環(huán)糊精酶改性對淀粉結(jié)構(gòu)及消化特性的影響

紀(jì)杭燕，金征宇*

（1.食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室，江南大學(xué)，江蘇 無錫 214122；2.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇 無錫 214122；3.江南大學(xué)食品營養(yǎng)與安全協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 無錫 214122）

淀粉是自然界中來源最為廣泛的碳水化合物資源之一，在小麥、玉米等谷物的種子和甘薯、木薯等塊根中儲存豐富。淀粉是人類主要的膳食碳水化合物，對維持能量代謝水平和保證機體健康有重要作用。淀粉消化是餐后重要的代謝反應(yīng)之一，對餐后血糖水平和胰島素調(diào)節(jié)至關(guān)重要，選擇性的攝入慢消化速率淀粉對各類糖代謝疾病的預(yù)防和緩解具有重要意義[1-2]。淀粉依據(jù)其營養(yǎng)消化組分通常被劃分為快消化淀粉 （Rapidly Digestible Starch，RDS）、慢消化淀粉（Slowly Digestible Starch，SDS）、抗性淀粉（Resistant Starch，RS）等3 類組分[3]。在不同的淀粉中RDS 的質(zhì)量分?jǐn)?shù)比例通?？蛇_(dá)70%～80%，增加淀粉的慢消化和抗性組分對淀粉營養(yǎng)品質(zhì)的提升具有重要價值[4-5]。

淀粉是由交替的“生長環(huán)”的無定形和半結(jié)晶層組成，其無定形和半結(jié)晶層分別主要由直鏈淀粉（質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%～35%）和支鏈淀粉（質(zhì)量分?jǐn)?shù)65%～85%）構(gòu)成。為了提升淀粉的營養(yǎng)品質(zhì)，通常采用物理、化學(xué)和生物等手段對淀粉結(jié)構(gòu)進行修飾，其中濕熱處理、脈沖電場以及酶法催化由于其環(huán)境友好特性而受到廣泛關(guān)注[6-7]。相比于其他方法，淀粉的酶法改性還具有反應(yīng)機理明晰、催化效率高以及專一性強等優(yōu)勢[8-9]。α-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶 （α-Glucanotransferase，AGTase）是一類能夠通過轉(zhuǎn)苷的作用方式對淀粉糖鏈排列和連接方式進行重構(gòu)從而達(dá)到提升淀粉原有特性的酶類[10-11]。近年來，越來越多的報道表明，AGTase 在提升淀粉基食品的營養(yǎng)消化品質(zhì)、控制其在體內(nèi)消化產(chǎn)生的葡萄糖的釋放具有十分重要的作用。環(huán)糊精葡糖基轉(zhuǎn)移酶（Cyclodextrin glucosyltransferase，CGTase）是一類通過環(huán)化活力將淀粉及其衍生物轉(zhuǎn)化為環(huán)糊精（Cyclodextrin，CD）的酶類。作為典型的AGTase，該酶在改性淀粉中的應(yīng)用效果良好。據(jù)報道，CGTase可與分支酶協(xié)同作用淀粉以提升淀粉的慢消化性質(zhì)[12]。此外，CGTase 在糊化溫度以下處理顆粒淀粉，所得到的產(chǎn)物有利于維持小鼠的餐后血糖水平[13]。

在CGTase 改性淀粉的過程中，通常會有高比例的CD 產(chǎn)生，過量的CD 可能會有導(dǎo)致腎毒性的風(fēng)險[14]。此外，CD 作為底物還會對CGTase 具有一定的抑制作用，降低酶反應(yīng)效率[15]。環(huán)糊精水解酶（Cyclodextrinase，CDase）是一類具有高度CD 水解特異性的酶類。因此，將CGTase 和CDase 協(xié)同改性淀粉，一方面降低反應(yīng)體系中CD 的含量，另一方面CDase 可以將CD 水解為具有益生效果的麥芽低聚糖來進一步提升淀粉的營養(yǎng)品質(zhì)。作者利用CGTase和CDase 協(xié)同改性淀粉，系統(tǒng)探究了酶改性對淀粉的結(jié)構(gòu)、環(huán)狀和低聚糖組成、消化特性的影響，旨在為提升淀粉營養(yǎng)消化特性提供一種新的酶法改性途徑。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

