不同調(diào)控措施對(duì)草莓連作大棚土壤微生物群落的影響

李榮飛，楊仕品，王愛(ài)華，馬紅葉，王天鴻，韋 茜，鐘霈霖，喬 榮

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所/貴州省園藝工程技術(shù)研究中心，貴州貴陽(yáng) 550006；2.遵義市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，貴州遵義 563000)

近年來(lái)，設(shè)施草莓栽培面積逐年增加，草莓連作障礙發(fā)生越來(lái)越嚴(yán)重?，F(xiàn)草莓連作障礙不僅在我國(guó)普遍存在，在全世界栽培草莓地區(qū)同樣廣泛存在。草莓連作障礙已成為草莓種植者及研究者廣泛關(guān)注的焦點(diǎn)，是急需解決的問(wèn)題。根據(jù)前人的研究，產(chǎn)生連作障礙的原因主要為土壤養(yǎng)分缺少或失衡[1]，土壤鹽漬化嚴(yán)重[2-3]，植物自毒物質(zhì)的分泌[4-5]，土壤微生物變化[6]等。目前，土壤微生物被認(rèn)為是連作障礙的主要影響因子[7]。土壤微生物是反映土壤肥力和生產(chǎn)力的一個(gè)重要指標(biāo)。一般情況，具有較高的細(xì)菌和放線菌數(shù)量的土壤較肥沃，而真菌數(shù)量居多的土壤較貧瘠[8]。連作后土壤微生物變化在黃瓜[9]、韭菜[10]、蘋(píng)果[11]等果蔬中均有研究。眾多研究者認(rèn)為，長(zhǎng)期連作會(huì)改變根際土壤的微生物群落結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)菌數(shù)量下降，真菌數(shù)量增多。草莓連作會(huì)使土壤微生物群落結(jié)構(gòu)失衡，影響植株生長(zhǎng)[12]。因此，研究者建議生產(chǎn)上應(yīng)盡可能采取措施避免連作，并及時(shí)對(duì)連作土壤進(jìn)行修復(fù)改良。

針對(duì)大棚草莓連作障礙，現(xiàn)在生產(chǎn)中常用的修復(fù)方法有合理輪作、土壤消毒、生防菌利用、生物炭利用等。合理輪作，不同作物間輪作、擴(kuò)大草莓種植之間的間距是克服連作障礙最常見(jiàn)的一種防范措施[13-14]，進(jìn)行大棚草莓—鮮食玉米輪作，經(jīng)濟(jì)效益顯著提高[15]。土壤消毒，使用化學(xué)藥劑消毒或者高溫(太陽(yáng)能)消毒，使用化學(xué)藥劑進(jìn)行土壤消毒是目前防治草莓連作病害的主要手段。生防菌利用，利用降解毒素微生物，如細(xì)菌菌株 B3512對(duì)羥基苯甲酸有降解作用[16]。生物炭利用，生物炭具有作為污染土壤的一種化學(xué)鈍化修復(fù)劑的物理化學(xué)性質(zhì)，通過(guò)吸附、沉淀、離子交換、絡(luò)合等系列反應(yīng)，使污染物向穩(wěn)定化形態(tài)轉(zhuǎn)化，以降低污染物的可遷移性和生物可利用性，達(dá)到污染土壤原位修復(fù)的目的[17]。且生物炭可增加土壤微生物的基礎(chǔ)呼吸作用和生物量[18]，從而增強(qiáng)了微生物對(duì)有機(jī)污染物的降解能力[19]，這可能有利于緩解連作障礙問(wèn)題。修復(fù)方法較多，但各有其優(yōu)點(diǎn)和不足，少有研究者對(duì)多種方法進(jìn)行比較、篩選。因此，本研究采用輪作、棉隆消毒、生物炭利用、休耕、淋雨等不同調(diào)控措施，通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)測(cè)定根際土壤細(xì)菌、真菌群落多樣性和組成，比較不同調(diào)控措施效果，以期為草莓連作障礙調(diào)控提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在貴州省園藝研究所草莓展示園大棚中進(jìn)行，試驗(yàn)種植草莓品種為黔莓1號(hào)，于2019年8月下旬移栽。試驗(yàn)設(shè)置了9個(gè)處理和2個(gè)對(duì)照，分別為處理1(T1)甜玉米輪作(4月下旬至8月上旬種植甜玉米)；處理2(T2)棉隆悶棚(用量為 35 g/m2，參照王廣印等的方法[20])；處理3(T3)小麥秸稈炭；處理4(T4)稻殼炭；處理5(T5)竹炭；處理6(T6)木質(zhì)炭；處理7(T7)菌渣混土(用量 0.9 kg/m2，參照聶勝委等的方法[21])；處理8(T8)未揭棚膜休耕1年；處理9(T9)揭棚膜淋雨1年；對(duì)照1(CK1)未處理，對(duì)照2(CK2)新土花盆種植。CK2為連作大棚周邊未種植過(guò)草莓的土壤，前茬種植葡萄。T3～T6處理為生物炭處理，用量為 10 kg/m2(參照房彬等的方法[22])，T3～T5處理生物炭來(lái)源于南京勤豐秸稈科技有限公司。T1～T9處理和CK1，采用隨機(jī)區(qū)組處理，每個(gè)處理3次重復(fù)(小區(qū))，每個(gè)小區(qū) 20 m。CK2設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)20盆，隨機(jī)排列。T1～T7處理、CK1、CK2于同一個(gè)大棚中，T8、T9處理于相鄰大棚，2個(gè)大棚中管理同步。各處理定植前土壤理化性狀見(jiàn)表1。

