• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    茶樹種質(zhì)資源汝城白毛茶的代謝物差異研究

    2023-02-27 03:08:50楊培迪
    熱帶作物學(xué)報(bào) 2023年1期
    關(guān)鍵詞:汝城毛茶代謝物

    趙 熙,趙 洋,楊培迪,寧 靜,楊 陽,成 楊,劉 振

    湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所/國(guó)家茶樹改良中心湖南分中心/湖南省茶樹品種與種苗工程技術(shù)研究中心,湖南長(zhǎng)沙 410125

    汝城白毛茶原產(chǎn)于羅霄山脈東段九龍江次生森林一帶,是湖南四大茶樹地方群體資源之一,也是白毛茶變種(Camelliasinensisvar.pubilimbaChang)的一個(gè)典型代表[1]。研究表明汝城白毛茶不僅在演化地位上與湖南其他3個(gè)地方群體資源差異較大,而且在植物學(xué)特征、生化成分、制茶品質(zhì)等方面特色鮮明[2]。

    目前對(duì)汝城白毛茶生化成分的研究主要集中在水浸出物、咖啡堿、氨基酸、茶多酚、兒茶素組分等方面,而對(duì)于其深度的功能成分研究相對(duì)較少[3]。近年來隨著人們物質(zhì)生活水平的提高,高功能成分特異茶樹種質(zhì)資源的發(fā)掘與利用越來越受到研究者的關(guān)注[4-5]。研究表明,不同地方茶樹資源由于長(zhǎng)期的演化和引種馴化,在功能成分方面具有較大差異[1]。通過對(duì)不同地方茶樹資源的鑒定評(píng)價(jià),已在茶氨酸[6]、苦茶堿[7]、黃酮[8]、β-胡蘿卜素[9]等檢測(cè)工作中取得了一定的進(jìn)展,篩選出了一些功能成分特異的茶樹資源(品種),這些品種的推廣極大地帶動(dòng)了當(dāng)?shù)夭璁a(chǎn)業(yè)發(fā)展[4]。因此對(duì)于汝城白毛茶資源的代謝物差異研究不僅對(duì)汝城白毛茶的選育、開發(fā)具有重要意義,而且對(duì)于探明汝城白毛茶馴化分子機(jī)理研究也具有重要的參考價(jià)值。

    代謝組學(xué)技術(shù)是一種可以在很寬范圍內(nèi)對(duì)生物樣品中代謝物進(jìn)行全面定量分析的技術(shù),具有高效、全面及準(zhǔn)確的特點(diǎn)[10-11]。同時(shí),結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)分析技術(shù)不僅可以在模型水平進(jìn)行評(píng)價(jià),而且可以尋找潛在性差異代謝物[12]。代謝組學(xué)已在茶葉的生理代謝[13]、加工過程的成分變化[14-15]、特征成分的挖掘等[16]方面有了一定的應(yīng)用。本研究以湖南典型地方茶樹群體資源為對(duì)照,采用UPLC-MS/MS分析技術(shù),研究并篩選汝城白毛茶的差異代謝產(chǎn)物,以期為汝城白毛茶茶樹種質(zhì)資源的篩選、加工工藝研究和馴化分子機(jī)理探索等提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 植物材料 本研究采用的汝城白毛茶(RCBM)、城步峒茶群體(CBDC)、江華苦茶群體(JHKC)和安化群體(AHQT)樣品采自于湖南省茶樹種質(zhì)資源圃,春季采摘第一批一芽一葉,樣品采集后在液氮中冷卻并進(jìn)行冷凍干燥。

    1.1.2 儀器與試劑 儀器:FD-56真空冷凍干燥機(jī),美國(guó)SIM公司;MT203T電子天平,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;5424R離心機(jī),德國(guó) Eppendorf公司;MM 400研磨機(jī),德國(guó)RETSCH公司;CBM30A超高效液相色譜,日本島津公司;4500 QTRAP串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS),美國(guó)Applied Biosystems公司。

    試劑:乙醇、甲醇、乙腈,國(guó)產(chǎn);標(biāo)準(zhǔn)品:二甲基亞砜或甲醇作為溶劑溶解后,保存條件-20℃,質(zhì)譜分析前采用 70%甲醇稀釋成合適濃度(美國(guó),Sigma-Aldrich),試劑均為色譜純。

