基于數(shù)據(jù)挖掘和網(wǎng)絡藥理學探討中醫(yī)藥治療甲狀腺功能減退癥的用藥規(guī)律及作用機制*

呂 艷，陳艷奇，范 源

（1.云南中醫(yī)藥大學，云南 昆明 650500；2.云南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院，云南 昆明 650021）

甲狀腺功能減退癥（hypothyroidism），簡稱甲減，是由于甲狀腺激素合成和分泌減少或組織利用不足，以機體代謝和多系統(tǒng)功能減退為特征的低代謝綜合征，其常見臨床表現(xiàn)有畏寒肢冷、乏力、手足腫脹感、嗜睡、記憶力減退、少汗、關節(jié)疼痛、脫發(fā)、體重增加、便秘、女性月經(jīng)紊亂、性功能減退、皮膚和頭發(fā)干燥等癥狀[1-5]。甲減的發(fā)病率約為1%～3%[1]，以原發(fā)性甲減最多見，自身免疫、甲狀腺手術(shù)和甲亢131I治療占原發(fā)性甲減的90%以上[2]。其患病率隨著年齡的增長而增加，發(fā)病率呈現(xiàn)逐漸上升趨勢[3-4]。該病可能會引起消化、呼吸、心血管、腦血管、腎上腺、性腺等多系統(tǒng)多臟器損害，病情嚴重者可發(fā)生甲減危象、心腎功能衰竭等嚴重并發(fā)癥[3，6]。研究發(fā)現(xiàn)甲狀腺功能減退可誘發(fā)血脂異常及其相關的心臟代謝紊亂疾病[7]，增加患心血管疾病的風險[8]。甲減的患病與飲食、環(huán)境、遺傳、藥物及手術(shù)等因素密切相關，西醫(yī)學認為其病理特征是皮膚和組織內(nèi)的糖胺聚糖沉積，臨床表現(xiàn)為黏液性水腫，重度甲減患者可能導致黏液水腫、昏迷和死亡，嚴重者影響生活質(zhì)量和加重心血管疾病發(fā)生的風險[9-10]。西醫(yī)對于甲減的治療主要以口服藥物為主，常用左旋甲狀腺素（L-T4）替代性治療，療效確切，但長時間服藥不良反應較多，嚴重者可誘發(fā)心律失常、心絞痛及心力衰竭和骨質(zhì)疏松癥[6]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，對于甲減的治療，中西醫(yī)結(jié)合治療較單純西藥療效更佳，在臨床癥狀改善和促進甲功恢復正常方面優(yōu)勢顯著[11-13]。

本研究采用文獻研究，通過收集中醫(yī)藥治療甲狀腺功能減退癥的文獻，借助數(shù)據(jù)挖掘和網(wǎng)絡藥理學的研究方法，初步闡述其藥物的用藥規(guī)律和作用機制。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源 檢索自建庫以來CNKI、萬方醫(yī)學網(wǎng)、CBM中國生物醫(yī)學文獻數(shù)據(jù)庫公開發(fā)表的關于中醫(yī)藥辨治甲狀腺功能減退癥的文獻，分別以“甲狀腺功能減退癥”“甲減”為主題檢索詞，并含“溫陽”“補陽”進行高級檢索，檢索時間設置為建庫到2022年3月31日。

1.2 數(shù)據(jù)篩選 將檢索到的文獻參照納入標準及排除標準進行數(shù)據(jù)篩選，共篩選出377篇文獻，412首中藥處方，涉及中藥300味。

1.2.1 納入標準 將明確診斷為甲狀腺功能減退癥且有明確療效評價的文獻納入，其中包括臨床觀察文章、專家經(jīng)驗總結(jié)、醫(yī)案醫(yī)話、治療體會、辨證論治的文獻（具體舉例說明）；配方顆粒、膏劑、復合制劑、丸劑等制劑中，中藥組成及劑量完整時同樣納入。

