對(duì)視網(wǎng)膜靜脈阻塞患者進(jìn)行Hcy、VEGF檢測(cè)的臨床意義

馬 楠，何 敬，王淑珍

（河北省張家口市第一醫(yī)院眼科，河北 張家口 075000）

視網(wǎng)膜靜脈阻塞(RVO) 是臨床眼科多發(fā)性疾病，是造成成年人失明的主要疾病危險(xiǎn)因素[1]。一般臨床中根據(jù)病理表現(xiàn)將RVO 分為BRVO 與CRVO 兩種類型，前者一般僅在視網(wǎng)膜靜脈阻塞區(qū)域發(fā)生出血，后者可在視網(wǎng)膜4 個(gè)象限均發(fā)生出血[2]。RVO 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜多樣，在目前的醫(yī)療水平下對(duì)于RVO 進(jìn)行治療的難度頗高，尚無可有效治愈的方法。因此，早期預(yù)測(cè)、診斷，及時(shí)予以治療對(duì)改善此病患者預(yù)后的意義重大[3]。VEGF 是一種血管生長因子，與血管形成存在密切關(guān)聯(lián)[4]。Hcy 在多種疾病中均呈現(xiàn)高表達(dá)，其表達(dá)水平過高是造成血管病變的重要危險(xiǎn)因素[5]。本研究納入2020 年3 月至2022 年2 月我院收治的RVO 患者78 例作為觀察對(duì)象，觀察RVO 患者VEGF與Hcy 的表達(dá)水平，并分析VEGF 和Hcy 異常變化與RVO 的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究納入2020 年3 月至2022 年2 月我院收治的RVO 患者78 例作為觀察對(duì)象，研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)；根據(jù)不同RVO 類型分為CRVO 組（45 例）和BRVO 組（33 例）。CRVO 組：男性23 例、女性22 例；年齡25 ～75 歲，平均年齡（48.14±12.35）歲。BRVO 組：男性18 例、女性15 例；年齡24 ～73 歲，平均年齡（47.95±13.06）歲。另篩選同期健康體檢者40 例作為對(duì)照組，其中男性25 例、女性15 例；年齡26 ～70 歲，平均年齡（48.62±12.54）歲。三組研究對(duì)象的基本資料相比，P＞0.05，有可比性。RVO 病例的納入標(biāo)準(zhǔn)：1）經(jīng)熒光血管造影檢查證實(shí)RVO 患者均符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；2）患者年齡≥18歲；3）對(duì)本研究知情，且自愿參與；4）無眼部外傷史；5）瞳孔散大、無光感。RVO 病例的排除標(biāo)準(zhǔn)：1）同期參與其他研究者；2）入組前1 周使用甲氨蝶呤、VitB 等藥物者；3）甲狀腺功能減退者；4）凝血機(jī)制障礙者；5）腎心等臟器功能損害者；6）合并其他眼科疾病者；7）哺乳期、妊娠期女性；8）急性感染或惡性腫瘤患者。

1.2 方法

采集所有受試者的空腹肘靜脈血液標(biāo)本（5mL），進(jìn)行常規(guī)離心處理，離心速率3000r/min，進(jìn)行5min 的離心處理后分離血清保存于-80 ℃冰箱中待 檢。 患 者Hcy 水 平、VEGF 水 平 以ELISA 法 檢測(cè)，使用AU5800 全自動(dòng)生化分析儀（貝克曼庫爾特）與配套的試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。Hcy 正常參考值：5μmol/L ～15μmol/L。Hcy ＞100μmol/L 為重度升高，Hcy 31μmol/L ～100μmol/L 為中度升高，Hcy 16μmol/L ～30μmol/L 為輕度升高?；颊邇?nèi)皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO）表達(dá)水平采用放射免疫分析法檢測(cè)，由上海茁彩生物科技有限公司提供試劑盒。所有操作均嚴(yán)格依照試劑盒說明書進(jìn)行，由專業(yè)檢驗(yàn)科醫(yī)師負(fù)責(zé)各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比RVO 患者與健康人群NO、ET-1、VEGF、Hcy 的表達(dá)水平；根據(jù)Hcy 水平分組，比較不同Hcy分組患者NO、ET-1 與VEGF 的表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

