山桐子葉際微生物群落多樣性、結(jié)構(gòu)及功能預(yù)測(cè)分析

周慧娜，張 濤，徐自恒，薛曉焱，馮 建，劉 震，王艷梅，蔡齊飛，耿曉東，代 莉 ，李明婉 ，李 志

（1. 河南農(nóng)業(yè)大學(xué) a. 林學(xué)院；b. 中原地區(qū)森林資源培育國(guó)家林業(yè)局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南 鄭州 450002；2. 棕櫚生態(tài)城鎮(zhèn)發(fā)展股份有限公司，河南 鄭州 450000）

微生物是生態(tài)環(huán)境的重要組成部分，對(duì)生態(tài)環(huán)境的穩(wěn)定發(fā)揮著重要作用，它們的生存繁衍影響著植株的健康生長(zhǎng)。與土壤、根際相比，葉際微生物種類(lèi)較少[1]，但仍發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。葉際微生物（Phyllospheric microorganism）一般是指生活在植物地上部分，主要棲息于葉片的微生物群落[2]。對(duì)葉際微生物而言，葉際環(huán)境是一個(gè)非?？量糖也环€(wěn)定的生境，生活在葉表的微生物經(jīng)常要面臨水分和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不足，以及劇烈變化的強(qiáng)光、高溫和高紫外線(xiàn)等的影響[1]，受當(dāng)?shù)丨h(huán)境影響明顯[3-4]，即便如此，植物葉片仍存在大量不同性質(zhì)的微生物，比如真菌、細(xì)菌和病毒等[5]。葉際微生物與植物體共同生長(zhǎng)、相互依存、相互影響、相互制約，彼此形成一個(gè)緊密的整體，它們是微生物生態(tài)系統(tǒng)的主要成員，其代謝活動(dòng)與代謝產(chǎn)物可以促進(jìn)宿主適應(yīng)環(huán)境，維持生態(tài)系統(tǒng)平衡[6]。其中，有可以固氮、促進(jìn)宿主生長(zhǎng)、抑制病原菌、降解農(nóng)殘農(nóng)藥等正面功能的有益菌，如蘇云金芽孢桿菌Bacillus thuringiensis是一種常見(jiàn)的葉際細(xì)菌，作為生物殺蟲(chóng)劑，它在保護(hù)作物和防治病蟲(chóng)害方面起到了很大作用。由于長(zhǎng)期使用同一類(lèi)型的殺蟲(chóng)劑，昆蟲(chóng)易產(chǎn)生抗性[7]，而蘇云金芽孢桿菌轉(zhuǎn)基因作物的廣泛應(yīng)用，極大地減少了農(nóng)藥的使用，降低了環(huán)境污染，有助于生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性[8]。另一方面，也存在著引發(fā)病害、抑制植物生長(zhǎng)等負(fù)面效應(yīng)的病原菌[9]，如青枯假單胞菌Ralstonia solanacearum，俗稱(chēng)青枯菌，是危害嚴(yán)重的世界性植物病原細(xì)菌[10]，廣泛分布于熱帶、亞熱帶、溫帶地區(qū)[11]，青枯菌可引起煙草、花生和番茄等萎蔫病，可侵染40多個(gè)科200多種植物，寄主范圍極廣[12]。目前，對(duì)于植物微生物的研究更多集中于土壤微生物、根際微生物以及微生物肥料等的研究[13-16]，相比之下，有關(guān)葉際微生物的研究相對(duì)較少。

山桐子Idesia polycarpaMaxim.，又名水冬瓜，為大風(fēng)子科Flacourtiaceae山桐子屬I(mǎi)desia落葉喬木，分布廣泛，樹(shù)干通直美觀(guān)，極具觀(guān)賞價(jià)值[17]。山桐子果和種子均可榨油，干果含油率達(dá)35%左右[18]，木材質(zhì)地松軟，適宜做工藝品家具等[19]。油脂中亞油酸含量很高，山桐子果實(shí)中提取的油脂可以加工出優(yōu)良的食油、柴油以及潤(rùn)滑油等，其油脂還可以通過(guò)加工用于制藥，具有降低血脂、血壓等功效[20]。由此可見(jiàn)，山桐子是一種有著觀(guān)賞性、果材兩用的多功能速生經(jīng)濟(jì)型樹(shù)種[21]。目前，對(duì)于山桐子的研究，多集中于山桐子油、種子、果實(shí)以及栽培扦插等方面，對(duì)于山桐子微生物方面的研究尚不多見(jiàn)。微生物在自然環(huán)境中的相互作用非常復(fù)雜，它們的數(shù)量和多樣性以及組成的異質(zhì)性使其更加復(fù)雜化[22]。本研究通過(guò)分析健康與感病山桐子葉際微生物之間的群落多樣性特征，探明微生物群落的主要差異，并對(duì)不同菌群進(jìn)行功能預(yù)測(cè)分析，為山桐子科研及生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)區(qū)概況

