• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      叉頭框蛋白C2、淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體-1的表達與皮膚鱗狀細(xì)胞癌生物學(xué)特性的相關(guān)性

      2023-03-14 00:49:40孫秋悅曹宸楊細(xì)虎嚴(yán)志新
      安徽醫(yī)藥 2023年3期
      關(guān)鍵詞:淋巴管組織化學(xué)內(nèi)皮細(xì)胞

      孫秋悅, 曹宸, 楊細(xì)虎, 嚴(yán)志新

      皮膚鱗狀細(xì)胞癌(CSCC)是起源于表皮或附屬器角質(zhì)形成細(xì)胞的一類惡性腫瘤, CSCC的發(fā)病率在皮膚非黑色素惡性腫瘤中僅次于基底細(xì)胞癌, 約占所有皮膚癌的20%, 也是非黑色素皮膚腫瘤致死的首要原因[1-4]?,F(xiàn)據(jù)統(tǒng)計, 有5%的CSCC可發(fā)生轉(zhuǎn)移[5]。CSCC在發(fā)生、發(fā)展的過程中涉及眾多的基因。叉頭框蛋白C2(FoxC2)是淋巴管發(fā)育的重要蛋白, 在許多惡性腫瘤中均有表達, 但在CSCC中鮮有研究。淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體-1(LYVE-1)是淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物, 有研究發(fā)現(xiàn)LYVE-1的表達與口腔鱗狀細(xì)胞癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[6-8]。但在CSCC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的作用還沒有相關(guān)報道, 因此本實驗探討了FoxC2、LYVE-1在CSCC發(fā)生、發(fā)展、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中可能的作用。本實驗采用免疫組織化學(xué)S-P法, 應(yīng)用抗FoxC2單抗對人CSCC中FoxC2抗原進行標(biāo)記;應(yīng)用抗LYVE-1單抗對淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞進行標(biāo)記, LYVE-1表達水平用微淋巴管密度(MLVD)表示。半定量分析FoxC2表達情況, 定量分析腫瘤內(nèi)MLVD, 探討二者與CSCC生物學(xué)特性的關(guān)系。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料選擇2013年10月至2021年1月在江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院收治的44例原發(fā)性CSCC病人。篩選條件:①病人行原發(fā)性CSCC腫塊切除手術(shù), ②腫瘤原發(fā)灶蠟塊保存完整, ③臨床病理及病例資料完整。44例病人年齡范圍為37~97歲。選取2例正常皮膚組織作為對照。本研究病人及近親屬對研究方案簽署知情同意書, 符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

      1.2 免疫組織化學(xué)試劑兔抗人FoxC2單抗(即用型)、兔抗人LYVE-1單抗(即用型)均來自Abcam;羊抗鼠/兔IgG聚合物(即用型)來自合肥泉暉醫(yī)療器械有限公司, 貨號RQT100;DAB顯色液由該院病理科提供。

      1.3 染色方法采用免疫組織化學(xué)染色檢測全部標(biāo)本中FoxC2、LYVE-1水平, 操作如下:組織切片常規(guī)脫蠟至水, 在4%福爾馬林溶液室溫條件下固定24 h, 采用高溫高壓組織抗原修復(fù), 抗原修復(fù)液采用濃度0.1 mol/L的乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)(pH 8.0), 修復(fù)條件為溫度121 ℃、修復(fù)時間為噴氣計時2.5 min, 滅活劑采用3%過氧化氫一抗稀釋液采用磷酸緩沖鹽溶液, FoxC2與LYVE-1的稀釋比例分別為1∶200、1∶10 000, 孵育溫度4 ℃, 過夜。二抗羊抗鼠/兔IgG聚合物(即用型), 在室溫下孵育20 min, 顯色液采用DAB, 顯色時間5 min。蘇木精復(fù)染30 s, 脫水, 中性樹脂封片。