以SPSS 26.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析及檢驗(yàn)，正態(tài)分布的計(jì)量資料以配對(duì)、獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、F檢驗(yàn)為主，通過（±s）表示；采用Spearman 相關(guān)性分析法進(jìn)行相關(guān)性分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)比三組受試者各指標(biāo)水平

三組受試者VEGF、Hcy、NO、ET-1 等指標(biāo)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；CRVO 組與BRVO組患者VEGF、Hcy、ET-1 的表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組，CRVO 組與BRVO 組患者NO 的表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。CRVO組與BRVO 組兩組間各指標(biāo)相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見表1。

2.2 不同Hcy 分組患者VEGF、NO、ET-1 水平的對(duì)比

根據(jù)Hcy 表達(dá)水平對(duì)78 例RVO 患者進(jìn)行分組，分為重度升高組、中度升高組、輕度升高組。重度升高組患者VEGF、ET-1 的表達(dá)水平均高于中度升高組、輕度升高組，而重度升高組患者NO 的表達(dá)水平低于中度升高組、輕度升高組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；輕度升高組患者VEGF、ET-1 的表達(dá)水平均低于中度升高組，NO 的表達(dá)水平高于中度升高組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2。

表1 三組血清Hcy、VEGF、NO、ET-1 水平的對(duì)比（± s）

表1 三組血清Hcy、VEGF、NO、ET-1 水平的對(duì)比（± s）

注：* 與對(duì)照組比較，P ＜0.05；#與BRVO 組相比，P ＞0.05。

組別 Hcy（μmol/L） VEGF（pg/mL） NO（pg/mL） ET-1（pg/mL）CRVO 組（n=45） 90.23±3.12*# 136.12±11.40*# 70.20±1.93*# 178.41±8.35*#BRVO 組（n=33） 90.12±3.11* 135.77±111.38* 70.33±1.87* 178.22±28.58*對(duì)照組（n=40） 10.60±1.45 68.20±9.70 88.54±6.79 140.61±6.33 F 值 11745.43 516.05 245.11 309.63 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 不同Hcy 分組患者VEGF、NO、ET-1 水平的對(duì)比（± s）

表2 不同Hcy 分組患者VEGF、NO、ET-1 水平的對(duì)比（± s）

注：* 與重度升高組比較，P ＜0.05；#與輕度升高組相比，P ＜0.05。

組別 VEGF（pg/mL） NO（pg/mL） ET-1（pg/mL）重度升高組（n=10） 162.24±14.17 44.85±6.19 285.28±37.40中度升高組（n=31） 116.37±9.74*# 95.56±15.74*# 200.15±15.16*#輕度升高組（n=37） 81.34±7.65* 158.31±20.50* 151.28±9.44*F 值 318.71 341.02 246.40 P 值 0.000 0.000 0.000

2.3 分析RVO 患者Hcy 水平與NO、ET-1 及VEGF 水平的相關(guān)性

RVO 患 者Hcy 的 表 達(dá) 水 平 與ET-1、VEGF 的表達(dá)水平呈明顯正相關(guān)性（P＜0.05）；RVO 患者Hcy 的表達(dá)水平與NO 的表達(dá)水平呈明顯負(fù)相關(guān)性（P＜0.05）。詳見表3。

表3 分析RVO 患者Hcy 水平與NO、ET-1 及VEGF 水平的相關(guān)性

3 討論

RVO 是一種眼底血管病變，最早在1978 年由國外學(xué)者Von michele 提出，可對(duì)患者的視力造成嚴(yán)重影響。該病癥具有致盲性。近年來，隨著人們生活方式的改變，臨床RVO 的患病率顯著升高。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球范圍內(nèi)RVO 患病人數(shù)多達(dá)1.60 億人[6]。ROV 對(duì)人類視力構(gòu)成嚴(yán)重威脅，是臨床不可忽視的重要公共衛(wèi)生問題。

RVO 的主要病癥特征表現(xiàn)為視網(wǎng)膜水腫和出血、靜脈迂回?cái)U(kuò)張、視網(wǎng)膜血液瘀滯等。RVO 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，包括血流動(dòng)力學(xué)異常、動(dòng)脈硬化、高血壓、視網(wǎng)膜炎癥等因素的作用；其病因較多，與全身用藥、生活習(xí)慣、年齡、眼局部因素等存在關(guān)聯(lián)性[7]。目前，臨床對(duì)于RVO 主要采取針對(duì)性藥物治療，但療效欠佳，治療難度頗高，且目前尚無特效治療方案[8]。因此，對(duì)于RVO 相關(guān)影響因子的進(jìn)一步探討與分析，對(duì)RVO 的臨床治療、早期診斷等均有重要意義。