CGTase （來源于Thermoanaerobactersp.，β-CGTase）：Novozymes 有限公司（中國）；異淀粉酶（來源于Pseudomonassp.）：Megazyme 有限公司 （愛爾蘭）；葡萄糖測定試劑盒（GOPOD 試劑盒，葡萄糖氧化酶法）：北京利德曼生化股份有限公司；普通和高直鏈玉米淀粉 （直鏈淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為25%和45%）：杭州普羅星淀粉有限公司；α-淀粉酶（來源于豬胰腺，50 U/mg）和淀粉葡萄糖苷酶（來源于黑曲霉，70 U/mg）：美國Sigma-Aldrich 公司。麥芽低聚糖標(biāo)準(zhǔn)品（麥芽三糖（G3）、麥芽四糖（G4）、麥芽五糖（G5）、麥芽六糖（G6）、麥芽七糖（G7）、麥芽八糖（G8））：英國卡博森斯化學(xué)科技有限公司；葡萄糖（G1）、麥芽糖（G2）等其他分析純生化試劑：國藥集團化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

高效液相色譜儀（HPLC）：日本島津公司產(chǎn)品；氨基柱 （APS-2HYPERSIL 柱，250 mm × 4.6 mm，5 μm）：美國賽默飛世爾科技公司產(chǎn)品；高壓反應(yīng)釜：上?；敉嶒瀮x器有限公司產(chǎn)品；多角度激光散射凝膠色譜系統(tǒng) （HPSEC-MALLS-RI 系統(tǒng)、Waters 1525 泵）：美國Waters 公司產(chǎn)品；多角度激光散射檢測器（Dawn Heleos-Ⅱ）：美國Wyatt 公司產(chǎn)品；示差折光檢測器（Optilab T-rEX）：美國Wyatt 公司產(chǎn)品；尺寸排阻色譜柱（Shodex OHpak SB-806 HQ 和SB-804 HQ）：日本Shodex 公司產(chǎn)品；離子色譜儀ICS-5000（GP40 梯度泵，脈沖安培檢測器和電化學(xué)法檢測器，Chromeleon 6.8 色譜分析工作站）：美國戴安公司產(chǎn)品；陰離子交換色譜柱CarboPac PA20（250 mm × 3 mm）：美國戴安公司產(chǎn)品。

1.3 實驗方法

1.3.1 CDase 及CGTase 的制備及酶活測定CDase 的制備及酶活測定參考Ji[16]等的方法。挑取宿主菌株E.coliBL21 （DE3）于LB 液體培養(yǎng)基中（含100 μg/mL 氨芐青霉素），在37 ℃、200 r/min 培養(yǎng)8～10 h。以1%的接種體積分?jǐn)?shù)將上述培養(yǎng)液擴大培養(yǎng)，OD600為0.4～0.6 時加入終摩爾濃度為0.4 mmol/L 的IPTG，于25 ℃、160 r/min 誘導(dǎo)8～10 h。將發(fā)酵液在10 000g、4 ℃條件下離心15 min，收集菌體沉淀。使用pH 7.5 的20 mmol/L Tris-HCl 緩沖液重懸菌體，隨后超聲20 min 破壁，超聲功率為260 W，每超聲2 s 停頓3 s，離心、收集破壁菌體懸浮液的上清液（即粗酶液）。采用70 ℃保溫20 min 熱處理和鎳層析兩步法對CDase 粗酶液進行純化。參照文獻[17]用3，5-二硝基水楊酸（DNS）法測定CDase酶活，在最適反應(yīng)條件下，每分鐘從環(huán)糊精中釋放1 μmol 還原末端所需要的酶量定義為一個酶活單位（U）。將購買的CGTase 稀釋到適當(dāng)酶濃度，采用酚酞法測定β-CD 的含量，計算CGTase 的酶活[18]。一個酶活單位（U）定義為每分鐘生成1 μmol β-CD 所需要酶的添加量。