表1 不同處理定植前土壤理化性狀

1.2 樣品采集

于2020年4月中旬取根際土測(cè)微生物群落多樣性。土壤樣本采集按“S”形分別布點(diǎn)，去除表土，采集10～20 cm土層的根系，輕輕抖動(dòng)根際土壤，每個(gè)處理采5個(gè)點(diǎn)。同一處理的土壤混合均勻，按四分法處理，將約2 kg的土壤樣品盡快帶回實(shí)驗(yàn)室。將采集的土樣去掉石塊、植物根系、落葉等雜物，用滅菌的 50 mL 離心管裝好，隨即用干冰保存寄到上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司測(cè)定土壤微生物多樣性。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 DNA 抽提和PCR擴(kuò)增 根據(jù) E.Z.N.A.? soil DNA kit(Omega Bio-tek，Norcross，GA，U.S.)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行微生物群落總DNA 抽提，使用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA的提取質(zhì)量，用NanoDrop 2000測(cè)定DNA 濃度和純度。使用引物ITS-1F/ITS-2R對(duì)真菌rRNA基因ITS可變區(qū)進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增和引物16S-338F/16S-806R對(duì)16S rRNA基因V3～V4 可變區(qū)進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增。每個(gè)樣本3次重復(fù)。

1.3.2 Illumina Miseq 測(cè)序 將同一樣本的PCR產(chǎn)物混合后，使用2%瓊脂糖凝膠回收PCR產(chǎn)物，利用AxyPrep DNA Gel Extraction Kit(Axygen Biosciences，Union City，CA，USA)進(jìn)行回收產(chǎn)物純化，用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，QuantusTMFluorometer(Promega，USA)對(duì)回收產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)定量。使用NEXTFLEX? Rapid DNA-Seq Kit進(jìn)行建庫(kù)。利用Illumina公司的Miseq PE300/NovaSeq PE250平臺(tái)進(jìn)行測(cè)序(上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)分析采用上海美吉生信云分析。使用fastp(https：//github.com/OpenGene/fastp，version 0.20.0)軟件對(duì)原始測(cè)序序列進(jìn)行質(zhì)控[23]，使用FLASH(http：//www.cbcb.umd.edu/software/flash，version 1.2.7)軟件進(jìn)行拼接[24]。利用RDP classifier(http：//rdp.cme.msu.edu/，version 2.2)對(duì)每條序列進(jìn)行物種分類(lèi)注釋[25]，比對(duì)真菌ITS數(shù)據(jù)庫(kù)和16S rRNA數(shù)據(jù)庫(kù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理土壤真菌、細(xì)菌群落多樣性