    1.2 方法

    UPLC-MS分析。數(shù)據(jù)采集儀器系統(tǒng)主要包括超高效液相色譜(ultra performance liquid chromatography, UPLC)和串聯(lián)質(zhì)譜(tandem mass spectrometry, MS/MS)。色譜柱:SB-C18 Agilent 1.8 μm,2.1 mm×100 mm;流動(dòng)相:A相為超純水(加入0.1%的甲酸),B相為乙腈;洗脫梯度:0 min B相比例5%,9.00 min內(nèi)B相比例線性增至95%,維持1 min,10.00~11.10 min,B相比例降至5%,并平衡至14 min;流速為0.35 mL/min;柱溫為40℃;進(jìn)樣量4 μL。質(zhì)譜條件參照CHEN等[10]的方法。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    基于邁維生物科技公司的植物廣靶代謝數(shù)據(jù)庫(kù),對(duì)樣本的代謝物進(jìn)行質(zhì)譜定性分析,采用 MultiaQuant軟件進(jìn)行色譜峰面積和對(duì)應(yīng)物質(zhì)相對(duì)含量的確定。采用變量重要性投影值(variable importance in projection, VIP)和差異倍數(shù)值(fold change, FC)對(duì)正交偏最小二乘法判別分析(OPLS-DA)結(jié)果進(jìn)行差異代謝物篩選,VIP值大于1可判定為差異顯著的代謝物,同時(shí)含量增加的代謝物 FC≥2或含量減少的代謝物FC≤0.5。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 汝城白毛茶的差異代謝物篩選

    共有609個(gè)代謝物在4個(gè)群體中被檢測(cè)出。以安化群體、城步峒茶、江華苦茶3個(gè)群體為對(duì)照組,采用 OPLS-DA分析方法,基于顯著差異代謝物的篩選依據(jù),分別在汝城白毛茶中篩選到顯著差異代謝物189、180、162個(gè)(圖1),其中差異代謝物最多的為黃酮類(69、51、60個(gè)),其次為酚酸類(31、40、25個(gè)),最少的為木脂素和香豆素(5、4、4個(gè))。

    圖1 汝城白毛茶與其他3個(gè)群體的差異代謝物比較Fig.1 Comparison of metabolites in Rucheng Baimaocha with other three populations

    2.2 與3個(gè)群體顯著差異代謝物比較

    為挖掘汝城白毛茶中含量較高的差異代謝物,本研究將汝城白毛茶分別與湖南其他典型地方群體資源間含量增加的差異代謝物進(jìn)行比較分析,結(jié)果表明,汝城白毛茶中含量增加最多的代謝物均為黃酮,其次為酚酸類,其中含量增加最高的物質(zhì)均為喬松素。比安化群體顯著增加的代謝物共93種,與茶葉品質(zhì)密切相關(guān)、有CAS號(hào)且Log2FC>2的代謝物共20個(gè);比城步峒茶顯著增加的代謝物共91種,與茶葉品質(zhì)密切相關(guān)、有CAS號(hào)且Log2FC>2的代謝物質(zhì)共18個(gè);比江華苦茶群體顯著增加的代謝物共67種,其中與茶葉品質(zhì)密切相關(guān)、有CAS號(hào)且Log2FC>2的代謝物共15個(gè)(表1)。將不同群體中汝城白毛茶含量顯著增加的代謝物進(jìn)行比較,汝城白毛茶較其他 3個(gè)群體含量均增加的代謝物共15個(gè)(圖2,表2),表明這些物質(zhì)在汝城白毛茶群體中的含量較高。

    表2 在3個(gè)群體中含量均增加的代謝物(Log2FC>1)Tab.2 Metabolites increased in all three population (Log2FC>1)

    圖2 汝城白毛茶與3個(gè)群體差異代謝物的韋恩圖Fig.2 Venn map of differential metabolites among three population

    表1 與3個(gè)不同群體比較含量顯著增加的物質(zhì)(Log2FC>2)Tab.1 Specific increased differential metabolites compared with three different populations (Log2FC>2)

    續(xù)表1 與3個(gè)不同群體比較含量顯著增加的物質(zhì)(Log2FC>2)Tab.1 Specific increased differential metabolites compared with three different populations (Log2FC>2) (continued)

