Netrin-1在眼病中的研究進(jìn)展

黃孔乾，徐 帆，崔 凌，鐘海彬

0引言

Netrin-1是Netrins家族中研究最為廣泛的一員[1]。Netrin-1最初作為神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中的導(dǎo)航信號(hào)而聞名[2]，隨著研究不斷深入，其他功能也逐漸被發(fā)現(xiàn)。已有研究表明，Netrin-1不僅參與神經(jīng)系統(tǒng)軸突的導(dǎo)向[3]，還參與了炎癥[4]、新生血管形成[5]、癌癥[6]等相關(guān)疾病。在眼科疾病中，Netrin-1與視神經(jīng)發(fā)育不全(optic nerve hypoplasia，ONH)、角膜疾病、糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy, DR)、年齡相關(guān)性黃斑變性(age-related macular degeneration, ARMD)及視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma, RB)等疾病密切相關(guān)，是一個(gè)潛在的治療靶點(diǎn)。本文就Netrin-1與眼科疾病的聯(lián)系及作用進(jìn)行綜述。

1 Netrin-1的定義和功能

Netrin-1是一種層黏連蛋白相關(guān)的黏性蛋白[7]，是Netrins家族中最早被人們發(fā)現(xiàn)的成員。人類的Netrin-1由位于第17號(hào)染色體上的NTN1基因所編碼[1]。Netrin-1在N-端含有層黏連蛋白結(jié)構(gòu)域(LN，又稱結(jié)構(gòu)域VI)，其后是三個(gè)富含半胱氨酸的層黏連素型表皮生長(zhǎng)因子樣模塊(LE1、LE2和LE3，又稱結(jié)構(gòu)域V)，在C-末端含有一個(gè)帶正電荷的結(jié)構(gòu)域(LC)，而其整體結(jié)構(gòu)為一個(gè)細(xì)長(zhǎng)的花狀，兩端有受體結(jié)合位點(diǎn)[8]。

Netrin-1的受體具有多樣性。在哺乳動(dòng)物中，結(jié)直腸癌缺失基因(deleted in colorectal carcinoma, DCC)家族和不協(xié)調(diào)的UNC5(uncoordinated-5)家族是Netrin-1的主要受體[9]。而DCC受體家族包括DCC和neogenin兩個(gè)受體[10]。受體UNC5家族由UNC5A、UNC5B、UNC5C和UNC5D組成[11]。此外，還有唐氏綜合征細(xì)胞黏附分子(DSCAM)、腺苷2B受體(A2BAR)、整合素(α6β3和α3β1)和小腦蛋白4(CBLN4)等受體。Netrin-1受體的多樣性與其功能多樣性密切相關(guān)。

Netrin-1可與不同受體結(jié)合激活不同的生物學(xué)效應(yīng)。Netrin-1不僅參與調(diào)控軸突的生長(zhǎng)發(fā)育，還參與了細(xì)胞的遷移、增殖及凋亡過(guò)程。當(dāng)Netrin-1與DCC結(jié)合時(shí)，可介導(dǎo)軸突的定向誘導(dǎo)，而當(dāng)Netrin-1與UNC5或與UNC5和DCC同時(shí)結(jié)合時(shí)，則可引起排斥效應(yīng)[12-13]。Netrin-1可與不同受體結(jié)合介導(dǎo)炎癥及新生血管生成。Netrin-1與A2BAR結(jié)合參與調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)及上皮細(xì)胞的增殖和遷移[14]，與UNC5B結(jié)合可介導(dǎo)新生血管形成[15]，與neogenin結(jié)合可促進(jìn)小鼠皮層的血管穩(wěn)態(tài)和功能[16]。此外，Netrin-1及其DCC受體還與癌癥發(fā)生發(fā)展有關(guān)[6]。