1.3.2 CGTase 和CDase 改性淀粉樣品的制備使用磷酸鹽緩沖液（pH 6.0，20 mmol/L）配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的普通/高直鏈玉米淀粉底物溶液。利用高壓反應(yīng)釜在121 ℃、160 r/min 條件下充分糊化30 min，隨后將糊化后的淀粉溶液降溫至反應(yīng)溫度75 ℃。本研究中使用的CDase 對CD 具有高度水解特異性而對淀粉無水解活力，因此，按如下方式利用CGTase 和CDase 制備改性淀粉。1）CGTase：CGTase（3.8 U/g 干基淀粉）與淀粉底物保溫6 h；2）CDase/CGTase：將CDase（14.2 U/g 干基淀粉）和CGTase（3.8 U/g 干基淀粉）共同與淀粉底物保溫6 h；3）CGTase+CDase：CGTase（3.8 U/g 干基淀粉）與淀粉底物保溫6 h，沸水浴30 min 滅酶，將反應(yīng)產(chǎn)物與CDase（14.2 U/g 干基淀粉）保溫6 h。酶反應(yīng)結(jié)束后均采用沸水浴1 h 滅酶，將產(chǎn)物冷凍干燥、研磨、過100 目篩備用?？瞻讓φ諡椴惶砑用敢褐苽涞臉悠?。

1.3.3 改性淀粉中環(huán)狀和線性低聚糖的組成測定參考Xia[19]等報道的方法使用HPLC 對改性淀粉樣品中CD 和線性麥芽低聚糖的組成進行分析。使用的分析柱為X-Bridge BEH 氨基柱 （250 mm × 4.6 mm，Waters），流動相為體積分?jǐn)?shù)65%乙腈溶液，流速設(shè)定為0.8 mL/min，進樣量為20 μL，柱溫維持在30 ℃。

1.3.4 改性淀粉的分子結(jié)構(gòu)測定將改性的淀粉樣品參考Ji[20]等的方法用HPSEC-MALLS-RI 系統(tǒng)進行分子結(jié)構(gòu)的測定。將樣品分散于體積分?jǐn)?shù)90%的二甲亞砜溶液中，使得終質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%，沸水浴1 h 充分溶解樣品。隨后將樣品置于37 ℃、160 r/min 下恒溫振蕩48 h。向樣品溶液中加入9 倍體積的無水乙醇，10 000g、4 ℃下離心10 min，沉淀用無水乙醇洗滌2 次。測定前將無水乙醇蒸干，用流動相復(fù)溶，過0.45 μm 濾膜。流動相使用0.1 mol/L NaNO3（含質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.02%NaN3），流量為0.6 mL/min，柱溫保持50 ℃，所得數(shù)據(jù)使用Astra（Version 5.3.4，Wyatt Technologies）進行分析。

1.3.5 改性淀粉的鏈長分布測定將改性的淀粉樣品參考Ji[21]等的方法使用HPAEC-PAD 系統(tǒng)進行鏈長分布的測定。將樣品溶解在乙酸鈉緩沖溶液中（50 mmol/L，pH 4.5）使得終質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%，沸水浴30 min 充分分散。隨后將樣品溶液置于42 ℃保溫，加入2 U 異淀粉酶脫支處理24 h，沸水浴20 min 滅酶。在10 000g下離心10 min，取上清液過0.22 μm 濾膜。測定流量為0.4 mL/min，柱溫保持30 ℃，流動相用150 mmol/L NaOH 和40～400 mmol/L梯度NaOAc 進行洗脫。

1.3.6 改性淀粉的體外消化性測定參考Englyst[22]等報道的方法并稍做修改測定改進淀粉的體外消化性。使用淀粉葡萄糖苷酶和豬胰腺α-淀粉酶以去離子水配制小腸模擬溶液，其中豬胰腺α-淀粉酶的酶活力為150 U/mL，淀粉葡萄糖苷酶的酶活力為80 U/mL。將200 mg 樣品分散于15 mL、0.2 mol/L乙酸鈉緩沖液中（1 mmol/L CaCl2、pH 5.2）。在37 ℃平衡5 min 后，在充分分散的樣品溶液中加入5 mL的小腸模擬溶液，37 ℃、200 r/min 水浴條件下酶解。隨后在0、20、120 min 分別取200 μL 水解反應(yīng)液，立即加入9 倍體積的無水乙醇滅酶。將樣品液在10 000g離心5 min，取上清液利用GOPOD 試劑盒測定其中的葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)。RDS、SDS 和RS 的比例根據(jù)游離葡萄糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（G0）、酶解20 min 的葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)（G20）和酶解120 min 的葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)（G120）見式（1）～（3）。

