紫荊花總黃酮的提取及在牙膏中的應(yīng)用

李江平 黃曉燕 王小敏 許 遜

(柳州兩面針股份有限公司技術(shù)中心,廣西 柳州 545001)

據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國人群口腔患病率達(dá) 80% 以上，并已威脅到各個年齡段的人群，口腔護(hù)理迫在眉睫。常見的口腔問題包括齲病、牙周炎等。有關(guān)研究顯示，口腔菌屬的分類也較細(xì)，以厭氧菌為多。其中，齲病的主要致病菌為變形鏈球菌，是造成齲齒的主要原因；牙周炎的主要致病菌為牙齦卟啉單胞菌，其可能作為內(nèi)源性致病菌在特定條件下過度生長而導(dǎo)致牙周破壞，同時也是口臭主要致病厭氧菌，甚至是成人失牙的主要原因。選擇合適的口腔抑菌護(hù)理產(chǎn)品,可以有效地控制口腔有害細(xì)菌增長，使我們在日常生活中輕松地預(yù)防口腔疾病的發(fā)生。

近年來，以作用溫和且具有一定功效的中草藥提取物作功效添加劑應(yīng)用于日用品中已經(jīng)成為新產(chǎn)品開發(fā)熱點(diǎn)。現(xiàn)代藥理學(xué)表明：黃酮類化合物具有抗菌消炎、抗氧化美白等多種功效 。

紫荊花，系豆科紫荊屬植物，全國大部分地區(qū)均有分布，其中華南地區(qū)分布最廣。據(jù)《中藥大辭典》記載，紫荊花具有清熱涼血、去風(fēng)解毒的等功效。研究發(fā)現(xiàn)，紫荊花中含有大量的總黃酮，總黃酮是指黃酮類化合物，是以α-苯基苯并吡喃酮為主體的一系列物質(zhì)的總稱，主要類型有黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、雙黃酮和異黃酮。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 黃酮類有機(jī)物的提取

1.1.1 紫荊花總黃酮提取物

采用乙醇回流提取技術(shù)，稱取紫荊花花粉 100g，搗碎研磨后，加入75%食用乙醇2000mL, 70℃回流2h,過濾，濾渣中再加1000 mL 75%乙醇70℃回流2h，合并濾液，抽濾。濾液減壓濃縮得浸膏，真空干燥。

表1 紫荊花的提取率

1.1.2 紫荊花黃酮類化合物含量的測定

1.1.2.1 黃酮類化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精確稱取干燥至恒重的蘆丁對照品5.0mg于25mL容量瓶中，用70%乙醇溶解、定容。分別稱取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL標(biāo)準(zhǔn)品溶液于25mL容量瓶中，加入5%亞硝酸鈉溶液1mL，混勻，放置6min，加入10%硝酸鋁溶液1mL，搖勻，放置6min，加入10%氫氧化鈉溶液10mL，加水至刻度，搖勻，放置156min。用分光光度法，在510nm波長測定吸光度。

表2 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液含量與吸光度的關(guān)系

1.1.2.2 紫荊花黃銅含量測定

精確稱取紫荊花浸膏粉末用70%乙醇溶解并定容至25mL。吸取取樣品液3.00mL，置于25mL容量瓶中，加入5%亞硝酸鈉溶液1mL，混勻，放置6min，加入10%硝酸鋁溶液1mL，搖勻，放置6min，加入10%氫氧化鈉溶液10mL，加水至刻度，搖勻，放置156min。用分光光度法，在510nm波長測定吸光度。

表3 紫荊花提取物總黃酮含量和紫荊花總黃酮得率

1.2 紫荊花總黃酮提取物抑菌試驗(yàn)

采用最小抑菌濃度(MIC)試驗(yàn)方法，用無菌蒸餾水將紫荊花總黃酮提取物按成倍稀釋成不同的質(zhì)量濃度下對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、牙齦卟啉單胞菌和變形鏈球菌的抑制情況如表4，從而確定紫荊花提取物的最小抑菌濃度(MIC)。