1.2.2 排除標準 診斷及療效不明確的文獻；診療過程不連續(xù)的處方；動物類實驗文獻。

1.3 數(shù)據(jù)庫的建立、規(guī)范與數(shù)據(jù)分析

1.3.1 數(shù)據(jù)庫的建立 將上述文獻中篩選出的處方錄入中醫(yī)傳承輔助平臺（V2.5），選擇中醫(yī)傳承輔助平臺系統(tǒng)中的“平臺管理系統(tǒng)”→“數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)”→“方劑分析”模塊錄入數(shù)據(jù)，錄入并核查。

1.3.2 數(shù)據(jù)庫的規(guī)范 將處方中的中藥參照《中藥學》[14]、《中華人民共和國藥典》[15]錄入，其中中藥名稱不一樣的同一味中藥，將其名稱規(guī)范化，“雙花”統(tǒng)一為“金銀花”，“仙靈脾”統(tǒng)一為“淫羊藿”，“夜交藤”統(tǒng)一為“首烏藤”，“薯蕷”統(tǒng)一為“山藥”，“大云”“淡大蕓”統(tǒng)一為“肉蓯蓉”，“云苓”統(tǒng)一為“茯苓”，“熟附子”“黑附子”統(tǒng)一為“制附子”。

1.3.3 數(shù)據(jù)分析 采用頻次統(tǒng)計、關聯(lián)規(guī)則、熵聚類算法等數(shù)據(jù)挖掘方法，通過“中醫(yī)傳承輔助平臺（V2.5）”，對藥物的使用頻次、性味、歸經(jīng)及組方規(guī)律進行聚類分析，得到潛在的核心藥物組合，并在此基礎上挖掘出新處方。

1.4 基于網(wǎng)絡藥理學分析核心藥物治療甲減的作用機制

1.4.1 核心藥物活性成分收集 利用中藥系統(tǒng)藥理學分析平臺（traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform，TCMSP）以口服利用度（oral bioavailability，OB）≥30%，藥物相似性（drug-like properties，DL）≥0.18，篩選出核心藥物的有效成分。

1.4.2 核心藥物靶點收集 （1）根據(jù)藥物有效成分的MOL ID檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫中有效成分對應的藥物作用靶點名稱。（2）根據(jù)藥物作用靶點名稱借助UniProt數(shù)據(jù)庫中的UniProt KB查詢靶點對應的UniProt ID及基因名稱，構(gòu)建藥物有效成分-靶點基因數(shù)據(jù)庫。

1.4.3 疾病靶點收集 以“hypothyroidism”作為關鍵詞，搜索GeneCards數(shù)據(jù)庫、TTD數(shù)據(jù)庫及OMIM數(shù)據(jù)庫，檢索及篩選靶點基因，得到甲減的疾病潛在靶點基因。

1.4.4 基因映射 將甲減的疾病潛在靶點基因與核心藥物靶點基因，輸入Venn Diagrams系統(tǒng)制作疾病藥物韋恩圖，篩選出核心藥物與甲減的共同作用靶點基因，即潛在的治療靶點基因。

1.4.5 PPI網(wǎng)絡構(gòu)建與核心靶點基因篩選 將交集靶點基因上傳至STRING數(shù)據(jù)庫，選擇屬性為人類，構(gòu)建核心藥物治療甲減的靶基因蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡圖。借助 Cytoscape 3.9.1軟件對網(wǎng)絡進行拓撲結(jié)構(gòu)分析，通過Centiscape插件篩選出核心靶點基因。

1.4.6 GO富集分析和KEGG信號通路分析 應用DAVID數(shù)據(jù)庫將核心靶點信息進行基因本體GO富集分析與KEGG信號通路富集分析，GO富集分析包括 生 物過 程 （biological process，BP）、分 子 功 能（molecular function，MF）及細胞組分（cellular component，CC）3個功能層次。使用微生信平臺對結(jié)果進行可視化處理。依據(jù)P值篩選核心藥物治療甲減的靶點生物過程及信號通路，進一步闡明該核心藥物治療甲減的作用機制。

