中藥誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化信號通路的研究進展

黃澤宇，梁艷芳，曾今誠，邱賢秀 （1.廣東醫(yī)科大學東莞市醫(yī)學活性分子開發(fā)與轉(zhuǎn)化重點實驗室，廣東省醫(yī)學分子診斷重點實驗室，廣東東莞 52808；2.廣東醫(yī)科大學醫(yī)學技術(shù)學院，廣東東莞 52808；.東莞市濱海灣中心醫(yī)院/暨南大學附屬東莞醫(yī)院病理科，廣東東莞 52900；4.廣東醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院，廣東東莞 52808）

骨質(zhì)疏松癥（Osteoporosis）為常見的慢性代謝性骨病之一。間充質(zhì)干細胞（MSCs）成骨分化能力下降被認為是其發(fā)生的主要原因之一。MSCs 早在1976 年便被Friedenstein 等[1]發(fā)現(xiàn)，其具有高度自我更新和多向分化潛能，如今已成為干細胞研究的熱點。MSCs 來源廣泛，在一定條件下可分化為成骨細胞，因其強大的修復潛力而被廣泛用于骨質(zhì)疏松癥的治療。MSCs 成骨分化的主要機制可簡單概括為兩種，一是通過添加生物活性因子或促成骨藥物、物理刺激等直接激活細胞成骨分化的基因；二是通過上述條件活化成骨分化相關(guān)通路，通路再激活成骨分化相關(guān)基因，最終發(fā)揮誘導間充質(zhì)干細胞定向成骨分化的作用。研究表明MSCs在成骨分化的過程受到多種信號通路的調(diào)節(jié)[2-5]。目前間充質(zhì)干細胞誘導成骨分化主要依靠成骨誘導培養(yǎng)基[6]。然而單純使用傳統(tǒng)成骨誘導培養(yǎng)基的誘導效率較低，因此常添加其他成分或改變培養(yǎng)基的環(huán)境來提高成骨分化的效率，但該過程中常存在多種缺點。中藥來源廣泛，副作用小，其治療骨質(zhì)疏松癥具有多種獨特優(yōu)勢[7-8]。本文旨在分析總結(jié)中藥在誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化方面的國內(nèi)外研究進展，綜述中藥在誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化過程中相關(guān)信號通路及機制，以期為骨科疾病的防治、再生醫(yī)學、中醫(yī)藥開發(fā)、細胞與組織工程等科學技術(shù)領域的研究提供參考。

1 中藥通過Wnt/β-catenin 信號通路誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化

間充質(zhì)干細胞的成骨分化是一個包含諸多信號因子的復雜過程，Wnt/β-catenin 信號通路是目前研究最多的促性成骨的關(guān)鍵經(jīng)典通路，其參與了多種生物學過程。Wnt/β-catenin 信號通路主要包括Wnt 蛋白、β-連環(huán)蛋白（β-catenin）、糖原合成蛋白激酶-3（GSK-3β）、低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6（LRP5/6）和卷曲（Frizzled）受體，其中β-catenin 是該通路的關(guān)鍵因子，其在胞質(zhì)中的濃度控制著Wnt/β-catenin 信號通路的激活與關(guān)閉，在MSCs 定向成骨分化中起重要的調(diào)節(jié)作用；GSK-3β 激酶能促進β-catenin 的磷酸化及泛素化降解，調(diào)節(jié)胞內(nèi)β-catenin 濃度；LRP5/6 和Frizzled受體作為受體與Wnt 蛋白結(jié)合以激活通路。該信號通路的主要調(diào)節(jié)機制為Wnt 基因被激活后生成Wnt 蛋白與LRP5/6 受體及Frizzled 受體結(jié)合后，激活細胞內(nèi)蓬亂（DSH）蛋白以激活GSK-3β 結(jié)合蛋白（GBP），而GBP則抑制GSK-3β 激酶的生成，使胞內(nèi)的β-catenin 濃度因無法被降解而升高，最后進入核內(nèi)與T 細胞輔助因子（TCF）編碼的蛋白質(zhì)及淋巴增強因子（LEF）編碼的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，最后激活Wnt/β-catenin 信號通路下游的成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子。