2.1.1 真菌群落多樣性 土壤真菌群落通過(guò)高通量測(cè)序分析，從11個(gè)樣品中獲得了857 065個(gè)有效序列，并從序列中鑒定出676個(gè)操作分類(lèi)單元(OTU)，被鑒定為 11個(gè)門(mén)209個(gè)屬。從表2可以看出，T1、T2、T4、T8、T9處理群落豐富度高于CK1，且T4處理群落多樣性、均一性、譜系多樣性均高于CK1，但低于CK2。真菌群落豐富度指數(shù)Sobs、Chao、ACE均為T(mén)1處理最高，其次是T9處理、CK2，其后依次是T2、T4、T8處理>CK1、T3、T5>T7>T6處理。群落多樣性指數(shù)Shannon以CK2最高，其次是T4處理，T8處理最低。群落均一性Heip、Shannoneven指數(shù)均為CK2最高，且明顯高于其他處理，T4、T6、T7處理高于CK1，T8處理最低。譜系多樣性指數(shù)PD以T9處理最高，T1處理其次，CK2排名第3。表明草莓連作后土壤真菌群落多樣性降低，與對(duì)照CK1相比，不同處理后真菌群落多樣性改變，其中T4處理多樣性增加較為明顯，但仍低于未連作的CK2。

表2 不同處理土壤真菌群落多樣性指數(shù)

2.1.2 細(xì)菌群落多樣性 土壤細(xì)菌群落通過(guò)高通量測(cè)序分析，從不同處理中獲得了600 340個(gè)有效序列，并從序列中鑒定出3 829個(gè)OTU，被鑒定為38個(gè)門(mén)710個(gè)屬。由表3可知，CK2土壤細(xì)菌群落豐富度、多樣性、均一性、譜系多樣性均明顯低于其他處理，其次是T3、T7處理，之后是CK1、T2、T4處理。細(xì)菌群落豐富度指數(shù)Sobs、Chao、ACE均為CK2最低，其次是T7、T3處理，其后依次是T2、T4、CK1、T8、T6、T9處理。群落多樣性指數(shù)Shannon、Simpson為CK2最低，其次是T7、T3處理，之后為T(mén)2處理、CK1，T9處理最高。群落均一性Heip、Shannoneven和譜系多樣性指數(shù)均以CK2最低，T3、T7處理其次，之后是CK1、T2、T4處理。

表3 不同處理土壤細(xì)菌群落多樣性指數(shù)

2.2 不同處理土壤真菌、細(xì)菌群落組成差異

2.2.1 真菌群落組成差異 不同處理土壤真菌群落中子囊菌門(mén)占主導(dǎo)地位，CK1、CK2、T1～T9處理中子囊菌門(mén)相對(duì)豐度分別為96.02%、53.43%、97.66%、98.51%、97.46%、94.01%、96.89%、96.17%、96.50%、99.28%、97.24%。其次是擔(dān)子菌門(mén)、unclassified_k_Fungi、被孢霉門(mén)，CK2中占比最高，分別為20.21%、13.40%、12.84%，T7處理中擔(dān)子菌門(mén)為3.11%、T4處理中unclassified_k_Fungi為4.53%，低于CK2，但高于其他處理(圖1)。

土壤真菌群落中CK1、T1、T2、T3、T4、T5、T6處理主要真菌屬是unclassified_f_Chaetomiaceae、熱帶頭梗霉屬，但T2、T4處理中以熱帶頭梗霉屬占主導(dǎo)，其他為unclassified_f_Chaetomiaceae占主導(dǎo)(圖2)。CK2中占主導(dǎo)地位的是Apiotrichum(19.86%)、曲霉屬(15.49%)、unclassified_o_Mortierellales(11.22%)、鐮刀菌屬(10.05%)、熱帶頭梗霉屬(6.93%)。T8、T9處理是unclassified_f_Chaetomiaceae占主導(dǎo)，但T9處理真菌群落結(jié)構(gòu)不同于其他處理。CK1、CK2、T1～T9處理中unclassified_f_Chaetomiaceae占比分別為62.78%、2.46%、54.59%、21.77%、61.52%、36.25%、48.36%、55.73%、56.65%、82.51%、46.24%，被孢霉屬占比分別為0.93%、1.62%、0.55%、0.53%、0.93%、1.18%、1.28%、1.22%、0、0、3.22%。表明連作改變土壤真菌結(jié)構(gòu)，種類(lèi)減少，比例失衡，以少數(shù)菌屬為主。

