Nesfatin-1、瘦素在肥胖兒童的表達(dá)水平及臨床意義

楊 娟，冷茂東，孫倩倩，方盼盼，弓偉華，楊建麗，任 沖，楊俊梅

(鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科/鄭州市兒童感染與免疫重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，鄭州 450018)

肥胖是由于體內(nèi)能量攝入和消耗失衡而引起，可以發(fā)生于任何年齡。近年來由于社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們營養(yǎng)狀況的提高，肥胖發(fā)生率越來越高。肥胖和代謝綜合征相關(guān)，包括內(nèi)臟肥胖、高血壓、胰島素抵抗和血脂障礙等，會(huì)導(dǎo)致心血管疾病和2型糖尿病，嚴(yán)重威脅兒童的身體健康。下丘腦是調(diào)節(jié)能量平衡的關(guān)鍵中樞，且有豐富的肽類調(diào)節(jié)飽腹感[1]。Nesfatin-1是最近發(fā)現(xiàn)的一種使食欲減退的肽類，來源于核連蛋白-2，參與食欲、體重、營養(yǎng)和能量代謝的調(diào)節(jié)[2-3]。核連蛋白-2表達(dá)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周組織，Nesfatin-1由于其親脂性低，可以通過非飽和跨膜擴(kuò)散跨越血腦屏障。研究表明，肥胖兒童外周血中Nesfatin-1水平不同于體重正常兒童，可能參與體重的調(diào)節(jié)[4-5]。瘦素主要由脂肪組織分泌，能夠引起動(dòng)物產(chǎn)生飽腹感，從而攝食減少，且增加能量消耗。血清中瘦素水平在肥胖患兒相對(duì)于正常體重患兒明顯增高[6]。目前國內(nèi)外對(duì)Nesfatin-1在肥胖患兒血清水平的研究數(shù)量有限，且研究結(jié)論存在分歧，缺少肥胖患兒血清Nesfatin-1與瘦素水平的相關(guān)性研究，因此，本研究旨在探討Nesfatin-1與瘦素在肥胖患兒血清中的水平，并分析二者的臨床意義及相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2022年1—4月本院門診或住院的80例患兒為研究對(duì)象。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)診斷為內(nèi)分泌疾病，如甲狀腺功能亢進(jìn)或減退、庫欣綜合征等；(2)急性或慢性感染性疾??；(3)有藥物使用史，如類固醇或抗精神病藥物；(4)合并慢性疾病，如心血管、胃腸道或呼吸系統(tǒng)疾病等。根據(jù)2009年李輝等制訂的2～18歲兒童超重肥胖篩查BMI界值(專家標(biāo)準(zhǔn))對(duì)納入病例是否肥胖進(jìn)行診斷，并分為肥胖組和對(duì)照組，每組40例。

1.2 方法

1.2.1身體指標(biāo)測量

使用身高體重測量儀測量每個(gè)研究對(duì)象的身高與體重。其中測量體重時(shí)，研究對(duì)象需要脫去鞋子并穿質(zhì)量較輕的衣服，身高體重的測量分別精確到0.1 cm和0.1 kg。BMI(kg/m2)=體重/身高的平方。

1.2.2血清指標(biāo)檢測

肥胖組和對(duì)照組在空腹8～12 h狀態(tài)下抽取靜脈血3 mL，靜置0.5 h后離心獲取血清，以進(jìn)行后期相關(guān)指標(biāo)的檢測。采用貝克曼全自動(dòng)生化分析儀(AU5800)檢測血清中血糖、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT) 和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的濃度。采用羅氏化學(xué)發(fā)光分析儀(cobas 602)檢測血清中胰島素水平。胰島素抵抗的穩(wěn)態(tài)模型評(píng)估(the homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)的計(jì)算方式為：HOMA-IR=空腹胰島素×空腹血糖/22.5。青春前期兒童HOMA-IR>2.5和青春期兒童HOMA-IR>4.0定義為胰島素抵抗(insulin resistance,IR)[7]。