1.3.7 數(shù)據(jù)處理實驗結(jié)果均重復(fù)3 次，計算標(biāo)準(zhǔn)偏差作為其誤差限。數(shù)據(jù)的顯著性分析使用SPSS 19.0 進行，P＜0.05 表明實驗數(shù)據(jù)差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 雙酶改性淀粉產(chǎn)物的環(huán)糊精組成分析

為了探究CGTase 與CDase 復(fù)合改性淀粉的效果，基于CGTase 主導(dǎo)的環(huán)化活力，首先對產(chǎn)物中的CD 組成進行分析。如圖1所示，相比于CGTase 單獨轉(zhuǎn)化淀粉底物，經(jīng)CGTase 和CDase 雙酶復(fù)合改性后產(chǎn)物中的α-CD、β-CD 和γ-CD 均有不同程度的下降。該結(jié)果表明在雙酶復(fù)合改性的過程中，CDase 能充分發(fā)揮CD 的水解作用。此外，使用不同的淀粉底物以及不同的雙酶改性方式時，產(chǎn)物中不同CD 的剩余比例不同，這可能是由CGTase 的產(chǎn)物特異性和CDase 的底物選擇性共同導(dǎo)致的[23-24]。相比于CGTase 和CDase 雙酶順序添加，雙酶同時添加的改性方式具有更為顯著的CD 水解效果。相比于使用高直鏈玉米淀粉為底物，以普通玉米淀粉為底物不同雙酶改性方式的CD 產(chǎn)物差異更顯著。

圖1 雙酶改性對產(chǎn)物中CD 質(zhì)量濃度的影響Fig.1 Effects of dual-enzyme modification on the content of CD in products

2.2 雙酶改性淀粉產(chǎn)物中麥芽低聚糖組成分析

麥芽低聚糖是一類由α-1，4 糖苷鍵連接聚合度范圍為2～10 個葡萄糖單元的低聚寡糖，具有良好保濕性、適中黏度以及調(diào)節(jié)腸道菌群等益生功能[25-26]。利用具有CD 水解活力的CDase 以CD 為底物，可以高效制備具有特定聚合度的麥芽低聚糖[27-28]。因此，麥芽低聚糖是CGTase 與CDase 復(fù)合改性淀粉的重要產(chǎn)物。如圖2所示，相比于CGTase 單獨改性，CGTase 和CDase 復(fù)合改性顯著提升了淀粉產(chǎn)物中的麥芽低聚糖質(zhì)量濃度，不同聚合度的低聚糖比例也有明顯差異。單獨使用CGTase 時，產(chǎn)物中僅有少量的G2、G3 和G6～G8 生成。當(dāng)使用雙酶改性時，產(chǎn)物中的G2～G8 比例均顯著提升，其中G6 和G7質(zhì)量濃度最高。這可能是由于本研究中使用的CDase 對α-CD 和β-CD 具有高效的水解活力，而對麥芽低聚糖的水解則相對緩慢[29]。因此，CDase 將體系中的α-CD 和β-CD 主要水解為G6 和G7，這也與圖1中的CD 下降比例相一致。同樣，淀粉底物以及雙酶改性方式對產(chǎn)物中麥芽低聚糖組成也具有顯著影響。當(dāng)以普通玉米淀粉為底物時，淀粉產(chǎn)物中麥芽低聚糖的得率更高，且雙酶順序添加改性生成的麥芽低聚糖質(zhì)量濃度高于雙酶同時添加改性。當(dāng)以高直鏈玉米淀粉為底物時，產(chǎn)物中不同的雙酶改性方式所得麥芽低聚糖組成則相對較為接近。

圖2 雙酶改性對產(chǎn)物中麥芽低聚糖質(zhì)量濃度的影響Fig.2 Effects of dual-enzyme modification on the content of malto-oligosaccharides in products