      1.4 免疫組織化學(xué)結(jié)果判定觀察FoxC2、LYVE-1在CSCC組織中的表達情況及與病理參數(shù)(年齡、性別、腫瘤長徑、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)的關(guān)系。LYVE-1采用MLVD表示, MLVD計數(shù)方式為[9]:一個淋巴管為棕黃色染色的單個內(nèi)皮細(xì)胞或細(xì)胞簇, 先在低倍鏡(40倍鏡)下觀察, 再選擇高密度區(qū)在高倍鏡下(200倍鏡)隨機選擇5個視野內(nèi)淋巴管進行計數(shù), 記錄平均值。FoxC2為細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)染色, 主要為細(xì)胞核染色。以同一顯微鏡倍數(shù)(×40)觀察全片, 確定腫瘤浸潤邊緣, 然后選擇5個高倍(×400)視野, 取所分析的5個不同視野染色細(xì)胞所占百分比及染色強度進行綜合評分, 染色強度判分標(biāo)準(zhǔn):細(xì)胞未著色為0分(-)、淺黃色為1分(+)、棕黃色為2分(++)、棕褐色為3分(+++)。陽性細(xì)胞所占百分比判分標(biāo)準(zhǔn)[10]:陽性細(xì)胞<1%為0分;1%~10%為1分、>10%~30%為2分;>30%~60%為3分;>60%為4分。以染色強度與陽性細(xì)胞百分比評分之和作為染色結(jié)果的判定, 陰性或低表達:0~3分;高表達:≥4分。0~3分為低表達組, ≥4分為高表達組。

      1.5 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。FoxC2的表達高低與病人臨床病理特征的關(guān)系采用χ2檢驗。LYVE-1的表達情況用MLVD表示, MLVD值與病人臨床病理特征的關(guān)系, 兩組樣本間比較符合正態(tài)分布且方差齊者采用兩獨立樣本t檢驗, 反之則采用秩和檢驗。三組樣本間比較先進行方差齊性檢驗, 方差齊且符合正態(tài)分布采用單因素方差分析, 反之則采用Kruskal-WallisH檢驗。FoxC2和LYVE-1的表達的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析。檢驗標(biāo)準(zhǔn)α=0.05。

      2 結(jié)果

      2.1 FoxC2表達和MLVD值與CSCC臨床病理特征的關(guān)系2例正常皮膚組織中FoxC2表達陰性。44例CSCC中, FoxC2高表達率為52%(23/44), 有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組其高表達率為(88.88%), 明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(42.85%)(P=0.036);中低分化組FoxC2高表達率為(88.88%), 明顯高于高分化組(26.92%)(P<0.001);不同年齡、性別、腫瘤長徑的CSCC組織中FoxC2表達水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

      CSCC標(biāo)本經(jīng)免疫組織化學(xué)LYVE-1抗體染色后, 其淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表現(xiàn)為棕黃色, 44例CSCC的MLVD為(9.62±5.07)個, 不同年齡、性別、腫瘤長徑的CSCC組織中MLVD值差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05), CSCC有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、中低分化組的MLVD值分別高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、高分化組(P<0.05)。具體情況見表1。

      表1 原發(fā)性皮膚鱗狀細(xì)胞癌44例癌組織中叉頭框蛋白C2(FoxC2)表達和微淋巴管密度(MLVD)與其臨床病理特征的關(guān)系

      2.2 FoxC2表達水平與MLVD的相關(guān)性44例CSCC組織中, FoxC2高表達組MLVD為(12.24±4.86)個, 低表達組MLVD為(6.75±3.56)個, Pearson相關(guān)分析顯示, FoxC2表達情況與MLVD值呈正相關(guān)(r=0.55,P<0.001), 即FoxC2高表達組的MLVD值高于FoxC2低表達組的MLVD值。

      3 討論

      CSCC臨床上的治療手段主要以手術(shù)切除治療為主, 我國仍然以傳統(tǒng)腫塊局部切除手術(shù)為主, 國外最常用的手術(shù)治療為莫式顯微描記手術(shù), 此技術(shù)不僅僅可以切除皮膚腫塊, 在充分考慮浸潤深度的前提下, 可以將局部復(fù)發(fā)率降到最低, 但在我國還沒有達到普及[11-12]。目前納米光療已經(jīng)是治療皮膚腫瘤的一種全新的技術(shù), 但治療效果仍然非常受限[13], 我國CSCC病人術(shù)后復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移風(fēng)險依然很高, 一旦發(fā)生轉(zhuǎn)移將會導(dǎo)致較差的預(yù)后。