2 Netrin-1與視神經(jīng)發(fā)育不全

Netrin-1可在眼底視網(wǎng)膜組織中表達(dá)。研究表明，在視網(wǎng)膜發(fā)育過(guò)程中，視盤細(xì)胞表達(dá)Netrin-1，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cells, RGCs)軸突表達(dá)DCC[17]。Miloudi等[18]研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠中，Netrin-1不僅可在胚胎期視網(wǎng)膜中表達(dá)，還可在成熟視網(wǎng)膜中高水平表達(dá)。此外，Netrin-1的DCC受體的mRNA及蛋白在視網(wǎng)膜也有較高的表達(dá)[13]。

Netrin-1是視神經(jīng)發(fā)育不可或缺的神經(jīng)軸突導(dǎo)向因子。Netrin-1在Netrins家族中具有最強(qiáng)的促進(jìn)軸突延伸的趨化能力[19]，是神經(jīng)軸突定向生長(zhǎng)和神經(jīng)元遷移的中介。在視神經(jīng)發(fā)育過(guò)程中，由RGCs軸突生長(zhǎng)到達(dá)視盤而形成視神經(jīng)。視神經(jīng)乳頭表達(dá)的Netrin-1是RGCs軸突離開視網(wǎng)膜進(jìn)入視神經(jīng)所必需的神經(jīng)導(dǎo)向因子。Netrin-1與DCC結(jié)合對(duì)發(fā)育中的視網(wǎng)膜內(nèi)新生神經(jīng)元的遷移發(fā)揮著指導(dǎo)作用[20]，而Netrin-1對(duì)DCC的依賴性反應(yīng)介導(dǎo)了胚胎期RGCs軸突向視神經(jīng)的生長(zhǎng)[17]。已有研究表明，在胚胎期視神經(jīng)裂閉合過(guò)程中，Netrin-1作為一種具有吸引力的信號(hào)，能引導(dǎo)RGCs軸突延伸到視神經(jīng)乳頭[17,21]，并引導(dǎo)RGCs集中神經(jīng)纖維，退出發(fā)育中的眼球[22]。并且，Netrin-1/DCC能引導(dǎo)RGCs穿過(guò)視盤，甚至穿過(guò)視頂蓋，到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)[23-24]，是眼球與中樞神經(jīng)系統(tǒng)建立聯(lián)系的重要基礎(chǔ)。然而，當(dāng)在胚胎發(fā)育中缺乏Netrin-1時(shí)，RGCs軸突不能正確地離開視盤，可導(dǎo)致ONH[17]。由于目前的治療手段有效，對(duì)許多視神經(jīng)損傷疾病的療效差，Netrin-1介導(dǎo)了視神經(jīng)生長(zhǎng)發(fā)育的過(guò)程，未來(lái)有望在視神經(jīng)損傷與再生領(lǐng)域中發(fā)揮作用。

3 Netrin-1與角膜疾病

角膜組織是重要的光學(xué)通路，因此，角膜疾病愈合情況與視力預(yù)后息息相關(guān)。Netrin-1作為多功能的蛋白質(zhì)分子可在多種組織中表達(dá)，并在許多系統(tǒng)疾病中扮演重要角色。同樣，Netrin-1不僅在角膜組織中表達(dá)且角膜疾病中發(fā)揮著重要作用。

Netrin-1及其受體在正常及損傷的角膜組織中均可表達(dá)。Han等[25]在正常大鼠角膜中研究發(fā)現(xiàn)，Netrin-1 mRNA和受體UNC5B mRNA主要在角膜基質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)，而大多數(shù)Netrin-1蛋白和受體UNC5B蛋白在角膜上皮細(xì)胞中被檢測(cè)到，因此認(rèn)為，Netrin-1主要由角膜細(xì)胞產(chǎn)生并分泌到細(xì)胞外基質(zhì)中。隨后，Zhou等[26]在免疫熒光染色中亦發(fā)現(xiàn)Netrin-1蛋白在正常小鼠角膜上皮細(xì)胞(corneal epithelial cells, CECs)中表達(dá)。同時(shí)，Netrin-1及其受體也可在損傷的角膜組織中表達(dá)。Han等[25]在大鼠角膜堿燒傷模型中發(fā)現(xiàn)Netrin-1及其UNC5B受體表達(dá)，但其表達(dá)水平較正常角膜下降。此外，Netrin-1及其受體亦可在感染性角膜炎中表達(dá)。Zhou等[26]發(fā)現(xiàn)Netrin-1及其A2BAR在真菌感染的小鼠角膜組織中表達(dá)，并且，在真菌刺激后，Netrin-1的表達(dá)水平先下降后增加，而A2BAR表達(dá)水平則升高。Netrin-1及其受體在角膜組織中表達(dá)是其在角膜疾病中發(fā)揮作用的基礎(chǔ)。

