急性缺血性腦卒中患者基質(zhì)金屬蛋白酶-9、 誘導(dǎo)型一氧化氮合酶、神經(jīng)元特異性烯醇化酶、 神經(jīng)導(dǎo)向因子 -1與神經(jīng)功能缺損及預(yù)后的關(guān)系

鄭亞彬，王 蔚

[南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京醫(yī)院（南京市第二醫(yī)院）神經(jīng)內(nèi)科，江蘇 南京 210003]

急性缺血性腦卒中（acute ischemic stroke，AIS）患者臨床多表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)、感覺障礙、偏癱、失語(yǔ)等神經(jīng)功能缺損癥狀，部分患者還會(huì)伴有昏迷、嘔吐、頭痛等癥狀，若不能得到及時(shí)有效的控制和治療，極易對(duì)患者的生命安全造成嚴(yán)重威脅。因此，對(duì)AIS患者的病情進(jìn)行早期診斷，有利于后續(xù)治療方案的制定，及時(shí)對(duì)病情予以控制，對(duì)患者的預(yù)后改善具有重要的意義。基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）屬于炎癥因子的一種，參與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成，其水平升高能夠誘發(fā)腦卒中的發(fā)生[1]；誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）正常生理?xiàng)l件下水平較低，在炎癥、神經(jīng)損傷條件下其表達(dá)水平升高，具有神經(jīng)毒性，可誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡，從而加重腦損傷[2]；神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）參與大腦神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞內(nèi)的糖酵解，體液中NSE含量較低，當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損時(shí)，神經(jīng)細(xì)胞膜的完整性遭到破壞，導(dǎo)致NSE從細(xì)胞外進(jìn)入血液中，其水平可直接反映大腦神經(jīng)系統(tǒng)的受損程度[3]；神經(jīng)導(dǎo)向因子-1（Netrin-1）在神經(jīng)系統(tǒng)中的表達(dá)較為廣泛，其參與神經(jīng)元遷移、血管生成和抗凋亡過程，可參與神經(jīng)系統(tǒng)受損后的功能和結(jié)構(gòu)重建[4]。因此，本研究旨在探討血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與AIS患者神經(jīng)功能缺損和預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年1月至2022年2月南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京醫(yī)院（南京市第二醫(yī)院）收治的81例AIS患者作為研究對(duì)象，其中男性52例，女性29例；年齡45～76歲，平均（64.17±6.25）歲；基礎(chǔ)疾?。禾悄虿?9例，高血壓35例，冠心病26例，其他7例。同時(shí)選取同期健康體檢者101例作為對(duì)照組，其中男性53例，女性48例；年齡46～78歲，平均（64.23±6.18）歲；基礎(chǔ)疾病：糖尿病28例，高血壓43例，冠心病28例，其他7例。AIS患者和對(duì)照組的一般資料經(jīng)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），組間具有可比性。診斷標(biāo)準(zhǔn)：所有AIS患者參照《臨床神經(jīng)內(nèi)科疾病診療》[5]中關(guān)于AIS的診斷標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)者；均屬于初次發(fā)病者；近3個(gè)月內(nèi)未采用抗凝、抗炎等相關(guān)治療者；肝、腎功能均無(wú)異常者等。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有急性感染者；自身免疫性疾病者；合并惡性腫瘤者等。本研究已經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京醫(yī)院（南京市第二醫(yī)院）醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有患者及家屬均知曉并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 檢測(cè)方法采集AIS患者入院次日、對(duì)照組研究對(duì)象受檢當(dāng)天空腹靜脈血5 mL，以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min后分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)血清MMP-9、iNOS、Netrin-1水平，采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清NSE水平。

1.2.2 分組、治療方法根據(jù)入院時(shí)美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）[6]評(píng)分情況，將AIS患者分為輕度組（NIHSS評(píng)分＜4分，25例）、中度組（NIHSS評(píng)分4～15分，30例）和重度組（NIHSS評(píng)分＞15分，26例）。AIS患者入院后均接受血糖、血脂和血壓調(diào)節(jié)，抗血小板、營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)、改善循環(huán)及功能鍛煉等治療，采用改良Rankin量表（mRS）[7]評(píng)分評(píng)估患者的預(yù)后情況并將其分為預(yù)后良好組（mRS評(píng)分0～2分，57例）和預(yù)后不良組（mRS評(píng)分3～6分，24例）。

