速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬生產(chǎn)性能、養(yǎng)分消化率和免疫指標(biāo)的影響

葉劍

（廣東大廣農(nóng)牧集團(tuán)有限公司，廣東 江門 529400）

母豬產(chǎn)后哺乳期間泌乳任務(wù)繁重，需要足夠高品質(zhì)的營養(yǎng)來滿足泌乳需求。哺乳母豬產(chǎn)后25 d的泌乳量和乳品質(zhì)直接決定了斷奶仔豬的成活率和斷奶重。為了預(yù)防哺乳母豬泌乳期間體重?fù)p失過多、提高母豬泌乳量和斷奶后母豬發(fā)情率等，應(yīng)為哺乳母豬提供營養(yǎng)濃度高、適口性好、消化率高的飼料。因此，哺乳母豬日糧中添加微生物發(fā)酵蛋白、動物蛋白、酵母蛋白、乳化脂肪和淀粉糖等原料非常必要，如酵母蛋白、發(fā)酵豆粕、乳化大豆油、果糖、麥芽糊精、葡萄糖、蔗糖等，為母豬泌乳期間提供營養(yǎng)濃度高、消化吸收率高的營養(yǎng)。

酶解和發(fā)酵蛋白原料，如發(fā)酵豆粕和酶解小肽等是哺乳母豬優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)來源。飼料經(jīng)過酶解和發(fā)酵后，不僅可以提高原料利用率，還可以降低飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子和霉菌毒素等有毒有害成分，并且可以產(chǎn)生大量酶、有機酸、維生素、低聚糖、益生菌、小肽和未知促生長因子。油脂乳化將大分子油脂變成乳糜微粒，能夠防止油脂氧化酸敗，提高油脂適口性和消化率。朱元召等[1]用酵解乳化飼料替代麥芽糊精、果糖、葡萄糖、乳化大豆油、乳化椰子油和發(fā)酵豆粕后，結(jié)果顯示酶解發(fā)酵乳化飼料可提高泌乳母豬的生產(chǎn)性能和飼糧中部分養(yǎng)分表觀消化率?，F(xiàn)階段，飼料發(fā)酵大多數(shù)都是固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵前未經(jīng)熟化，底物中含糖量低，沒有溫控裝備，發(fā)酵過程易被雜菌污染，酵解不徹底，有機酸、生物酶、小肽等代謝產(chǎn)物含量低，且一批好，一批差，質(zhì)量不穩(wěn)定[2-3]。因此，超微粉碎、高溫高壓膨化和烘烤爆破之后的飼料熟料小分子高糖發(fā)酵尚待探討。

目前，大多數(shù)研究探討了復(fù)合多糖、乳化脂肪粉和酵解蛋白原料單獨對母豬生產(chǎn)性能的影響，復(fù)合多糖、乳化脂肪粉和酵解蛋白原料三者是否存在組合效應(yīng)，目前尚不清楚。因此，本試驗擬探討復(fù)合多糖、乳化脂肪粉和酵解蛋白原料組合一起對哺乳母豬生產(chǎn)性能、養(yǎng)分消化率以及血清免疫指標(biāo)的影響，以期為生物預(yù)消化產(chǎn)品在母豬生產(chǎn)實踐中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料試驗品制備

參照發(fā)明專利“一種飼用高蛋白乳狀速溶功能性微囊包被乳化脂肪粉的制備方法”[4]（申請?zhí)枺?02210835881.3），將碎米、玉米和豆粕先粗粉后超微粉碎至300目以上，制得超微粉碎米、超微粉玉米和超微粉豆粕。將超微粉碎米、超微粉玉米和超微粉豆粕先高壓膨化再烘烤爆破制得膨化烘烤爆破碎米、膨化烘烤爆破玉米和膨化烘烤爆破豆粕。將膨化烘烤爆破碎米、膨化烘烤爆破玉米、膨化烘烤爆破豆粕、酵母菌種液、乳酸菌種液、復(fù)合酶、葡萄糖和干凈水混合均勻，在大劑量添加復(fù)合酶制劑和連續(xù)持續(xù)攪拌條件下固態(tài)酶解發(fā)酵制得速溶酵解飼料。將大豆油、椰子油、玉米油、乳化劑和干凈水混合均勻，乳化均質(zhì)后制得乳化油脂。將速溶酵解飼料、乳化油脂、麥芽糊精、乳清粉、全脂奶粉、蔗糖和低聚糖混合均勻，干燥后制得速溶酶解發(fā)酵乳化飼料。該速溶酶解發(fā)酵乳化飼料由安徽五糧泰生物工程股份有限公司生產(chǎn)制備并提供，其外觀呈現(xiàn)乳白色不規(guī)則細(xì)小顆粒，100%能夠快速溶于水，水溶液呈現(xiàn)乳白色，粗脂肪含量在10%以上，乳化脂肪含量在9.5%以上，蛋白質(zhì)含量在18%以上，可溶性總糖含量在65%以上，乳酸含量在0.5%以上，無抗原多肽含量在15.0%以上，益生菌含量在0.5×104以上。其營養(yǎng)成分詳見表1、表2。

