng)增加噪音模擬運(yùn)輸應(yīng)激的過程。觀察小鼠的臨床癥狀，處死小鼠并剖檢對比，取出肺臟，用4%多聚甲醛固定液固定用于實(shí)驗。

1.2 實(shí)驗材料 顯微數(shù)碼拍攝圖像分析系統(tǒng)（BX53F）購自錦州益眾商貿(mào)有限公司；生物組織攤片烤片機(jī)（KL 型）購自錦州益眾商貿(mào)有限公司；生物組織包埋機(jī)（JB-P5）購自錦州恒達(dá)醫(yī)療器械有限公司；輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)（HistoCore BIOCUT）購自徠卡顯微系統(tǒng)（上海）有限公司；組織脫水機(jī)（KRD-TA型）購自孝感康瑞德電子科技有限公司；石蠟包埋機(jī)（KRD-LB2 型）購自孝感康瑞德電子科技有限公司；組織染色機(jī)（KRD-RA）購自孝感康瑞德電子科技有限公司。

1.3 剖檢和制作石蠟切片 觀察不同濃度的VitC對運(yùn)輸應(yīng)激小鼠的肺臟組織的影響將小鼠處死后剖檢，觀察肺臟的解剖學(xué)結(jié)構(gòu)和學(xué)病理組織變化，拍照。取肺部組織置于4%多聚甲醛固定液中固定2h，流水沖洗、梯度脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、HE染色和封片，在光學(xué)顯微鏡下觀察肺臟的組織學(xué)變化并拍照。

2 結(jié)果

2.1 VitC 對運(yùn)輸應(yīng)激小鼠肺臟解剖結(jié)構(gòu)的影響

圖1 小鼠肺臟病理解剖結(jié)構(gòu)

空白對照組小鼠精神狀態(tài)良好，食欲正常。運(yùn)輸應(yīng)激組小鼠精神萎靡，食欲減退，運(yùn)輸應(yīng)激藥物組小鼠精神狀態(tài)較好。剖檢空白對照組小鼠的肺臟組織可見共分5 個葉，左側(cè)肺臟一個單葉，右側(cè)肺臟三個分葉及一個較小的副葉，肺組織肉眼觀察無出血點(diǎn)或出血斑，胸腔內(nèi)無滲出液和纖維素凝塊。運(yùn)輸應(yīng)激小鼠如圖，肺臟有紅色的滲出液和纖維素凝塊，小鼠的各個肺葉上肉眼可見數(shù)量不等的出血點(diǎn)或出血斑。運(yùn)輸應(yīng)激藥物組小鼠肺臟的運(yùn)輸應(yīng)激癥狀明顯消失，小鼠肺臟剖檢后纖維素滲出物明顯減少，僅可見少量的出血點(diǎn)及紅色滲出液。

2.2 VitC 對運(yùn)輸應(yīng)激小鼠肺臟組織學(xué)結(jié)構(gòu)的影響

圖2 小鼠肺臟的組織學(xué)結(jié)構(gòu)

光學(xué)顯微鏡下觀察，正常的小鼠肺臟組織結(jié)構(gòu)清晰，由圖可見肺泡囊、肺泡及肺泡隔的正常組織結(jié)構(gòu)，無炎性細(xì)胞滲出。運(yùn)輸應(yīng)激小鼠肺臟鏡下觀察肺泡腔沉陷，幾個肺泡融合形成一個大的囊腔；巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤導(dǎo)致肺泡隔增厚，毛細(xì)血管擴(kuò)張并含大量紅細(xì)胞，可見上皮細(xì)胞變性、壞死，表現(xiàn)為核固縮，胞質(zhì)淡染，有的細(xì)胞膜破裂，肺泡腔中可見到少量的紅細(xì)胞、脫落的上皮細(xì)胞。與運(yùn)輸應(yīng)激組相比較，運(yùn)輸應(yīng)激前飼料中添加1.5g/kgVitC，鏡檢肺臟的組織結(jié)構(gòu)比較清晰，病理性癥狀明顯減輕，各種炎性細(xì)胞的數(shù)量減少，表明VitC 可以提高動物抗運(yùn)輸應(yīng)激的能力。