1.3 觀察指標(biāo)①對(duì)AIS患者與對(duì)照組研究對(duì)象血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平進(jìn)行比較。②對(duì)不同神經(jīng)功能缺損程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平進(jìn)行比較。③對(duì)不同預(yù)后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平進(jìn)行比較。④分析血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與NIHSS、mRS評(píng)分的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，使用S-W法檢驗(yàn)計(jì)量資料數(shù)據(jù)是否服從正態(tài)分布，對(duì)于符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以(±s)表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，3組間比較采用單因素方差分析，以Pearson相關(guān)性分析法分析血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與神經(jīng)功能缺損和預(yù)后的相關(guān)性。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AIS患者與對(duì)照組研究對(duì)象血清MMP-9、iNOS、 NSE、Netrin-1水平比較AIS組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均高于對(duì)照組，血清Netrin-1水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 AIS患者與對(duì)照組研究對(duì)象血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

表1 AIS患者與對(duì)照組研究對(duì)象血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

注：AIS：急性缺血性腦卒中；MMP-9：基質(zhì)金屬蛋白酶-9；iNOS：誘導(dǎo)型一氧化氮合酶 ；NSE ：神經(jīng)元特異性烯醇化酶；Netrin-1：神經(jīng)導(dǎo)向因子-1。

組別 例數(shù) MMP-9(μg/L) iNOS(U/mL) NSE(ng/mL) Netrin-1(pg/mL)對(duì)照組 101 214.12±37.74 14.34±2.56 3.46±0.45 487.74±67.36 AIS組 81 325.78±43.62 28.97±3.38 38.99±4.74 226.11±35.22 t值 18.503 33.220 74.962 31.647 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 不同神經(jīng)功能缺損程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、 NSE、Netrin-1水平比較與輕度組比，中度組、重度組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均呈升高趨勢(shì)，血清Netrin-1水平呈降低趨勢(shì)，且組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 不同神經(jīng)功能缺損程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

表2 不同神經(jīng)功能缺損程度AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

注：與輕度組比，*P＜0.05，與中度組比，#P＜0.05。

組別 例數(shù) MMP-9(μg/L) iNOS(U/mL) NSE(ng/mL) Netrin-1(pg/mL)輕度組 25 257.96±37.48 25.46±3.57 10.35±2.67 327.12±45.74中度組 30 335.47±42.59* 29.47±3.24* 25.64±3.58* 234.58±36.80*重度組 26 412.63±58.61*# 32.58±3.73*# 51.37±6.94*# 143.52±19.61*#F值 69.063 26.410 492.115 169.086 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 不同預(yù)后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、 Netrin-1水平比較預(yù)后不良組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均高于預(yù)后良好組，血清Netrin-1水平低于預(yù)后良好組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表3。

表3 不同預(yù)后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

表3 不同預(yù)后AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平比較( ±s)

組別 例數(shù) MMP-9(μg/L) iNOS(U/mL) NSE(ng/mL) Netrin-1(pg/mL)預(yù)后良好組 57 273.25±30.41 21.36±3.53 18.97±3.85 289.77±35.36預(yù)后不良組 24 375.48±33.54 33.94±3.32 45.41±4.22 174.14±21.18 t值 13.400 14.898 27.430 14.901 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.4 血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與神經(jīng)功能缺損和預(yù)后的關(guān)系經(jīng)Pearson相關(guān)系數(shù)分析，血清MMP-9、iNOS、NSE水平與NIHSS、mRS評(píng)分呈正相關(guān)，血清Netrin-1與NIHSS、mRS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表4。

表4 血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平 與神經(jīng)功能缺損和預(yù)后的關(guān)系

3 討論

AIS具有較高的發(fā)病率、致殘率和致死率，且超過一半以上的存活患者均存在不同程度的后遺癥，嚴(yán)重影響患者的身心健康和生活質(zhì)量，且給患者家庭帶來較大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[8]。因此，盡早對(duì)患者的病情和預(yù)后狀況作出準(zhǔn)確的評(píng)估，可為臨床治療提供較好的指導(dǎo)，及時(shí)有效地控制病情進(jìn)展，促進(jìn)患者預(yù)后的改善。