3.1Netrin-1與角膜上皮損傷角膜上皮損傷是眼部疾病及視力損害的重要原因之一。在角膜上皮損傷后，角膜透明性的維持極大程度上依賴于上皮創(chuàng)面的最佳愈合。角膜傷口愈合不當(dāng)可導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)的角膜混濁和視力下降，甚至視力喪失。有研究表明，上皮細(xì)胞的功能受到Netrin-1的調(diào)控[24]。在角膜上皮中，Netrin-1亦參與了其功能的調(diào)節(jié)。

Netrin-1能夠促進(jìn)動(dòng)物模型中角膜上皮創(chuàng)面的愈合。在角膜堿燒傷動(dòng)物模型中，Han等[25]研究發(fā)現(xiàn)，Netrin-1可減少堿燒傷誘導(dǎo)的CECs凋亡，并能上調(diào)表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor, EGF)表達(dá)，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。隨后，Yun[27]在角膜上皮損傷的小鼠模型中，予結(jié)膜下注射Netrin-1，發(fā)現(xiàn)其可促進(jìn)CECs增殖、遷移，加速小鼠角膜上皮愈合，且在無(wú)菌創(chuàng)面模型中，傷口閉合率更高，CECs凋亡減少。

此外，Netrin-1能夠促進(jìn)人類角膜上皮細(xì)胞(human corneal epithelial cells, HCECs)的增殖遷移。Zhou等[26]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)外源性應(yīng)用Netrin-1時(shí)，可顯著促進(jìn)HCECs的增殖、遷移。而Netrin-1對(duì)HCECs的影響與其濃度有關(guān)。Yun[27]發(fā)現(xiàn)HCECs的活性與Netrin-1濃度相關(guān)，在體外應(yīng)用低濃度Netrin-1可增加HCECs的活性，而高濃度則可降低其活性。然而，這種劑量依賴性的機(jī)制及原因目前并未清楚。但Netrin-1在角膜上皮再生中的作用，為治療持續(xù)性角膜上皮缺損提供了新方法及新思路。

3.2Netrin-1與角膜炎癥Netrin-1作為重要的炎癥調(diào)節(jié)因子，參與了炎癥反應(yīng)過(guò)程的調(diào)控[28]。在炎癥病理過(guò)程中，Netrin-1作為一種抗炎因子發(fā)揮著保護(hù)組織細(xì)胞的作用[29-30]。研究發(fā)現(xiàn)，Netrin-1不僅是牙周炎癥的標(biāo)志[31]，也是治療炎癥性關(guān)節(jié)炎的新靶標(biāo)[32]。在角膜炎癥反應(yīng)，Netrin-1亦發(fā)揮著調(diào)節(jié)作用。適當(dāng)?shù)难装Y反應(yīng)有利于殺滅外來(lái)病原體，而過(guò)度炎癥反應(yīng)則對(duì)眼睛結(jié)構(gòu)和功能造成嚴(yán)重?fù)p害[33]。研究發(fā)現(xiàn)，外源性應(yīng)用Netrin-1可減少角膜堿燒傷大鼠眼表面中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，緩解角膜炎癥[25]。同時(shí)，外源性Netrin-1對(duì)內(nèi)源性Netrin-1存在正反饋?zhàn)饔茫?dāng)外源性Netrin-1應(yīng)用于大鼠角膜時(shí)可誘導(dǎo)內(nèi)源性Netrin-1 mRNA和 UNC5B受體表達(dá)，這種正反饋?zhàn)饔脤?duì)治療角膜堿燒傷具有重要意義[25]。在感染性角膜炎中Netrin-1亦起著重要作用。Zhou 等[26]研究發(fā)現(xiàn)，在煙曲霉菌感染的小鼠角膜中，外源性應(yīng)用Netrin-1可減輕炎癥反應(yīng)，減少中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)和促炎因子的表達(dá)，并且，Netrin-1可通過(guò)A2BAR受體發(fā)揮調(diào)節(jié)角膜炎癥的作用。角膜炎癥性疾病是眼科的常見(jiàn)病、多發(fā)病，炎癥控制不佳可導(dǎo)致角膜穿孔、眼內(nèi)炎等嚴(yán)重并發(fā)癥，而Netrin-1在角膜炎癥的調(diào)節(jié)作用，對(duì)治療角膜炎癥性疾病具有重大的潛力。

