α-微管蛋白乙?；{(diào)控NLRP3炎癥小體活化的研究進(jìn)展①

李陳廣 吳曉君 肖禮祖 （華中科技大學(xué)協(xié)和深圳醫(yī)院，深圳 518052）

炎癥小體是由多種蛋白質(zhì)組成的大型胞內(nèi)復(fù)合物，包括NLRP1、NLRP3、NLRC4 和AIM2 等，而NLRP3 炎癥小體是當(dāng)前研究最多的炎癥小體，由凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白（apoptosis associated speck like protein containing a CARD，ASC）、pro-caspase-1 和NLRP3 等蛋白質(zhì)組裝而成，巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等多種細(xì)胞經(jīng)各種激動(dòng)劑如尼日利亞菌素（nigericin）、胞外腺嘌呤核苷三磷酸（adenosine triphosphate，ATP）、尿酸鈉晶體（monosodium urate，MSU）和二氧化硅（SiO?）等激活后誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡發(fā)生，釋放成熟IL-1β和IL-18，引起強(qiáng)烈的固有免疫應(yīng)答，這是機(jī)體抵抗病原微生物感染的重要防御機(jī)制［1-2］。但NLRP3 炎癥小體的過度活化又與人類許多炎癥性疾病和自身免疫性疾病相關(guān)，如2 型糖尿?。╰ype 2 diabetes，T2D）、痛風(fēng)和阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD）等［3-5］。因此，如何調(diào)控 NLRP3 炎癥小體的活化成為當(dāng)下研究NLRP3 炎癥小體的重點(diǎn)。

NLRP3 炎癥小體可被多種激動(dòng)劑激活，但由于各種激動(dòng)劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)差異甚大，因此不大可能直接作用于NLRP3，而是調(diào)控細(xì)胞內(nèi)信號(hào)活化NLRP3炎癥小體，并伴隨離子流動(dòng)、活性氧（reactive oxygen species，ROS）產(chǎn)生、線粒體功能失調(diào)和溶酶體破裂等一系列現(xiàn)象產(chǎn)生［6］。迄今為止，尚無一個(gè)公認(rèn)的確切機(jī)制說明NLRP3 炎癥小體是如何被活化的。研究表明，NLRP3 炎癥小體活化時(shí)，感受蛋白NLRP3 通過其自身結(jié)構(gòu)域的相互作用，促進(jìn)自身的寡聚化，隨后寡聚化的NLRP3與接頭蛋白ASC 通過兩者同源蛋白相互作用而結(jié)合形成ASC speck，隨后ASC 與pro-caspase-1 相互作用，從而形成大型胞內(nèi)復(fù)合物NLRP3 炎癥小體，進(jìn)而誘導(dǎo)pro-caspase-1 自我切割活化，引發(fā)IL-1β 和IL-18 的活化及細(xì)胞焦亡發(fā)生［3-5］。在該過程中，線粒體可作為NLRP3炎癥小體組裝平臺(tái)，通過線粒體上的膜蛋白，如線粒體抗病毒蛋白（mitochondrial antiviral signaling protein，MAVS）、線粒體外膜蛋白mitofusin 2 以及外化的心磷脂等募集NLRP3，促進(jìn)NLRP3炎癥小體活化。而在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中微管網(wǎng)絡(luò)作為細(xì)胞內(nèi)信號(hào)的主要調(diào)節(jié)物參與線粒體的調(diào)控和分布，有利于促進(jìn)NLRP3 炎癥小體活化，在破壞微管后，線粒體產(chǎn)生的ROS 并不會(huì)促進(jìn)IL-1β 分泌［7-8］。然而，微管是如何適時(shí)調(diào)控NLRP3 到達(dá)線粒體并與ASC 進(jìn)行相互作用，進(jìn)而活化NLRP3 炎癥小體的呢？這是需要深入探討的方向。