1.4.7 核心藥物-成分-疾病-靶點-通路復合網(wǎng)絡的構(gòu)建 將疾病與核心藥物的交集靶點、核心藥物成分及KEGG中信號通路導入到 Cytoscape 3.9.1軟件，構(gòu)建核心藥物治療甲減的藥物-成分-疾病-靶點-通路網(wǎng)絡圖。

2 結(jié)果

2.1 用藥頻次統(tǒng)計 通過數(shù)據(jù)篩選，共有412首方劑符合篩選條件，涉及300味中藥，對其進行藥物頻次分析，可得出頻次最高的10味中藥為：茯苓（253次）、黃芪（226次）、白術(shù)（171次）、淫羊藿（161次）、熟地黃（158次）、當歸（149次）、黨參（142次）、山藥（135次）、山茱萸（130次）、肉桂（119次）。

2.2 四氣、五味、歸經(jīng)分析 對處方中的300味中藥進行統(tǒng)計分析，四氣中溫性藥占44.49%，平性藥占24.34%，寒性藥占21.08%，熱性藥占7.91%，涼性藥占2.19%。五味中甘味藥占44.39%，辛味藥占24.89%，苦味藥占20.49%，酸味藥占4.51%，咸味藥占3.47%，澀味藥占2.25%。歸經(jīng)中脾（2 414次）、腎（2 320次）、肝（2 242次）、肺（1 507次）、心（1 453次）、胃（887次）、膽（350次）、膀胱（340次）、大腸（221次）、小腸（115次）、心包（72次）、三焦（39次）。

2.3 用藥規(guī)律分析 基于關聯(lián)規(guī)則的組方規(guī)律分析，選擇數(shù)據(jù)分析，設置“支持度”為25，“置信度”為0.6，支持度個數(shù)為82，常用中藥藥對的用藥模式為18組，通過用藥模式分析，可得藥物組合出現(xiàn)的頻次。通過關聯(lián)規(guī)則分析，藥物組合中置信度為60%的關聯(lián)藥物共16組。見表1、表2。

表1 常用藥對及頻次

表2 常用中藥關聯(lián)規(guī)則分析

2.4 基于無監(jiān)督的熵層次聚類的新處方 通過藥物之間相關性發(fā)現(xiàn)其隱性規(guī)律，進入數(shù)據(jù)分析頁面，選擇新方分析，設置“相關度”為5，“懲罰度”為2，點擊聚類，共有250條數(shù)據(jù)，提取出8個常用核心藥物組合；進一步演化為4個治療甲狀腺功能減退癥的新處方。見表3、表4。

表3 常用核心藥物組合

表4 無監(jiān)督的熵層次聚類的新處方組合

2.5 基于網(wǎng)絡藥理學的作用機制研究

2.5.1 核心藥物活性成分及靶點的篩選 在獲得的核心藥物組合及新方組合中，淫羊藿、熟地黃、山藥、山茱萸4味中藥在用藥頻次統(tǒng)計中出現(xiàn)頻次最高，因此，將此4味藥作為核心藥物配伍進行網(wǎng)絡藥理學探討。通過TCMSP數(shù)據(jù)庫檢索淫羊藿-熟地黃-山藥-山茱萸配伍組所有活性成分，設置藥代動力學參數(shù)后得到符合條件的活性成分62個，其中淫羊藿24個、熟地黃2個、山藥16個、山茱萸20個。根據(jù)有效成分的MOL ID檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫相關靶點活性成分對應的藥物作用靶點淫羊藿195個、熟地黃27個、山藥72個、山茱萸63個，去除重復靶點，發(fā)現(xiàn)淫羊藿-熟地黃-山藥-山茱萸的作用靶點為215個。其中化合物 MOL000449、MOL001771、MOL000359為 4味中藥的共同成分。見表5。

表5 核心藥物共同活性成分表

2.5.2 核心藥物與甲減共有靶點的篩選 以“Hypothyroidism”作為關鍵詞，搜索GeneCards數(shù)據(jù)庫、TTD數(shù)據(jù)庫及OMIM數(shù)據(jù)庫，檢索去重得到甲減相關疾病靶點1 062個。將1 062個疾病靶點與215個核心藥物的作用靶點數(shù)據(jù)輸入Venn Diagrams系統(tǒng)，制作疾病藥物韋恩圖，獲得核心藥物與甲減共有靶點39個。見圖1。

