尿石通消糖漿標(biāo)準(zhǔn)提高

李 旎 陳撫州

（南昌結(jié)石病?？漆t(yī)院藥劑科，江西 南昌 330001）

醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥制劑是指醫(yī)療機(jī)構(gòu)根據(jù)本單位臨床需要經(jīng)批準(zhǔn)而配制、自用的固定處方制劑，其特點為組方合理，有較長的臨床應(yīng)用歷史，療效和安全性均有可靠保證[1]?；陂L期臨床經(jīng)驗積累而產(chǎn)生的醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑，承擔(dān)著填補(bǔ)上市藥品臨床用藥空缺的重要角色[2]。加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥制劑質(zhì)量管理，為醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑臨床療效、風(fēng)險評估、制劑安全使用等研究提供有效的技術(shù)支撐[3]。

尿石通消糖漿為純中藥制劑，是由石韋、黃芩等藥材和輔料制成的糖漿劑，屬于醫(yī)院制劑（贛藥制字Z20090048）。具清熱利尿、排石消石的功效，用于泌尿系統(tǒng)結(jié)石，制劑質(zhì)量安全穩(wěn)定，療效確切。原標(biāo)準(zhǔn)以黃芩中黃芩苷的薄層鑒別及制劑通則中糖漿劑的要求為主，為加強(qiáng)該制劑的質(zhì)量控制，更好地保證臨床用藥療效，現(xiàn)增加石韋的薄層色譜鑒別，以及對制劑中黃芩苷含量測定。

1 材料

1.1 儀器與試藥LC-20AT 液相色譜儀（日本島津）；ODS-3 C18色譜柱（日本島津，5 μ m，4.6 mm×250 mm）；JK-300 超聲波清洗器（合肥金尼克機(jī)械制造有限公司）；BT125D 分析天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]；ZF-2 三用紫外儀（上海市安亭電子儀器廠）；聚酰胺薄膜（浙江臺州路橋四甲生化塑料廠，10 cm×30 cm）。

1.2 試劑與藥品綠原酸對照品（批號：110753-201314）、黃芩苷對照品（批號：110715-201318）均購于中國食品藥品檢定研究院；甲醇（安徽天地高純?nèi)軇┯邢薰?，批號?0115029）為色譜純；水為自制純化水；甲醇（西隴化工股份有限公司，批號：160510）、乙醇（西隴化工股份有限公司，批號：160402）、乙酸（西隴化工股份有限公司，批號：160101）、磷酸（西隴化工股份有限公司，批號：160203）等均為分析純；尿石通消糖漿（批號：151021、151022、160328、160329、160330)為南昌結(jié)石病?？漆t(yī)院制劑室生產(chǎn)（規(guī)格：每瓶200 mL）。

2 方法與結(jié)果

2.1 石韋的薄層色譜鑒別取本品20 mL，加20 mL 70%甲醇超聲30 min，濾過，濾液作為供試品溶液。取不含石韋藥材的陰性樣品，同法制備陰性對照溶液。另取綠原酸對照品，加甲醇制成每1 mL 含1 mg的溶液，作為對照品溶液。分別吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液3～5 μ L，點于同一聚酰胺薄膜上成條狀，以30%乙酸為展開劑，展開，取出后晾干，置紫外線燈（365 nm）下檢視。色譜中可見綠原酸熒光斑點，斑點清晰無粘連，且無干擾。見圖1。

圖1 石韋薄層色譜圖

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件島津ODS-3 C18（5 μ m 4.6×250 mm）色譜柱；流動相為甲醇-0.4%磷酸（47∶53）；檢測波為280 nm；流速為1.0 mL/min；柱溫40 ℃。黃芩苷峰理論板數(shù)不低于3000。