    2.3 群體間差異代謝物的K均值聚類

    為了研究代謝物在不同樣本中相對(duì)含量的變化趨勢(shì),將差異代謝物相對(duì)含量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理和中心化處理,然后進(jìn)行K均值聚類(K-means)分析(圖3)。結(jié)果表明,4個(gè)群體中變化趨勢(shì)一致的代謝物可分為9類。本研究對(duì)變化趨勢(shì)一致、與茶葉品質(zhì)密切相關(guān)且有 CAS號(hào)的差異代謝物進(jìn)行了篩選,得出汝城白毛茶中含量最高的代謝物共 32個(gè)(表3),分布在 1、2、5、7、9共 5個(gè)聚類群中,主要為黃酮和鞣質(zhì)類。

    表3 變化趨勢(shì)一致且在汝城白毛茶群體中含量最高的物質(zhì)Tab.3 Substances with the same change trend and the highest content in Rucheng Baimaocha

    圖3 差異代謝物K-means圖Fig.3 K-means of different metabolites

    2.4 差異代謝物KEGG富集分析

    根據(jù)差異代謝物的篩選結(jié)果,本研究進(jìn)行了差異代謝物KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路富集分析,其中Rich factor值越大表示富集程度越大,Pvalue越接近于0,表示富集越顯著(圖4、圖5、圖6)。圖中圓點(diǎn)越大,代表富集到相應(yīng)通路上的差異顯著代謝物的個(gè)數(shù)越多。差異代謝物KEGG富集分析結(jié)果表明,與安化群體富集顯著且個(gè)數(shù)最多的代謝途徑依次為類黃酮生物合成途徑、苯丙烷生物合成途徑、黃酮與黃酮醇生物合成途徑、異喹啉生物堿生物合成途徑(圖4);與城步峒茶富集顯著且個(gè)數(shù)最多的代謝途徑依次為類黃酮生物合成途徑、其次為賴氨酸降解和賴氨酸生物合成途徑(圖5);與江華苦茶富集顯著且個(gè)數(shù)最多的代謝途徑依次為類黃酮生物合成途徑、苯丙烷生物合成途徑和黃酮與黃酮醇生物合成途徑(圖6)。

    圖4 汝城白毛茶與安化群體差異代謝物的KEGG通路富集Fig.4 KEGG pathway enrichment of different metabolites between RCBM and AHQT

    圖5 汝城白毛茶與城步峒茶差異代謝物的KEGG通路富集Fig.5 KEGG pathway enrichment of different metabolites between RCBM and CBDC

    圖6 汝城白毛茶與江華苦茶差異代謝物的KEGG通路富集Fig.6 KEGG pathway enrichment of different metabolites between RCBM and JHKC

    3 討論

    黎星輝等[3]對(duì)湖南主要地方茶樹資源進(jìn)行了經(jīng)濟(jì)性狀和主要生化成分含量測(cè)定,結(jié)果表明,茶多酚與兒茶素含量在不同茶樹資源中差異較大,其中汝城白毛茶含量最高,屬于高茶多酚資源,其次為江華苦茶和城步峒茶,云臺(tái)山種含量最低。本研究結(jié)果表明,以安化群體、城步峒茶、江華苦茶3個(gè)群體為對(duì)照,在汝城白毛茶中篩選到了顯著差異代謝物最多的均為黃酮類,其次為酚酸類,這與前人的研究結(jié)果一致。一方面說明黃酮和茶多酚作為茶葉中的一大類物質(zhì),包括的次生代謝物類型在茶葉中數(shù)量相對(duì)較多,另一方面也說明汝城白毛茶作為湖南的典型地方茶樹種質(zhì)資源,具有較高的茶多酚含量,是一個(gè)加工紅茶的優(yōu)異茶樹種質(zhì)資源。