3 討論

3.1 運(yùn)輸應(yīng)激對畜禽的影響 畜禽的運(yùn)輸是動物生產(chǎn)中很關(guān)鍵的一個過程，而運(yùn)輸應(yīng)激會導(dǎo)致被運(yùn)輸?shù)膭游镌斐蓢?yán)重的組織損傷。運(yùn)輸應(yīng)激可以誘發(fā)應(yīng)激性心肌病，心肌細(xì)胞能發(fā)生不同程度的顆粒變性；對肝臟也會造成一定的損傷，肝細(xì)胞出現(xiàn)顆粒變性及水泡變性；還會對幼畜腎臟造成損傷，腎臟上皮細(xì)胞顆粒變形或空泡樣變性；能引起免疫系統(tǒng)中心脾臟與淋巴結(jié)急性病理性損傷。能造成畜禽的腸黏膜結(jié)構(gòu)損傷，小腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞、杯狀細(xì)胞和肥大細(xì)胞數(shù)量會顯著增加。

運(yùn)輸應(yīng)激可使畜禽的生長發(fā)育受到影響，畜禽的產(chǎn)蛋率、產(chǎn)奶量、產(chǎn)肉率下降，同時肉蛋奶的品質(zhì)也會明顯降低，運(yùn)輸應(yīng)激會增加食品安全問題；運(yùn)輸應(yīng)激使畜禽有機(jī)體的抵抗力下降，當(dāng)有害物質(zhì)侵害畜禽有機(jī)體時，導(dǎo)致疾病的發(fā)生，而人類若攝入這種動物性食品后也會引發(fā)疾病。運(yùn)輸應(yīng)激對生殖系統(tǒng)的影響比較嚴(yán)重，可使機(jī)體激素分泌不足，進(jìn)而導(dǎo)致幼體發(fā)育不良，性器官發(fā)育不全。

3.2 運(yùn)輸應(yīng)激前添加VitC 對運(yùn)輸應(yīng)激的影響 在運(yùn)輸應(yīng)激前添加VitC，可以降低畜禽毛細(xì)血管的通透性，增強(qiáng)機(jī)體的抵抗力，減少在運(yùn)輸應(yīng)激過程中的死亡率和淘汰率。VitC 的作用還可以增強(qiáng)畜禽的代謝和產(chǎn)熱，增強(qiáng)機(jī)體對溫度的適應(yīng)性，減少高溫下畜禽的淘汰率和死亡率，在運(yùn)輸過程中如若在飼料中添加適宜劑量的VitC 就可減輕畜禽疾病的發(fā)生、高溫、免疫、噪音等的運(yùn)輸應(yīng)激狀態(tài)下的不利狀態(tài)。VitC 還能夠促進(jìn)兩種球蛋白（免疫球蛋白和膠原蛋白）的合成作用。VitC 還能夠降低結(jié)締組織的韌性，進(jìn)而提高機(jī)體在運(yùn)輸應(yīng)激下的抗應(yīng)激能力，使畜禽體溫下降，并且降低血液中皮質(zhì)醇的濃度。但用量卻為平時的2～3 倍。所以在運(yùn)輸過程中使用VitC 時可以使機(jī)體抵抗細(xì)菌和病毒的侵襲能力上升，動物的抗應(yīng)激能力變強(qiáng)，使肺臟的結(jié)構(gòu)和功能正常，加速血管內(nèi)皮的自我修復(fù)功能。

3.3 對運(yùn)輸應(yīng)激的防治措施 完善運(yùn)輸管理，運(yùn)輸前對運(yùn)輸環(huán)境進(jìn)行嚴(yán)格消毒，同時對運(yùn)輸?shù)男笄萁】登闆r進(jìn)行排查，禁止運(yùn)輸患病和帶毒的畜禽，以免在運(yùn)輸過程中患病畜禽與健康畜禽發(fā)生交叉感染，造成大規(guī)模的傳播。長時間運(yùn)輸時，應(yīng)飼喂易消化飼料，口服補(bǔ)液鹽、葡萄糖溶液，抑制應(yīng)激反應(yīng)的產(chǎn)生。運(yùn)輸期間維護(hù)運(yùn)輸環(huán)境，避免冷、熱、顛簸、高密度等造成的應(yīng)激反應(yīng)，做好運(yùn)輸監(jiān)控，實(shí)時掌握畜禽狀態(tài)，一旦出現(xiàn)癥狀，需及時處理。運(yùn)輸后單獨(dú)隔離飼養(yǎng)運(yùn)輸動物，控制飲食，當(dāng)畜禽適應(yīng)新環(huán)境，檢疫合格后再合群。

添加抗應(yīng)激藥物，運(yùn)輸前日糧中添加維生素、微生物制劑、中成藥等降低應(yīng)激的發(fā)生。一旦發(fā)現(xiàn)畜禽可能患有運(yùn)輸應(yīng)激綜合癥后，及時治療，避免病情惡化死亡。

4 結(jié)論

在飼料中加入1.5g/kgVitC 后可以增加機(jī)體的抗應(yīng)激能力，并且有效的緩解運(yùn)輸應(yīng)激對小鼠肺臟組織的損傷。