豬弓形蟲病的研究進(jìn)展

王袆，楊磊

（1.運(yùn)城市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山西 運(yùn)城 044000；2.臨猗縣畜牧獸醫(yī)發(fā)展中心，山西 臨猗 044199）

弓形蟲病是由弓形蟲寄生于人、牛、羊、豬等宿主的有核細(xì)胞內(nèi)而引起的一種危害嚴(yán)重的人獸共患機(jī)會(huì)致病性原蟲病。人類感染弓形蟲病后，可引引發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大、孕婦流產(chǎn)、兒童失明、腦膜炎等癥狀。在牛、羊、豬等多種家畜中，以豬弓形蟲病感染率為最高，可引起病豬體溫升高，食欲不振，仔豬發(fā)育遲緩、妊娠母豬流產(chǎn)和死胎等癥狀。截至目前，弓形蟲病已經(jīng)分布在世界范圍內(nèi)的多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我國(guó)的多個(gè)省份都有弓形蟲病的流行。弓形蟲病已經(jīng)對(duì)我國(guó)的畜牧業(yè)生產(chǎn)和人民生命健康產(chǎn)生嚴(yán)重的危害，特別是對(duì)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失。

1 病原學(xué)特性

1.1 生物性特征弓形蟲屬于動(dòng)物界、原生動(dòng)物門、孢子蟲綱、真球蟲目、肉孢子蟲科的專性細(xì)胞內(nèi)寄生蟲，于1908年被學(xué)者在嚙齒動(dòng)物體內(nèi)的單核細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)。弓形蟲在其不同發(fā)育階段存在速殖子、緩殖子、卵囊、裂殖體和配子體的不同形態(tài)。速殖子的大小為3μm×6μm左右，呈一端圓一端略尖，近似于香蕉的形狀，吉姆薩染色深藍(lán)色，主要存在于宿主的腦脊液、血液、腹腔滲出液等處。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)存在幾十個(gè)速殖子時(shí)，形成了一個(gè)以細(xì)胞膜為速殖子集合體外膜的“假包囊”。緩殖子存在于外層的彈性囊壁包裹著的包囊中，隨著緩殖子的繁殖增加，包囊的直徑最大可達(dá)到60μm，包囊主要存在于骨骼肌、心臟、大腦等組織中。卵囊的大小為8μm×13μm左右，卵圓形，一般只存在于貓科動(dòng)物體內(nèi)。裂殖體一般呈橢圓型，其中有數(shù)量不等的裂殖子。裂殖子的大小為8μm×3μm左右，形狀呈一端圓一端略尖，其可增殖變成配子體。配子體可分為雌雄兩種，雌雄配子體的形狀不同，雌配子體的長(zhǎng)度是雄配子體的數(shù)倍。

1.2 生活史弓形蟲完整的生活史包括有性生殖和無性生殖兩個(gè)階段。速殖子進(jìn)入人類和牛、羊、豬等中間宿主細(xì)胞內(nèi)，只能以內(nèi)雙芽增殖的方式進(jìn)行無性繁殖，速殖子繁殖數(shù)量增加可導(dǎo)致寄生的細(xì)胞破裂。速殖子可利用寄生泡躲避中間宿主的免疫系統(tǒng)攻擊。當(dāng)中間宿主的免疫系統(tǒng)持續(xù)發(fā)揮作用時(shí)，速殖子會(huì)轉(zhuǎn)化成緩殖子，緩殖子存在于包囊中，完整的包囊對(duì)宿主無害，可長(zhǎng)期存在宿主體內(nèi)。當(dāng)包囊被作為終末宿主的貓科動(dòng)物攝入消化道以后，包囊的外壁會(huì)被胃蛋白酶和胰蛋白酶消化，其內(nèi)部的緩殖子被釋放出來。一部分緩殖子進(jìn)入貓科動(dòng)物腸道的固有層，轉(zhuǎn)化為速殖子開始無性繁殖，同時(shí)可以入侵其他組織的細(xì)胞；另一部分緩殖子進(jìn)入貓科動(dòng)物腸上皮細(xì)胞中，先經(jīng)過裂體生殖以后，會(huì)轉(zhuǎn)變成雌雄配子體，進(jìn)而發(fā)育成雌雄配子開始有性繁殖，形成卵囊，最后卵囊隨著糞便排出貓科動(dòng)物體外。