    差異代謝物的富集通路對(duì)理解品種差異具有重要意義。差異代謝物富集通路研究表明,汝城白毛茶與其他群體的差異代謝物除主要富集于類黃酮、黃酮與黃酮醇生物合成途徑外,還在苯丙烷生物合成途徑、異喹啉生物堿生物合成途徑和咖啡堿代謝途徑中有比較顯著的富集。苯丙烷類生物合成途徑是植物 3條主要次生代謝途徑之一,在植物的生長(zhǎng)發(fā)育過程及應(yīng)答逆境脅迫中發(fā)揮重要作用,如避免植物受逆境脅迫傷害、提高植株抗病能力、生成花和果實(shí)的顏色與氣味、作為信號(hào)傳導(dǎo)分子等[17-18]。目前茶樹中關(guān)于苯丙烷類代謝途徑的研究較少,谷夢(mèng)雅等[19]通過不同強(qiáng)度紅光對(duì)茶樹影響進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組分析,研究表明紅光處理可能對(duì)茶樹苯丙烷類生物合成代謝途徑具有重要影響,進(jìn)而可能影響茶樹黃酮類化合物生物合成和木質(zhì)素合成途徑。異喹啉生物堿具有多種生物活性,例如抗腫瘤、抗菌、調(diào)節(jié)免疫功能等,具有很高的醫(yī)用價(jià)值和廣闊的前景,一直是國(guó)內(nèi)外研究開發(fā)利用的熱點(diǎn)[20]。

    前期對(duì)汝城白毛茶的差異代謝物研究主要集中在水浸出物、茶多酚、氨基酸等大類物質(zhì)中,對(duì)于更深層次的功能成分差異研究卻關(guān)注較少。本研究開展了汝城白毛茶通與湖南其他3個(gè)典型地方茶樹種質(zhì)資源的差異代謝物研究,通過分析得到在汝城白毛茶中顯著增加的差異代謝物,比如喬松素、鞣花酸、山奈酚等,這些代謝物具有良好的抗炎、抗菌、抗腫瘤、抗氧化、降低血脂和神經(jīng)保護(hù)等作用,已在一些蔬菜、水果及中藥材中有了研究的報(bào)道,但目前在茶葉中相關(guān)的研究較少[21-23]。因此通過汝城白毛茶含量增加的差異代謝物研究,不僅為后期汝城白毛茶群體資源篩選提供了重要的研究方向,而且也為汝城白毛茶資源的保健功能研究和開發(fā)利用提供了重要依據(jù)。