3.3Netrin-1與角膜新生血管角膜新生血管是一種嚴(yán)重威脅視力的眼病，也是人們?nèi)找骊P(guān)注的突出問(wèn)題[34]。角膜新生血管的形成是由促血管生成因子與抗血管生成因子之間的自然及動(dòng)態(tài)平衡緊密調(diào)控的[27]。許多研究表明，Netrin-1與新生血管的形成密切相關(guān)[5,35-36]。Netrin-1通過(guò)調(diào)控促血管生成因子與抗血管生成因子的表達(dá)水平，參與調(diào)控角膜新生血管的形成。已有研究證實(shí)，Netrin-1是一種血管生成因子，可獨(dú)立誘導(dǎo)新生血管生成，在與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)結(jié)合時(shí)，可增強(qiáng)新生血管形成效應(yīng)[37]。而色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor, PEDF)是一種強(qiáng)有效的血管生成抑制劑,具有對(duì)抗VEGF的血管生成作用[38]。Han等[25]研究發(fā)現(xiàn)，在角膜堿燒傷大鼠中，Netrin-1下調(diào)了角膜堿燒傷后VEGF的表達(dá)水平，上調(diào)了PEDF的表達(dá)水平，使角膜損傷后VEGF和PEDF恢復(fù)平衡，逆轉(zhuǎn)角膜新生血管的形成，促進(jìn)新生血管的消退。目前，角膜新生血管的治療是棘手的難題，在將來(lái)，Netrin-1有望成為治療角膜新生血管的新靶標(biāo)。

3.4Netrin-1與糖尿病角膜病變?cè)谔悄虿?diabetes mellitus, DM)患者中，超過(guò)70%的患者會(huì)發(fā)生角膜病變(diabetic keratopathy, DK)，表現(xiàn)為角膜知覺(jué)受損、持續(xù)性上皮缺損及反復(fù)糜爛[39-40]。Zhang等[14]在DM小鼠模型的角膜中發(fā)現(xiàn)，Netrin-1表達(dá)水平較正常小鼠角膜下降，且高糖能阻斷創(chuàng)傷誘導(dǎo)的Netrin-1表達(dá)上調(diào)。因此，Netrin-1與DK息息相關(guān)。

Netrin-1可促進(jìn)DK上皮損傷愈合。在DK中，最為人所知的特征之一是由EGFR、ERK和PI3K/AKT信號(hào)通路激活受損而導(dǎo)致的角膜再上皮化延遲[41]。因此，重新激活這些信號(hào)通路則可促進(jìn)DM的角膜上皮愈合。有研究表明，外源性應(yīng)用Netrin-1可通過(guò)重新激活高糖處理的CECs中ERK和EGFR的磷酸化，促進(jìn)CECs的增殖及遷移，進(jìn)而加速DM小鼠角膜上皮的損傷愈合[14]。此外，Netrin-1可通過(guò)A2BAR介導(dǎo)DM角膜損傷的炎癥反應(yīng)，減少DM小鼠CECs的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，促進(jìn)M2型巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，同時(shí)可抑制促炎因子的表達(dá)[14]，從而促進(jìn)DM角膜上皮的修復(fù)。DM患者角膜上皮損傷愈合能力較正常人差，角膜上皮持續(xù)糜爛，不僅增加感染的風(fēng)險(xiǎn)，還嚴(yán)重的影響患者視功能，因此，促進(jìn)角膜上皮愈合是治療的關(guān)鍵。Netrin-1在DM角膜上皮愈合中的積極作用，有望成為治療DK的重要手段。

