巖黃連防治肝病的藥理作用及相關(guān)機制研究進展

李紅婷，金書屹，韓 鳳，羅 川，謝國勇**，秦民堅*

（1.中國藥科大學，江蘇 南京 210009；2.重慶市藥物種植研究所，重慶 南川 408435）

巖黃連，收載于《中藥大辭典》［1］，其基原主要為罌粟科紫堇屬石生黃堇（Corydalis saxicolarBunting）的帶根全草。主要分布于我國貴州、廣西、湖北、云南及四川等地，生長于石縫、石穴等，又因其功效似黃連，故得名巖黃連。其味苦、性涼；具清熱解毒，利濕，止痛止血的功效；主治肝炎，口舌糜爛，火眼，目翳，痢疾，腹瀉，腹痛，痔瘡出血等。巖黃連是壯族、藏族等民族和漢族民間用于治療急慢性肝炎、肝硬化等的特效草藥，目前已研制有巖黃連注射液等中成藥制劑［3-4］?，F(xiàn)代研究表明巖黃連的有效成分主要是生物堿，包括小檗堿、卡維丁、白蓬葉堿及脫氫卡維丁等［5］，具有抗肝纖維化［6］、抗病毒［7］、抗腫瘤［8］、抗菌［9］、神經(jīng)保護［10］等作用。

另據(jù)《中國植物志》記載［2］，罌粟科紫堇屬的毛黃堇（Corydalis tomentellaFranch.）、短葶黃堇（Corydalis pseudorupestrisLiden et Z.Y.Su）、川鄂黃堇（Corydalis wilsoniiN.E.Brown）及寬裂黃堇（Corydalis latiloba（Franch.）Hand.-Mazz.）在某些地區(qū)也作巖黃連使用。臨床上石生黃堇、毛黃堇、川鄂黃堇等都被作為巖黃連使用，且治療效果良好，但僅石生黃堇及毛黃堇有相應的質(zhì)量檢驗標準，多年來的研究主要集中在石生黃堇的藥理作用及其機制。然而石生黃堇資源稀缺，現(xiàn)已被列為國家二級保護植物，尋找石生黃堇的替代藥用植物資源很有必要。本文通過對巖黃連在抗肝損傷、抗肝纖維、干預黃疸性肝炎、抗病毒性肝炎等方面的藥理作用和相關(guān)機制及臨床應用研究進行綜述，以期為今后深入研究其藥理作用及其機制和開發(fā)利用紫堇屬藥用植物資源提供參考。

1 藥理作用及相關(guān)機制

1.1 抗肝損傷

肝損傷是由多種因素引起的肝細胞損傷［11-12］。研究表明，巖黃連總堿和毛黃堇水提物能夠有效抑制肝細胞損傷，減少肝細胞的凋亡和壞死。這與巖黃連能夠調(diào)節(jié)肝損傷模型動物體內(nèi)的肝組織中氧化應激的水平，以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine transaminase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（Aspartate aminotransferase，AST）、堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP）、血清總蛋白（Total protein）等肝功能生化指標水平有關(guān)［13-15］。吳方［16］、梁永紅等［17］將巖黃連總生物堿分別作用于肝損傷大鼠和小鼠，觀察到血清中ALT 和AST 的水平降低，丙二醛（Malondiadehyde，MDA）水平及超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）活力升高，提示巖黃連總生物堿的保護作用可能是通過對抗脂質(zhì)過氧化，從而提高肝細胞膜穩(wěn)定性，減輕細胞變性和壞死，最終促進肝細胞再生和修復。