2.2.2 溶液的制備精密量取樣品2 mL，置100 mL 容量瓶中，加入50%乙醇適量，超聲5 min，再加50%乙醇定容，搖勻，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按尿石通消糖漿處方和工藝，制得不含黃芩藥材的陰性樣品，按供試品溶液方法制備陰性對照溶液。稱取黃芩苷對照品適量，加甲醇制成1 mL 含0.1 mg 的對照品溶液。

2.2.3 專屬性試驗在2.2.1 色譜條件下，分別記錄對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液色譜圖。結(jié)果顯示專屬性良好。見圖2。

圖2 黃芩苷HPLC 色譜圖

2.2.4 線性關(guān)系試驗取對照品儲備液（194.6 μ g/mL），以甲醇稀釋，制得對照品溶液：194.6 μ g/mL，97.3 μ g/mL、19.46 μ g/mL、9.73 μ g/mL、3.892 μ g/mL。按2.2.1色譜條件分析，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程為：Y＝3.696 44×10-7X+27 224.7，r2＝0.999 5。結(jié)果顯示，黃芩苷在3.892～194.6 μ g/mL范圍內(nèi)線性良好。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗取供試品溶液，分別于0 h、2 h、4.5 h、7 h、20 h 按2.2.1 色譜條件測定，計算黃芩苷峰面積RSD 為0.54%，表明供試品溶液在20 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.6 重復(fù)性試驗取尿石通消糖漿樣品（批號：160330），按2.2.2 中方法制備6 份供試品溶液，按2.2.1 色譜條件測定，得平均峰面積為3 530 325 mV·min，RSD為1.00%，表明該方法重復(fù)性好。

2.2.7 加樣回收率試驗取已知含量的尿石通消糖漿樣品（批號：151022）6 份，每份均精密加入黃芩苷對照品溶液（0.934 9 mg/mL）5 mL，按2.2.2 中方法制備供試品溶液，在2.2.1 色譜條件下測定。見表1。

表1 加樣回收率試驗結(jié)果

2.2.8 樣品的含量測定取5 批尿石通消糖漿樣品按2.2.2 項下方法分別制成供試品溶液，測定黃芩苷含量，結(jié)果5 批樣品的黃芩苷含量范圍為4.046 7～5.820 0 mg/mL。見表2。

表2 5 批尿石通消糖漿樣品的含量測定結(jié)果

3 討論

3.1 石韋薄層鑒別摸索《中華人民共和國藥典》[4]中未收載石韋藥材的薄層鑒別方法，經(jīng)查詢相關(guān)文獻(xiàn)資料，參照復(fù)方石韋片中石韋的薄層鑒別試驗方法，結(jié)合本制劑特點，制定出石韋的薄層色譜鑒別方法。方法中所用試劑毒性小且簡便易行。經(jīng)過不同濃度的提取溶劑（50%甲醇、70%甲醇、100%甲醇）的試驗對比，以及對展開劑乙酸濃度的調(diào)整，確定最終試驗方法[5，6]。

3.2 黃芩苷的含量測定黃芩苷是從唇形科植物黃芩的干燥根中提取出來的黃酮類化合物，是黃芩的主要活性成分之一[7]。黃芩苷在趨堿性溶液中不穩(wěn)定，在酸性溶液中穩(wěn)定，在有機(jī)溶劑中穩(wěn)定性較好[8]。尿石通消糖漿制劑要求pH 為4.0～6.0，黃芩苷在制劑中比較穩(wěn)定。參照《中華人民共和國藥典》[4]中黃芩藥材的含量測定方法，比較了不同提取時間處理樣品、不同流動相和不同柱溫條件下測定結(jié)果，確定測定方法。HPLC 法因其高速、高效、高分辨率等技術(shù)優(yōu)勢，已成為目前控制中藥制劑有效成分的重要手段[9]。樣品中黃芩苷與其他的峰分離效果好，出峰時間適宜，峰形較好，方法簡單可行。經(jīng)方法學(xué)驗證試驗，方法準(zhǔn)確、靈敏、可靠。