4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾的室內(nèi)毒力測定

龔雪娜，王雪松，羅梓文，陳洪云，汪云剛，龍亞芹，陳林波

（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所/云南省茶樹種質(zhì)資源創(chuàng)新與配套栽培技術(shù)工程研究中心/云南省茶學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650201）

0 引言

茶谷蛾(Agriophara rhombata)又稱茶灰木蛾，屬鱗翅目谷蛾科，是茶樹重要的食葉性害蟲之一，以幼蟲吐絲綴葉成苞，匿居苞中咀食葉肉為害茶樹[1]。該蟲喜食成葉和老葉，大發(fā)生時(shí)亦危害嫩葉，受害輕的植株葉片形成缺刻、干枯，受害重時(shí)茶樹葉片被食盡[1]，曾是東北印度的主要害蟲，后在國內(nèi)廣東、福建、廈門、四川等地普遍爆發(fā)[2]。近年來開始在云南省局部茶園爆發(fā)性為害，對云南茶園茶谷蛾為害規(guī)律的調(diào)查研究顯示，全年有4個(gè)幼蟲為害時(shí)期，以第1代和第4代密度較大，并有逐年加重趨勢，給茶葉生產(chǎn)帶來巨大損失[1]。殺蟲劑一直是農(nóng)作物害蟲防治的主要措施，這種措施不僅能夠快速遏制其危害，又能彌補(bǔ)監(jiān)測預(yù)警落后的問題，減少人力物力和財(cái)力不必要的浪費(fèi)[3]。因此，在研究茶谷蛾的危害規(guī)律基礎(chǔ)上，從節(jié)約成本、增加防治效果的角度出發(fā)篩選出比較實(shí)用的防治藥劑，對于防治茶谷蛾有重要意義。

乙基多殺菌素是陶氏益農(nóng)公司出品的一種新型多殺菌素類殺蟲劑，通過胃毒和觸殺作用，影響昆蟲正常的神經(jīng)活動[4]；對絕大多數(shù)主要益蟲沒有影響，比目前市場上常用的殺蟲劑用量更低、防效更好；而且在環(huán)境中的滯留時(shí)間更短，具有優(yōu)異的環(huán)境特性，主要用于防治鱗翅目幼蟲[5-6]。蟲螨腈是吡咯類殺蟲劑[7]，通過抑制細(xì)胞線粒體上的二磷酸腺苷(ADP)向三磷酸腺苷(ATP)轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致其因能量供應(yīng)不足而死亡，具有殺蟲譜廣、防效高、持效長、安全的特點(diǎn)，可以控制抗性害蟲[8]。茚蟲威是兼具噁二嗪結(jié)構(gòu)的氨基甲酸酯類殺蟲劑，它通過阻斷昆蟲神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的鈉離子通道，使神經(jīng)細(xì)胞失去功能，導(dǎo)致害蟲運(yùn)動失調(diào)，0～4 h內(nèi)即停止取食、麻痹并最終死亡[9]。唑蟲酰胺是一種新型吡唑雜環(huán)類殺蟲殺螨劑，它通過阻礙線粒體代謝系統(tǒng)中的氧化磷酸化作用使其最終因能量不足而死亡，主要用于鱗翅目幼蟲的防治，具有低毒高效快速降解等特點(diǎn)[10-11]。有對茶谷蛾生物習(xí)性的研究提出，幼蟲期、蛹期、成蟲期是茶谷蛾的3個(gè)有效防治時(shí)期[1]。由于幼蟲期的發(fā)育歷期最長（平均33.1天），為害最嚴(yán)重[1]，故筆者以幼蟲期為突破口，選取上述4種不同機(jī)制的殺蟲劑，測定其對茶谷蛾的生物活性，旨在篩選對茶谷蛾防效較好的藥劑及劑量，為田間防治茶谷蛾提供科學(xué)用藥指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

供試蟲源于2021年5月采自云南省勐?？h云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所基地內(nèi)。收集老熟幼蟲50頭，用放置有新鮮茶樹葉片植株的采蟲袋（80目）帶回室內(nèi)，用茶苗飼養(yǎng)，經(jīng)過化蛹、羽化后將成蟲放入40 cm×40 cm×40 cm的養(yǎng)蟲籠內(nèi)，喂以10%蜂蜜水，放入茶苗供其產(chǎn)卵，孵化后的幼蟲用茶苗飼養(yǎng)至3齡，挑選大小一致、健康的3齡初期幼蟲進(jìn)行毒力測定。