試驗(yàn)地選在河南省鄭州市金水區(qū)河南農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)試驗(yàn)站，地理位置 113°38′E，34°47′N(xiāo)；海拔為108 m，該地區(qū)最高氣溫為43℃，最低氣溫為-17.9℃，年平均氣溫為14.2℃，年降水量為650.1 mm，無(wú)霜期為215 d，全年光照時(shí)間約為2 400 h，屬于典型的半干旱半濕潤(rùn)大陸性季風(fēng)氣候。土壤為潮土，pH值為中性[23-24]。

1.2 樣品采集

選擇生長(zhǎng)在鄭州地區(qū)的山桐子為試驗(yàn)材料，株行距為4 m×4 m，山桐子采用常規(guī)栽培方法。分別采集健康與感病山桐子葉片，山桐子選擇樹(shù)體大小一致，且每株選擇相同部位的葉片。將山桐子葉片清洗干凈，用75%的酒精消毒4～5 min，用蒸餾水清洗3～4次；將處理過(guò)的葉片放在研缽中加入液氮進(jìn)行搗碎處理，之后放入離心管中，應(yīng)用CTAB方法提取DNA[25]。

1.3 高通量測(cè)序

使用上海派森諾生物科技有限公司Illumina平臺(tái)對(duì)樣品的16S rRNA和ITS基因測(cè)序。對(duì)細(xì)菌的16S V3V4區(qū)（測(cè)序策略：Novaseq-PE250）和真菌的ITS V1區(qū)（測(cè)序策略：測(cè)序策略：Miseq-PE250）進(jìn)行測(cè)序。細(xì)菌的上游引物名稱(chēng)：338F上游引物序列：ACTCCTACGGGAGGCAGCA；下游引物名稱(chēng)：806R下游引物序列：GGA CTACHVGGGTWTCTAAT[26]。真菌的上游引物名稱(chēng)：ITS5F上游引物序列：GGAAGTAAAAG TCGTAACAAGG；下游引物名稱(chēng)：ITS1R下游引物序列：GCTGCGTTCTTCATCGATGC[27]。再將擴(kuò)增產(chǎn)物用1.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物純化效果，測(cè)定純化后PCR產(chǎn)物的濃度，將純化產(chǎn)物等摩爾數(shù)混合，以備上機(jī)前純化和測(cè)序儀分析。

1.4 數(shù)據(jù)處理

運(yùn)用QIIME軟件（Quantitative Insights Into Microbial Ecology，v1.8.0）進(jìn)行序列過(guò)濾，以保證分析結(jié)果準(zhǔn)確性。去除葉綠體來(lái)源和線(xiàn)粒體來(lái)源的序列。運(yùn)用Mothur軟件去除嵌合體序列，得到后續(xù)分析的優(yōu)質(zhì)序列。使用QIIME軟件，對(duì)獲得的序列按97%的序列相似度進(jìn)行歸并和OTU劃分，獲得每個(gè)OTU所對(duì)應(yīng)的分類(lèi)學(xué)信息，并使用QIIME軟件計(jì)算多樣性指數(shù)[28]。運(yùn)用SPSS 26.0軟件對(duì)健康山桐子與感病山桐子葉際微生物多樣性指數(shù)進(jìn)行顯著性分析。采用PICRUSt2方法分析預(yù)測(cè)山桐子葉際菌群的代謝功能。

2 結(jié)果與分析

2.1 健康山桐子與感病山桐子葉際微生物的豐富度及多樣性

健康（Y）與感?。˙Y）山桐子葉際細(xì)菌獲得有效序列分別為211 375、202 030，真菌分別獲得有效序列314 050、273 779（表1）。采用97%的序列相似度作為OTUs（Operational Taxonomic Unit，OTUs））的劃分閾值。如圖1所示，健康山桐子與感病山桐子細(xì)菌OTUs數(shù)量分別為212和198個(gè)，兩者共有的OTUs數(shù)目為29個(gè)，特有OTUs數(shù)量分別為183和169個(gè)。健康山桐子與感病山桐子真菌OTUs數(shù)量分別為101和79個(gè)，兩者共有的OTUs數(shù)目為31個(gè)，特有OTUs數(shù)量分別為70和48個(gè)。