      FoxC2是調(diào)節(jié)血管及淋巴管發(fā)育的重要蛋白, 目前有17個Fox基因亞家族, 控制著一系列生物過程, 包括細(xì)胞生長、增殖、分化, 其突變與淋巴水腫密切相關(guān), 同時也是腫瘤轉(zhuǎn)移所必需的上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化過程的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子[14]。本研究結(jié)果顯示, FoxC2在CSCC中低分化組、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中高表達, 提示FoxC2可能參與CSCC發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移, 且FoxC2高表達組的MLVD值明顯高于低表達組, 提示FoxC2促進腫瘤淋巴管新生, 與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。FoxC2參與腫瘤淋巴管新生的原因可能有:①磷酸化的FoxC2和果蠅同源框蛋白1(Prox1)控制下游的連接蛋白37的表達[15], 從而阻礙淋巴管瓣膜的形成。FoxC2和連接蛋白37的缺失會導(dǎo)致淋巴管生長和重塑發(fā)生嚴(yán)重缺陷[16]。②淋巴管成熟需要流體剪切應(yīng)力, 而FoxC2可以通過調(diào)節(jié)流體剪切應(yīng)力來穩(wěn)定新生的淋巴管系統(tǒng), 幫助其存活[17]。因此FoxC2在淋巴系統(tǒng)中起到至關(guān)重要的作用。已有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)FoxC2在食管癌病人中高度表達, 其表達程度與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)[18], 本研究結(jié)果與其相似。因此, 靶向阻斷FoxC2的表達可能會在治療CSCC及腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移有著廣闊的前景。

      LYVE-1是淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物, 用于區(qū)分淋巴管與血管, 對淋巴管有高度特異性, 在淋巴管新生中發(fā)揮重要的作用[19]。本研究結(jié)果顯示, CSCC有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、中低分化組的MLVD值分別高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、高分化組, FoxC2高表達組MLVD值大于FoxC2低表達組, 提示LYVE-1的表達水平與CSCC的發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。因此, 靶向阻斷LYVE-1的表達可能會為治療CSCC提供新的方向。

      猜你喜歡
      淋巴管組織化學(xué)內(nèi)皮細(xì)胞
      淺議角膜內(nèi)皮細(xì)胞檢查
      肺淋巴管肌瘤病肺內(nèi)及肺外CT表現(xiàn)
      胸內(nèi)淋巴管瘤診治進展
      食管鱗狀細(xì)胞癌中FOXC2、E-cadherin和vimentin的免疫組織化學(xué)表達及其與血管生成擬態(tài)的關(guān)系
      雌激素治療保護去卵巢對血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的初步機制
      大口黑鱸鰓黏液細(xì)胞的組織化學(xué)特征及5-HT免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞的分布
      細(xì)胞微泡miRNA對內(nèi)皮細(xì)胞的調(diào)控
      免疫組織化學(xué)和免疫熒光染色在腎活檢組織石蠟切片磷脂酶A2受體檢測中的應(yīng)用
      聚桂醇治療左腋下巨大淋巴管瘤1例
      痰瘀與血管內(nèi)皮細(xì)胞的關(guān)系研究
      江北区| 蒙城县| 兴化市| 安阳县| 阿拉尔市| 小金县| 湘潭市| 邢台市| 雷山县| 蓬莱市| 宁城县| 芜湖县| 盖州市| 洮南市| 阿克苏市| 托克逊县| 安吉县| 蒲城县| 云安县| 皋兰县| 阳山县| 原阳县| 嵩明县| 万载县| 兴安盟| 临澧县| 桃园市| 垦利县| 惠安县| 香港 | 隆昌县| 麻江县| 绿春县| 红河县| 犍为县| 光泽县| 榕江县| 夏邑县| 和顺县| 永丰县| 新巴尔虎左旗|