淫羊藿苷（又名淫羊藿素）是淫羊藿的主要活性成分，可于各類淫羊藿的干燥莖葉中提取得到，因其具有促進骨代謝的作用而成為臨床治療骨質(zhì)疏松癥中的常用中藥有效成分。研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷可通過Wnt/β-catenin 信號通路調(diào)控MSCs 的成骨分化能力。李智奎等[9]通過熒光定量聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）和Western blot 發(fā)現(xiàn)一定濃度的淫羊藿苷處理后Wnt7 和β-catenin 蛋白表達上調(diào)，而其抑制因子GSK-3β 的表達則下降，Wnt/β-catenin 信號激活促進了Runt 相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（Runx2）和骨橋蛋白（OPN）等成骨相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，最后誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）成骨分化。芝麻素是從花椒植物表皮與芝麻油中提取出的一類木脂素，廣泛應用于多種疾病的臨床治療。研究表明芝麻素具有重塑骨骼結(jié)構(gòu)、促進成骨分化的作用，然而其在促進MSCs 成骨分化中的作用卻鮮有報道。馬忠平等[10]通過免疫組化、免疫熒光和Western blot 實驗發(fā)現(xiàn)芝麻素可以提高LRP5 蛋白的表達水平，促進其與配體Wnt 分子的結(jié)合以激活Wnt/β-catenin 信號，同時抑制GSK-3β 蛋白的合成，促進成骨分化相關(guān)基因OSX（成骨細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子）、骨鈣蛋白（OCN）、Runx2 和性別決定轉(zhuǎn)錄因子9（SOX9）的轉(zhuǎn)錄，以誘導大鼠BMSCs 成骨分化。冬凌甲草素是冬凌草的草質(zhì)部分中具有生物活性主要的天然物質(zhì)，副作用小，其在多種癌癥、炎癥與腫瘤的治療中有著廣泛的引用。近年來，有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)冬凌甲草素能誘導成骨細胞分化與礦化，抑制破骨細胞的形成和功能，發(fā)揮了抗骨質(zhì)分解的作用。蒯鳳等[11]通過qRT-PCR 和Western blot 發(fā)現(xiàn)適當濃度的冬凌甲草素可以提高Wnt1 和β-catenin 的蛋白活性，被激活的Wnt/β-catenin 信號通路，使大量β-catenin 得以釋放游離，與目的因子結(jié)合，激活成骨相關(guān)基因堿性磷酸酶（ALP）、細胞色素C 氧化酶1 號基因（Col-1）、Runx2 及OCN 的轉(zhuǎn)錄，以誘導大鼠MSCs 成骨分化。大豆異黃酮為大豆在生長過程中形成的一次生代謝產(chǎn)物，是一種具有雌激素樣作用的天然活性物質(zhì)，具有多種生物學作用，如抗氧化、抗血栓與降低炎性作用等，因此其在各種疾病的臨床治療中得到了廣泛的應用。劉一棟等[12]通過qRT-PCR和Western blot 發(fā)現(xiàn)不同濃度的大豆異黃酮可提高Wnt1的表達水平，以此來促進其與LRP/Frizzled 等受體的結(jié)合，進而活化Wnt/β-catenin 信號通路，使之激活成骨相關(guān)基因Runx2、OPN 的轉(zhuǎn)錄，最后誘導大鼠BMSCs 成骨分化。目前關(guān)于大豆異黃酮促進間充質(zhì)干細胞成骨分化的研究日益增多，大豆異黃酮在骨質(zhì)疏松癥的治療價值開始得到認可，但其具體機制有待進一步研究。盤龍七片由盤龍七、當歸、杜仲等二十九味中藥有效成分組成，具有活血化瘀、祛風除濕等功效，臨床上用于治療骨性關(guān)節(jié)炎、骨折及骨質(zhì)疏松癥等多種骨科疾病。吳澤榮等[13]通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）和Western blot 發(fā)現(xiàn)在最佳濃度下的盤龍七片可以上調(diào)Wnt3 與β-catenin 蛋白的表達水平，能促進Wnt 配體及其受體的結(jié)合醫(yī)活化Wnt/β-catenin 信號通路，使大量的β-catenin游離并堆積，并與目的因子結(jié)合，激活成骨相關(guān)基因Runx2、OSX 與Col-a1 的轉(zhuǎn)錄，促進其蛋白的表達，最后誘導人BMSCs 成骨分化。盡管盤龍七片在骨科治療中應用較為廣泛，但其作用機制尚不明確，近年來已有不少研究人員發(fā)現(xiàn)其能通過調(diào)控多條信號通路誘導MSCs成骨分化，有助于進一步闡明其作用機制。