表1 樣品序列信息Table 1 Sample sequence information

分析正常山桐子葉片與感病山桐子葉片的Chao1、Observed_species、Pielou_e、Shannon 和Simpson多樣性指數(shù)（表2），發(fā)現(xiàn)山桐子健康葉片細(xì)菌及真菌的豐富度和多樣性均高于感病葉片，說(shuō)明山桐子感病在一定程度上降低了其豐度和多樣性，且Chao1指數(shù)的顯著差異表明健康山桐子葉際細(xì)菌豐富度顯著高于病葉（P＜0.05）。

2.2 健康山桐子與感病山桐子葉際細(xì)菌群落組成

測(cè)序結(jié)果表明，山桐子葉際細(xì)菌隸屬于16個(gè)門(mén)、43個(gè)綱、90個(gè)目、143個(gè)科、199個(gè)屬。如圖2A，在門(mén)水平上，山桐子葉際細(xì)菌主要為變形菌門(mén)Proteobacteria。隸屬于該門(mén)的細(xì)菌豐度分別占健康和感病植株的77.66%和70.29%。變形菌門(mén)Proteobacteria、藍(lán)細(xì)菌門(mén)Cyanobacteria、酸桿菌門(mén)Acidobacteria相對(duì)豐度相比健康植株，感病植株中相對(duì)豐度均有所下降；相比健康植株，厚壁菌門(mén)Firmicutes、放線(xiàn)菌門(mén)Actinobacteria、擬桿菌門(mén)Bacteroidetes、綠彎菌門(mén)Chloroflexi相對(duì)豐度在感病植株中均有所增加。

圖1 山桐子葉際細(xì)菌、真菌韋恩圖Fig. 1 Venn diagram of bacteria and fungi in leaf area of I. polycarpa

表2 樣品微生物多樣性指數(shù)Table 2 Microbial diversity index of samples

在葉際細(xì)菌屬水平上（圖2B），不動(dòng)桿菌屬Acinetobacter和別生根瘤菌-新生根瘤菌-寄生根瘤菌-根瘤菌屬Allorhizobium-Neorhizobium-Pararhizobium-Rhizobium的相對(duì)豐度較高，不動(dòng)桿菌屬在健康和感病植株中相對(duì)豐度分別為32.67%和24.90%，別生根瘤菌-新生根瘤菌-寄生根瘤菌-根瘤菌屬在兩者中相對(duì)豐度分別為11.64%和8.47%，這兩個(gè)屬以及伯克霍爾德氏菌屬Burkholderia-Caballeronia-Paraburkholderia、短波單胞菌屬Brevundimonas在感病植株的相對(duì)豐度相對(duì)于健康植株均有所下降，Escherichia-Shigella屬感病植株的相對(duì)豐度相較于健康植株上升較多（1.14%、5.46%）。

檢測(cè)出健康山桐子葉際細(xì)菌特有菌屬92類(lèi)，除去未分類(lèi)及未培養(yǎng)菌屬，特有菌屬相對(duì)豐度排名前三的是：Candidatus_Competibacter、水桿菌屬Aquabacterium以及海洋芽胞桿菌屬Oceanobacillus；感病山桐子葉際特有細(xì)菌菌屬56類(lèi)，除去未分類(lèi)及未培養(yǎng)菌屬，相對(duì)豐度排名前三的是動(dòng)球菌屬Kineococcus、脆弱球菌屬Craurococcus及薄層菌屬Hymenobacter。

2.3 健康山桐子與感病山桐子的葉際真菌組成分析

測(cè)序結(jié)果表明，山桐子葉際真菌隸屬于8個(gè)門(mén)、18個(gè)綱、37個(gè)目、71個(gè)科、101個(gè)屬。如圖3A，在門(mén)水平上，山桐子葉際真菌優(yōu)勢(shì)菌落為子囊菌門(mén)Ascomycota、擔(dān)子菌門(mén)Basidiomycota，分別占健康和感病植株的85.15%和93.54%。其中子囊菌門(mén)Ascomycota的分別占健康和感病植株77.59%和89.50%，是相對(duì)豐度最高的門(mén)。經(jīng)分析，擔(dān)子菌門(mén)Basidiomycota在正常植株（7.56%）是感病植株（4.04%）的1.9倍，斜紋菌門(mén)Olpidiomycota在正常植株（5.34%）是感病植株（1.83%）的2.9倍，毛霉菌門(mén)Mucoromycota在健康植株（1.50%）是感病植株（0.65%）的2.3倍，三者相比，健康植株，感病植株的相對(duì)豐度都大幅降低。