圖1 核心藥物與甲減共有靶點韋恩圖

2.5.3 PPI網(wǎng)絡與核心靶點分析 將39個共同靶點通過STRING數(shù)據(jù)庫進行蛋白互作網(wǎng)絡分析，PPI網(wǎng)絡中包含39個有效節(jié)點，174條邊，平均節(jié)點度8.92。將STRING數(shù)據(jù)庫中的結(jié)果導入Cytoscape軟件中，將PPI網(wǎng)絡可視化，利用Centiscape插件篩選關鍵子模塊，關鍵子模塊中包括VEGFA、ESR1、PTEN、TP53、TNF、APP 等 6個靶點基因，推測這些可能是核心藥物治療甲減的核心靶點基因。見圖2。

圖2 核心藥物治療甲減的靶基因PPI互作網(wǎng)絡圖

2.5.4 生物過程及通路富集結(jié)果 將39個共同靶點基因輸入DAVID數(shù)據(jù)庫進行KEGG富集分析及GO富集分析。結(jié)果顯示，GO-BP結(jié)果195個，GO-CC結(jié)果22個，GO-MF結(jié)果32個。富集到的生物過程主要有細胞凋亡、基因表達、miRNA的產(chǎn)生和調(diào)控、一氧化氮生物合成過程調(diào)控、炎癥反應、細胞增殖、MAPK級聯(lián)、MAP激酶活性調(diào)節(jié)、微膠質(zhì)細胞激活、對缺氧的反應等。富集到的細胞組分主要有大分子復合體、線粒體、細胞膜、細胞因子等。富集到的分子功能主要有酶結(jié)合、肝素結(jié)合、類固醇結(jié)合、血紅素結(jié)合、蛋白結(jié)合、RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄因子活性與配體激活序列特異性DNA結(jié)合等。KEGG分析結(jié)果顯示：富集的通路主要包括癌癥中PD-L1表達和PD-1關卡通路、T細胞受體相關信號通路、調(diào)節(jié)Th1和Th2細胞分化、脂質(zhì)和動脈硬化、JAK-STAT信號通路、MAPK信號通路、PI3K-AKT信號通路等。見圖3、圖4、圖5。

圖3 GO富集的柱狀圖

圖4 GO富集氣泡圖

圖5 KEGG富集氣泡圖

2.5.5 核心藥物-成分-疾病-靶點-通路復合網(wǎng)絡的構(gòu)建 將甲減與核心藥物的交集靶點、核心藥物成分及KEGG中信號通路導入到 Cytoscape 3.9.1軟件，構(gòu)建核心藥物治療甲減的藥物-成分-疾病-靶點-通路網(wǎng)絡圖。見圖6。

圖6 藥物-成分-疾病-靶點-通路網(wǎng)絡圖

3 討論

甲減根據(jù)其臨床癥狀，屬于中醫(yī)“癭病”“虛勞”“水腫”“勞癭”等范疇，其發(fā)病與飲食水土、情志不遂、先天稟賦不足、體虛勞累、用藥不當?shù)纫蛩孛芮邢嚓P。其病機以陽虛、氣虛為主，因陽氣不足，導致推動、溫煦、固攝功能的異常，進而出現(xiàn)水濕、痰濁、氣滯、血瘀等變化?？傮w而言，本病病性屬本虛標實或虛實夾雜，病位主要在脾、腎，隨著病情的進展逐漸涉及心、肝。其治療上以溫補脾腎為主，輔以利濕、化痰、疏肝理氣、活血化瘀之法[16-20]。