2 中藥通過Hedgehog 信號通路誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化

研究表明，Hedgehog（Hh）信號通路各種調(diào)節(jié)因子廣泛存在于骨組織，在調(diào)節(jié)骨發(fā)育及維持骨組織穩(wěn)態(tài)中起重要作用。該通路主要包括配體（Shh、Ihh、Dhh）、膜蛋白受體（Ptch、Smo）及轉(zhuǎn)錄因子（Gli1、Gli2、Gli3）。主要作用機制是上游的shh 配體（音猬因子）與patched 跨膜蛋白受體（膜蛋白受體Ptch）結(jié)合以解除后者對Smoothened 跨膜蛋白受體（Smo）的抑制作用，被解除抑制作用后的Smo 可激活下游鋅指家族（Gli）轉(zhuǎn)錄因子，使其啟動成骨分化相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，促進MSCs 的成骨分化。

補骨脂素為補骨脂中的主要有效成分，具有抗骨質(zhì)疏松、舒張血管及抗炎等多種功效，目前已被廣泛應用于骨質(zhì)疏松癥的臨床治療中。韓宇等[14]通過酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）與熒光免疫檢測發(fā)現(xiàn)補骨脂素含藥血清可以上調(diào)通路中上游的啟動信號因子 Shh配體的mRNA 及蛋白的表達，Shh 結(jié)合并下調(diào)patched跨膜蛋白受體1（Ptch1）mRNA 及蛋白的表達，以此解除Ptch1 對Hedgehog 信號通路下游的特異性轉(zhuǎn)錄因子Smo 的抑制作用，使得活化的Smo 激活Hedgehog 信號通路下游的轉(zhuǎn)錄促進因子Gli1，增加Gli1 蛋白的表達，從而促進大鼠BMSCs 成骨分化。目前補骨脂素在誘導MSCs 成骨分化的研究較為深入，但其促進MSCs在人體內(nèi)的成骨分化的相關(guān)報道較為缺乏，有待進一步研究。補腎活血膠囊由多種中藥濃縮制成，包括淫羊藿、杜仲、牛膝等，具有補腎健骨、填精益髓的作用。在骨質(zhì)疏松癥的臨床治療中，因其具有多成分、多靶點的特點而得到重視，亦有多項報道顯示補腎活血膠囊能直接或間接對多個信號通路進行調(diào)控，以促進MSCs的成骨分化。梁學振等[15]通過Western blot 發(fā)現(xiàn)補腎活血膠囊含藥血清能促進shh 配體的生成來使其結(jié)合Ptch 受體，解除Ptch 受體對Smo 的抑制作用，并激活Gli1 及Gli2 基因的表達，以上調(diào)成骨相關(guān)蛋白Runx2、Col-a1 的表達來促進大鼠BMSCs 成骨分化。梓醇為滋陰補腎中藥地黃的主要活性成分，有關(guān)研究報道梓醇對于骨質(zhì)疏松癥具有一定的防治作用。賴滿香等[16]通過定量聚合酶鏈反應（q-PCR）及Western blot 發(fā)現(xiàn)最佳濃度的梓醇能提高Shh mRNA 的表達，使其結(jié)合Ptch1 蛋白受體，激活Smo 及下游的Gli1 轉(zhuǎn)錄因子，增加Gli1 蛋白的表達量，以上調(diào)大鼠BMSCs 成骨相關(guān)基因來促進其成骨分化。目前有關(guān)梓醇誘導MSCs 成骨分化的研究也開始受到關(guān)注，但涉及的信號通路較多，具體的分子機制及潛在靶點有待進一步挖掘。左歸丸是以菟絲子、川牛膝、山茱萸、山藥等為主要有效成分的中藥制劑，作為中藥經(jīng)典制劑，具有滋陰補腎的效果，在治療骨質(zhì)疏松癥的臨床應用中，其因療效較好、副作用小的特點而引起了眾多關(guān)注。高舉會[17]通過ELISA 發(fā)現(xiàn)左歸丸含藥血清能上調(diào)提高Shh 蛋白的表達量，使其結(jié)合Ptch 受體以活化Smo，提高Gli1 蛋白的表達，最后促進大鼠BMSCs 中成骨相關(guān)基因的表達來促進其成骨分化。近年來，對于左歸丸誘導MSCs 成骨分化的試驗研究的數(shù)量也日漸增多，對其涉及的相關(guān)因子及信號通路的探究也在不斷深入。柚皮苷為中藥材骨碎補的主要成分之一，主要從柑橘類果皮中抽提而得，是一種天然黃酮類化合物，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、降血壓等功效，還兼具無毒、綠色與環(huán)保等優(yōu)點。有多項報道顯示柚皮苷具有誘導成骨的潛力，引起研究者的廣泛關(guān)注。周淵[18]通過熒光實時定量PCR 發(fā)現(xiàn)柚皮苷能上調(diào)通路Shh 配體對Ptch1 的結(jié)合，活化Smo 基因并促進下游Gli1 基因的轉(zhuǎn)錄，提高Gli1 蛋白的表達，最后激活成骨分化相關(guān)基因OCN、Runx2 的表達來促進人牙周膜干細胞hPDLSCs 成骨分化。隨著探究的不斷深入，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)柚皮苷在誘導MSCs 成骨分化的過程中涉及多條信號通路，其具體的作用機制仍待進一步探索。