    猜你喜歡
    汝城毛茶代謝物
    劉嘉怡作品
    ——增城毛茶制作技藝插畫
    大觀(2023年8期)2023-09-25 06:21:14
    阿爾茨海默病血清代謝物的核磁共振氫譜技術(shù)分析
    仁化紅山鎮(zhèn)白毛茶亮相央視《新聞直播間》
    源流(2022年5期)2022-06-30 01:31:44
    鑄造汝城精神
    湖南不同等級(jí)黑毛茶品質(zhì)分析
    茶葉通訊(2018年3期)2018-11-08 07:01:56
    柱前衍生化結(jié)合LC-MSn分析人尿中茶堿及其代謝物
    HPLC-MS/MS法分析乙酰甲喹在海參中的主要代謝物
    汝城河流治理美如畫
    湖南汝城:投3000多萬建大型供水工程惠澤6萬群眾
    云南曬青毛茶物理特性研究
    久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲成人久久性| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 久久久久久久久久久久大奶| 久久久国产成人精品二区| 最新美女视频免费是黄的| 亚洲一区中文字幕在线| 国产三级在线视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产成人免费无遮挡视频| 中文亚洲av片在线观看爽| avwww免费| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 美女大奶头视频| 宅男免费午夜| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 亚洲熟妇熟女久久| 叶爱在线成人免费视频播放| 午夜福利在线观看吧| 热99re8久久精品国产| 亚洲男人的天堂狠狠| 我的亚洲天堂| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲欧美激情在线| 精品人妻1区二区| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产精品日韩av在线免费观看 | 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲电影在线观看av| 日本 av在线| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 首页视频小说图片口味搜索| 色综合婷婷激情| 自线自在国产av| 亚洲中文av在线| 男人操女人黄网站| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国语自产精品视频在线第100页| 午夜福利欧美成人| 51午夜福利影视在线观看| 国产单亲对白刺激| 91九色精品人成在线观看| 久久久久亚洲av毛片大全| 午夜福利免费观看在线| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 可以在线观看毛片的网站| 身体一侧抽搐| 91精品三级在线观看| 男人操女人黄网站| 精品国内亚洲2022精品成人| 12—13女人毛片做爰片一| www.999成人在线观看| 免费看十八禁软件| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 精品福利观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 亚洲人成77777在线视频| 免费av毛片视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 欧美午夜高清在线| 淫秽高清视频在线观看| 视频在线观看一区二区三区| 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲国产中文字幕在线视频| 精品国产乱子伦一区二区三区| 91九色精品人成在线观看| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲成人精品中文字幕电影| 在线免费观看的www视频| av欧美777| 久9热在线精品视频| 1024视频免费在线观看| 一本久久中文字幕| 极品人妻少妇av视频| 午夜福利视频1000在线观看 | 丁香六月欧美| 手机成人av网站| 午夜精品国产一区二区电影| 午夜免费观看网址| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 久久久久久大精品| 极品人妻少妇av视频| 成人永久免费在线观看视频| 欧美av亚洲av综合av国产av| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 老司机午夜十八禁免费视频| 正在播放国产对白刺激| 一区在线观看完整版| 一级a爱片免费观看的视频| 久久亚洲精品不卡| videosex国产| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 国产精品一区二区精品视频观看| 国产亚洲av高清不卡| 最好的美女福利视频网| 岛国视频午夜一区免费看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 可以在线观看的亚洲视频| www.熟女人妻精品国产| 9191精品国产免费久久| 午夜两性在线视频| 国产在线观看jvid| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 欧美日韩一级在线毛片| 高清在线国产一区| 一本大道久久a久久精品| 亚洲国产欧美网| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲七黄色美女视频| 18美女黄网站色大片免费观看| 国产熟女午夜一区二区三区| 色综合欧美亚洲国产小说| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 精品福利观看| 自线自在国产av| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 成年版毛片免费区| 日本五十路高清| 黄色视频不卡| 国产麻豆69| 搞女人的毛片| 亚洲片人在线观看| 制服诱惑二区| 色播在线永久视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 在线观看免费日韩欧美大片| 看片在线看免费视频| 99国产精品99久久久久| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 99精品欧美一区二区三区四区| 99精品久久久久人妻精品| 欧美乱码精品一区二区三区| 搡老岳熟女国产| 亚洲精华国产精华精| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久久久久人人人人人| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲avbb在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 香蕉国产在线看| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲自拍偷在线| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 精品一区二区三区av网在线观看| 亚洲伊人色综图| 满18在线观看网站| 久久午夜综合久久蜜桃| 999久久久国产精品视频| 精品免费久久久久久久清纯| 少妇的丰满在线观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产私拍福利视频在线观看| 热99re8久久精品国产| av电影中文网址| 神马国产精品三级电影在线观看 | 亚洲专区国产一区二区| 国产成人系列免费观看| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲欧美精品综合久久99| 久久草成人影院| 青草久久国产| 欧美日本亚洲视频在线播放| 中文字幕色久视频| 午夜久久久久精精品| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 91字幕亚洲| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美日韩乱码在线| 免费看十八禁软件| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 午夜免费鲁丝| 色综合婷婷激情| 亚洲熟女毛片儿| 18禁观看日本| 在线视频色国产色| 