3.1 藥物頻次、性味歸經(jīng)分析 對412首中藥處方中的中藥進行藥物統(tǒng)計分析可知，治療甲減的藥物多選用補益藥。排名前三的是茯苓、黃芪、白術(shù)，均為補氣健脾之藥；其次為淫羊藿溫補腎陽，熟地黃、當歸補血之品，黨參、山藥健脾益肺生津，最后取山茱萸補益肝腎，肉桂助陽溫經(jīng)通脈。其中茯苓、白術(shù)、黃芪、當歸，常與人參、甘草等藥配伍，如歸脾湯為補益氣血之良方；淫羊藿、肉桂與補氣健脾之藥相伍可治療脾腎陽虛之病證。四氣中溫性藥占比最多為44.49%，其次為平性藥占24.34%。溫性藥具有溫里散寒，溫補陽氣作用，治療甲減陽虛、氣虛、虛寒證；平性藥性味平和，調(diào)和諸藥，與溫性藥相輔相成，共同治療甲減。五味中甘味藥占比最多為44.39%，其次為辛味藥占比24.89%。甘味藥，“能補能和能緩”，具有補益、和中、調(diào)和諸藥和緩急止痛作用；辛味藥，“能行能散”，具有發(fā)散、行氣、行血作用，甘辛同用，具有補益氣血、疏肝行氣作用[21]。歸經(jīng)中以脾、腎、肝經(jīng)為主，其中脾經(jīng)2 414次，腎經(jīng)2 320次，肝經(jīng)2 242次。脾為后天之本、氣血生化之源，脾虛則氣血生化不足，四肢肌肉不能濡養(yǎng)，故見疲乏無力；脾虛氣血生化不足，婦女可見月經(jīng)量少、月經(jīng)不調(diào)。腎為先天之本，腎陽虧虛，累及脾臟，脾腎陽虛并見，溫煦失司，陽虛則寒冷，臨床上可見畏寒怕冷；腎精虧虛，腰府失養(yǎng)，可見腰膝酸軟等癥狀。肝失疏泄，氣機不暢，可見急躁易怒；肝疏泄失常，不能推動氣血運行，津液輸布失常，氣滯、血瘀、痰凝結(jié)于頸前，而見頸部腫大。甲減的治療以溫補腎陽，疏肝健脾益氣為主，用藥多使用辛、甘，溫、平之藥。

3.2 基于關聯(lián)規(guī)則組方用藥分析 根據(jù)藥物配伍頻次統(tǒng)計結(jié)果可知，高頻次用藥組合以茯苓、黃芪、白術(shù)、淫羊藿、熟地黃為主要藥物，功效溫補腎陽、益氣健脾，配伍當歸、黨參、山藥補益氣血，山茱萸補益肝腎，桂枝溫補陽氣，高頻用藥模式與高頻次單藥物相吻合，再次證明甲減治療中溫補腎陽、益氣健脾、補益肝腎的重要性。通過關聯(lián)規(guī)則分析，排名前三依次為：山茱萸→山藥；黃芪，白術(shù)→茯苓；桂枝→茯苓。山茱萸性微溫，味酸、澀，歸肝腎經(jīng)，具有補益肝腎，收澀固脫作用；山藥味甘，性平，具有益氣養(yǎng)陰，補脾肺腎，澀精止帶作用；兩藥合用，具有補益肝脾腎，代表方如六味地黃丸。黃芪味甘，性微溫，歸脾肺經(jīng)，具有補氣養(yǎng)血作用；白術(shù)味甘、苦，性溫，歸脾胃經(jīng)，具有補氣健脾作用；茯苓味甘淡，性平，歸肺脾腎經(jīng)，具有利水滲濕，健脾寧心作用；三藥合用增強補益氣血，健脾寧心作用，代表方如歸脾湯。桂枝味辛、甘，性溫，具有溫通經(jīng)脈，助陽化氣作用，與茯苓配伍，兩藥合用溫陽以助行水，治療脾腎陽虛證。溫補脾腎法能明顯改善脾腎陽虛型甲狀腺功能減退癥患者的臨床癥狀，改善甲狀腺功能[22-24]。黃芪、白術(shù)兩藥合用，具有益氣養(yǎng)血、補氣健脾功效，常用于治療甲減患者氣虛、疲乏、頭暈、四肢無力等氣血兩虛癥狀。