Netrin-1可參與調(diào)節(jié)DK的角膜神經(jīng)纖維的再生修復(fù)[14]。DK的典型特征是角膜神經(jīng)纖維密度降低及角膜知覺(jué)下降[42-43]。同時(shí)，角膜神經(jīng)功能障礙與DM角膜上皮的損傷愈合息息相關(guān)。Zhang等[14]研究發(fā)現(xiàn)，CECs表達(dá)的Netrin-1維持了角膜上皮神經(jīng)支配的動(dòng)態(tài)平衡，而高血糖引起CECs中Netrin-1的表達(dá)減少可能參與了DM角膜神經(jīng)纖維的下降，當(dāng)外用Netrin-1可促進(jìn)DM小鼠角膜神經(jīng)纖維的再生。角膜神經(jīng)纖維的再生修復(fù)是臨床治療的難點(diǎn)，治療手段有效，治療效果差。因此，Netrin-1對(duì)角膜神經(jīng)纖維再生修復(fù)的作用將為廣大DK患者帶來(lái)福音。

4 Netrin-1與DR

DR是糖尿病最常見(jiàn)的并發(fā)癥之一。最近，美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)把DR定義為一種高度特異的神經(jīng)血管并發(fā)癥[44]。神經(jīng)元引導(dǎo)信號(hào)Netrin-1是介導(dǎo)神經(jīng)血管通訊的效應(yīng)分子[45]，與DR的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。并且，有研究表明，Netrin-1是DR新的治療靶點(diǎn)[46]。

Netrin-1可在DR玻璃體及視網(wǎng)膜中表達(dá)。Liu等[47]研究發(fā)現(xiàn)，在DR缺血無(wú)灌注區(qū)增加的同時(shí)，可刺激視網(wǎng)膜內(nèi)Netrin-1的合成和分泌增加，導(dǎo)致玻璃體內(nèi)Netrin-1水平升高。亦有研究表明，Netrin-1蛋白及其mRNA在DR大鼠的視網(wǎng)膜中表達(dá)上調(diào)，并較正常組明顯升高[48]。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，DM可誘導(dǎo)Netrin-1及其受體UNC5B表達(dá)上調(diào)[18]，導(dǎo)致病理性新生血管形成。

Netrin-1可保護(hù)DR血視網(wǎng)膜屏障及降低微血管通透性。周賢慧等[49]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)外源性應(yīng)用Netrin-1時(shí)，可對(duì)早期DM大鼠的血視網(wǎng)膜屏障起保護(hù)作用。隨后，周賢慧等[50]還發(fā)現(xiàn)，當(dāng)玻璃體腔注射外源性Netrin-1時(shí)，DM大鼠視網(wǎng)膜血管通透性顯著降低，且該作用與Netrin-1濃度相關(guān)，當(dāng)外源性Netrin-1濃度越高對(duì)視網(wǎng)膜血管的保護(hù)作用可能就越顯著。同時(shí)，Cao等[46]研究表明，在DM大鼠玻璃體中注射大量外源性Netrin-1時(shí)，視網(wǎng)膜血管通透性可顯著降低，并且，Netrin-1還可通過(guò)降低VEGF的表達(dá)水平而降低視網(wǎng)膜通透性。此外，視網(wǎng)膜血管通透性與Netrin-1濃度相關(guān)。Yu等[51]在DR大鼠玻璃體腔中注射不同濃度Netrin-1，發(fā)現(xiàn)低濃度(0.1μg/mL)Netrin-1處理組的大鼠視網(wǎng)膜中VEGF-A濃度明顯高于PBS組，視網(wǎng)膜血管通透性增加；而較高濃度(5μg/mL)Netrin-1處理組可顯著抑制VEGF-A表達(dá)，視網(wǎng)膜血管通透性降低。血視網(wǎng)膜屏障損害是DR發(fā)生發(fā)展的重要原因，修復(fù)屏障、減輕視網(wǎng)膜滲漏是目前治療DR的關(guān)鍵所在。Netrin-1通過(guò)血視網(wǎng)膜屏障的保護(hù)作用，減輕視網(wǎng)膜血管通透性，可見(jiàn)，Netrin-1是預(yù)防及治療DR重要靶標(biāo)。