2 流行學(xué)特點(diǎn)

2.1 地理分布及易感動(dòng)物從1952年在美國(guó)俄亥俄州首次發(fā)現(xiàn)豬弓形蟲病以來，在世界范圍內(nèi)其呈現(xiàn)普遍流行的趨勢(shì)。我國(guó)于1955年首次從豬體內(nèi)分離出了弓形蟲，1977年首次證實(shí)了豬的“無名高熱”是由弓形蟲引起的。豬弓形蟲在我國(guó)分布的范圍也非常廣泛，東北、華北、華中、華東等地區(qū)均有分布。

所有品種和日齡的豬都是豬弓形蟲病的易感動(dòng)物，特別是哺乳仔豬、架子豬和妊娠母豬更容易患豬弓形蟲病。弓形蟲主要入侵豬的心臟、眼睛、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)以及妊娠母豬的胎盤等。該病一年四季發(fā)病情況不存在明顯差異，但是夏秋季節(jié)更容易發(fā)病；亞熱帶沿海地區(qū)的生豬患病率明顯高于寒冷干燥的地區(qū)，生豬散養(yǎng)戶的生豬患病率也明顯高于規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)。

2.2 傳播方式豬弓形蟲病的傳播方式主要分為3種：（1）接觸傳播：生豬直播攝入含有弓形蟲包囊、卵囊的動(dòng)物組織或者攝入了被弓形蟲卵囊污染的飼料和水，這是最主要的傳播途徑；（2）垂直傳播：主要是通過妊娠母豬的胎盤將豬弓形蟲病垂直傳播給胎兒；（3）蟲媒傳播：在夏秋季節(jié)，通過節(jié)肢動(dòng)物和吸血昆蟲通過叮咬等，可以廣泛地傳播豬弓形蟲病。

3 癥狀

3.1 臨床表現(xiàn)該病的潛伏期一般為3～7d，按照病程長(zhǎng)短可分為急性型、亞急性型、慢性型。

3.1.1 急性型該型的易感動(dòng)物主要為哺乳或剛斷奶的仔豬和妊娠母豬。哺乳或剛斷奶的仔豬發(fā)病后，一般體溫明顯升高，最高可達(dá)41～42℃，呈稽留熱，出現(xiàn)食欲不振、精神萎靡、不喜運(yùn)動(dòng)、呼吸不暢、便秘腹瀉、大量飲水等癥狀。隨著病程發(fā)展，眼部黏膜和四肢、腹部、耳朵皮膚會(huì)出現(xiàn)界限清晰的小出血點(diǎn)或干性壞死，出現(xiàn)血樣尿液、腹式呼吸和肌肉痙攣等癥狀，最嚴(yán)重時(shí)會(huì)發(fā)展為呼吸困難、出現(xiàn)劃水動(dòng)作等精神癥狀，直至衰竭死亡。妊娠母豬的癥狀主要為發(fā)生流產(chǎn)和產(chǎn)出死胎，一般情況下分娩以后可自愈。

3.1.2 亞急性型該型病豬一般會(huì)出現(xiàn)體溫升高、食欲不振、動(dòng)作遲緩、呼吸不暢等癥狀，隨著病程的發(fā)展，病豬自身的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體會(huì)抑制弓形蟲發(fā)育，使得病豬康復(fù)。但是弓形蟲入侵豬的神經(jīng)系統(tǒng)，可能會(huì)導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)障礙、后肢麻痹、失明等癥狀。

3.1.3 慢性型該型病豬一般情況下會(huì)出現(xiàn)精神不振、食欲減退等癥狀或無任何臨床癥狀，但是會(huì)導(dǎo)致其生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，容易形成僵豬。