1 α-微管蛋白乙酰化

1.1 α-微管蛋白乙?；揎椀臋C(jī)制研究 微管包括γ-微管蛋白、α-微管蛋白和β-微管蛋白，它們是細(xì)胞質(zhì)骨架的重要組成成分。其中，γ-微管蛋白是主要定位于微管組織中心（microtubule organizing center， MTOC）的微管蛋白，其對(duì)微管的形成具有重要作用，而α-微管蛋白和β-微管蛋白組成的異二聚體則是微管組裝基本單元，每13 個(gè)單元為1 圈，形成螺旋中空管狀結(jié)構(gòu)（圖1）。由于微管處于生長(zhǎng)速度較快解離速度較慢的（+）端和生長(zhǎng)速度較慢解離速度較快的（-）端的不斷動(dòng)態(tài)變化中，因此允許微管不斷地在增長(zhǎng)和收縮間切換［9］。微管還是兩種運(yùn)載分子——驅(qū)動(dòng)蛋白（kinesin）和動(dòng)力蛋白（dynein）的行走軌道，因此微管在細(xì)胞內(nèi)具有多種生理功能，如參與胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸、細(xì)胞器定位、細(xì)胞分裂和運(yùn)動(dòng)等［9］。微管蛋白的翻譯后修飾賦予了其功能上的多樣性。最早于1985 年在衣藻的鞭毛中發(fā)現(xiàn)微管蛋白的乙?；揎?，其主要發(fā)生于α-微管蛋白上K40 的ε-氨基，由于大多數(shù)微管的翻譯后修飾發(fā)生在微管外壁，而α-微管蛋白的K40 的乙酰化修飾是微管腔內(nèi)唯一的翻譯后修飾，因此受到廣泛關(guān)注［10-11］。K40 的乙?；街饕蓛深惷刚{(diào)控，一類是去乙?；福燉０废汆堰识塑账?（nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+）非依賴的組蛋白脫乙酰基酶6（histone deacetylase 6，HDAC6）和NAD+依賴的沉默信息調(diào)節(jié)因子2（sirtuin type 2，SIRT2），SIRT2主要分布于細(xì)胞質(zhì)，少量分布于細(xì)胞核，但核 內(nèi)的SIRT2 并 沒有 去乙 ?；?活性［12-14］。SIRT2 去乙?；磻?yīng)是通過水解NAD+，生成煙酰胺（nicotinamide，NAM）和乙酰-ADP-核糖。通過抑制劑FK866 可減少煙酰胺磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶（NAM phosphoribosyltransferase，NamPRT），降低胞內(nèi)NAD+合成，從而促進(jìn)α-微管蛋白乙?；?5］。另一類是乙?；?，如α-微管蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶-1（α-tubulin acetyltransferase-1，αTAT1）。αTAT1 可通過微管末端或微管網(wǎng)格的內(nèi)部間隙進(jìn)入微管內(nèi)腔，然后相對(duì)緩慢地?cái)U(kuò)散到微管內(nèi)部，尋找其催化位點(diǎn)。當(dāng)缺失αTAT1 時(shí)，體內(nèi)多種組織中幾乎檢測(cè)不到α-微管蛋白K40 的乙酰化［16-17］。有趣的是，缺失αTAT1 可以增強(qiáng)微管的穩(wěn)定性并降低微管動(dòng)力，雖然聚集的乙?；?微管蛋白可以穩(wěn)定微管，但αTAT1本身可能不利于微管的穩(wěn)定［16-17］。