在屬水平上（圖3B），健康植株中鏈格孢屬Alternaria、亞隔孢殼屬Didymella相對(duì)豐度均在15%以上，鏈格孢屬Alternaria在感病植株中相對(duì)豐度占一半以上，是感病植株的主要菌屬。相對(duì)豐度前十的菌屬里，亞隔孢殼屬Didymella（15.43%，8.95%）、油壺菌屬Olpidium（5.34%，1.83%）、球腔菌屬M(fèi)ycosphaerella（4.57%，1.05%）健康植株高于感病植株，鏈格孢屬Alternaria在感病葉片里明顯增多，其余菌屬差異不大。

圖2 健康山桐子與感病山桐子主要細(xì)菌群在門(mén)（A）、屬（B）水平上相對(duì)豐度Fig. 2 Relative abundance of the main bacterial groups at phylum (A) and genus (B) levels of healthy and susceptible I. polycarpa

圖3 健康山桐子與感病山桐子主要真菌群在門(mén)（A）、屬（B）水平上相對(duì)豐度Fig. 3 The relative abundance of the main fungi in healthy and susceptible I. polycarpa at phylum (A) and genus (B) levels

2.3.1 鏈格孢屬Alternaria

鏈格孢屬Alternaria是一類(lèi)世界范圍廣泛分布的真菌，存在于自然界的不同基質(zhì)上，可作為腐生菌、寄生菌和內(nèi)生菌。作為腐生菌，鏈格孢以極強(qiáng)的適應(yīng)能力存活于水、土壤、空氣和紙等不同基質(zhì)上，部分可在已發(fā)病的寄主組織上再次定植，占領(lǐng)其他病原物造成的病斑位點(diǎn)、受損部位或其他衰弱組織等，加重其他病害的發(fā)生。鏈格孢屬病葉相比健康葉片增加了215%，推測(cè)該屬為葉片致病的主要菌屬。

2.3.2 亞隔孢殼屬Didymella

亞隔孢屬真菌是一類(lèi)重要的植物病害病原菌。徐兵劃等[29]研究報(bào)道亞隔孢殼屬真菌Didymella.bryoniae（Auersw.）可引起蔓枯病，危害甜瓜、黃瓜、哈密瓜、西瓜、西葫蘆等至少12個(gè)屬，23種葫蘆科作物。亞隔孢殼屬Didymella是唯一與莖點(diǎn)霉屬和殼二孢屬真菌正確關(guān)聯(lián)的有性型屬[30]，莖點(diǎn)霉屬由Fries（1821）建立，該屬真菌是一類(lèi)重要的植物病原菌，分布廣泛且具有豐富的多樣性,主要引起植物葉片及莖桿上的病斑，可導(dǎo)致作物產(chǎn)量嚴(yán)重?fù)p失，其中一些物種還被列為檢疫性真菌[31]。山桐子病葉中亞隔孢殼屬數(shù)量相較于健康葉片降低了42%。

2.3.3 油壺菌屬Olpidium

油壺菌屬Olpidium是壺菌目Chytridiales中的一種生物內(nèi)生的、整體產(chǎn)果式真菌。其中Olpidium uicia可引起蠶豆癭病，是蠶豆主要和最具破壞性的疾病[32]。該屬相對(duì)于健康葉片，病葉中相對(duì)豐度下降了66%。

2.3.4 健康山桐子和感病山桐子葉際真菌特有屬

檢測(cè)出健康山桐子葉際真菌特有菌屬34類(lèi)，除去未分類(lèi)及未培養(yǎng)菌屬，特有菌屬相對(duì)豐度排名前三的是：赤霉菌屬Gibberella、毛殼菌屬Chaetomium及擬棘殼孢屬Pyrenochaetopsis；感病山桐子葉際特有菌屬29類(lèi)，除去未分類(lèi)及未培養(yǎng)菌屬，特有菌屬相對(duì)豐度排名前三的是：熱子囊菌屬Thermoascus、黃絲曲霉屬Talaromyces及裸腳菇屬Gymnopus。