根據(jù)不同處理土壤真菌OTU分布的Venn圖分析發(fā)現(xiàn)，共有OTU有33種(圖3)，CK2的特異性O(shè)TU最多，有114種，其次是T9處理，而CK1、T6、T7處理最少，僅3種獨(dú)有OTU。表明連作減少了土壤中真菌種類(lèi)和數(shù)量，不同處理方式稍有所改善。

2.2.2 細(xì)菌群落組成差異 根據(jù)圖4可知，各處理土壤細(xì)菌群落中優(yōu)勢(shì)菌門(mén)為厚壁菌門(mén)、變形菌門(mén)、放線細(xì)菌門(mén)、綠彎菌門(mén)、酸桿菌門(mén)。土壤細(xì)菌群落中厚壁菌門(mén)、變形菌門(mén)、綠彎菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、螺旋體菌門(mén)均在CK2中占比最高，分別為37.94%、24.44%、14.72%、3.25%、1.04%，但CK2中放線細(xì)菌門(mén)、酸桿菌門(mén)、芽單胞菌門(mén)、硝化螺旋菌門(mén)、浮霉菌門(mén)的相對(duì)豐度低于CK1及其他各處理。其中CK1及各處理與CK2差異較大的菌門(mén)主要是厚壁菌門(mén)、放線細(xì)菌門(mén)、酸桿菌門(mén)、芽單胞菌門(mén)、浮霉菌門(mén)。而各處理間及對(duì)照的優(yōu)勢(shì)菌門(mén)占比不一致，其中T3處理各菌門(mén)的占比規(guī)律與CK2較為相近。

根據(jù)圖5可知，各處理細(xì)菌群落主要菌屬為芽孢桿菌屬、norank_c_Acidobacteria、norank_o_JG30-KF-CM45、norank_f_Anaerolineaceae、norank_f_Gemmatimonadaceae、微小桿菌、玫瑰彎菌屬、硝化螺菌屬、鏈霉菌屬、類(lèi)芽孢桿菌屬。CK1、CK2、T1～T9處理中芽孢桿菌屬占比分別為17.88%、20.58%、11.49%、13.09%、19.83%、14.52%、15.04%、16.32%、19.42%、13.27%、8.77%。CK2根際土壤中微小桿菌屬、玫瑰彎菌屬、硝化螺菌屬、鏈霉菌屬、類(lèi)芽孢桿菌屬占比低于其他處理，分別為1.40%、1.50%、0.30%、0.79%、0.73%，但芽孢桿菌屬、鞘氨醇單胞菌屬、梭菌屬stricto 13、梭菌屬stricto 12、硫桿菌屬占比最高，分別為20.58%、1.85%、5.81%、1.18%、1.17%。連作改變了土壤細(xì)菌群落的組成比例，不同處理間細(xì)菌群落組成差異較大，其中T3、T7處理細(xì)菌群落的變化規(guī)律與CK2更接近。

據(jù)圖6可知，對(duì)照與各處理間共有的OTU 681種，其中CK2特有OTU最多，其次是T9處理。但CK2總的OTU數(shù)最少，T1處理最多。CK1細(xì)菌特有OTU共17種，CK2特有OTU主要有22種，稍較CK1多。說(shuō)明連作后土壤中細(xì)菌種類(lèi)減少，總量增加，這與細(xì)菌多樣性分析結(jié)果一致。不同處理稍有不同，其中T7處理細(xì)菌總量減少，T9處理細(xì)菌種類(lèi)增加。

2.3 不同處理土壤真菌、細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)差異

聚類(lèi)分析樹(shù)上不同分枝之間的距離反映了樣本微生物之間遺傳距離的大小。在OTU水平，采用Bray-Curtis距離算法對(duì)不同樣本真菌群落相似性分析發(fā)現(xiàn)，CK2與CK1及其他處理間相似度低，差異大，CK1與T6、T3處理相似度高，與T8、T9、T2、T4處理相似度低(圖7-A)。對(duì)不同樣本細(xì)菌群落相似性分析發(fā)現(xiàn)，CK2與CK1及其他處理間相似度低，差異大，CK1與T1處理相似度高，與T9、T3、T7處理相似度低(圖7-B)。