2.3 雙酶改性淀粉產(chǎn)物的相對分子質(zhì)量分布表征

淀粉的分子結(jié)構(gòu)對其性質(zhì)具有重要影響，相對分子質(zhì)量分布是其重要的分子結(jié)構(gòu)特征[30]。如圖3和表1所示，當(dāng)以不同玉米淀粉為底物時，經(jīng)酶改性后的分子結(jié)構(gòu)變化規(guī)律較為一致。經(jīng)CGTase 改性后產(chǎn)物相對分子質(zhì)量分布曲線均顯著右移，其中普通玉米淀粉相對分子質(zhì)量由158.4×105下降至0.5×105，高直鏈玉米淀粉相對分子質(zhì)量由11.7×105下降至0.7×105，表明2 種淀粉結(jié)構(gòu)均發(fā)生明顯降解。此外，經(jīng)CDase 和CGTase 雙酶改性后產(chǎn)物相對分子質(zhì)量與經(jīng)CGTase 單獨改性后接近，雙酶順序改性比雙酶同時改性對淀粉結(jié)構(gòu)降解效果更顯著，這與上述體系中CD 和麥芽低聚糖的測定結(jié)果一致?？赡苁怯捎陔p酶順序改性時，經(jīng)CGTase 改性后的產(chǎn)物具有更多的短鏈結(jié)構(gòu)，更利于CDase 的進一步水解。CDase 對淀粉幾乎無水解作用，但可緩慢水解低聚寡糖，因此在順序改性過程中促進了淀粉分子結(jié)構(gòu)的降解。此外，淀粉分子多分散系數(shù)（PDI）也能有效反映淀粉相對分子質(zhì)量分布特征[31]。如表1所示，相比于原玉米淀粉，酶改性后產(chǎn)物的PDI 值均增加，這表明改性淀粉樣品的相對分子質(zhì)量差異更大。然而，當(dāng)以高直鏈玉米淀粉為底物時，與雙酶同時改性相比，另兩種改性方法會使得產(chǎn)物的相對分子質(zhì)量分布差異性增大[32]，相對分子質(zhì)量的分布特征會顯著影響淀粉酶解產(chǎn)物的理化及營養(yǎng)特性。

圖3 雙酶改性對淀粉分子結(jié)構(gòu)的影響Fig.3 Effects of dual-enzyme modification on starch molecular structure

表1 雙酶改性淀粉產(chǎn)物的重均相對分子質(zhì)量（Mw）和尺寸參數(shù)Table 1 Weight-average molecular weight（Mw）and size parameters of dual-enzyme modified starch products

2.4 雙酶改性淀粉的精細(xì)結(jié)構(gòu)表征

依據(jù)支鏈淀粉鏈長比例的周期性分布模式，淀粉鏈長通常被分為DP＜6、DP 6～12、DP 13～24、DP 25～36、DP ＞36 共5 個組分，分別與淀粉A、B1、B2、B3 和更長鏈對應(yīng)[33]。淀粉不同鏈長比例反映了其內(nèi)在精細(xì)結(jié)構(gòu)且與淀粉性質(zhì)密切相關(guān)[34]。如圖4和表2所示，經(jīng)CGTase 單獨和雙酶改性的不同玉米淀粉鏈長分布均呈現(xiàn)明顯左移，表明淀粉結(jié)構(gòu)顯著降解，對應(yīng)的鏈長組分DP 13～24、DP 25～36 和DP ＞36 的比例顯著下降。當(dāng)以普通玉米淀粉為底物時，CGTase 改性將DP ＜13 的葡萄糖鏈比例提升了約40%以上。當(dāng)使用CGTase 和CDase 復(fù)合改性時，對應(yīng)的葡萄糖鏈比例進一步提升約20%左右，并且雙酶順序改性比雙酶同時改性對短鏈比例的提升效果更顯著。當(dāng)以高直鏈玉米淀粉為底物時，改性淀粉鏈長比例具有類似的組成，CGTase 和CDase 的不同復(fù)合改性方式的產(chǎn)物鏈長比例組成差異不大，因此，雙酶改性淀粉的精細(xì)結(jié)構(gòu)測定結(jié)果與上述的環(huán)狀、線性麥芽低聚糖質(zhì)量濃度和相對分子質(zhì)量分布結(jié)論一致。此外，由于測定的樣品是由酶改性淀粉產(chǎn)物經(jīng)脫支處理后側(cè)鏈和CD 經(jīng)CDase 降解得到的麥芽低聚糖組成，可以看出經(jīng)酶改性后的淀粉產(chǎn)物主要以短支鏈結(jié)構(gòu)為主。