表1 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料主要營養(yǎng)成分

表2 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料氨基酸含量（實測均值） %

1.2 試驗動物與試驗設(shè)計

選取胎次、體況、預(yù)產(chǎn)期相近的長白×大白二元經(jīng)產(chǎn)母豬160頭，隨機分為4組（對照組、試驗1組、試驗2組、試驗3組），每組4個重復(fù)，每個重復(fù)10頭母豬。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗1～3組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加4.0%、5.0%、6.0%的速溶酶解發(fā)酵乳化飼料。對照組和試驗組的日糧營養(yǎng)水平基本等同一致。試驗分為產(chǎn)前7 d、產(chǎn)后23 d，預(yù)試期3 d，正試期27 d。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗哺乳母豬舍為雙破式單體豬舍，產(chǎn)床地面為全漏縫地板，自動通風(fēng)、自然采光、夜間補光，試驗期間自由采食、自由飲水，按豬場常規(guī)程序免疫消毒。

1.4 試驗飼糧

試驗日糧參照NRC（2012）豬營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，并根據(jù)實際情況進(jìn)行配方設(shè)計，日糧組成及營養(yǎng)水平見表3。

表3 日糧組成以及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.5 哺乳母豬生產(chǎn)性能的測定

哺乳母豬平均采食量：每天定時記錄哺乳母豬飼料飼喂量和剩余量，并計算哺乳母豬平均采食量。

哺乳母豬斷奶后7 d內(nèi)發(fā)情率：哺乳母豬斷奶下產(chǎn)床后，觀察母豬7 d內(nèi)發(fā)情頭數(shù)，計算哺乳母豬斷奶后7 d發(fā)情率。

哺乳母豬便秘率：每天觀察母豬便秘頭數(shù)，計算母豬便秘率。

仔豬生長性能：分娩當(dāng)天稱量仔豬初生窩重，斷奶當(dāng)天稱量仔豬斷奶窩重，計算仔豬日均增重，記錄哺乳仔豬死亡頭數(shù)，計算哺乳仔豬存活率。

1.6 養(yǎng)分消化率的測定

飼糧用四分法采樣，每組取500 g樣品裝袋并做記號，-18℃保存。于試驗結(jié)束當(dāng)天早上，每頭母豬取糞樣500 g，同一處理組所有母豬糞樣混合均勻后，加入10%的HCl溶液，防止氨氣的揮發(fā)，做好標(biāo)記，將樣品置于-18℃保存待用。飼糧和糞便中干物質(zhì)（DM）、粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）、鈣（Ca）和總磷（P）的含量測定，參照飼料常規(guī)分析方法檢測[5-7]。

養(yǎng)分消化率檢測方法參照GB/T 23742—2009，用鹽酸不溶灰分作為指示劑進(jìn)行計算。養(yǎng)分消化率（%）=[1-（A1×B2）/（A2×B1）]×100。其中B1代表飼糧中該養(yǎng)分含量（%），B2代表糞便中該養(yǎng)分含量（%）；A1代表飼糧中鹽酸不溶灰分含量（%），A2代表糞便中鹽酸不溶灰分含量（%）。