1.2 抗肝纖維化

肝纖維化是機體對慢性損傷的主動性修復反應，肝纖維化在進展為肝硬化和肝細胞癌之前是可逆的［18-19］。研究表明，巖黃連能通過抑制肝星狀細胞的活化和減少膠原沉積以及抗脂質(zhì)過氧化而促進肝纖維化的逆轉(zhuǎn)［20］?；趲r黃連總堿的抗肝纖維化作用，近年來，多種研究思路被用于明確巖黃連防治肝纖維化的活性成分群。唐超玲［21］首次提出利用代謝組學技術(shù)，建立生物標志物指紋圖譜研究巖黃連，結(jié)果發(fā)現(xiàn)巖黃連提取物可以改變肝纖維化大鼠的代謝輪廓、升高O-乙酰糖蛋白（肝纖維化標志物之一）的含量。并確定了13個影響肝纖維化的潛在生物標志物，揭示了巖黃連可能是通過參與調(diào)節(jié)與肝纖維化相關(guān)的氨基酸、脂質(zhì)、糖代謝途徑以及作用于O-乙酰糖蛋白產(chǎn)生信號因子，從而實現(xiàn)抗肝纖維化的作用。脫氫卡維丁是巖黃連生物堿的主要成分之一，Wang［22］將脫氫卡維丁作用于肝纖維化大鼠，對263 個基因進行微陣列分析，驗證了4個異常表達的基因，結(jié)果顯示在肝纖維化的過程中，體內(nèi)膠原蛋白代謝和肝纖維化密切相關(guān)，脫氫卡維丁可能是通過減少氧化應激、促進膠原分解和調(diào)節(jié)纖維化相關(guān)基因來抑制肝纖維化。

劉旭文［6］將巖黃連提取液作用于肝纖維化大鼠后，將代謝組學和網(wǎng)絡(luò)藥理學相結(jié)合用于闡明巖黃連抗纖維化的機制，結(jié)果表明白屈菜紅堿和血根堿是巖黃連的主要潛在活性化合物，可能通過調(diào)節(jié)ALT活性治療肝纖維化。陸世銀等［23］將巖黃連提取物作用于大鼠肝星狀細胞（Hepatic stellate cell-T6，HSC-T6），通過組效關(guān)系初步確定了脫氫卡維丁、巴馬汀和小檗堿是巖黃連中抑制細胞增殖、誘導細胞凋亡貢獻最大的3 個成分，提示三者可能是巖黃連抗肝纖維化的活性成分群的重要組成部分。孟春梅等［24］在此基礎(chǔ)上，通過觀察脫氫卡維丁、巴馬汀及小檗堿處理后肝星狀細胞超微結(jié)構(gòu)的變化，發(fā)現(xiàn)三者不僅誘導了細胞凋亡也誘導了自噬，比較它們誘導凋亡與自噬的作用差異，結(jié)果提示自噬可能拮抗了HSC-T6 細胞的凋亡過程，保護了HSC-T6 細胞。因此，降低肝星狀細胞自噬的水平、促進肝星狀細胞凋亡可能成為靶向治療肝纖維化的新途徑。

1.3 抗膽汁淤積

急性肝內(nèi)膽汁淤積是由各種原因引起的肝臟病變，研究表明，膽汁淤積和肝細胞的膽汁酸轉(zhuǎn)運體表達異常密切相關(guān)［25-26］。巖黃連能夠減輕肝組織匯管區(qū)小葉間膽管增生及炎性細胞浸潤，改善肝功能指標，也可增加肝細胞膽汁酸轉(zhuǎn)運蛋白的表達，這可能是通過調(diào)控肝細胞對膽汁酸的攝入和轉(zhuǎn)出、促進肝細胞排泌膽汁、改善膽汁酸肝腸循環(huán)，從而達到降低膽汁淤積的效果［27］。袁衛(wèi)平［28］等用巖黃連配合介入療法治療伴有膽紅素升高的肝癌患者，結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者食欲增加，術(shù)后低熱癥狀改善，血清總膽紅素迅速下降，表明應用巖黃連注射液優(yōu)于常規(guī)保肝治療，并且有明顯的消炎利膽作用。

1.4 對脂肪肝的作用

陳萍等［29］以連續(xù)十周的高脂高糖飲食對C57BL/6 小鼠進行誘導造模，研究巖黃連總堿對代謝相關(guān)脂肪性肝病的治療作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)巖黃連能夠顯著降低血清總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇及游離脂肪酸等脂肪肝相關(guān)指標水平，表明巖黃連總堿能夠顯著改善小鼠肝組織脂肪病變及纖維化，進一步檢測到肝組織中能量代謝調(diào)節(jié)的關(guān)鍵分子AMPK 蛋白表達下降，胰島素信號通路相關(guān)的PI3K、AKT 蛋白表達顯著上調(diào)，提示巖黃連總堿對代謝相關(guān)脂肪性肝病的治療作用可能是通過激活AMPK/PI3K/AKT信號通路達成的。