日韩成人在线观看一区二区三区| 午夜福利高清视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 国产一区在线观看成人免费| avwww免费| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 日韩大码丰满熟妇| 亚洲人成伊人成综合网2020| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲中文字幕日韩| 午夜福利18| 日韩视频一区二区在线观看| 大香蕉久久成人网| 亚洲国产中文字幕在线视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产免费男女视频| 岛国在线观看网站| 妹子高潮喷水视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲男人的天堂狠狠| 免费无遮挡裸体视频| 国产91精品成人一区二区三区| cao死你这个sao货| 校园春色视频在线观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 精品免费久久久久久久清纯| 婷婷丁香在线五月| www日本在线高清视频| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 婷婷丁香在线五月| 欧美性长视频在线观看| 国产成人系列免费观看| 18禁美女被吸乳视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 欧美国产精品va在线观看不卡| 99国产精品免费福利视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久精品91蜜桃| 午夜亚洲福利在线播放| 免费观看精品视频网站| 亚洲国产精品sss在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产91精品成人一区二区三区| 极品人妻少妇av视频| 亚洲三区欧美一区| 精品免费久久久久久久清纯| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 人人妻人人澡欧美一区二区 | 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久精品91无色码中文字幕| 成人永久免费在线观看视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产av在哪里看| 成人手机av| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产成人精品在线电影| 黄色丝袜av网址大全| 国产野战对白在线观看| 两性夫妻黄色片| 激情在线观看视频在线高清| av有码第一页| 中文字幕最新亚洲高清| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 人人妻人人澡人人看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 高清黄色对白视频在线免费看| 中文字幕av电影在线播放| 精品国产美女av久久久久小说| 在线av久久热| ponron亚洲| 免费看十八禁软件| 欧美精品啪啪一区二区三区| 免费高清在线观看日韩| 精品一区二区三区av网在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲三区欧美一区| 色播亚洲综合网| 韩国av一区二区三区四区| 免费高清视频大片| 级片在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 在线观看免费午夜福利视频| 亚洲熟女毛片儿| 日韩av在线大香蕉| 一本大道久久a久久精品| av有码第一页| 精品国产乱子伦一区二区三区| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 此物有八面人人有两片| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产乱人伦免费视频| 日韩欧美免费精品| 一区二区三区国产精品乱码| 一二三四社区在线视频社区8| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产成人系列免费观看| 国内精品久久久久久久电影| 欧美亚洲日本最大视频资源| 日韩高清综合在线| 亚洲国产精品合色在线| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 一区二区三区国产精品乱码| АⅤ资源中文在线天堂| 两个人看的免费小视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 中出人妻视频一区二区| 男女午夜视频在线观看| 国产成人av教育| 久久婷婷成人综合色麻豆| 又大又爽又粗| av免费在线观看网站| 精品国产乱码久久久久久男人| 成人欧美大片| 午夜福利,免费看| 国产精品久久电影中文字幕| 久久久国产欧美日韩av| aaaaa片日本免费| 午夜精品国产一区二区电影| 好男人在线观看高清免费视频 | 国产精品二区激情视频| 中文字幕最新亚洲高清| 久热这里只有精品99| 精品久久蜜臀av无| 午夜福利18| 国内精品久久久久久久电影| 久久人人97超碰香蕉20202| 一区在线观看完整版| 日本黄色视频三级网站网址| www.www免费av| 欧美精品亚洲一区二区| 满18在线观看网站| 天天一区二区日本电影三级 | 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产熟女xx| 久久久久久久午夜电影| 黄色毛片三级朝国网站| 日韩三级视频一区二区三区| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| xxx96com| 亚洲男人天堂网一区| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 午夜a级毛片| 首页视频小说图片口味搜索| 色在线成人网| 女人精品久久久久毛片| 国产野战对白在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 神马国产精品三级电影在线观看 | 亚洲成av人片免费观看| 激情视频va一区二区三区| 亚洲人成电影观看| 又紧又爽又黄一区二区| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产一区二区三区视频了| 久久性视频一级片| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 久久久久国内视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产精品久久视频播放| 少妇 在线观看| 亚洲国产欧美一区二区综合| 成人国产综合亚洲| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美不卡视频在线免费观看 | 90打野战视频偷拍视频| 91大片在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产av一区在线观看免费| 男人舔女人的私密视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 在线观看舔阴道视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 在线观看免费日韩欧美大片| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲中文av在线| 日本三级黄在线观看| 国语自产精品视频在线第100页| 99re在线观看精品视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产成人精品久久二区二区免费| 日韩欧美一区视频在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产精品精品国产色婷婷| 午夜久久久久精精品| 亚洲国产看品久久| 精品熟女少妇八av免费久了| 久热爱精品视频在线9| 露出奶头的视频| 黄色丝袜av网址大全| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国产色视频综合| 手机成人av网站| 成人免费观看视频高清| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 色在线成人网| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 