3.2 病理變化病理剖檢時(shí)，主要病理變化為全身淋巴結(jié)腫大出血、內(nèi)臟器官腫大、出血和體腔內(nèi)充滿積液。全身淋巴結(jié)腫大出血，特別是腹股溝淋巴結(jié)和腸系膜淋巴結(jié)腫大程度最為明顯，并且可見明顯的出血點(diǎn)；肺部腫脹，間質(zhì)增寬出現(xiàn)膠凍狀滲出物，支氣管和氣管充滿泡沫；心臟、肝臟、脾臟水腫，表面出現(xiàn)出血點(diǎn)和壞死灶；腎臟表面包膜不易剝離，整體呈土黃色，存在出血腫大；腸道腫大出血，甚至部分部位出現(xiàn)壞死。

4 診斷技術(shù)

4.1 病原學(xué)診斷該診斷是指通過顯微鏡等設(shè)備直接觀察被檢測(cè)動(dòng)物的組織中是否含有弓形蟲蟲體的方法，具體做法是取被檢測(cè)病豬的病變內(nèi)臟制作涂片，固定后進(jìn)行吉姆薩染色，鏡檢觀察有無弓形蟲蟲體。其優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單方便、對(duì)人員和設(shè)備的要求不高；缺點(diǎn)是工作強(qiáng)度大，檢出率偏低，不適用于大規(guī)模疫病普杰和診斷，只適用于小規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

4.2 免疫學(xué)診斷免疫學(xué)診斷主要包括染色實(shí)驗(yàn)（DT）、間接血凝實(shí)驗(yàn)（IHA）、乳膠凝集實(shí)驗(yàn)（LAT）、酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)（ELISA）、抗體親和力實(shí)驗(yàn)、間接熒光抗體實(shí)驗(yàn)（IFAT）、免疫膠體金技術(shù)等。

4.2.1 染色實(shí)驗(yàn)單純的染色實(shí)驗(yàn)對(duì)弓形蟲敏感性強(qiáng)，但是安全性較差，現(xiàn)在已經(jīng)不使用了?，F(xiàn)在一般使用的免疫酶染色實(shí)驗(yàn)，是指利用酶標(biāo)抗體和底物發(fā)生特異性反應(yīng)進(jìn)行染色的方法，該方法可以用于與血吸蟲病、肝片吸蟲病的鑒別診斷。該方法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便快捷、特異性高；缺點(diǎn)是個(gè)別樣品的誤判。

4.2.2 間接血凝實(shí)驗(yàn)該實(shí)驗(yàn)是指利用檢測(cè)被檢測(cè)生豬血清內(nèi)IgG抗體滴度來診斷豬弓形蟲病的方法，目前市場(chǎng)上已經(jīng)有以該方法為原理的試劑盒銷售。該方法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單快速、可以用于大規(guī)模的流行學(xué)調(diào)查；缺點(diǎn)是重復(fù)性較差，存在免疫學(xué)交叉反應(yīng)，容易出現(xiàn)假陽性。

4.2.3 乳膠凝集實(shí)驗(yàn)該實(shí)驗(yàn)是指利用乳膠顆粒為載體，使得特異性抗體與抗原發(fā)生凝聚反應(yīng)的方法。該方法的優(yōu)點(diǎn)是敏感性高、特異性高、假陽性率較低，具有很好的診斷效果；缺點(diǎn)是操作過程相對(duì)復(fù)雜。

4.2.4 酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)該實(shí)驗(yàn)是指把可溶性抗原或者抗體結(jié)合到固態(tài)載體上，利用抗體抗原結(jié)合和底物的顯色反應(yīng)進(jìn)行定性和定量的方法。酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)?zāi)壳翱梢苑譃殚g接酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)、夾心酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)、競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)等多種方法。該方法的優(yōu)點(diǎn)是操作快捷、特異性和敏感性強(qiáng)，適用于大規(guī)模的流行病學(xué)調(diào)查；缺點(diǎn)是試劑的選擇可能在較大程度上影響檢測(cè)的結(jié)果。

4.2.5 抗體親和力實(shí)驗(yàn)該實(shí)驗(yàn)是指利用測(cè)定特異性弓形蟲Ig G抗體的親和度來進(jìn)行檢測(cè)的方法。該方法的優(yōu)點(diǎn)是可以區(qū)分感染的程度，幫助人們判斷是被檢測(cè)的樣品是近期首次感染還是重復(fù)感染；缺點(diǎn)是檢測(cè)結(jié)果可靠性較差，需要其他方法幫助驗(yàn)證結(jié)果。