3 中藥通過BMP/Smad 信號通路誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化

BMP/Smad 通路是調(diào)節(jié)成骨分化的經(jīng)典通路，其在骨損傷相關(guān)疾病中的作用被廣泛關(guān)注。該通路通過對間充質(zhì)干細胞的自我分化和更新、細胞凋亡、遷移和增殖進行調(diào)節(jié)，發(fā)揮穩(wěn)定胚胎發(fā)育和出生后組織體狀態(tài)的作用。通路主要包括骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP 膜蛋白）受體（BMPR-I A、BMPR-I B 及BMPR-Ⅱ）及Smad蛋白家族（R-Smads、C-Smads 及I-Smads）。配體激活后先結(jié)合BMP II 類受體，激活其激酶特性使BMP I 類受體磷酸化，之后促進Smad 蛋白的分泌；Smad 家族中的R-Smads 被磷酸化的BMP I 類受體激活并結(jié)合C-Smads 形成復合物，該復合物進入核內(nèi)可啟動成骨相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。

研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿素可通過BMP/Smads 信號通路誘導MSCs 的成骨分化。訾慧等[19]通過RT-PCR 法和ELISA 實驗發(fā)現(xiàn)淫羊藿素能促進BMP-2 及BMP-9 的分泌，增強其與胞外BMP II 類受體的結(jié)合，進而磷酸化BMP I 型受體，以激活通路下游的受體調(diào)節(jié)型Smads（R-Smads），使R-Smads 與共同通路型介體Smads（C-Smads）形成復合物并轉(zhuǎn)移至核內(nèi)，啟動成骨相關(guān)基因骨谷氨酸蛋白（BGP）、Osterix、Runx2 及Col-1 的轉(zhuǎn)錄，誘導大鼠BMSCs 成骨分化。三七皂苷Fa，為中藥三七中的一種有效活性成分，主要從三七的干燥根及根莖中提取分離而得，具有活血止血、抗炎、抗腫瘤等諸多功效。林燕平[20]通過Western blot 發(fā)現(xiàn)一定濃度的三七皂苷Fa 能促進BMP2 與BMP4 的分泌，增強其與BMP II 類受體的結(jié)合，使其磷酸化BMP I 型受體進而激活通路下游的Smad1 及Smad4，進而啟動成骨相關(guān)基因Runx2 的轉(zhuǎn)錄，促進大鼠BMSCs 成骨分化。除三七皂苷Fa 外，目前從三七中還能提取出七十多種具有較強的生物活性的皂苷成分且有著不同的藥理活性，因此得到了中醫(yī)藥研究人員的重視。然而目前三七皂苷Fa 治療骨質(zhì)疏松癥的報道較少，且其在誘導MSCs 成骨分化過程中涉及多條信號通路，具體機制仍需要進一步探討。木通皂苷D（又稱川續(xù)斷皂苷Ⅵ），為傳統(tǒng)中藥川續(xù)斷的主要成分，有著抗骨質(zhì)疏松、補肝補腎、抗氧化的功用。