Syndecan-4 對類風濕關(guān)節(jié)炎患者鑒別的診斷價值

李娟 譚立明

（1 南昌大學第二附屬醫(yī)院檢驗科 江西南昌 330006；贛南衛(wèi)生健康職業(yè)學院 江西贛州 341000；2 南昌大學第二附屬醫(yī)院檢驗科 江西省檢驗醫(yī)學重點實驗室 江西南昌 330006）

類風濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種表現(xiàn)為滑膜炎、鄰近骨侵蝕和關(guān)節(jié)破壞的自身免疫疾病。 曾小峰等的調(diào)查研究顯示，我國RA 患者的病程及活動度對患者工作效率和健康生活影響巨大[1]。尤其是早期RA的臨床病理變化，可以引起血清中實驗性標志物水平變化，很多研究發(fā)現(xiàn)早期檢測的標志物可以提升早期診斷價值[2-3]。臨床上對RA 的診斷存在一定的缺陷，本研究通過文獻[4-6]學習發(fā)現(xiàn)，多配體蛋白聚糖-4（SDC-4）蛋白屬于硫酸乙酰肝素蛋白聚糖家族成員之一，與抗環(huán)瓜氨酸多肽抗體（anti-CCP）和類風濕因子（RF）等指標聯(lián)合檢測。其對RA 的診斷效能頗佳。本研究對2019 年9 月～2020 年12 月南昌大學第二附屬醫(yī)院確診的患者和健康體檢者的血清SDC-4 蛋白、anti-CCP 和RF 等指標進行檢測，并對結(jié)果進行統(tǒng)計分析，報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2019 年9 月～2020 年12 月南昌大學第二附屬醫(yī)院確診的100 例RA 患者、93 例Non-RA患者以及53 例健康體檢者作為研究對象。其中Non-RA 患者包括23 例干燥綜合征（SS）患者、30例骨性關(guān)節(jié)炎（OA）患者和40 例強直性脊柱炎（AS）患者。

RA 組男性35 例，女性65 例；年齡23～82 歲，平均（52.74±15.08）歲。

Non-RA 組中干燥綜合征（SS）男性3 例，女性20 例；年齡34～81 歲，平均（58.69±15.09）歲。

骨性關(guān)節(jié)（OA）男性14 例，女性16 例；年齡34～78 歲，平均（55.15±12.32）歲。

強直性脊柱炎（AS）男性11 例，女性29 例；年齡28～78 歲，平均（52.88±14.05）歲。

健康對照組男性20 例，女性33 例；年齡26～82 歲，平均（52.23±15.29）歲。

3 組研究對象年齡經(jīng)方差分析檢驗，差異無統(tǒng)計學意義，P＞0.05；性別經(jīng)χ2檢驗，差異無統(tǒng)計學意義，P＞0.05。RA 患者診斷符合2010 年歐洲風濕病協(xié)會和美國風濕病協(xié)會分類標準；OA、SS 和AS患者診斷均符合對應指南。所有標本均在患者知情條件下獲得，并經(jīng)南昌大學第二附屬醫(yī)院倫理委員會批準許可。

1.2 試劑及方法

（1）ELISA 法檢測血清SDC-4 ：分別采用上海恒遠生物科技有限公司和上海谷研生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑，運用寶特ELX800 酶標儀（北京普朗新技術(shù)有限公司）進行比色, 使用450 納米波長比色讀取吸光度,計算結(jié)果。（2）血清anti-CCP：iFlash 3000-C 化學發(fā)光免疫分析儀及配套試劑（深圳宏利生物科技有限公司）。（3）血清RF：采用貝克曼庫爾特IMMAGE 800 自動特定蛋白分析儀及配套試劑采用速率散射濁度法檢測[5]。

1.3 統(tǒng)計學處理

SPSS 25 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料用構(gòu)成比表示，組間差異用χ2檢驗；計量資料所有數(shù)據(jù)進行正態(tài)性分析和Levene`s 方差檢驗。正態(tài)數(shù)據(jù)用（）表示；偏態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)（四分位距）M（IQR）表示。偏態(tài)分布計量資料，組間水平差異采用克魯斯卡爾- 沃利斯H 檢驗（Kruskal-Wallis H test），3 個樣本間差異的校正方法用Bonferroni校正，校正后P＜0.05，有統(tǒng)計學差異。繪制受試者工作特征（ROC）曲線，計算曲線下面積（AUC）綜合評價其對RA 的診斷價值。

2 結(jié)果

2.1 3 組研究對象血清各標志物含量

RA 組血清Syndecan-4 含量中位數(shù)為1128.40皮克/毫升，anti-CCP 含量中位數(shù)為332.17U/ml，RF 含量中位數(shù)為143.00IU/ml，均顯著高于Non-RA 和健康對照組。見表1。