淫秽高清视频在线观看| 韩国av一区二区三区四区| 91av网站免费观看| 激情在线观看视频在线高清| 免费看十八禁软件| 不卡一级毛片| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 免费看a级黄色片| 女人精品久久久久毛片| 日本欧美视频一区| 国产精品久久电影中文字幕| 国产精品,欧美在线| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 一级毛片高清免费大全| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 午夜福利成人在线免费观看| 精品人妻在线不人妻| 黄色丝袜av网址大全| 岛国视频午夜一区免费看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产精品九九99| 国产亚洲精品av在线| 国产伦人伦偷精品视频| 美女国产高潮福利片在线看| a在线观看视频网站| 999精品在线视频| 黄色片一级片一级黄色片| 涩涩av久久男人的天堂| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 亚洲第一青青草原| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 亚洲专区国产一区二区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 一级毛片女人18水好多| 国产私拍福利视频在线观看| 日日爽夜夜爽网站| 久久中文字幕一级| 免费无遮挡裸体视频| 午夜免费激情av| 色哟哟哟哟哟哟| 免费在线观看黄色视频的| 97碰自拍视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美黑人精品巨大| 久久热在线av| 一个人免费在线观看的高清视频| 757午夜福利合集在线观看| 1024视频免费在线观看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| aaaaa片日本免费| 精品国产一区二区三区四区第35| 最新美女视频免费是黄的| 啦啦啦 在线观看视频| 国产熟女xx| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 亚洲熟女毛片儿| 操出白浆在线播放| 国产精品久久久av美女十八| 久久午夜综合久久蜜桃| 色综合站精品国产| 欧美精品啪啪一区二区三区| 青草久久国产| av中文乱码字幕在线| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 黄片小视频在线播放| 91精品国产国语对白视频| 久久人妻熟女aⅴ| 精品不卡国产一区二区三区| 一进一出抽搐动态| 精品国产一区二区三区四区第35| 黄片播放在线免费| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 成人国产一区最新在线观看| 色av中文字幕| 在线免费观看的www视频| 中文字幕高清在线视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 日本一区二区免费在线视频| 免费少妇av软件| 中文字幕最新亚洲高清| 国产成人精品在线电影| 国语自产精品视频在线第100页| 国产色视频综合| 精品人妻1区二区| 国产精品久久电影中文字幕| 岛国视频午夜一区免费看| 麻豆一二三区av精品| 狠狠狠狠99中文字幕| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲人成伊人成综合网2020| 亚洲国产精品999在线| 久久伊人香网站| 久久久水蜜桃国产精品网| 麻豆一二三区av精品| 久久中文字幕一级| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产麻豆69| 欧美黑人精品巨大| 国产1区2区3区精品| 亚洲一码二码三码区别大吗| 麻豆久久精品国产亚洲av| 女人被狂操c到高潮| 一区福利在线观看| 看免费av毛片| av视频在线观看入口| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 极品人妻少妇av视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 久久中文看片网| 成人精品一区二区免费| 最近最新中文字幕大全免费视频| 999精品在线视频| 中文字幕色久视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 久久精品成人免费网站| 亚洲专区中文字幕在线| www.精华液| 美女高潮到喷水免费观看| 欧美性长视频在线观看| 麻豆国产av国片精品| 久久久国产欧美日韩av| 黑人欧美特级aaaaaa片| 制服丝袜大香蕉在线| 在线观看www视频免费| 欧美黄色淫秽网站| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美乱码精品一区二区三区| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲成人精品中文字幕电影| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 久久人妻熟女aⅴ| 欧美日韩黄片免| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 在线视频色国产色| 精品国产乱子伦一区二区三区| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 人妻久久中文字幕网| 一二三四社区在线视频社区8| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 欧美乱妇无乱码| 村上凉子中文字幕在线| 黄色a级毛片大全视频| а√天堂www在线а√下载| 妹子高潮喷水视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 变态另类丝袜制服| 亚洲色图av天堂| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 亚洲视频免费观看视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 美女午夜性视频免费| 黄色毛片三级朝国网站| 1024视频免费在线观看| 国产野战对白在线观看| 国内精品久久久久精免费| 国产成人精品无人区| 91字幕亚洲| 正在播放国产对白刺激| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 身体一侧抽搐| 午夜久久久在线观看| or卡值多少钱| 欧美成人午夜精品| 狂野欧美激情性xxxx| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 亚洲av美国av| 午夜日韩欧美国产| 国产高清有码在线观看视频 | 狠狠狠狠99中文字幕| 久久香蕉精品热| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美日韩黄片免| 热99re8久久精品国产| 久久狼人影院| 正在播放国产对白刺激| 深夜精品福利| 男男h啪啪无遮挡| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲av五月六月丁香网| 久久九九热精品免费| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 成人国产一区最新在线观看| 欧美中文日本在线观看视频| 国产又色又爽无遮挡免费看| 午夜久久久久精精品| АⅤ资源中文在线天堂| 欧美中文日本在线观看视频| 国产成+人综合+亚洲专区| av在线天堂中文字幕| 91九色精品人成在线观看| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲一区中文字幕在线| 十八禁人妻一区二区| 麻豆成人av在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 最近最新中文字幕大全电影3 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 免费在线观看亚洲国产| 国产成人系列免费观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 啦啦啦 在线观看视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产精品久久视频播放|