3.3 基于無監(jiān)督的熵層次聚類的新處方分析 基于無監(jiān)督的熵層次聚類分析中，可以得到8個核心藥物組合、4個新處方。新方中應用熟地黃、菟絲子、鹿角膠、山藥、山茱萸、牡丹皮、玄參、夏枯草、浙貝母、梔子、巴戟天、淫羊藿、肉蓯蓉、山茱萸、肉桂、白芥子、炮姜等藥物。其中熟地黃、菟絲子、鹿角膠、巴戟天、淫羊藿、肉蓯蓉、山茱萸、肉桂、炮姜等具有補腎陽、益肝腎的作用，對于臨床治療甲減中補腎溫陽藥物選用提供一個更廣泛的思路，不局限于某一部分藥物。牡丹皮、梔子具有清熱涼血、散結(jié)消瘀作用，常用于治療肝經(jīng)郁熱兼有血瘀病證；山藥、玄參具有益氣滋陰作用；白芥子具有溫中散寒、理氣化痰散結(jié)作用；夏枯草、浙貝母具有軟堅散結(jié)之功效。新方中單味藥物在甲減治療中的運用具有參考價值，但新方藥物組合的配伍比例及劑量不明確，尚不完整，需要進一步臨床實踐證明。

3.4 網(wǎng)絡藥理學作用機制探討 根據(jù)核心藥物組合及新方組合，結(jié)合用藥頻次統(tǒng)計，篩選出淫羊藿、熟地黃、山藥、山茱萸4味中藥作為核心藥物配伍進行網(wǎng)絡藥理學探討。通過TCMSP數(shù)據(jù)庫相關靶點核心藥物有效活性成分篩選，可知化合物MOL000449（豆甾醇）為山藥、山茱萸、熟地黃共有成分；化合物MOL001771（茯香-5-烯-3β-醇）為山茱萸、淫羊藿共有成分；化合物MOL000359（谷甾醇）為山茱萸、熟地黃、淫羊藿共有成分。豆甾醇是一種具有抗炎和抗分解代謝特性，能夠結(jié)合軟骨細胞膜的植物甾醇[25]，其可能通過調(diào)節(jié)激素信號通路上MAPK3和PRKACA靶點的表達，調(diào)控細胞因子水平，從而發(fā)揮抗炎作用[26]；同時，豆甾醇的抗分解代謝特性，也能夠改善甲減患者脂代謝等功能。β-谷甾醇具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗動脈粥樣硬化、降脂、調(diào)節(jié)骨代謝等多方面作用[27]，故核心藥物有效成分中的β-谷甾醇，能夠有效改善甲減患者血脂異常及骨質(zhì)疏松等疾病。運用Cytoscape 3.9.1軟件篩選出PPI互作網(wǎng)絡中VEGFA、ESR1、PTEN、TP53、TNF、APP 等 6 個核心藥物為治療甲減的核心靶點基因。

對39個核心藥物與甲減的共同靶點基因進行KEGG富集分析及GO富集分析。GO富集分析結(jié)果顯示，核心藥物主要通過影響以下生物調(diào)節(jié)過程來治療甲減：細胞凋亡、基因表達、炎癥反應、細胞增殖等生物過程；大分子復合體、線粒體、細胞膜、細胞因子等細胞組分；酶結(jié)合、類固醇結(jié)合、蛋白結(jié)合等分子功能。研究發(fā)現(xiàn)[28]：隨TSH升高，甲減患者炎癥介質(zhì)分泌增多，脂代謝紊亂，可能影響脂蛋白氧化修飾及炎癥介導等途徑，導致腦組織處于缺血缺氧狀態(tài)，造成能量物質(zhì)生成減少，導致甲減患者認知功能受損。GO富集結(jié)果不僅與甲減復雜的發(fā)病機制有關，而且也體現(xiàn)中藥治療疾病多靶點的特色及其優(yōu)勢。