大量研究證實(shí)，在動(dòng)脈粥樣硬化、深靜脈血栓性疾病、腦血管疾病等多種血管病變中Hcy 均起到重要影響作用[9-10]。Hcy 是一種含硫氨基酸，又稱高半胱氨酸，是由蛋氨酸轉(zhuǎn)化而成，是其重要中間產(chǎn)物。蛋氨酸可在ATP 作用下合成S- 腺苷蛋氨酸。在甲基轉(zhuǎn)移酶作用下，S- 腺苷蛋氨酸可對(duì)甲基進(jìn)行轉(zhuǎn)移，引起相應(yīng)物質(zhì)的甲基化反應(yīng)，S- 腺苷蛋氨酸則轉(zhuǎn)變?yōu)镾- 腺苷同型半胱氨酸，最后在水解酶作用下成為Hcy[11]。在葉酸與維生素B12作用下，Hcy 可再發(fā)生甲基化反應(yīng)，生成甲硫氨酸，在這一過程中甲硫氨酸合成酶發(fā)揮催化作用，以N10/N5甲基四氫葉酸為供體；因此，維生素B12、葉酸缺乏可能是造成Hcy 水平升高的重要因素。有研究表明，RVO 在危險(xiǎn)因素方面與動(dòng)脈粥樣硬化病變存在一定的相似性[12-13]。而Hcy 可進(jìn)一步促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展，參與血栓形成；可見在RVO 中高Hcy 水平可能發(fā)揮重要作用。

VEGF 作為一種最直接、最強(qiáng)的血管生長因子，在人體各組織、器官中廣泛存在；一般健康人群眼部視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞中VEGF 均呈現(xiàn)低表達(dá)，以維持眼部功能正常。眼部疾病患者的視網(wǎng)膜細(xì)胞處于缺氧狀態(tài)時(shí)，VEGF 水平會(huì)明顯升高；高表達(dá)的VEGF 可與血管內(nèi)皮細(xì)胞受體發(fā)生特異性結(jié)合，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，提高血管通透性，改變細(xì)胞外基質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）表達(dá)進(jìn)行上調(diào)，進(jìn)而破壞血- 視網(wǎng)膜屏障，參與視網(wǎng)膜病變過程。

本研究顯示，CRVO 組與BRVO 組患者VEGF、Hcy、ET-1 的表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組，CRVO 組與BRVO 組患者NO 的表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。這說明，RVO 患者VEGF、Hcy、NO、ET-1 的水平與健康人群存在明顯差異，表明以上指標(biāo)與RVO 的發(fā)生存在關(guān)聯(lián)性。重度升高組患者VEGF、ET-1 的表達(dá)水平均高于中度升高組、輕度升高組，而重度升高組患者NO 的表達(dá)水平低于中度升高組、輕度升高組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。這提示，RVO 患者Hcy 的表達(dá)水平越高，其VEGF、ET-1 的表達(dá)水平就越高，NO 的表達(dá)水平就越低。

本研究顯示，RVO 患者Hcy 的表達(dá)水平與VEGF、NO、ET-1 的表達(dá)水平存在密切關(guān)聯(lián)性（P＜0.05）。Hcy 可與患者的血脂發(fā)生異常結(jié)合，引起機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)，促使血脂升高，增加粥樣硬化發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)一步加重RVO 病情，促使患者VEGF水平升高。NO 與ET-1 在機(jī)體體液系統(tǒng)調(diào)節(jié)中起到重要作用?；颊叩腍cy 水平升高，可導(dǎo)致機(jī)體血脂升高，血液流速降低，造成NO 表達(dá)水平下降，ET-1表達(dá)水平升高。

綜上所述，RVO 患者Hcy、VEGF 的表達(dá)水平升高與其病情存在密切關(guān)聯(lián)性，其Hcy 表達(dá)水平與NO、ET-1 表達(dá)水平存在密切關(guān)聯(lián)性；臨床可通過檢測(cè)Hcy、VEGF 對(duì)患者的病情進(jìn)行早期預(yù)測(cè)，為早期診斷、疾病治療等提供重要依據(jù)。