4.2.6 間接熒光抗體實(shí)驗(yàn)該實(shí)驗(yàn)是指利用抗原抗體特異性反應(yīng)和形態(tài)學(xué)進(jìn)行檢測(cè)的方法，目前國(guó)外已經(jīng)出現(xiàn)商業(yè)化試劑盒。該方法的優(yōu)點(diǎn)是特異性高、敏感性高；缺點(diǎn)是我國(guó)采用該方法較少，熟悉程度較低。

4.2.7 免疫膠體金技術(shù)該技術(shù)是指利用膠體金作為載體進(jìn)行抗原抗體特異性反應(yīng)來檢測(cè)的方法。免疫膠體金技術(shù)發(fā)展形成了一系列相關(guān)技術(shù)方法用于檢測(cè)弓形蟲病。該方法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單快捷、特異性敏感性高；缺點(diǎn)是檢測(cè)診斷的成本較高。

4.3 分子生物診斷與病原學(xué)診斷和免疫學(xué)診斷相比，分子學(xué)生物學(xué)診斷方法具備高效快速、敏感性和特異性高等優(yōu)點(diǎn)。目前，采用的分子生物診斷技術(shù)主要有利用PCR檢測(cè)B1基因、P30基因、529bp片段等弓形蟲靶基因的靶基因方法，設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增弓形蟲基因片段的PCR法，實(shí)時(shí)定量PCR法、巢式PCR法和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)等。

5 治療

從弓形蟲的生活史來看，當(dāng)弓形蟲進(jìn)入生豬體內(nèi)轉(zhuǎn)化成包囊時(shí)，一定程度上能夠抵御宿主免疫系統(tǒng)和藥物的作用，給弓形蟲的治療造成了一定的困難，所以治療豬弓形蟲病應(yīng)當(dāng)堅(jiān)持早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療的原則。目前，治療弓形蟲病的藥物主要分為抗生素類、人工合成類和中藥類三類藥物。

選用的抗生素類藥物主要為四環(huán)素類、林可胺類、大環(huán)內(nèi)酯類，但是抗生素類藥物對(duì)住的弓形蟲作用不大，主要用于治療人的弓形蟲病。選用的人工合成類藥物主要為喹酮類和磺胺類，其中磺胺類藥物是首選藥物，可以選用磺胺嘧啶片按照0.14g/kg口服使用、復(fù)方磺胺嘧啶鈉注射液按照0.3mL/kg注射使用。選用的中藥類主要為黃芩、甘草等，與磺胺類藥物配伍使用治療豬弓形蟲病效果更好。

6 預(yù)防

預(yù)防豬弓形蟲病的發(fā)生需要采用綜合預(yù)防措施：（1）提高飼養(yǎng)管理水平，定期清除圈舍內(nèi)污物和定期噴灑消毒，加強(qiáng)通風(fēng)換氣保持適當(dāng)?shù)臏囟群蜐穸龋瑢?duì)豬糞污進(jìn)行無害化處理，禁止在圈舍內(nèi)養(yǎng)貓；（2）提升科學(xué)喂養(yǎng)水平，保證給豬飼喂干凈新鮮的飼料和水，杜絕弓形蟲卵囊的攝入；（3）加強(qiáng)生豬引種，盡量保證“全進(jìn)全出”防止將病豬引入豬群。

弓形蟲病作為一種人獸共患病，已經(jīng)嚴(yán)重地威脅了我國(guó)畜牧業(yè)特別是生豬養(yǎng)殖業(yè)的健康穩(wěn)定的發(fā)展，也嚴(yán)重威脅人們的公共衛(wèi)生安全。雖然我們對(duì)其病原學(xué)、流行病學(xué)、臨床癥狀、診斷技術(shù)、治療和預(yù)防等方面進(jìn)行了大量研究，但是還未能更好地預(yù)防治療豬弓形蟲病的發(fā)生。今后我們應(yīng)該高度重視弓形蟲病的預(yù)防和早期治療，推動(dòng)生豬養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展。