1.2 供試藥劑

供試殺蟲劑種類和生產(chǎn)廠家信息見表1，表中推薦劑量為各農(nóng)藥登記的推薦劑量范圍的平均值。

表1 供試殺蟲劑

1.3 試驗(yàn)方法

采用浸葉法進(jìn)行生物測定。在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，用含0.05% Triton X-100的蒸餾水將殺蟲劑稀釋成5個(gè)系列濃度梯度，每濃度藥液量200 mL。將準(zhǔn)備好的茶樹葉片（最長直徑6 cm）浸于不同濃度的藥液中10 s，取出后在室內(nèi)晾干至表面無游離水。用0.05% Triton X-100浸漬的葉片作為對照。將晾干的葉片放入10 mL的冷凍管中，冷凍管貼壁放有濾紙保濕，用鑷子接入發(fā)育程度相同的茶谷蛾3齡幼蟲，每管1頭，每個(gè)濃度30頭試蟲，用蘸有少量水的脫脂棉封口。放入溫度(25±1)℃，相對濕度70%，光周期14 h L/10 h D的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。分別于24、48、72、96 h后在體式顯微鏡下用毛刷輕觸幼蟲體表，不動者判定為死亡，并記錄死亡數(shù)、存活數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel 2019、SPSS 22.0[12]計(jì)算4種化學(xué)殺蟲劑對3齡茶谷蛾幼蟲的致死率、毒力回歸方程、LC50及LC90，并以24%蟲螨腈SC的毒力為1計(jì)算相對毒力指數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 4種殺蟲劑對茶谷蛾的毒殺作用

6%乙基多殺菌素SC 500倍稀釋液24 h的致死率為93.33%，48 h后即達(dá)到了100%；750倍稀釋液24 h的致死率為93.33%，48 h后達(dá)到96.67%；1000倍稀釋液24 h的致死率為76.67%，48 h后達(dá)到93.33%；1500倍稀釋液24 h的致死率為63.33%，48 h后達(dá)到90%；2000倍稀釋液24 h致死率為43.33%，48 h后達(dá)到76.67%。24 h內(nèi)的劑量—死亡率效應(yīng)最顯著，并都在48 h后達(dá)到最大死亡率，持效性好（圖1A）。

圖1 4種化學(xué)殺蟲劑不同處理下的茶谷蛾死亡情況

24%蟲螨腈SC 24 h內(nèi)500、750倍稀釋液的致死率能達(dá)到50%，96 h后才超過90%；1000倍稀釋液在48 h致死率達(dá)到50%，96 h才達(dá)到90%；2000倍稀釋液在72 h致死率達(dá)到50%，毒殺作用具有明顯的時(shí)間—?jiǎng)┝俊劳雎市?yīng)（圖1B）。

15%茚蟲威EC 24 h內(nèi)1000倍稀釋液致死率最高，達(dá)96.67%，后隨濃度降低致死率逐漸下降；各濃度處理均能在48 h后達(dá)到最大致死率，分別為96.67%、96.67%、83.33%、56.67%、53.33%（圖1C）。

15%唑蟲酰胺SC 24 h內(nèi)750倍稀釋液致死率最高，為63.33%，后隨濃度降低致死率下降；各濃度處理的致死率均在48 h后達(dá)到最大并持效到96 h，750倍液處理下的茶谷蛾死亡率最高（圖1D）。

2.2 4種殺蟲劑隨時(shí)間變化對茶谷蛾的毒力大小

相關(guān)系數(shù)是變量之間相關(guān)程度的指標(biāo)，通常r＞0.8時(shí)認(rèn)為2個(gè)變量有很強(qiáng)的線性相關(guān)性，而相關(guān)系數(shù)越接近1.0，則回歸效果越好[6]。6%乙基多殺菌素SC、15%茚蟲威EC、15%唑蟲酰胺SC、24%蟲螨腈SC對3齡茶谷蛾幼蟲24 h的LC50值分別為32.509、57.907、142.645、328.572 mg/L（表2）。以24%蟲螨腈SC的毒力為1計(jì)算，6%乙基多殺菌素SC的相對毒力是其10.11倍，15%茚蟲威EC的相對毒力是其5.67倍，15%唑蟲酰胺SC的相對毒力是其2.31倍。毒力由大到小表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC＞24%蟲螨腈SC。

表2 4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾的室內(nèi)毒力(24 h)