1.7 血液采集與血清免疫指標(biāo)的測定

于試驗結(jié)束當(dāng)天早上8:00，從每一組中隨機選擇6頭母豬，用10 mL注射器靜脈取血，待血液靜置后3 000 r·min-1離心15 min，將制備的血清快速置于-20℃冰箱中保存?zhèn)溆?。所測血清免疫指標(biāo)為免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、白細(xì)胞介素-2、白細(xì)胞介素-6，上述免疫指標(biāo)全部采用酶聯(lián)免疫吸附測定法進(jìn)行檢測，免疫指標(biāo)測定試劑盒均采購于南京建成生物工程研究所有限公司。

1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗結(jié)果均采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，多重比較用LSD法進(jìn)行，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”方式表達(dá)。P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬生產(chǎn)性能的影響

測定哺乳母豬生產(chǎn)性能，結(jié)果見表4。從表4可知，哺乳母豬基礎(chǔ)日糧中添加不同比例的速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后，可以提高哺乳母豬生產(chǎn)性能。與對照組相比，試驗1組和試驗2組母豬便秘率顯著降低（P＜0.05），采食量顯著提高（P＜0.05），其他指標(biāo)與對照組比均有改善，但差異不顯著（P＞0.05）；試驗3組除便秘率顯著低于對照組外，其他指標(biāo)均顯著高于對照組（P＜0.05）。

表4 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬生產(chǎn)性能的影響

2.2 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬養(yǎng)分消化率的影響

測定哺乳母豬養(yǎng)分消化率，結(jié)果見表5。從表5可知，與對照組相比，哺乳母豬基礎(chǔ)日糧中添加不同比例的速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后，粗蛋白和粗脂肪消化率顯著提高（P＜0.05）；試驗1組的干物質(zhì)、鈣和磷消化率有所提高，但差異不顯著（P＞0.05），其他處理組干物質(zhì)、鈣和磷消化率顯著高于對照組（P＜0.05）。

表5 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬養(yǎng)分消化率的影響 %

2.3 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬血清免疫指標(biāo)的影響

測定哺乳母豬血清免疫指標(biāo)，結(jié)果見表6。從表6可知，與對照組相比，哺乳母豬基礎(chǔ)日糧中添加不同比例的速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后，可以提高哺乳母豬血清免疫指標(biāo)。其中試驗1組免疫球蛋白M和白細(xì)胞介素-6顯著高于對照組（P＜0.05），其他指標(biāo)有提高，但差異不顯著（P＞0.05）；試驗2組和試驗3組所有指標(biāo)均有顯著性提高（P＜0.05）。

表6 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬血清免疫指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料生產(chǎn)工藝特色與優(yōu)勢

近年，飼料體外預(yù)處理技術(shù)在國內(nèi)外被廣泛關(guān)注[8-9]。玉米、小麥、大米、豆粕和植物油等是常規(guī)使用的飼料原料，但由于植物原料中含有大量抗?fàn)I養(yǎng)因子和霉菌毒素等有毒有害成分，且消化利用率較低，所以限制了其在乳豬、犢牛和羔羊等幼齡動物日糧中的應(yīng)用，也限制了在高產(chǎn)母畜中的利用。生物酶解和發(fā)酵技術(shù)可使蛋白質(zhì)部分降解為小肽，其中一部分小肽降解為氨基酸，可被動物直接利用，進(jìn)而可提高動物的生長性能[10]。油脂乳化可將大分子油脂變成乳糜微粒，能夠防止油脂氧化酸敗，提高油脂適口性和消化率[11]。大豆分離蛋白在酶解開始10 min后，抗原活性有明顯下降的趨勢，大多數(shù)分子量在30 ku以下的多肽中的抗原已經(jīng)被破壞消除。但是β-伴大豆球蛋白中的α-亞基中分子量21 ku的多肽抗原剩余率仍然達(dá)到15.7%。研究表明酶解是難以破壞消除大豆抗原的[12]。本試驗中速溶酶解發(fā)酵乳化飼料是采用納米超微粉碎、高壓雙螺桿膨化、高壓烘烤爆破、差溫酶解異步發(fā)酵、植物油蛋白糖酸菌基均質(zhì)乳化、摻拌糖粉包被和氣流閃蒸干燥等工藝裝備生產(chǎn)制造，是具有入口即化無渣、醬香濃郁、抗?fàn)I養(yǎng)因子含量大幅度降低、適口性好、采食量高、易消化吸收、促生長性能好等特點的生物預(yù)消化產(chǎn)品。