圖4 雙酶改性對淀粉鏈長分布的影響Fig.4 Effects of dual-enzyme modification on the chain length distribution of starch

表2 雙酶改性淀粉產(chǎn)物的鏈長比例Table 2 Chain length distribution ratio of dual-enzyme modified starch products

2.5 雙酶改性淀粉的體外消化性分析

使用改進的Englyst 體外模擬消化法對酶改性淀粉樣品的營養(yǎng)組分進行測定。如圖5所示，經(jīng)充分糊化的普通玉米淀粉和高直鏈玉米淀粉中RS 質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為15.6%和31.0%?？梢钥闯?，當(dāng)以不同淀粉為底物時，經(jīng)CGTase 和雙酶改性后產(chǎn)物中RS的比例均顯著提升。其中，以普通玉米淀粉為底物時，經(jīng)CGTase 單獨酶改性可以獲得最高的RS 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為39.0%。結(jié)合上述分子結(jié)構(gòu)的測定結(jié)果，這可能是由于經(jīng)CGTase 作用后淀粉樣品的相對分子質(zhì)量顯著下降，分子尺寸減小，DP ＜13 的葡萄糖鏈長比例顯著增加。據(jù)報道，高比例DP ＜13 的葡萄糖側(cè)鏈能有效提升淀粉的抗酶解性。CD 通過強氫鍵穩(wěn)定環(huán)結(jié)構(gòu)來抵抗水解，因而改性樣品中高比例的CD 也對其抗消化性具有重要的貢獻作用。當(dāng)使用CGTase 和CDase 雙酶同時和順序改性時，RS 質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為35.4%和34.2%，與原淀粉相比明顯提升但低于CGTase 單獨改性。這可能是由于雙酶改性將淀粉產(chǎn)物中CD 轉(zhuǎn)化為高比例的麥芽低聚糖。其中高聚合度的麥芽低聚糖如G4—G8，可以相對容易被α-淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶水解，直至不能被進一步利用。當(dāng)以高直鏈玉米淀粉為底物時，經(jīng)CGTase、CGTase 和CDase 同時添加和順序添加，改性后淀粉產(chǎn)物中的RS 質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為59.3%、49.7%和52.3%，RS 的變化與普通玉米淀粉規(guī)律一致。

圖5 雙酶改性對淀粉中營養(yǎng)消化組分的影響Fig.5 Effects of dual-enzyme modification on nutrient digestible components in starch

以CGTase 改性不同淀粉能夠顯著增加淀粉的抗性組分比例，提升淀粉的營養(yǎng)消化品質(zhì)。然而，產(chǎn)物體系中高比例的CD 可能會對人體造成一定的腎毒性危害。在雙酶改性過程中，高比例的CD 被CDase 水解轉(zhuǎn)化為麥芽低聚糖，并且CGTase 單獨改性淀粉與雙酶改性產(chǎn)物具有相近的體外消化性。這可能是由于麥芽低聚糖本身也是具有良好的益生效果的功能性寡糖[35]。因此，CGTase 與CGTase 復(fù)合改性是一種有效提升淀粉營養(yǎng)消化品質(zhì)的方法，具有良好的應(yīng)用前景。

3 結(jié) 語

在利用以CGTase 主導(dǎo)的雙酶改性普通和高直鏈玉米淀粉時，發(fā)現(xiàn)CGTase 與CDase 具有明顯的協(xié)同改性效果。經(jīng)CDase 的水解作用，產(chǎn)物中CD 比例顯著下降而麥芽低聚糖比例顯著提升。此外，CGTase 和雙酶改性使得淀粉相對分子質(zhì)量和分子尺寸顯著下降，DP 13～24，DP 25～36 和DP ＞37 的鏈長比例顯著下降，而DP ＜13 的鏈長比例顯著提升。經(jīng)CGTase 和雙酶改性后淀粉中RS 的比例顯著提升，這與淀粉產(chǎn)物組成和分子結(jié)構(gòu)相對應(yīng)。綜上可知，利用CGTase 和CDase 可通過產(chǎn)物組成和分子結(jié)構(gòu)的修飾顯著提升淀粉的營養(yǎng)消化品質(zhì)。