郭 慶,呂繼明,孟祥俊
1 安徽科寶生物工程有限公司,安徽淮北 235000 2 安徽曦強乳業(yè)集團有限公司,安徽淮北 235000 3 淮北市曦強生態(tài)奶牛養(yǎng)殖有限公司,安徽淮北 235000
奶牛子宮內(nèi)膜炎指奶牛生產(chǎn)后,子宮產(chǎn)道未完全修復,自身抵抗力差,使病原體進入子宮內(nèi)繁殖,引起子宮內(nèi)膜淺表的炎癥,是影響奶業(yè)發(fā)展和經(jīng)濟效益的重要疾病之一。該病目前主要用抗生素全身性的治療和針對子宮局部的治療。但抗生素濫用常使奶牛機體產(chǎn)生抗藥性以及乳制品殘留,給奶牛場帶來巨大經(jīng)濟損失[1]。用中藥治療子宮內(nèi)膜炎的研究報道越來越多,己有中草藥栓劑、乳劑、灌注劑等,對子宮內(nèi)膜炎的防治方面發(fā)揮了重要作用[2~4]。目前,亦有微生態(tài)制劑治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的報道,單純用益生菌制成微生態(tài)制劑及將中藥與益生菌合在一起進行炮制[5,6],但未有將中藥有效成分提取與益生菌一起進行發(fā)酵的報道。本試驗將中藥微生態(tài)制劑飼喂患有子宮內(nèi)膜炎奶牛,探索其對奶牛子宮內(nèi)膜炎療效、血液生化指標以及鈣磷的影響,為中藥微生態(tài)制劑在奶牛子宮內(nèi)膜炎上的合理應用提供依據(jù)。
1.1.1 中藥與菌株
紅花、益母草、桃仁,市養(yǎng)生堂大藥房;紅茶菌,獻華生物科技有限公司。
1.1.2 主要試劑
葡糖糖(食品級),濟南遠聯(lián)化工有限公司;乙醇(食品級),安徽安特食品股份有限公司;一次性真空采血管,深圳市益希醫(yī)療器械有限公司。
1.1.3 主要儀器
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(型號:R-1005)、恒溫磁力攪拌器(型號:SZC-2),鄭州長城科工貿(mào)有限公司;超聲波清洗器(型號:DL-360B),上海之信儀器有限公司;邁瑞半自動生化分析儀(型號:BA-90),咸陽銘海醫(yī)療器械有限公司;便攜式陰道鏡(型號:YKD-3004),徐州益柯達電子科技有限公司;臺式高速冷凍離心機(型號:TGL-16M),鹽城市凱特試驗儀器有限公司;醫(yī)用冷藏箱(型號:YC-300L),中科美菱低溫科技有限公司。
1.2.1 中藥微生態(tài)制劑的制備
中藥微生態(tài)制劑參照《一種防治奶牛子宮內(nèi)膜炎中藥微生態(tài)制劑的制備方法》[7]制備。
1.2.2 血液的采集與血清的制備
試驗前第0天和第7天進行血液的采集,每頭牛在早晨飼喂前于頸靜脈采集新鮮血樣,均采集血樣20 mL,置于取樣袋內(nèi),然后在4 ℃條件下3 000 r/mim離心15 min,吸出血清-20 ℃保存待測,將余下血液進行血常規(guī)檢測。
1.2.3 測定指標
用全自動血液分析儀進行血液和血清的檢測。
1.2.4 試驗設計
選取某奶牛場的患有子宮內(nèi)膜炎奶牛20 頭,隨機分成2組,中藥微生態(tài)制劑治療組(Ⅰ)15 頭和陽性對照組(Ⅱ)5 頭,另選選取胎次、年齡、泌乳月相近、身體狀況良好的陰性奶牛10 頭為陰性對照組(Ⅲ)。治療組將中藥微生態(tài)制劑10 L讓奶牛自由飲用,連續(xù)用藥7 d。
中藥治療效果評價。治愈:末次治療7 d后,不再有排出物(或發(fā)情時排出正常透明分泌物),直腸檢查子宮恢復正常,細菌檢驗一般子宮內(nèi)無病原菌。好轉(zhuǎn):排出物由膿性變?yōu)闇啙岚胪该?、分泌物量較少,子宮基本恢復正常。無效:治療前后子宮炎癥無變化。同時比較用藥第0天和用藥后第7天的各組血常規(guī)的變化。
1.2.5 統(tǒng)計分析
試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0分析軟件進行統(tǒng)計分析。