1.2.3血清中Nesfatin-1和瘦素水平的檢測

采用基于ELISA原理的商品化試劑盒(武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司)對(duì)血清中Nesfatin-1和瘦素水平進(jìn)行檢測，線性相關(guān)性系數(shù)≥0.990，批內(nèi)變異系數(shù)<10%。每份血清標(biāo)本50倍稀釋，根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行ELISA操作，使用安圖酶標(biāo)儀(PHOMO)在450 nm波長處測量各個(gè)反應(yīng)孔的吸光度(A)值。采用倍比稀釋的方法，將1 000 ng/L的Nesfatin-1和瘦素標(biāo)準(zhǔn)品工作液分別配置成1 000.00、500.00、250.00、125.00、62.50、31.25、15.63、0 ng/L的標(biāo)準(zhǔn)品工作液，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。根據(jù)制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線的公式計(jì)算每個(gè)反應(yīng)孔對(duì)應(yīng)標(biāo)本濃度，再乘以50即為標(biāo)本終濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 兩組一般資料比較

肥胖組體重和BMI水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組一般資料比較(n=40)

2.2 兩組生化指標(biāo)、Nesfatin-1及瘦素水平比較

肥胖組胰島素、血糖、HOMA-IR、IR比例、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白、ALT、AST、Nesfatin-1和瘦素水平高于對(duì)照組，高密度脂蛋白水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩組生化指標(biāo)、Nesfatin-1及瘦素水平比較(n=40)

2.3 Nesfatin-1、瘦素水平與身體指數(shù)、各生化指標(biāo)的相關(guān)性分析

肥胖組Nesfatin-1水平與BMI、總膽固醇、低密度脂蛋白和瘦素水平呈正相關(guān)，瘦素水平與BMI、總膽固醇、低密度脂蛋白及Nesfatin-1水平呈正相關(guān)(P<0.05)。對(duì)照組Nesfatin-1水平與年齡、BMI、總膽固醇、低密度脂蛋白及瘦素水平呈正相關(guān)，瘦素水平與年齡、BMI、總膽固醇、低密度脂蛋白及Nesfatin-1水平呈正相關(guān)(P<0.05)，見表3。

表3 Nesfatin-1、瘦素水平與身體指數(shù)、各生化指標(biāo)的相關(guān)性分析

3 討 論

兒童肥胖癥是一種日益嚴(yán)重的全球性營養(yǎng)障礙，屬于世界范圍的流行病。這種流行病最初發(fā)生在發(fā)達(dá)國家，由于全球化進(jìn)展使得該病的高發(fā)區(qū)逐漸轉(zhuǎn)移至發(fā)展中國家，我國作為最大的發(fā)展中國家，肥胖已經(jīng)嚴(yán)重威脅我國兒童的身心健康[8]。

肥胖由體內(nèi)能量攝入與消耗平衡失調(diào)引起，因此，這是一個(gè)由神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)等共同參與的過程。食物攝入調(diào)節(jié)異常會(huì)引起體內(nèi)能量攝入增加，進(jìn)而導(dǎo)致肥胖。食物攝入受消化系統(tǒng)、脂肪組織和腦飽腹感中心共同控制，多種肽類和激素參與到這個(gè)過程的病理生理調(diào)節(jié)。Nesfatin-1是一種新的厭食性神經(jīng)肽類，其能夠通過抑制食物攝入而參與到進(jìn)食行為和體重的調(diào)節(jié)。瘦素在人體表達(dá)情況和作用研究較早，其在肥胖人群中表達(dá)水平的相關(guān)性研究較多，結(jié)論明確，其在肥胖人體中表達(dá)水平增高，能夠調(diào)節(jié)人體的進(jìn)食行為和體重。但目前少有研究將Nesfatin-1和瘦素共同檢測，并探討二者之間的關(guān)聯(lián)與臨床意義。

本研究納入40例肥胖兒童作為肥胖組，40例健康對(duì)照兒童作為對(duì)照組，兩組年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，因而排除了年齡和性別因素對(duì)研究結(jié)果的影響。同時(shí)，選擇研究對(duì)象時(shí)排除了存在感染性疾病、內(nèi)分泌疾病、慢性疾病等可能影響研究結(jié)果的因素。在空腹8～12 h后抽取靜脈血，離心獲取血清進(jìn)行檢測，從而保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