2.4 山桐子葉際微生物群落功能預(yù)測(cè)分析

2.4.1 細(xì)菌群落

基于KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)細(xì)菌群落進(jìn)行分析（圖4），結(jié)果表明在第一層級(jí)水平，有生物進(jìn)程（Cellular Processes）、環(huán)境信息處理（Environmental Information Processing）、遺傳信息處理（Genetic Information Processing）、 人 類(lèi) 疾 ?。℉uman Diseases）、代謝（Metabolism）和有機(jī)體系統(tǒng)（Organismal Systems）6種代謝通路。其中和代謝有關(guān)的基因相對(duì)豐度最高，為81.34%。

圖4 PICRUSt2預(yù)測(cè)細(xì)菌群落的功能（level2）Fig. 4 Bacterial communities functions predicted by PICRUSt2 (level2)

在KEGG第二層級(jí)上研究代謝功能，豐度排名位于前三的代謝功能有輔助因子和維生素的代 謝（Metabolism of cofactors and vitamins）、氨基酸代謝（aminoacid metabolism）和碳水化合物代謝（carbohydrate metabolism），其豐度分別為16.57%、12.02%和11.63%。同時(shí)，還存在能量代謝（energy metabolism）、其他氨基酸 代 謝（Metabolism of other amino acids）、 萜類(lèi)化合物和聚酮類(lèi)化合物的代謝（Metabolism of terpenoids and polyketides）、異源生物降解和代謝（xenobiotics biodegradation and metabolism） 、脂代謝（lipid metabolism）、其他次生代謝產(chǎn)物的合成（biosynthesis of other secondary metabolites）、聚糖生物合成與代謝（glycan biosynthesis and metabolism）、 核 苷 酸 代 謝（nucleotide metabolism）、折疊，分類(lèi)和降解（Folding,sorting and degradation）、復(fù)制和修復(fù)（replication and repair）、翻譯（translation）等。

2.4.2 真菌群落

基于MetaCyc數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)真菌群落進(jìn)行分析（圖5），在山桐子葉際真菌群落有5個(gè)代謝通路，分別為：生物合成（Biosynthesis）、退化/利用/同化（Degradation/Utilization/Assimilation）、前體代謝物和能量的產(chǎn)生（Generation of Precursor Metabolite and Energy）、 聚 糖 通 路（Glycan Pathways）和代謝集群（Metabolic Clusters）。主要功能類(lèi)群為生物合成（44.74%）、前體代謝物和能量的產(chǎn)生（35.57%）。

圖5 PICRUSt2預(yù)測(cè)真菌群落的功能（level2）Fig. 5 Fungal communities functions predicted by PICRUSt2 (level2)

在第二層級(jí)上，主要功能有核苷和核苷酸的生物合成（Nucleoside and Nucleotide Biosynthesis）、輔因子，輔基，電子載體和維生素生物合成（Cofactor, Prosthetic Group, Electron Carrier, and Vitamin Biosynthesis）、氨基酸生物合成（Amino Acid Biosynthesis）、電子轉(zhuǎn)移（Electron Transfer）和呼吸（Respiration）。

3 討 論

在本研究中，發(fā)現(xiàn)山桐子健康葉片細(xì)菌及真菌豐富度和多樣性均高于感病葉片，說(shuō)明山桐子感病在一定程度上降低了其豐度和多樣性，與前人研究[33-35]得出健康植株比感病植株擁有更高的豐富度和多樣性的結(jié)論一致。葉際細(xì)菌中變形菌門(mén)Proteobacteria、擬桿菌門(mén)Bacteriodetes等為最具代表性的優(yōu)勢(shì)類(lèi)群，不動(dòng)桿菌屬Acinetobacter、假單胞菌屬Pseudomonas等在不同植物葉際中也被反復(fù)檢測(cè)到；門(mén)水平上的子囊菌門(mén)Ascomycota、擔(dān)子菌門(mén)Basidiomycota是葉際真菌的優(yōu)勢(shì)類(lèi)群，屬水平上枝孢屬Cladosporium、鏈格孢屬Alternaria等較為常見(jiàn)[36]。對(duì)比兩者之間的差異性發(fā)現(xiàn)鏈格孢屬Alternaria真菌在健康山桐子的相對(duì)豐度遠(yuǎn)低于感病山桐子的相對(duì)豐度。鏈格孢屬Alternaria屬于子囊菌門(mén)、座囊菌綱、格孢腔目和孢腔菌科[37]，對(duì)應(yīng)健康山桐子與感病山桐子的葉際真菌優(yōu)勢(shì)門(mén)、綱、目、科，因此可能是由于鏈格孢屬Alternaria在健康山桐子與感病山桐子中的顯著性差異導(dǎo)致了山桐子感病。鏈格孢屬Alternaria真菌同時(shí)具有寄生和腐生性，可以適應(yīng)多種不同的環(huán)境條件，故繁殖能力較強(qiáng)[38]。它們分泌的酶可以降解寄主植物的保護(hù)組織，降低植株抵御病原體的能力，幫助病原體入侵、定植植物[39]，造成多種植物感病[40]。