1.5 抗病毒性肝炎

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的，以肝臟炎性病變?yōu)橹鞑⒖梢鸲嗥鞴贀p傷的一種傳染性疾?。?0-31］。鄭志想［7］對巖黃連注射液治療93例慢性乙型肝炎患者的療效進行研究，結(jié)果表明巖黃連注射液治療慢性乙型肝炎有明顯退黃降酶療效，能改善癥狀，且安全可靠。李慧梁［32］將巖黃連總堿作用于乙肝模型大鼠，血清ALT 活性檢測和肝組織病理學檢查結(jié)果表明，巖黃連總堿可減輕肝細胞嗜酸性變性、脂肪變性和水腫，減輕多發(fā)性碎片狀壞死和肝組織病變的程度。吳穎瑞等［33］將巖黃連總生物堿中分離得到的化合物進行抗乙肝病毒活性試驗，結(jié)果表明，首次從巖黃連中分離得到二氫白屈菜紅堿和salutaridine 對HBV 有較好的抑制作用，二氫白屈菜紅堿對乙肝表面抗原和E 抗原的IC50值均小于0.02 mg/mL，salutaridine 對乙肝表面抗原和E抗原的IC50值分別為0.09 mg/mL和0.15 mg/mL。

1.6 抗肝癌作用

原發(fā)性肝癌是目前我國常見的易發(fā)惡性腫瘤。鞠佳霓等［8］將巖黃連作用于肝癌HepG2 細胞，結(jié)果顯示巖黃連水提物能抑制HepG2 細胞的增殖和遷移，而且可以上調(diào)NF-κBp65 mRNA 及其蛋白的表達，表明巖黃連可能是通過上調(diào)NF-κB p65 的表達從而抑制HepG2 細胞增殖和遷移。唐超玲等［34］將巖黃連提取物作用于肝癌SMMC-7721細胞，基于組效關(guān)系分析發(fā)現(xiàn)巖黃連提取物成分中脫氫卡維丁和巴馬汀可能是巖黃連抗肝癌作用的潛在活性成分。

臨床上肝癌患者確診時多發(fā)展至中后期，此時肝動脈化療栓塞術(shù)是首選治療方式，但會引起多種不良反應［35］。李淑榮［36］以中晚期肝癌患者作為研究對象，對照組給予肝動脈化療栓塞術(shù)治療，治療組給予肝動脈化療栓塞術(shù)聯(lián)用巖黃連注射液治療。結(jié)果顯示，與對照組相比，治療組的治療有效率高出25.46%，疾病控制率達到了90.91%，隨訪結(jié)果表明肝動脈化療栓塞術(shù)聯(lián)用巖黃連注射液能夠降低不良反應發(fā)生，抑制復發(fā)，延長患者生存時間，從而改善預后。劉海珍等［37］同樣以中晚期肝癌患者作為研究對象，觀察到巖黃連注射液聯(lián)合放射介入化療栓塞治療后，觀察組治療效果優(yōu)于對照組，表明巖黃連注射液能夠有效改善放射介入化療栓塞臨床治療效果。

2 小結(jié)與展望

巖黃連是我國特有的民族、民間藥，有著長期應用的歷史，其治療多種肝臟疾病的療效確切。多年來，學者們對巖黃連治療肝臟疾病藥理作用機制的研究表明，其具有抗急慢性肝損傷、抗肝纖維化、干預膽汁淤積過程、抗病毒性肝炎、抗肝腫瘤等作用。以巖黃連提取物為原料的注射液也已上市，該制劑在臨床上目前主要用于肝臟疾病的治療及肝癌的輔助治療。有關(guān)巖黃連在肝臟疾病之外的其它應用大多處于實驗室研究階段，目前還鮮有臨床報道。關(guān)于不同基原、不同生境對巖黃連藥效學影響的研究目前還很少。巖黃連新劑型的開發(fā)及其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機制研究尚待進一步深入。巖黃連防治肝臟疾病的藥效作用成分群、相關(guān)靶點蛋白和作用機制，將是未來開發(fā)巖黃連資源及其質(zhì)量控制研究的重要方向。