圖1 α-微管蛋白的乙?；揎棧?2-13，17］Fig.1 Acetylation modification of α-tubulin［12-13，17］

1.2 α-微管蛋白乙?；纳飳W(xué)功能 微管作為細(xì)胞內(nèi)囊泡運(yùn)輸?shù)墓羌芎蛙壍?，其?微管蛋白的乙?；欣诩?xì)胞內(nèi)囊泡沿微管軌道運(yùn)輸。雖然 α-微管蛋白乙?；粫?huì)改變微管的組裝和形態(tài)結(jié)構(gòu)，但可以影響微管的穩(wěn)定性并抑制微管的成核作用，阻礙微管蛋白原纖維間相互作用并加速收縮速率，從而增加微管的彈性并維持長(zhǎng)壽命微管的機(jī)械穩(wěn)定性［18］。有趣的是，乙酰化的α-微管蛋白更容易形成束狀微管，增強(qiáng)了微管驅(qū)動(dòng)蛋白和動(dòng)力蛋白的運(yùn)輸功能［19］。不過到目前為止微管的長(zhǎng)壽命與穩(wěn)定性是乙酰化的結(jié)果還是原因仍不清楚。過去大多數(shù)觀點(diǎn)認(rèn)為微管的乙酰化是微管穩(wěn)定的原因，因?yàn)槭褂没瘜W(xué)試劑穩(wěn)定微管后，可明顯提高其乙?；?；另外，有證據(jù)顯示乙?；蠖及l(fā)生在更為穩(wěn)定的微管上，因此認(rèn)為乙?；捷^高的微管較穩(wěn)定［20］。但同時(shí)也有實(shí)驗(yàn)表明，人工提高微管的乙?；剿坪醪⒉蛔阋栽黾游⒐艿姆€(wěn)定性，2014 年SZYK 等［21］的研究結(jié)果表明，由于αTAT1 催化α-微管蛋白乙?；乃俾氏鄬?duì)緩慢，且需要進(jìn)入微管腔內(nèi)發(fā)揮作用，使得乙?；嗟匕l(fā)生在穩(wěn)定且壽命較長(zhǎng)的微管上，這為乙?；c微管穩(wěn)定性的關(guān)系提供了最新的解釋。

1.3 α-微管蛋白乙?；c疾病發(fā)生 研究表明， α-微管蛋白的乙?；脚c人類疾病密切相關(guān)。在乳腺癌和胰腺癌細(xì)胞中，α-微管蛋白乙?；黠@升高，但在腸炎中卻明顯降低；感染艾滋病病毒、皰疹病毒和流感病毒等同樣可以影響α-微管蛋白的乙酰化［22］。研究表明，通過藥物抑制HDAC6 活性，提高乙?；乃降倪^程中，會(huì)加劇神經(jīng)退行性疾病的程度［23］。因此，α-微管蛋白的乙?；梢宰鳛橹委煾鞣N疾病的新靶點(diǎn)。

2 α-微管蛋白乙?；cNLRP3 炎癥小體活化

2.1 α-微管蛋白乙酰化參與NLRP3 炎癥小體活化 在NLRP3 激動(dòng)劑刺激下，僅發(fā)現(xiàn)核周邊有大量聚集的乙?；?微管蛋白。敲低αTAT1后，明顯降低NLRP3激動(dòng)劑誘導(dǎo)的乙?；?微管蛋白水平，且影響線粒體的運(yùn)輸并抑制NLRP3 炎癥小體活化。因此，α-微管蛋白乙?；瘜?duì)NLRP3 炎癥小體活化至關(guān)重要。而通過敲低SIRT2 或使用SIRT2 特異性抑制劑AGK2 處理后，可導(dǎo)致在核周邊形成乙?；?α-微管蛋白并使線粒體在核周邊聚集；而另一個(gè)sirtuin 家族成員SIRT1 并不影響α-微管蛋白的乙?；郊熬€粒體運(yùn)輸。但在敲低或抑制另一個(gè)去乙?；窰DAC6 后，雖然α-微管蛋白乙酰化水平提高，卻不影響線粒體運(yùn)輸至核周邊及隨后的NLRP3活化［8］。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，不同試劑誘導(dǎo)的乙?；?微管蛋白結(jié)構(gòu)可能不同。研究顯示，使用HDAC6抑制劑tubacin 可明顯增加整個(gè)細(xì)胞的α-微管蛋白乙酰化程度［24］；然而使用抑制劑AGK2 直接抑制SIRI2 活性或使用NAD+的合成酶NamPRT 抑制劑FK866 間接使SIRT2 失活，最終均導(dǎo)致僅在核周邊形成高度乙?；摩?微管蛋白［24-25］。這些結(jié)果表明，雖然SIRT2 與HDAC6 的去乙酰化位點(diǎn)相同，但兩者可能識(shí)別不同結(jié)構(gòu)的微管蛋白。