MMP-9主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞和吞噬細(xì)胞等合成和分泌，其含量增高后可加重炎癥反應(yīng)，破壞腦血管基底膜，嚴(yán)重者可導(dǎo)致腦水腫的發(fā)生[9]。iNOS、NSE主要參與腦組織的繼發(fā)性損傷過程，與神經(jīng)細(xì)胞的凋亡過程具有同步的規(guī)律。有研究顯示，Netrin-1的高表達(dá)可降低腦梗死面積，其血清含量與神經(jīng)功能密切相關(guān)，可促進(jìn)神經(jīng)行為的轉(zhuǎn)歸[10]。NIHSS評(píng)分是臨床評(píng)估腦卒中患者神經(jīng)功能缺損情況的重要指標(biāo)；mRS評(píng)分常用來反映腦卒中患者預(yù)后改善情況。本研究結(jié)果顯示，AIS組患者血清 MMP-9、iNOS、NSE水平均高于對(duì)照組，血清Netrin-1水平低于對(duì)照組；與輕度組比，中度組、重度組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平呈升高趨勢(shì)，血清Netrin-1水平呈降低趨勢(shì)，表明AIS患者的血清MMP-9、iNOS、NSE水平越高，血清Netrin-1水平越低，其神經(jīng)功能缺損程度越嚴(yán)重，其可作為預(yù)測(cè)評(píng)估AIS患者嚴(yán)重程度的指標(biāo)，與沈杰等[11]研究結(jié)果一致。AIS患者的腦組織受到嚴(yán)重?fù)p傷，血流量顯著下降，致使?jié)⑵频陌邏K加重了機(jī)體的炎癥反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致MMP-9因子大量釋放至血液中，其含量明顯升高，進(jìn)一步對(duì)血腦屏障造成損傷，加重神經(jīng)功能缺損[12]。AIS患者發(fā)病后，其腦組織神經(jīng)元受到嚴(yán)重的損傷，致使iNOS、NSE因子大量分泌和釋放，血清含量明顯升高[13]。Netrin-1具有調(diào)節(jié)血管生成和軸突導(dǎo)向的作用，在神經(jīng)功能受損時(shí)其水平顯著降低，致使神經(jīng)元再生功能受到抑制，加重病情[14]。本研究結(jié)果顯示，預(yù)后不良組患者血清MMP-9、iNOS、NSE水平均高于預(yù)后良好組，血清Netrin-1水平低于預(yù)后良好組；經(jīng)Pearson相關(guān)系數(shù)分析，血清MMP-9、iNOS、NSE水平與NIHSS、mRS評(píng)分成正相關(guān)，血清Netrin-1與NIHSS、mRS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，表明AIS患者血清MMP-9、iNOS、NSE、Netrin-1水平與神經(jīng)功能缺損、預(yù)后具有一定的相關(guān)性，可作為對(duì)患者預(yù)后的預(yù)測(cè)評(píng)估指標(biāo)。血清MMP-9含量較高表明機(jī)體炎癥反應(yīng)較為嚴(yán)重，會(huì)促進(jìn)患者動(dòng)脈粥樣硬化的破裂，逐漸增大梗死面積，另外iNOS、NSE通常參與腦損傷疾病的病情進(jìn)展，其含量較高可增加腦梗死面積，影響患者的預(yù)后；Netrin-1血清含量升高可有助于血管灌注和神經(jīng)元再生，減少神經(jīng)元凋亡和減輕缺血再灌注造成的損傷，進(jìn)而改善 預(yù)后。

綜上，AIS患者的血清MMP-9、iNOS、NSE水平越高，血清Netrin-1水平越低，其神經(jīng)功能缺損程度越嚴(yán)重，預(yù)后越差，對(duì)以上指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)可對(duì)患者的病情進(jìn)行判斷，為臨床后續(xù)治療提供一定的參考依據(jù)，并可作為對(duì)預(yù)后情況的預(yù)測(cè)指標(biāo)，值得臨床進(jìn)一步推廣應(yīng)用。