表1 各組血清標志物的表達含量

2.2 血清SDC- 4 蛋白、anti- CCP 和RF 檢測結(jié)果ROC 曲線分析

所檢測指標SDC-4、anti-CC 和RF 對RA 診斷均達到中等以上診斷價值，對應cutoff 值分別為568.02皮克/毫升、119.25 U/ml 和60.00 IU/ml。見表2。

表2 各標志物ROC 曲線參數(shù)

2.3 3 組研究對象SDC- 4 蛋白、anti- CCP 和RF 診斷效能評價

通過分析3 組研究對象的SDC-4 蛋白、anti-CCP 和RF 的靈敏度、特異度、預測值和似然比等，發(fā)現(xiàn)SDC-4 蛋白的靈敏度最高；anti-CCP 的特異度、陽性預測值最高。見表3。

表3 各診斷指標診斷價值

3 討論

RA 的致病機制尚不明確，病理非常復雜，女性多于男性。隨著病程的進展，其關(guān)節(jié)損傷的程度越來越嚴重，最后導致關(guān)節(jié)畸形。在這漫長的過程中，患者體內(nèi)發(fā)生復雜的變化。瓜氨酸化蛋白的研究較多，有研究發(fā)現(xiàn)患者對該蛋白的免疫應答較強。同時臨床上也將anti-CCP 應用于臨床RA 的診斷，其診斷的特異性較RF 高。從微觀角度來觀察RA患者整個病程是比較長的，在影像學檢查前，患者體內(nèi)就發(fā)生了一系列的血清學變化，所以在臨床上急需發(fā)現(xiàn)非創(chuàng)口性的檢測手段提高RA 的早期診斷的價值。RA 是一種高致畸性、難以治愈的疾病，因此臨床上都是以控制疾病、預防并發(fā)癥的發(fā)生為主?？v使RA 發(fā)病機制復雜，但是滑膜增生、骨畸變對疾病的發(fā)展影響較大。許多研究證實SDC-4 與RA之間的關(guān)系緊密，DC-HIL/SDC-4通路通過介導MDSC 的T 細胞抑制功能來調(diào)節(jié)自身免疫反應，進一步證實SDC-4 參與自身免疫反應。所以筆者選擇SDC-4 聯(lián)合anti-CCP、RF進行試驗，目的是探索SDC-4 對RA的診斷價值[7]。

本研究結(jié)果顯示，RA 組患者血清SDC-4 含量中位數(shù)為1128.40 皮克/毫升；血清anti-CCP 含量中位數(shù)為332.17U/ml；血清RF 含量中位數(shù)為143.00IU/ml 均顯著高于Non-RA 和健康對照組等水平，差異有統(tǒng)計學意義。表1 顯示SDC-4 在OA 和AS 也略有升高，這可能與SDC-4的作用機制有關(guān)。SDC-4 不但通過影響MMP 來影響關(guān)節(jié)骨和軟骨的破壞，還通過調(diào)節(jié)RPTPσ 影響骨和軟骨的平衡。而金屬酶是預測RA 患者骨質(zhì)破壞的一個重要的預測性指標。本研究提示SDC-4還影響著關(guān)節(jié)相關(guān)的疾病，有相關(guān)的文獻也顯示SDC-4 在OA 動物模型中有所升高并參與軟骨與骨損傷。該研究Anti-CCP 在RA 組水平明顯升高。RF 是由于某種原因?qū)е碌囊宰冃訧gG 為抗原的抗體，是診斷RA 患者中發(fā)現(xiàn)的第一個自身抗體。但是RF 的特異性不高，敏感性也不如SDC-4 高。RF 增高不僅見于RA，還可見于SS、SLE 等其他自身免疫性疾病。本研究顯示，SS 組RF 的含量雖沒有RA組的高，但是較OA 組、AS 組、健康對照組的平均值高[7]。

根據(jù)ROC 曲線統(tǒng)計分析得出AUC，所檢測指標SDC-4、anti-CCP 和RF 對RA 診斷均達到中等以上診斷價值。通過分析3 組研究對象的血清SDC-4 蛋白、anti-CCP 和RF 的靈敏度、特異度、預測值和似然比等，發(fā)現(xiàn)靈敏度最高的是SDC-4蛋白為86.5%；特異度最高的是anti-CCP 為95.0%；陽性預測值最高的是anti-CCP 為0.91[8]。

綜上，本研究表面血清SDC-4 蛋白可作為RA 新的輔助診斷指標。本研究的缺陷是沒有納入研究骨代謝相關(guān)指標及SDC-4 在RA 疾病活動度的關(guān)系。今后可以進一步研究SDC-4 與RA 骨平衡及其他骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)的疾病。