MISAWA 等［8］發(fā)現(xiàn)使用秋水仙素、諾考達(dá)唑和鬼臼素等微管解聚劑破壞微管可明顯抑制nigericin誘導(dǎo)的NLRP3 炎癥小體活化和IL-1β 分泌，提示微管參與NLRP3 炎癥小體活化的調(diào)控；而使用細(xì)胞松弛素D 則破壞細(xì)胞骨架另一種成分——微絲后，除了抑制依賴于吞噬作用的激動(dòng)劑如MSU 和SiO2誘導(dǎo)的IL-1β 分泌外，其余NLRP3 炎癥小體激動(dòng)劑的作用均不受影響。與此截然不同的是，秋水仙素可明顯抑制NLRP3 不同激動(dòng)劑所誘導(dǎo)的IL-1β 分泌，且并不影響細(xì)胞對(duì)SiO2的吞噬，進(jìn)一步說明微管調(diào)控NLRP3 炎癥小體的活化并不依賴于細(xì)胞的吞噬功能，且抑制微管的形成不會(huì)影響NLRC4 和AIM2炎癥小體活化，更加說明α-微管蛋白乙?；禺愋哉{(diào)控NLRP3炎癥小體活化。

2.2 α-微管蛋白乙?；閷?dǎo)線粒體運(yùn)輸有利于NLRP3 炎癥小體的組裝 線粒體功能異常或紊亂能夠介導(dǎo)NLRP3 炎癥小體活化。一方面是NLRP3激動(dòng)劑導(dǎo)致線粒體功能紊亂，釋放mtDNA 和mtROS作為危險(xiǎn)信號(hào)介導(dǎo)NLRP3 炎癥小體活化［26-27］；另一方面是線粒體的心磷脂從內(nèi)膜外移至外膜，可直接與NLRP3 的LRRs 結(jié)構(gòu)域結(jié)合，并活化NLRP3 炎癥小體。因此線粒體自身也可作為NLRP3 聚集的平臺(tái)，促進(jìn)NLRP3炎癥小體活化。

研究表明，在NLRP3 活化過程中，線粒體上外源轉(zhuǎn)入的ASC 移動(dòng)到核周邊區(qū)域，并與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上同樣是外源轉(zhuǎn)入的NLRP3 共定位［28］。在靜息狀態(tài)下，內(nèi)源性NLRP3 主要分布于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，激動(dòng)劑誘導(dǎo)NLRP3活化時(shí)，線粒體接近細(xì)胞核周邊的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，導(dǎo)致線粒體上的ASC 與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的NLRP3相互靠近，進(jìn)而活化NLRP3 炎癥小體。而微管可調(diào)控細(xì)胞內(nèi)多種物質(zhì)運(yùn)輸，包括對(duì)細(xì)胞器的運(yùn)輸，如線粒體等；秋水仙素處理能夠明顯抑制線粒體向核周邊的運(yùn)輸及隨后ASC 與NLRP3 的相互作用。說明微管調(diào)控的線粒體運(yùn)輸和重新分布可為NLRP3 炎癥小體活化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)找到一個(gè)最佳的活化位點(diǎn)。

在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，微管負(fù)責(zé)線粒體的長(zhǎng)距離運(yùn)輸。線粒體的運(yùn)輸分為兩類，一類為驅(qū)動(dòng)蛋白介導(dǎo)的從細(xì)胞核向外周的順行性運(yùn)輸；另一類為動(dòng)力蛋白介導(dǎo)的由外周向細(xì)胞核的逆行性運(yùn)輸［29］。由于在NLRP3 炎癥小體活化時(shí)，線粒體是由外周向細(xì)胞核逆行性運(yùn)輸，因此使用動(dòng)力蛋白抑制劑ciliobrevin-D預(yù)處理后可明顯抑制由不同NLRP3激動(dòng)劑誘導(dǎo)的線粒體向核周邊的運(yùn)輸以及隨后ASC 與 NLRP3的相互作用，最終抑制NLRP3炎癥小體活化和IL-1β 分泌［30］。提示線粒體依賴動(dòng)力蛋白沿微管的運(yùn)輸有利于NLRP3炎癥小體活化。