3 討論

連作會(huì)導(dǎo)致植物根際土壤中微生物群落結(jié)構(gòu)改變，土壤質(zhì)量降低，病害加重，嚴(yán)重影響了經(jīng)濟(jì)效益。研究發(fā)現(xiàn)，連作后土壤微生物群落的結(jié)構(gòu)及數(shù)量均會(huì)發(fā)生較大的變化[7]。隨連作年限的延長(zhǎng)，草莓根際土壤生態(tài)系統(tǒng)中，細(xì)菌和真菌群落各門(mén)類(lèi)組成的比例會(huì)發(fā)生顯著變化，根際土壤中細(xì)菌數(shù)量逐漸降低，真菌數(shù)量逐漸升高，細(xì)菌和真菌數(shù)量的比值逐漸降低，導(dǎo)致土壤微生物由“細(xì)菌型”向“真菌型”轉(zhuǎn)變[26]。在棉花[27]、太子參[28]、蘋(píng)果[29]等連作研究中也得出一致的結(jié)論。本研究中，草莓連作后改變了土壤真菌群落結(jié)構(gòu)，種類(lèi)減少，比例失衡，以少數(shù)菌屬為主；細(xì)菌群落多樣性升高，總量增加，種類(lèi)減少，比例改變。本研究與眾多研究者報(bào)道連作后細(xì)菌數(shù)量減少、真菌數(shù)量增加的規(guī)律有所差異。但在譚雪蓮等對(duì)馬鈴薯連作研究中也發(fā)現(xiàn)，連作3年和5年土壤真菌數(shù)量分別減少了25.68%和 32.43%[30]。在地黃連作研究中發(fā)現(xiàn)，隨著連作年限的增加，根際真菌減少，放線菌增多[31]。本試驗(yàn)不同處理后土壤中真菌、細(xì)菌群落稍有所改善，其中真菌以稻殼炭(T4)處理效果較為明顯，細(xì)菌以秸稈炭(T3)處理和菌渣混土(T7)處理效果較為明顯。

土壤微生物多樣性是指微生物在遺傳、種類(lèi)和生態(tài)層次上的變化，即微生物群落的穩(wěn)定性，可作為衡量土壤質(zhì)量和評(píng)價(jià)土壤生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定的重要生物學(xué)指標(biāo)[32-34]。本研究的高通量測(cè)序結(jié)果顯示，不同處理根際土壤真菌、細(xì)菌群落豐富度、多樣性、均勻度和系譜多樣性等指數(shù)差異明顯。真菌群落中T4處理群落多樣性、均一性、譜系多樣性指數(shù)均高于CK1，但低于CK2。細(xì)菌群落中CK2群落豐富度、多樣性、均一性、譜系多樣性均顯著低于其他處理，其次是T3、T7處理，之后是CK1、T2、T4處理，最高的是T9處理。說(shuō)明草莓連作后土壤真菌群落多樣性降低，與CK1相比，不同處理后真菌群落有所改善，其中稻殼炭(T4)處理效果較為明顯。由于稻殼炭結(jié)構(gòu)疏松、多孔，容重低，施用稻殼炭于土壤后，土壤表面的理化性質(zhì)會(huì)隨時(shí)間而發(fā)生變化，且使土壤微生物生物量增加[35]，故稻殼炭處理效果較好于其他處理。生產(chǎn)上可混合施用稻殼炭、秸稈炭修復(fù)草莓連作大棚土壤。

本試驗(yàn)各處理真菌群落中子囊菌門(mén)占主導(dǎo)地位，其次是擔(dān)子菌門(mén)、unclassified_k_Fungi、被孢霉門(mén)，其中CK2子囊菌門(mén)最低，其他優(yōu)勢(shì)菌門(mén)均較高于CK1、T1～T9處理。CK1、T1～T6處理主要真菌屬是unclassified_f_Chaetomiaceae、熱帶頭梗霉屬，其中T2、T4處理中熱帶頭梗霉屬占主導(dǎo)，CK2中占主導(dǎo)地位的是Apiotrichum、曲霉屬、unclassified_o_Mortierellales、鐮刀菌屬、熱帶頭梗霉屬。王曉寶等研究發(fā)現(xiàn)，被孢霉屬的相對(duì)豐度與蘋(píng)果連作障礙的嚴(yán)重程度呈顯著性負(fù)相關(guān)，對(duì)植株的生長(zhǎng)起促進(jìn)作用[11]。本研究CK2中以曲霉屬、unclassified_o_Mortierellales、鐮刀菌屬為優(yōu)勢(shì)菌屬，被孢霉屬占比最高，表明連作后土壤中有益真菌相對(duì)含量減少，將影響植株生長(zhǎng)發(fā)育。本研究對(duì)不同樣本真菌群落相似性分析發(fā)現(xiàn)，CK2與CK1及其他處理間相似度低、差異大，CK1與T6、T3處理相似度高，與T8、T9、T2、T4處理相似度低。表明連作前后真菌群落結(jié)構(gòu)差異大，修復(fù)之后各處理間差異明顯，但與未連作處理仍存在較大差異，需要進(jìn)一步修復(fù)調(diào)控。