Netrin-1參與調(diào)節(jié)DR的炎癥反應(yīng)。缺氧是DR發(fā)生發(fā)展的重要原因之一，研究表明，缺氧可通過(guò)缺氧誘導(dǎo)因子誘導(dǎo)Netrin-1的表達(dá)，進(jìn)而通過(guò)NF-κB和COX-2/PGE2途徑調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)[52]。Netrin-1作為重要的抗炎因子，參與DR的炎癥反應(yīng)。劉安琪等[53]研究發(fā)現(xiàn)，Netrin-1基因沉默可加重DM大鼠視網(wǎng)膜損傷和炎癥，而外源性補(bǔ)充則可減少炎癥反應(yīng)、抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化，對(duì)DR起保護(hù)作用。炎癥參與了DR的發(fā)生發(fā)展，因此，Netrin-1對(duì)炎癥調(diào)節(jié)作用對(duì)預(yù)防DR發(fā)生及控制疾病進(jìn)展具有重要意義。

Netrin-1參與DR的病理性新生血管形成。缺氧、炎癥是DR血管生成的主要原因，而Netrin-1對(duì)血管生成具有雙重作用[13]，且其作用呈劑量依賴性[51]。在缺氧條件下，視網(wǎng)膜中Netrin-1表達(dá)上調(diào)，對(duì)病理性視網(wǎng)膜血管生成中起重要作用[54]。Netrin-1在DR中過(guò)度表達(dá)可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞的增殖和分化，甚至誘導(dǎo)新生血管，以改善其血供和微灌注作為補(bǔ)償[48]。有研究認(rèn)為，在氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變(oxygen-induced retinopathy, OIR)模型中，Netrin-1是重要的促血管生成因子，可促進(jìn)病理性新生血管形成，而使用小發(fā)夾RNA(small hairpin RNA, ShRNA)降解Netrin-1是減少視網(wǎng)膜病理性血管生成的有效方法[54]。隨后，Liu等[55]在OIR小鼠模型中研究發(fā)現(xiàn)， Netrin-1及其受體UNC5B也介導(dǎo)了視網(wǎng)膜病理性新生血管形成。然而，新生血管生成效應(yīng)與Netrin-1濃度相關(guān)。Yu等[51]在DR小鼠中研究表明，低濃度(0.1μg/mL)Netrin-1處理組的視網(wǎng)膜新生血管的數(shù)量較PBS組明顯增加，而較高濃度(5μg/mL )Netrin-1處理組則能顯著抑制和逆轉(zhuǎn)視網(wǎng)膜新生血管的形成，說(shuō)明Netrin-1可能通過(guò)劑量依賴性雙向調(diào)節(jié)DR病理性新生血管生成。Müller細(xì)胞異?；罨蓪?dǎo)致視網(wǎng)膜新生血管生成及纖維化，是DR進(jìn)展的重要原因[56]。周賢慧等[57]研究發(fā)現(xiàn)，Netrin-1可降低DM大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞活化，但相關(guān)機(jī)制尚未明確。

此外，Netrin-1參與DR的RGCs活性調(diào)節(jié)。Netrin-1對(duì)RGCs調(diào)節(jié)亦具有雙重作用。Yu等[51]研究發(fā)現(xiàn)，低濃度(0.1μg/mL)Netrin-1可以減少的RGCs，而高濃度(5μg/mL)Netrin-1可以部分維持RGCs的存活。綜上可見(jiàn)，Netrin-1在DR中具有保護(hù)視網(wǎng)膜屏障、參與病理性新生血管形成、調(diào)節(jié)炎癥及RGCs活性的作用，是DR具有潛力的治療靶點(diǎn)。