NLRP3 炎癥小體的激動(dòng)劑能夠降低線粒體膜電位，誘導(dǎo)線粒體損傷，降低胞內(nèi)NAD+濃度，導(dǎo)致SIRT2失去活性，進(jìn)而引起乙?；?微管蛋白聚集，且微管動(dòng)力蛋白可結(jié)合在乙?；摩?微管蛋白上［31］。表明α-微管蛋白乙?；烧{(diào)控線粒體依賴于微管動(dòng)力蛋白運(yùn)輸?shù)倪^程，使線粒體上的ASC 沿著乙酰化的微管逆行性運(yùn)輸至細(xì)胞核周邊并與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的NLRP3合并在一起，從而促進(jìn)NLRP3炎癥小體活化。

2.3 線粒體相關(guān)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜（mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes，MAMs）介導(dǎo)NLRP3炎癥小體活化 MAMs是線粒體外膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜某些區(qū)域高度重疊的部位，通過線粒體外膜蛋白Mitofusin 2彼此相互“連接”，但又不發(fā)生膜融合，保持穩(wěn)定的10～30 nm 膜間距，在物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起重要作用［32］。研究表明，MAMs 可作為炎癥小體組裝平臺(tái)，通過上述α-微管蛋白乙?；閷?dǎo)線粒體上的ASC 運(yùn)輸至細(xì)胞核周邊與NLRP3 共定位于MAMs［8，33］。SUBRAMANIAN 等［34］發(fā)現(xiàn) 線 粒體 抗 病毒蛋白MAVS 在NLRP3 炎癥小體活化過程中分布于MAMs，而MAVS 可作為連接蛋白與NLRP3 的N端相互作用，促進(jìn)NLRP3 定位于線粒體并誘導(dǎo)其活化［34-35］。有趣的是，MAVS 可形成脘病毒樣的聚集體，而這樣的聚集體又有利于NLRP3 寡聚化的形成［36］。因此，MAVS 不僅介導(dǎo)抗病毒的Ⅰ型IFN 反應(yīng)，同時(shí)也可作為線粒體對(duì)NLRP3 炎癥小體調(diào)控的橋梁。另外，在流感病毒和腦心肌炎病毒（encephalomyocarditis virus，EMCV）感染過程中，線粒體外膜上的Mitofusin 2可作為NLRP3在線粒體上的停靠位點(diǎn)，同樣對(duì)NLRP3的活化至關(guān)重要［37］。

HDAC6 抑制劑誘導(dǎo)微管高度乙?；稍鰪?qiáng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滑動(dòng)的頻率，提示α-微管蛋白乙?；粌H可以調(diào)控胞內(nèi)線粒體分布，還能夠調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的滑動(dòng)。由于α-微管蛋白乙酰化導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的滑動(dòng)與線粒體運(yùn)輸是偶聯(lián)的，進(jìn)一步說明α-微管蛋白乙?；閷?dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的NLRP3 和線粒體上的ASC 可以在MAMs 處相互靠近和結(jié)合，使得NLRP3 炎癥小體在空間上得到合適的活化條件［38］。

值得注意的是，ZHOU 等［28］在未刺激的THP-1細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)ASC 主要定位于細(xì)胞質(zhì)，沒有或很少與線粒體共定位。ZHANG 等［39］研究發(fā)現(xiàn)，在不同的NLRP3 激動(dòng)劑處理下，線粒體主要聚集在高爾基體周圍，然后1，2-二酰甘油（diacylglycerol，DAG）迅速積聚在高爾基體，隨后募集蛋白激酶D（protein kinase D，PKD）來磷酸化NLRP3 的Ser293 位點(diǎn)，最終使NLRP3 從MAMs 中釋放出來，才能進(jìn)一步完成組裝而得以活化。因此，MAMs 在NLRP3 炎癥小體活化過程中的分子作用機(jī)制仍需深入探討。