研究人員發(fā)現(xiàn)木通皂苷D 具有誘導MSCs 成骨分化的作用，其可能的作用機制是通過促進BMP 配體及其受體的激活，促進Smad1 與Smad5 蛋白的表達，進而激活成骨相關(guān)基因OCN、Runx2 的轉(zhuǎn)錄，促進小鼠BMSCs 成骨分化[21]。因其眾多且明確的藥理作用，目前木通皂苷D 已主要用于骨質(zhì)疏松癥的治療中。固本增骨方由當歸、黨參等9 味中藥構(gòu)成，且不同成分間具有相互補益的效果，具有壯骨活血、健脾補腎的功效。大量的臨床應用實踐證明固本增骨方在骨質(zhì)疏松癥治療中效果良好，具有多靶點、多途徑的優(yōu)點，因此引起了研究人員探究其具體作用機制的興趣。宋敏等[22]通過RT-PCR 及ELISA 法發(fā)現(xiàn)固本增骨方含藥血清在大鼠BMSCs 中上調(diào)了BMP2 及BMP4 的表達量，增強了其與BMP II 類受體的結(jié)合，促進BMP I 類受體的磷酸化，進而激活BMP/Smad 通路下游的Smad1，從而啟動成骨相關(guān)基因Col-1、BGP、Runx2 及OPN 的轉(zhuǎn)錄，促進大鼠BMSCs 成骨分化。有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，柚皮苷誘導MSCs 成骨分化的過程中涉及了BMP/Smad通路。寧宇[23]通過qPCR 及Western blot 發(fā)現(xiàn)不同濃度梯度的柚皮苷可促進BMP2 的表達，以此增強其與BMP II 類受體的結(jié)合BMP I 類受體的磷酸化，增加Smad5 和Smad8 的蛋白表達量，并使它們與C-Smads形成復合體轉(zhuǎn)移至核內(nèi)，進而激活成骨相關(guān)基因Runx2及OSX 的表達，誘導兔BMSCs 成骨分化。

4 中藥通過Notch 信號通路誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化

Notch 信號通路是廣泛存在于動物組織細胞中介導細胞間信號傳遞的重要途徑之一，在細胞的生命活動中承擔重要作用，其進化模式高度保守，調(diào)節(jié)細胞增殖、分化及凋亡，對細胞活動和骨骼發(fā)育具有重要意義[24]。有研究表明Notch 信號通路能調(diào)控細胞成骨分化方向，在MSCs 成骨分化中扮演重要角色[25]。該通路主要包括Notch 受體、Jagged 配體（鋸齒蛋白）與Hes基因（發(fā)狀分裂相關(guān)增強子），其配體與受體都為細胞膜表面蛋白。其中Notch 受體與Jagged 配體結(jié)合后，經(jīng)過三次蛋白水解反應后激活Notch 信號通路并形成胞外NICD（Notch 胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域），NICD 經(jīng)過胞質(zhì)進入核內(nèi)與著絲粒結(jié)合蛋白 1（CBF1 蛋白）結(jié)合，將轉(zhuǎn)錄抑制因子轉(zhuǎn)化為轉(zhuǎn)錄活化因子，活化靶基因Hes 后可調(diào)節(jié)成骨相關(guān)基因。