本研究肥胖組BMI、血糖、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白、ALT、AST水平高于對(duì)照組，而高密度脂蛋白低于對(duì)照組，說明肥胖癥能夠影響兒童血脂、血糖代謝狀態(tài)引起血脂、血糖水平增高，且增加肝臟負(fù)擔(dān)從而影響肝功能。肥胖癥是兒童出現(xiàn)IR的主要危險(xiǎn)因素[9-10]，由于兒童肥胖癥發(fā)生率增加，IR又成為影響兒童健康的重要因素[11]。肥胖組胰島素、HOMA-IR水平及IR比例高于對(duì)照組，表明兒童肥胖癥與IR緊密關(guān)聯(lián)。目前關(guān)于肥胖兒童血清中Nesfatin-1水平變化存在分歧，而本研究結(jié)果可以作為佐證。有研究發(fā)現(xiàn)，Nesfatin-1在營養(yǎng)不良體重過輕兒童血清中水平增高，可能通過抑制食欲發(fā)揮作用[12]。而本研究Nesfatin-1和瘦素水平在肥胖兒童血清中也增高，表明在肥胖兒童處于一種耐受狀態(tài)，并受到肥胖的影響而代償性增高。

不同研究模型表明Nesfatin-1能夠參與脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)，并影響體重。Nesfatin-1可能是脂質(zhì)代謝和肥胖及代謝性疾病和心血管系統(tǒng)疾病的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，可能成為肥胖、心血管系統(tǒng)疾病和代謝性疾病新的治療靶標(biāo)[13-14]。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)肥胖組和對(duì)照組血清Nesfatin-1和瘦素水平均與BMI呈正相關(guān)，作為食欲和體重調(diào)節(jié)的兩種重要肽類，其表達(dá)水平隨BMI的增高而升高，從而調(diào)節(jié)肥胖兒童的體重。肥胖組和對(duì)照組血清總膽固醇和低密度脂蛋白水平與Nesfatin-1和瘦素水平均呈正相關(guān)，由于低密度脂蛋白的主要成分是膽固醇，表明外周血Nesfatin-1和瘦素可能參與膽固醇的代謝調(diào)節(jié)。血清Nesfatin-1與瘦素水平相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，二者在肥胖和健康兒童血清中的水平均呈正相關(guān)。由于Nesfatin-1抑制食欲的功能是獨(dú)立于瘦素通路發(fā)揮作用的[15]，因此，推測Nesfatin-1與瘦素在肥胖兒童體重調(diào)節(jié)中的作用是相互協(xié)同的。對(duì)照組血清Nesfatin-1和瘦素水平與年齡呈正相關(guān)，表明體重正常兒童血清Nesfatin-1和瘦素水平會(huì)受年齡影響。但本研究Nesfatin-1和瘦素水平與年齡的相關(guān)性并不存在于肥胖兒童，可能由于在肥胖兒童Nesfatin-1和瘦素的表達(dá)水平主要受肥胖影響而升高，年齡的影響可能較小，相對(duì)于肥胖是可以忽略的。

本研究的不足之處在于：(1)樣本量較小，未來需要納入更大樣本量進(jìn)行相關(guān)研究。(2)納入病例包括肥胖兒童和健康兒童，而未探討Nesfatin-1和瘦素在營養(yǎng)不良兒童外周血中的表達(dá)和臨床意義，未能充分闡釋二者在體重調(diào)節(jié)中的生物學(xué)作用。

綜上所述，Nesfatin-1和瘦素在肥胖兒童表達(dá)水平增高，處于一種耐受狀態(tài)，并隨BMI增加而代償性增高，從而調(diào)節(jié)肥胖兒童體重，且Nesfatin-1和瘦素在肥胖兒童體重調(diào)節(jié)中具有協(xié)同作用。體重正常兒童Nesfatin-1和瘦素水平受年齡和BMI共同影響，二者可能參與血清膽固醇水平的調(diào)節(jié)。