3 藥物調(diào)控α-微管蛋白乙?；绊慛LRP3炎癥小體活化

3.1 抑制α-微管蛋白乙?；{(diào)控NLRP3炎癥小體活化 秋水仙素是微管解聚劑，以不可逆的方式結(jié)合微管。MARTINON 等［40］首先發(fā)現(xiàn)秋水仙素可抑制MSU 誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞中NLRP3炎癥小體活化，這可能是秋水仙素治療痛風(fēng)的主要機(jī)制。MISAWA等［8］發(fā)現(xiàn)秋水仙素抑制NLRP3 的活化是通過抑制α-微管蛋白乙?；?，從而抑制線粒體的運(yùn)輸并影響ASC 與NLRP3 的結(jié)合。另外，秋水仙素可抑制P2X7R 形成的孔洞，進(jìn)而抑制ROS 的產(chǎn)生和IL-1β釋放［41］；還可抑制pyrin 的表達(dá)以抑制NLRP3 炎癥小體組裝［42］。

相較于秋水仙素通過破壞微管結(jié)構(gòu)來抑制α-微管蛋白的乙?；?，白藜蘆醇可抑制α-微管蛋白的乙?；⒉挥绊懳⒐芙Y(jié)構(gòu)。由于秋水仙素的細(xì)胞毒性和副作用較大，因此不適用于如糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化等需要長(zhǎng)期治療的疾病。相反白藜蘆醇毒性很低，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇能夠抑制體內(nèi)NLRP3炎癥小體活化，改善MSU誘導(dǎo)的小鼠腹膜炎，可作為治療NLRP3 相關(guān)疾病的候選藥物。有研究報(bào)道，白藜蘆醇可調(diào)控SIRT2 的酶活性，因此，白藜蘆醇可能通過增強(qiáng)SIRT2活性，從而降低α-微管蛋白的乙?；?，進(jìn)而抑制NLRP3 炎癥小體活化［43］。但由于沒有具體實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)αTAT1 的酶活性，很難探究白藜蘆醇是否對(duì)αTAT1 的酶活性有直接影響，因此白藜蘆醇抑制α-微管蛋白乙?；木唧w機(jī)制仍有待探索。

NAMPT 是合成NAD+補(bǔ)救途徑上關(guān)鍵限速酶，而水飛薊賓可提高NAMPT 的表達(dá)水平，因此可逆轉(zhuǎn)棕櫚酸鹽誘導(dǎo)的肝細(xì)胞內(nèi)NAD+濃度的下降，促進(jìn)SIRT2 的活性和表達(dá)，并降低αTAT1 表達(dá)，但對(duì)HDAC6無影響［44］；最終抑制α-微管蛋白的乙?；蚇LRP3炎癥小體的組裝［45］。

3.2 促進(jìn)α-微管蛋白乙?；{(diào)控NLRP3炎癥小體活化 吳茱萸堿可促進(jìn)微管蛋白聚合，是一種微管穩(wěn)定劑［46］。LI 等［47］研究表明吳茱萸堿可促進(jìn)α-微管蛋白乙?；纬梢粋€(gè)乙?；氖鵂钗⒐懿⑴cMTOC 共定位，促進(jìn)ASC 等NLRP3 炎癥小體組分與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的NLRP3 接近，以增強(qiáng)炎癥小體的組裝和活化。由于吳茱萸堿不影響細(xì)胞內(nèi)NAD+水平，因此，吳茱萸堿可能通過對(duì)SIRT2 活性的直接抑制作用來促進(jìn)α-微管蛋白乙酰化［48］。另外，敲低αTAT1后可明顯逆轉(zhuǎn)吳茱萸堿促進(jìn)α-微管蛋白乙?；郊癗LRP3 炎癥小體活化，提示吳茱萸堿也可能直接影響αTAT1活性。

紫杉醇能夠促進(jìn)微管蛋白聚合活性，可結(jié)合于β-微管蛋白，抑制微管的解聚；埃博霉素 B的生物活性研究顯示其作用機(jī)制與紫杉醇相似，且在微管上的結(jié)合位點(diǎn)很大程度上是重疊的。研究發(fā)現(xiàn)紫杉醇和埃博霉素B這兩個(gè)微管穩(wěn)定劑與吳茱萸堿一樣誘導(dǎo)α-微管蛋白的乙?；?，促進(jìn)NLRP3炎癥小體的活化和IL-1β 釋放，以提高細(xì)菌性感染小鼠的存活率［12，49］。