KEGG分析結(jié)果顯示，核心藥物治療甲減主要通過調(diào)節(jié)癌癥中PD-L1表達和PD-1關卡通路、T細胞受體信號通路、調(diào)節(jié)Th1和Th2細胞分化、脂質(zhì)和動脈硬化通路、JAK-STAT信號通路、MAPK信號通路、PI3K-AKT信號通路等發(fā)揮作用。研究發(fā)現(xiàn)[29]：TSH、年齡和低密度脂蛋白為甲減患者發(fā)生動脈粥樣硬化的獨立危險因素和嚴重程度的影響因素。甲狀腺功能減退加速動脈粥樣硬化的可能機制是甲狀腺激素通過激活TRα1-Erk1/2通路，抑制氧化應激，減輕氧化低密度脂蛋白誘導的巨噬細胞凋亡[30]。甲狀腺激素缺乏會影響睪丸功能。甲狀腺功能減退可能通過干擾雄激素受體的表達，改變Ca2+-ATP酶的活性，誘導氧化應激，進而激活睪丸線粒體中P38MAPK和JNK信號通路來影響男性生殖功能[31]。甲狀腺功能減退也可通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)表達來抑制ERK1/2和PI3K-AKT信號通路，誘導睪丸細胞凋亡[32]。研究發(fā)現(xiàn)[33]：艾灸關元穴能夠調(diào)控PI3K-AKT通路，調(diào)節(jié)Bcl-2和Bax的平衡，抑制甲狀腺濾泡上皮細胞的凋亡，調(diào)節(jié)甲狀腺激素水平，改善甲狀腺功能。消瘰丸治療大鼠甲狀腺功能減退伴有甲狀腺腫大，可能通過調(diào)節(jié)PI3K-AKT、RAS等信號通路來調(diào)節(jié)甲狀腺激素水平，縮小腫大的甲狀腺[34]。進而推測核心藥物主要通過對動脈硬化、JAK-STAT信號通路、MAPK信號通路、PI3KAKT信號通路的調(diào)控，從而達到治療甲狀腺功能減退癥的目的。

4 結(jié)論

本研究基于中醫(yī)傳承輔助平臺（V2.5），通過對CNKI、萬方醫(yī)學網(wǎng)、CBM中國生物醫(yī)學文獻數(shù)據(jù)庫治療甲狀腺功能減退癥的文獻分析，歸納總結(jié)中醫(yī)藥治療甲狀腺功能減退癥的遣方用藥規(guī)律，對甲減-方-藥之間的內(nèi)在聯(lián)系進行探索，基于核心藥物運用網(wǎng)絡藥理學分析治療甲減的可能作用機制。治療甲狀腺功能減退癥的中藥以性溫、平，味甘、辛，歸脾、腎、肝經(jīng)，藥效溫補腎陽、益氣健脾、補益肝腎為主。通過運用TCMSP、GeneCards、OMIM、TTD 數(shù)據(jù)庫查找以“淫羊藿-熟地黃-山藥-山茱萸”為首的核心藥物基因及甲狀腺功能減退癥的基因，運用Venn Diagrams系統(tǒng)制作疾病藥物韋恩圖，應用STRING數(shù)據(jù)庫、Cytoscape 3.9.1軟件制作PPI互作網(wǎng)絡圖，發(fā)現(xiàn)核心藥物可能通過 VEGFA、ESR1、PTEN、TP53、TNF、APP 等核心基因，調(diào)控細胞凋亡、基因表達、炎癥反應、細胞增殖等生物過程，動脈硬化通路、JAK-STAT信號通路、MAPK信號通路、PI3K-AKT信號通路等環(huán)節(jié)發(fā)揮作用，提示中醫(yī)藥治療甲減具有多成分、多靶點、多通路的作用特點。此次數(shù)據(jù)挖掘和網(wǎng)絡藥理學研究為中醫(yī)藥治療甲減提供指導和理論依據(jù)，同時，該數(shù)據(jù)分析方法有一定的局限性，研究結(jié)果仍需結(jié)合中醫(yī)理論基礎、臨床實踐及藥效實驗驗證，進行綜合分析。