6%乙基多殺菌素SC、15%茚蟲威EC、15%唑蟲酰胺SC、24%蟲螨腈SC對3齡茶谷蛾幼蟲48 h LC50值分別為 15.959、57.480、72.698、234.227 mg/L。以24%蟲螨腈SC的毒力為1計(jì)算，6%乙基多殺菌素SC的相對毒力是其14.68倍，15%茚蟲威EC的相對毒力是其4.07倍，15%唑蟲酰胺SC的相對毒力是其3.22倍（表3）。毒力由大到小表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC＞24%蟲螨腈SC。

表3 4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾的室內(nèi)毒力(48 h)

72 h 24%蟲螨腈SC的LC50值為99.633 mg/L，其他3種藥劑的LC50值與48 h時(shí)相同。6%乙基多殺菌素SC、15%茚蟲威EC、15%唑蟲酰胺SC的相對毒力分別是24%蟲螨腈SC的6.24、1.73、1.37倍（表4）。毒力由大到小表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC＞24%蟲螨腈SC。

表4 4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾的室內(nèi)毒力(72 h)

96 h 24%蟲螨腈SC的LC50值為52.534 mg/L，其他3種藥劑的LC50值與48 h時(shí)相同。6%乙基多殺菌素SC、15%茚蟲威EC、15%唑蟲酰胺SC的相對毒力分別是24%蟲螨腈SC的3.29、0.91、0.72倍（表5）。毒力由大到小表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞24%蟲螨腈SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC。

表5 4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾的室內(nèi)毒力(96 h)

3 結(jié)論與討論

茶葉是中國傳統(tǒng)的重要經(jīng)濟(jì)作物和重要飲品，作為滇西南經(jīng)濟(jì)支柱特色產(chǎn)業(yè)，對云南省產(chǎn)業(yè)發(fā)展、增加農(nóng)民收入、擴(kuò)大就業(yè)、實(shí)施鄉(xiāng)村振興具有重要作用。近年來，茶谷蛾在云南部分茶區(qū)呈現(xiàn)大面積爆發(fā)，具有蟲口密度大、繁殖能力強(qiáng)、隱蔽性強(qiáng)等特點(diǎn)，對春茶和夏茶為害尤其嚴(yán)重[1]。為了尋求安全有效的殺蟲劑，筆者選用了4種在防治鱗翅目害蟲中廣泛使用且作用機(jī)理不同的低毒高效藥劑對茶谷蛾的毒殺效果進(jìn)行比對。室內(nèi)毒力測定試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，4種化學(xué)殺蟲劑對3齡茶谷蛾幼蟲的毒力作用由強(qiáng)到弱表現(xiàn)為6%乙基多殺菌素SC＞15%茚蟲威EC＞15%唑蟲酰胺SC＞24%蟲螨腈SC。

乙基多殺菌素結(jié)構(gòu)中的鼠李糖基3-位，是由天然甲基醚轉(zhuǎn)變?yōu)橐一训慕Y(jié)果，僅是多加了一個(gè)亞甲基的產(chǎn)物，其活性就提高了10倍[13-14]，在防治草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda)[15-16]、棉鈴蟲(Helicoverpa armigera)[17]、梨小食心蟲(Grapholita molesta)和蘋果蠹蛾(Cydia pomonella)[18]、茶細(xì)蛾(Caloptilia theivora)[19]時(shí)，均體現(xiàn)了較高的生物活性和觸殺效果。本研究中，6%乙基多殺菌素SC 24 h內(nèi)的劑量—死亡率效應(yīng)最明顯，隨著處理濃度的降低，茶谷蛾死亡率下降。每個(gè)濃度處理的致死率均在48 h時(shí)達(dá)到最高，并且殺蟲效果能持續(xù)到96 h，而500倍稀釋液在24 h時(shí)死亡率能達(dá)到90%以上、48 h時(shí)達(dá)到100%，為本試驗(yàn)設(shè)置中的最優(yōu)劑量。4種藥劑的毒力測定發(fā)現(xiàn)，24、48、72、96 h時(shí)，6%乙基多殺菌素SC的LC50值均低于其他3種藥劑，毒力作用最大，在48 h時(shí)最大毒力顯現(xiàn)，且在48～96 h內(nèi)能保持同等毒殺力，證明6%乙基多殺菌素SC是一種見效快、持效時(shí)間長的可選殺蟲劑，對茶谷蛾的防治以500倍的稀釋液效果最佳。