4 總結(jié)與展望

炎癥小體活化需要多種組成元件形成復(fù)合體，因此，NLRP3炎癥小體需要像MTOC一樣的平臺(tái)，能更加有效地進(jìn)行組裝和活化，裝載在微管（+）末端軌道上的NLRP3 將沿著微管快速運(yùn)輸，以便其正確遞送到微管（-）末端MTOC 上。在NLRP3 激動(dòng)劑刺激下，NLRP3 在微管的運(yùn)輸過程中首先遇到線粒體，也許是為了獲得更多能量，然后進(jìn)一步運(yùn)輸至MTOC 進(jìn)行有效的裝配和活化。值得注意的是， NLRP3 一旦到達(dá)MTOC 并組裝成大的復(fù)合體時(shí)，就不再定位于線粒體，而只是圍繞著MTOC。因此，NLRP3運(yùn)輸至線粒體有可能是一種過渡狀態(tài)。

除α-微管蛋白外，細(xì)胞骨架的其他組成成分也可能參與NLRP3 炎癥小體的活化，如微絲參與線粒體的短距離運(yùn)輸。因此微絲是否也參與了炎癥小體活化過程？上文提到微絲藥物細(xì)胞松弛素只影響與細(xì)胞吞噬相關(guān)的激動(dòng)劑誘導(dǎo)的NLRP3 炎癥小體活化，且葫蘆素E雖然快速破壞微絲骨架，但不影響NLRP3炎癥小體活化，提示NLRP3炎癥小體的活化可能與微絲骨架關(guān)聯(lián)不大［8］。但也有文獻(xiàn)報(bào)道 F-肌動(dòng)蛋白可通過Flightless-Ⅰ和LRRFIP2 與活 化的NLRP3 炎癥小體相互作用，而Flightless-Ⅰ和 LRRFIP2 可抑制caspase-1 活化和IL-1β 分泌，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高可激活Flightless-Ⅰ切割F-肌動(dòng)蛋白，促進(jìn)IL-1β 分泌［50］。而β-微管蛋白的K252 位點(diǎn)在乙?；D(zhuǎn)移酶San 的作用下也可發(fā)生乙?；揎梺碚{(diào)控微管的多聚化，該特點(diǎn)是否會(huì)對(duì)線粒體的運(yùn)輸和NLRP3 炎癥小體活化有影響仍需進(jìn)一步研究［51］。

另外，雖然微管穩(wěn)定劑可誘導(dǎo)α-微管蛋白乙酰化，但是否只要促進(jìn)α-微管蛋白乙?；鸵欢艽龠M(jìn)NLRP3 炎癥小體活化？研究發(fā)現(xiàn)姜黃素雖然可與微管結(jié)合，進(jìn)一步促進(jìn)nigericin 誘導(dǎo)的胞內(nèi)NAD+濃度降低，降低SIRT2 活性來促進(jìn)nigericin 誘導(dǎo)的α-微管蛋白乙酰化，但會(huì)抑制線粒體運(yùn)輸至細(xì)胞核周邊，從而抑制NLRP3 炎癥小體的組裝與活化［52］。提示線粒體運(yùn)輸至細(xì)胞核周邊還存在其他未知途徑。另一方面，使用Tubacin 抑制HDAC6 的去乙?；富钚裕m然可以導(dǎo)致α-微管蛋白的乙?；黠@上升，但對(duì)NLRP3 炎癥小體的活化無影響，表明α-微管蛋白的乙酰化對(duì)NLRP3 炎癥小體的活化可能是充分不必要條件。

α-微管蛋白乙?；欣谡{(diào)控NLRP3 炎癥小體組分的空間分布和組裝，這種微管乙?；閷?dǎo)炎癥小體活化的機(jī)制（圖2），可能成為尋找解決人類炎癥性疾病治療方向的新線索。通過聯(lián)合使用微管抑制劑和NLRP3 炎癥小體抑制劑可針對(duì)更為廣泛的潛在靶點(diǎn)來治療相關(guān)的炎癥性疾病。

圖2 α-微管蛋白乙?；cNLRP3炎癥小體活化［8，47，49，53-54］Fig.2 α-tubulin acetylation and NLRP3 inflammasome activation［8，47，49，53-54］