亞隔孢殼屬Didymella、油壺菌屬Olpidium、球腔菌屬M(fèi)ycosphaerella真菌感病植株相較于健康植株相對(duì)豐度都出現(xiàn)不同程度下降，由此推測(cè)，鏈格孢屬真菌的增長(zhǎng)抑制了上述菌群的生存和繁殖。在馮麗等[41]的研究中，深海沉積物中分離出的包括鏈格孢屬在內(nèi)的幾個(gè)屬對(duì)多種指示細(xì)菌均產(chǎn)生了不同程度的抑制。因此，感病山桐子葉際細(xì)菌中除葉綠體線(xiàn)粒體以外的幾個(gè)菌落相對(duì)豐度降低可能也與鏈格孢屬菌落的抑制作用有關(guān)。

通過(guò)PICRUSt2功能預(yù)測(cè)，與代謝、生物合成及能量產(chǎn)生有關(guān)的微生物群落活躍度較高。其中，輔助因子和維生素的代謝在細(xì)菌群落中活躍度最高，其在維持細(xì)胞正常生長(zhǎng)和正常代謝，維持機(jī)體正常生命活動(dòng)中不可或缺。真菌群落內(nèi)核苷和核苷酸的生物合成功能群豐度最高，它們是生物體內(nèi)核酸的重要組成部分，參與多種代謝和調(diào)節(jié)活動(dòng)。

本研究基于高通量測(cè)序?qū)】瞪酵┳优c感病山桐子的葉際細(xì)菌和葉際真菌群落多樣性、組成及功能預(yù)測(cè)進(jìn)行了研究，其中健康山桐子與感病山桐子的葉際細(xì)菌群落多樣性指數(shù)總體來(lái)說(shuō)差異不顯著，但一些豐度較低的菌屬在健康山桐子與感病山桐子之間有明顯差異，如短波單胞菌屬Brevundimonas在健康植株（2.08%）是感病植株（0.74%）的2.8倍，這說(shuō)明了雖然葉際細(xì)菌群落多樣性指數(shù)無(wú)顯著差異，但是兩者之間的群落組成仍存在差異[42]。還有一些相對(duì)豐度不高的微生物菌落，不代表其在植物中沒(méi)有作用或作用微弱，在某些情況下它們是影響植物多種生理功能的主要因素[43]，其對(duì)植物的影響還有待進(jìn)一步探究。

微生物群落相互之間以及與環(huán)境之間息息相關(guān)、互相作用[44-46]，本文重點(diǎn)關(guān)注優(yōu)勢(shì)菌落對(duì)山桐子產(chǎn)生的影響，后續(xù)將對(duì)可能產(chǎn)生關(guān)鍵作用的非優(yōu)勢(shì)菌落，以及菌落之間聯(lián)合效應(yīng)對(duì)山桐子的作用進(jìn)行深入分析，以期為山桐子更好地生長(zhǎng)發(fā)育提供參考依據(jù)。

4 結(jié) 論

健康山桐子健康植株葉際細(xì)菌及真菌豐富度和多樣性均高于感病植株；檢測(cè)出山桐子葉際細(xì)菌主要菌門(mén)為變形菌門(mén)，真菌優(yōu)勢(shì)菌落為子囊菌門(mén)和擔(dān)子菌門(mén)，優(yōu)勢(shì)菌屬為鏈格孢屬和亞隔孢殼屬，鏈格孢屬真菌可能是山桐子感病的關(guān)鍵因子；功能預(yù)測(cè)結(jié)果表明，與代謝、生物合成及能量產(chǎn)生有關(guān)的微生物群落是活躍度最高的。