由表1可以看出,患有子宮內(nèi)膜炎奶牛通過7 d中藥微生態(tài)劑治療治愈率達86.66%,有效率為93.33%。
表1 中藥微生態(tài)劑治療奶牛子宮內(nèi)膜炎療效及治愈率
由表2可見,治療前,患病牛中血常規(guī)指標與陰性對照奶牛均差異極顯著(P<0.01)。用藥7 d后,中藥微生態(tài)制劑治療組血常規(guī)各項指標恢復正常,與陰性對照組差異不顯著(P>0.05)。
表2 中藥微生態(tài)制劑對奶牛子宮內(nèi)膜炎血常規(guī)指標的影響
由表3可知,患牛血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和乳酸脫氫酶(LDH)第0天與陰性對照組相比差異極顯著,(P<0.01)血清鈣和磷與陰性對照組相比差異顯著(P<0.05)經(jīng)治療7 d后,患牛血液中ALT、AST、LDH、血清鈣及血清磷與陰性對照組差異不顯著(P>0.05)。
表3 中藥微生態(tài)制劑對奶牛子宮內(nèi)膜炎血清指標的影響
中藥微生態(tài)制劑配方中,金銀花、白頭翁、紫錐菊等均有清熱解毒、抗炎的功效;益母草、紅花、桃仁等具有活血化瘀、破堅散結(jié)的功能;絞股藍、黃芪、甘草能增強機體免疫力[8];紅茶菌是良好的免疫激活劑,可以激活淋巴細胞活性,提高機體免疫功能,提高動物的抗病力和抗應激能力,有效預防金黃色葡萄球菌等有害菌的感染,降低奶牛子宮內(nèi)膜炎發(fā)病率[9]。將中藥提取有效成分和益生菌進行發(fā)酵制成微生態(tài)制劑,能夠起到協(xié)同作用。本試驗結(jié)果表明,中藥微生態(tài)制劑對奶牛隱性乳房炎有較好的治療效果,治愈率達86.66%、有效率達93.33%,為臨床應用提供了試驗數(shù)據(jù),但具體作用機制有待進一步探討。
白細胞數(shù)的增加,常為細菌感染所致[10]。病毒性疾病在臨床上多表現(xiàn)出白細胞總數(shù)降低,淋巴細胞數(shù)量和比例上升[11]。本試驗檢測20 頭患子宮內(nèi)膜炎奶牛的血液,同時檢測10 頭陰性奶牛血液做對比。通過對比發(fā)現(xiàn),患牛白細胞數(shù)、中性粒細胞數(shù)極顯著增加(P<0.01),淋巴細胞絕數(shù)沒有顯著增加(P>0.05),血常規(guī)檢測結(jié)果表明,本次患牛子宮內(nèi)膜炎由細菌感染引起的。經(jīng)過7 d中藥微生態(tài)制劑治療后,血常規(guī)各項指標與陰性對照組相比差異不顯著。
血清中AST、ALT、LDH等的水平已被臨床作為評估肝功能損傷程度的指標應用,ALT只存在于肝細胞胞質(zhì)內(nèi),具有較高的特異性,如果肝細胞出現(xiàn)1%的損傷,血液中ALT水平就會升高1 倍,因此,ALT被認為是檢測肝功能損害的最敏感指標[12]。本研究發(fā)現(xiàn)引起患牛的細菌,隨著病情的延長,也會引起肝細胞不同程度地損傷,經(jīng)過中藥微生態(tài)制劑治療后能夠使損傷的肝細胞恢復。
鈣、磷是動物體內(nèi)含量最多的元素,在動物體內(nèi)代謝中起著重要作用,血液中的鈣大部分存在于血清中,幾乎所有奶牛產(chǎn)犢后血鈣的濃度都會下降[13],不同泌乳階段鈣含量不同,但泌乳前期鈣含量降至正常范圍內(nèi)最低值,與本研究的陰性對照組檢測結(jié)果相近[14]。試驗組的血清鈣、磷的含量低于正常值的最低值,且鈣磷比值也發(fā)生變化。經(jīng)過中藥微生態(tài)治療后,奶牛鈣、磷水平升高,這可能是由于中藥微生態(tài)制劑能夠調(diào)節(jié)鈣、磷代謝。
中藥微生態(tài)制劑經(jīng)過7 d治療,對奶牛子宮內(nèi)膜炎有良好的治療效果,其主要是能夠使血液中炎性細胞的數(shù)量降低,肝功能指標降至正常。