5 Netrin-1與ARMD

ARMD是一種嚴(yán)重的、威脅視力的疾病。ARMD與免疫和炎癥反應(yīng)失調(diào)以及視網(wǎng)膜能量代謝改變相關(guān)[58]。Netrin-1具有激活多個(gè)信號(hào)系統(tǒng)的能力，負(fù)責(zé)整合ARMD中視網(wǎng)膜神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、免疫細(xì)胞和血管的調(diào)節(jié)信號(hào)[19, 45]。Netrin-1激活的細(xì)胞信號(hào)系統(tǒng)影響ARMD發(fā)病相關(guān)的過(guò)程[58]，這些過(guò)程包括細(xì)胞遷移、細(xì)胞-基質(zhì)黏附、血管網(wǎng)絡(luò)的形成、炎癥和蛋白質(zhì)翻譯[19]。

Netrin-1與DCC結(jié)合驅(qū)動(dòng)的信號(hào)系統(tǒng)在進(jìn)展期ARMD中起著重要作用[59]。在許多編碼Netrin-1(NTN1)-DCC-cAMP-CN-NFAT軸相互作用成分的基因中觀察到與進(jìn)展期ARMD相關(guān)的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism, SNPs)和聚集效應(yīng),且進(jìn)展期ARMD相關(guān)SNPs存在于NTN1、DCC和其他6個(gè)Netrin相關(guān)的基因中[59]?；谕贩治霰砻?，Netrin-1通路成分具有AMD相關(guān)的SNPs，特別是在Netrin-1結(jié)合DCC后，通過(guò)活化T細(xì)胞(NFAT)軸的3’-5’環(huán)磷酸腺苷(cAMP)-鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CN)核因子通路發(fā)揮作用[59]。Netrin-1的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在ARMD中的作用，為ARMD在臨床研究提供合理的基礎(chǔ)，有助于開發(fā)出預(yù)防或治療ARMD的新方法。

6 Netrin-1與RB

RB是兒童時(shí)期最常見(jiàn)的眼部惡性腫瘤，治療不及時(shí)可威脅生命[60]。RB的發(fā)生是遺傳和環(huán)境因素相互作用的結(jié)果，而基因突變或失活是其發(fā)生的直接原因[61-62]。Netrin-1作為一種分泌型和膜結(jié)合型蛋白，參與細(xì)胞遷移、分化和凋亡等生物學(xué)過(guò)程[63]。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)Netrin-1 可高表達(dá)于多種腫瘤中[63-64]。

在眼科腫瘤研究領(lǐng)域，喻一心等[65]研究發(fā)現(xiàn)Netrin-1在RB中高表達(dá)，且復(fù)發(fā)患者Netrin-1表達(dá)水平較初治者明顯增高；當(dāng)干擾Netrin-1表達(dá)時(shí)，RB細(xì)胞的增殖不僅受到抑制，還可增加腫瘤對(duì)化療藥物的敏感性，因此Netrin-1可能參與了RB的形成及耐藥的發(fā)生。Netrin-1在RB中過(guò)表達(dá)，有望成為診斷RB的生物標(biāo)志物，并且對(duì)RB的復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)及轉(zhuǎn)歸具有重要意義。此外，干擾Netrin-1表達(dá)可抑制RB細(xì)胞增殖，為RB的治療提供了新思路。然而，Netrin-1在RB中的具體作用機(jī)制尚未明確，未來(lái)有待進(jìn)一步探索。

7 小結(jié)及展望

綜上所述，Netrin-1可與上述許多眼科疾病相關(guān)且具有多種功能，Netrin-1不僅參與調(diào)控視神經(jīng)發(fā)育、角膜神經(jīng)纖維再生及RGCs活性，還參與炎癥反應(yīng)、新生血管形成、角膜上皮損傷愈合的調(diào)節(jié)及腫瘤的發(fā)生，期待將來(lái)在更多眼病中如白內(nèi)障、干眼病、近視等有更多的研究發(fā)現(xiàn)。由此可見(jiàn)，Netrin-1是眼部疾病中極具潛力的干預(yù)靶點(diǎn)，在未來(lái)具有廣闊的應(yīng)用前景及研究?jī)r(jià)值。