本試驗(yàn)各處理土壤細(xì)菌群落中優(yōu)勢(shì)菌門(mén)為厚壁菌門(mén)、變形菌門(mén)、放線細(xì)菌門(mén)、綠彎菌門(mén)、酸桿菌門(mén)，主要菌屬為芽孢桿菌、微小桿菌、玫瑰彎菌屬、硝化螺菌屬、鏈霉菌屬、類(lèi)芽孢桿菌屬等。CK1及各處理與CK2差異較大的菌門(mén)主要是厚壁菌門(mén)、放線細(xì)菌門(mén)、酸桿菌門(mén)、芽單胞菌門(mén)、浮霉菌門(mén)。厚壁菌門(mén)中芽孢桿菌和梭狀芽孢桿菌在碳水化合物代謝中起著重要作用[36]。擬桿菌門(mén)細(xì)菌與有機(jī)物的吸收、利用關(guān)系密切，能夠降解聚合物，是環(huán)境中碳循環(huán)的重要參與者[37]。變形菌、浮霉菌、放線菌等被認(rèn)為是富營(yíng)養(yǎng)菌[38]。綠彎菌門(mén)細(xì)菌傾向于生活在營(yíng)養(yǎng)充足的環(huán)境中，大量的營(yíng)養(yǎng)元素有利于其生長(zhǎng)繁殖[39]。酸桿菌門(mén)細(xì)菌適合在有機(jī)碳含量低的酸性土壤中生存[40]。本研究中未連作的CK2中厚壁菌門(mén)、綠彎菌門(mén)、擬桿菌門(mén)占比高，而放線菌門(mén)、酸桿菌門(mén)和浮霉菌門(mén)占比少，說(shuō)明連作之后土壤細(xì)菌群落改變，分解型細(xì)菌減少，富營(yíng)養(yǎng)型細(xì)菌增加，連作土壤肥力營(yíng)養(yǎng)充足，土壤酸性降低。芽孢桿菌屬的很多菌都是有利于植物生長(zhǎng)發(fā)育的促生菌，如枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、短小芽孢桿菌等[41]，本研究中未連作的CK2中芽孢桿菌屬相對(duì)含量最高，其次是T3、T7處理，說(shuō)明連作之后土壤中有益細(xì)菌含量減少。大棚草莓連作后改變了土壤細(xì)菌群落的組成比例，不同調(diào)控處理后土壤中細(xì)菌群落組成差異較大，其中秸稈炭(T3)處理和菌渣混土(T7)處理變化規(guī)律與CK2更接近，這與不同樣本細(xì)菌群落相似性分析結(jié)果相吻合。

4 結(jié)論

(1)真菌群落中稻殼炭處理群落多樣性、均一性、譜系多樣性指數(shù)均高于CK1，但低于CK2。與對(duì)照CK1相比，不同處理后真菌群落有所改善，其中稻殼炭(T4)處理效果較為明顯。(2)細(xì)菌群落中CK2群落豐富度、多樣性、均一性、譜系多樣性均明顯低于其他處理，其次是T3、T7處理，其中秸稈炭(T3)處理優(yōu)勢(shì)菌門(mén)占比規(guī)律與CK2較為相似。(3)真菌群落CK1與T6、T3處理相似度高，與T8、T9、T2、T4處理相似度低。細(xì)菌群落CK1與T1處理相似度高，與T9、T3、T7處理相似度低。不同處理對(duì)草莓連作大棚土壤真菌、細(xì)菌群落稍有所改善，其中真菌以施稻殼炭效果較為明顯，細(xì)菌以施秸稈炭和菌渣混土效果較為明顯，生產(chǎn)上可混合施用稻殼炭、秸稈炭修復(fù)草莓連作大棚土壤。