大麻二酚為著名的傳統(tǒng)中藥材大麻中提取的非成癮性成分，具有鎮(zhèn)痛、抗驚厥、抗炎等多項特性。多項研究證明大麻二酚具有眾多藥理功效，并且不存在精神活性與藥物依賴性，使得大麻二酚在臨床應用中得到重視與廣泛應用。近年來，眾多研究人員發(fā)現(xiàn)大麻二酚可通過多種機制誘導MSCs 成骨分化。王偉峰等[26]通過RT-PCR 及Western blot 發(fā)現(xiàn)大麻二酚能提高Notch1 蛋白的表達水平，促進受體Notch1 與其配體的結(jié)合以激活Notch 通路，釋放具有活性的Notch 胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域NICD，NICD 進入細胞后通過形成新的復合體來激活Notch 通路下游的靶基因Hes-1 的轉(zhuǎn)錄，增加了Hes-1 蛋白的表達量，最終促進成骨相關(guān)基因Col-1、OCN、Runx2 的轉(zhuǎn)錄，以誘導人牙齦間充質(zhì)干細胞hGMSCs 的成骨分化。刺五加苷為中草藥刺五加中提取的主要藥用成分，具有益氣健脾，補腎安神功效，作為一種無毒副作用的天然活性物質(zhì)受到各領域研究者的青睞，目前已應用于多種疾病的臨床治療中。雖然缺乏其治療骨質(zhì)疏松癥的報道，但近年來亦有研究人士開始探究其在誘導MSCs 成骨分化的作用。黃月等[27]通過RT-qPCR 及Western blot 發(fā)現(xiàn)刺五加苷能上調(diào)Notch1 蛋白的表達水平，促進其與配體的結(jié)合來活化并釋放NICD，激活Hes-1 基因的轉(zhuǎn)錄和表達，最終上調(diào)成骨分化相關(guān)基因Runx、OSX、OCN、骨唾液酸蛋白（BSP）的轉(zhuǎn)錄，誘導大鼠BMSCs 成骨分化。淫羊藿苷在誘導MSCs 成骨分化的過程中同樣存在Notch信號通路的介入。鄧宇等[28]通過RT-PCR 及Western blot 發(fā)現(xiàn)最佳處理濃度的淫羊藿苷能促進Notch 通路受體Notch1 及配體Jagged-1 的蛋白表達，使二者結(jié)合以激活Notch 信號通路，進而作用于Notch 通路下游的Hes-1，最終上調(diào)Runx2 的轉(zhuǎn)錄以誘導大鼠BMSCs成骨分化。研究表明，固本增骨方亦可通過Notch 信號通路誘導MSCs 成骨分化。周靈通[29]通過PCR 和Western blot 發(fā)現(xiàn)最佳濃度的固本增骨方含藥血清能促進Notch1 蛋白的表達，使其與配體結(jié)合以活化Notch 通路形成NICD，進入細胞與核內(nèi)帶有CBF1 的轉(zhuǎn)錄抑制因子蛋白結(jié)合使之轉(zhuǎn)化為轉(zhuǎn)錄活化因子，進而作用于Notch 通路下游的靶基因，最終上調(diào)成骨相關(guān)因子Col-1、BGP、Runx2 的轉(zhuǎn)錄，誘導大鼠BMSCs成骨分化。

5 結(jié)論與展望

間充質(zhì)干細胞具有多向分化潛能與自我更新能力，在一定誘導條件下，MSCs 可實現(xiàn)向成骨細胞、脂肪細胞、成軟骨細胞及肌肉細胞等多向分化。因此，作為一種較為理想的“細胞種子”，誘導間充質(zhì)干細胞分化為成骨細胞對治療成骨細胞生成障礙或功能失調(diào)等相關(guān)疾病有著重要意義[30]。中藥來源廣泛，生于自然，較常規(guī)治療藥物具有更豐富的結(jié)構(gòu)和生物活性，是巨大的藥物分子寶庫；目前已有大量研究證實中藥單體或中藥提取物具有誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化的作用，其中可能涉及多條成骨細胞分化相關(guān)通路[31]，表明中藥在促進間充質(zhì)干細胞成骨分化的研究中有極大潛力。

本綜述分析并總結(jié)了近年來中藥單體在調(diào)控成骨細胞分化方面的作用及相關(guān)信號通路的研究進展，并探討中藥誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化的作用機制。雖然現(xiàn)有研究已經(jīng)明確中藥在誘導間充質(zhì)干細胞成骨分化中的調(diào)控作用，但是這些研究以單信號通路研究為主，缺乏多通路交叉關(guān)聯(lián)的信號調(diào)控網(wǎng)絡研究，未能徹底地揭示其調(diào)控的具體機制，也未能充分體現(xiàn)中醫(yī)藥的獨特優(yōu)勢。后續(xù)仍需更多的研究工作去探索和挖掘這些不同信號通路各自發(fā)揮作用的分子機制及各通路間的相互聯(lián)系。