表4 不同濃度紫荊花提取物對大腸桿菌、 金黃色葡萄球菌、牙齦卟啉單胞菌、變形鏈球菌的MIC值

由表4可知，紫荊花總黃酮提取物對供試菌大腸桿菌的抑菌MIC值為0.391%，紫荊花總黃酮提取物對供試菌金黃色葡萄球菌的抑菌MIC值為0.391%，紫荊花總黃酮提取物對供試菌牙齦卟啉單胞菌的抑菌MIC值為0.782%，紫荊花總黃酮提取物對供試菌變形鏈球菌的抑菌MIC值為0.782%。

1.3 青紫荊花總黃酮提取物牙膏的配伍研究

采用二氧化硅牙膏基質(zhì)配方表5，將紫荊花總黃酮提取物添加到牙膏配方基質(zhì)進(jìn)行配伍性研究與測試，保證含紫荊花總黃酮提取物牙膏的穩(wěn)定性。

表5 青蒿提取物牙膏配方

牙膏穩(wěn)定性測試：測試依據(jù)為GB/T 8372。取樣3支牙膏，放3支到-8℃冰箱中 8 小時，取出牙膏后放入 45℃恒溫培養(yǎng)箱8小時，再取出試樣牙膏放在常溫處，穩(wěn)定性無異常。

1.4 紫荊花總黃酮提取物牙膏的抑菌效果

按照《消毒技術(shù)規(guī)范(2002 版)》2.1.11.3.2溶出性抗(抑)菌產(chǎn)品抑菌性能測試方法中規(guī)定的檢測方法。樣品作用濃度1∶1，作用時間5min，試驗(yàn)菌種為金黃色葡萄球菌 (ATCC 6538)和大腸桿菌 (ATCC 25922)、牙齦卟啉單胞菌(ATCC 33277)、變形鏈球菌(ATCC 25175)標(biāo)準(zhǔn)菌種，試驗(yàn)重復(fù)3次；抑菌率≥50%時，產(chǎn)品為有效抑菌，抑菌率≥90%時，產(chǎn)品有較強(qiáng)抑菌作用。

表6 青蒿提取物牙膏抑菌效果的檢測結(jié)果

1.5 紫荊花總黃酮提取物牙膏的止血效果

紫荊花總黃酮提取物牙膏止血作用藥理實(shí)驗(yàn)，采用兔肝臟局部創(chuàng)面損傷出血模型，在出血創(chuàng)面局部敷涂樣品后，觀察記錄止血時間，計(jì)算止血效果分值F。

表7 受試樣品對兔肝臟局部創(chuàng)面 損傷出血的止血效果

口腔中的炎癥主要有牙齦炎、牙周炎等，其表現(xiàn)為牙齒腫脹、出血、疼痛等癥狀。止血藥理試驗(yàn)結(jié)果顯示：含紫荊花總黃酮提取物牙膏對樣品能兔肝臟局部創(chuàng)面損傷出血有明顯止血作用。

3 結(jié)論

現(xiàn)代藥理學(xué)表明，黃酮類化合物具有抗菌消炎、抗氧化美白等多種功效。本研究對紫荊花總黃酮提取物的最小抑菌濃度(MIC)值進(jìn)行測試，其對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、牙齦卟啉單胞菌和變形鏈球菌的具有較強(qiáng)抑制作用；對紫荊花總黃酮提取物與牙膏基質(zhì)復(fù)配后有效含量值的牙膏抑菌效果進(jìn)行檢測，紫荊花總黃酮提取物牙膏對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、牙齦卟啉單胞菌、變形鏈球菌均具有一定的抑菌性能；對紫荊花總黃酮提取物牙膏進(jìn)行動物止血藥理試驗(yàn)，具有較好的止血效果。中草藥因“純天然”的特點(diǎn)受到現(xiàn)代人的認(rèn)同，以其為原料生產(chǎn)的日化產(chǎn)品、保健品等均受到廣大消費(fèi)者的熱捧。開發(fā)中藥抑菌成分，并在發(fā)揮抑制口腔有害菌的同時，減少耐藥性的產(chǎn)生，能降低化學(xué)劑用量及刺激性，達(dá)到保障口腔清潔衛(wèi)生健康、維護(hù)口腔微生態(tài)平衡的目的，符合并滿足消費(fèi)者需求。將中草藥抑菌成分應(yīng)用于產(chǎn)品中，該技術(shù)的市場應(yīng)用前景廣闊，必將受到廣大消費(fèi)者青睞。