茚蟲威屬噁二嗪類殺蟲劑，其作用機(jī)制獨(dú)特，雖沒有內(nèi)吸活性，但具有較好的耐雨水沖刷性能[20]，持效期長達(dá)14天左右[21]，是治理衛(wèi)生害蟲（白蟻和蟑螂）及鱗翅目害蟲的首選藥劑，在國內(nèi)已使用近20年[22-25]。本試驗(yàn)中15%茚蟲威EC體現(xiàn)出了高效的殺蟲活性，1000倍稀釋液在24 h即達(dá)到最大致死率，中毒反應(yīng)快、持效時(shí)間長，這與趙世文等[20]在茚蟲威對柞蠶幼蟲的毒性試驗(yàn)中的結(jié)果類似。在24～72 h內(nèi)15%茚蟲威EC毒力作用僅次于6%乙基多殺菌素SC，是24%蟲螨腈SC的1.73～5.67倍，這與商暾等[26]的研究結(jié)果存在差異，說明不同害蟲對每種藥劑的敏感性不同。

唑蟲酰胺主要通過與害蟲接觸后使其出現(xiàn)麻痹、難以活動和取食癥狀，最終影響生理代謝使其死亡[27]，兼具殺蟲譜廣、安全性高、復(fù)配性好等特點(diǎn)[10-11]，且在茶葉和土壤中易消解[28]；對柑橘木虱(Diaphorina citri)、茶小綠葉蟬(Empoasca pirisuga)和小菜蛾(Plutella xylostella)等具有良好的防治效果[29-31]。張丹等[11]的研究表明，15%唑蟲酰胺SC 850倍液對小菜蛾和菜青蟲的處理在藥后24、72 h的防效均在90%以上，而本研究中500倍稀釋液96 h后死亡率未達(dá)到90%，750倍稀釋液下死亡率最高，于48 h后達(dá)到86.67%。可能是不同昆蟲對同種藥劑的敏感性存在差異，且因?yàn)檫蛳x酰胺的作用機(jī)理，用藥后生效需要一定時(shí)間。毒力回歸測定表明，用藥48 h后毒力作用最大，且持效至96 h，72 h內(nèi)毒力作用次于15%茚蟲威乳油。

蟲螨腈主要通過胃毒及觸殺作用干擾昆蟲體內(nèi)細(xì)胞線粒體呼吸鏈上的電子傳遞，影響昆蟲體內(nèi)能量轉(zhuǎn)化，有殺蟲譜廣、適用作物多、延緩抗藥性、安全環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)[7]。莫志蓮等[7]的研究表明，240 g/L的蟲螨腈SC對柑橘全爪螨(Panonchus citri)有很好的防效，其1500倍液在藥后35天防效達(dá)90.92%以上。戴昌金[32]的研究表明10%蟲螨腈SC防治田甜菜夜蛾幼蟲在施藥后1天防效即達(dá)86.54%。本試驗(yàn)中24%蟲螨腈SC在24～72 h內(nèi)毒力最弱。不同稀釋倍數(shù)下的茶谷蛾致死率24 h內(nèi)均未超過60%，48 h后致死率開始上升，到96 h才達(dá)到最大致死率，毒力作用超過15%茚蟲威EC。相對于其他3種化學(xué)藥劑，對茶谷蛾3齡幼蟲的藥效發(fā)揮相對較慢，對茶谷蛾的毒殺作用存在明顯的時(shí)間效應(yīng)，這可能與其以內(nèi)吸殺蟲為主的作用機(jī)理及種群差異有關(guān)。

綜上所述，本試驗(yàn)中4種化學(xué)殺蟲劑對茶谷蛾3齡幼蟲均有較強(qiáng)毒殺作用，6%乙基多殺菌素SC 500倍稀釋液的致死率最高，毒力作用最大，其次為15%茚蟲威EC，二者對茶谷蛾幼蟲的毒殺速效性均可作為應(yīng)急防治茶谷蛾幼蟲的推薦藥劑。相對于其他3種藥劑，24%蟲螨腈SC作用發(fā)揮較緩，其96 h時(shí)才達(dá)到最大毒殺力。但殺蟲劑的篩選不能只依據(jù)室內(nèi)毒力測定結(jié)果下結(jié)論，還需要通過田間試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，要充分考慮田間環(huán)境、溫濕度天氣等外界因素[33-34]，延長時(shí)間檢驗(yàn)藥劑持效性，并綜合考慮藥劑殘留問題。目前生產(chǎn)上缺乏防治茶谷蛾的有效措施，本研究可為茶谷蛾田間藥劑防控的初篩提供基礎(chǔ)依據(jù)，并將繼續(xù)開展茶谷蛾的綠色防控研究。