3.2 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬生產(chǎn)性能的影響

哺乳母豬因繁殖任務(wù)重，對脂肪利用效率要求較高，往往需要在哺乳母豬日糧中添加乳化脂肪粉，以提高母豬生產(chǎn)性能。有學(xué)者研究表明，在哺乳母豬日糧中用乳化脂肪粉替代大豆油，可提高母豬生產(chǎn)性能和繁殖性能[13-14]。隋潔等[15]在繁殖母豬日糧中用微生物有益菌發(fā)酵飼料后，哺乳仔豬各生產(chǎn)性能相比對照組均有提升，其中斷奶窩重極顯著高于對照組（P＜0.01）。徐祗瑞等[16]在經(jīng)產(chǎn)母豬日糧中添加以豆渣為主的發(fā)酵飼料后，試驗組仔豬初生窩重、斷奶仔豬頭數(shù)和斷奶窩重顯著增加（P＜0.05）。本研究所用速溶酶解發(fā)酵乳化飼料涉及到整體預(yù)處理，蛋白質(zhì)進(jìn)行了發(fā)酵，關(guān)于發(fā)酵蛋白原料在哺乳母豬中的使用效果很明確[17-19]，可能與益生菌發(fā)酵產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物有關(guān)，比如發(fā)酵產(chǎn)生的活性肽、有機酸、氨基酸、維生素和消化酶等能促進(jìn)腸道對養(yǎng)分的消化吸[20]；果寡糖、甘露寡糖、低聚殼聚糖能提高動物的免疫力[21]。本研究所用速溶酶解發(fā)酵乳化飼料，系對其所用原料速爆、滅菌、先好氧再厭氧發(fā)酵，發(fā)酵工藝更具優(yōu)勢，產(chǎn)物更穩(wěn)定豐富，試驗結(jié)果表現(xiàn)的更好。本試驗結(jié)果顯示，添加4.0%、5.0%和6.0%速溶酶解發(fā)酵乳化飼料，與對照組相比，所有試驗組便秘率顯著降低（P＜0.05），4.0%和5.0%組母豬采食量顯著提高（P＜0.05）；6.0%組除便秘率顯著低于對照組外，其他指標(biāo)均顯著高于對照組（P＜0.05）。速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬生產(chǎn)性能的改善效果明顯，主要可能是其工藝優(yōu)勢明顯，經(jīng)處理后的飼料，具有適口性好、消化率高、水溶性好、抗?fàn)I養(yǎng)因子低、營養(yǎng)均衡、發(fā)酵產(chǎn)物豐富等特點。

3.3 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬養(yǎng)分消化率的影響

發(fā)酵、酶解和乳化等體外預(yù)消化技術(shù)可以使飼料中的營養(yǎng)大分子變成小分子，更利于消化吸收，提高飼糧養(yǎng)分消化率。朱元召等[22]在哺乳母豬日糧中添加酵解乳化原料，日糧粗脂肪、有機物的表觀消化率得到顯著提高，干物質(zhì)表觀消化率得到提高，但與對照組相比，差異不顯著。蔣載陽等[23]在哺乳母豬日糧添加發(fā)酵原料，可提高母豬對養(yǎng)分的表觀消化率，這與本試驗研究結(jié)果一致。哺乳母豬日糧添加脂肪可以顯著提高氮的利用率，但脂肪來源不同結(jié)果也有差異。李波等[10]研究表明，在提高哺乳母豬日糧養(yǎng)分消化率方面，脂肪粉優(yōu)于大豆油，這與本試驗結(jié)果一致。但趙偉等[24]在育肥豬日糧中添加50%發(fā)酵飼料，與對照組和10%發(fā)酵飼料組比，有提高干物質(zhì)表觀總腸道消化率的作用，但對總能和總磷的表觀總腸道消化率無顯著影響。本試驗在哺乳母豬日糧中添加不同比例的速溶酶解發(fā)酵乳化飼料，粗蛋白、粗脂肪、干物質(zhì)、鈣和磷消化率均有不同程度的提高。

3.4 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對哺乳母豬免疫指標(biāo)的影響

IgA、IgG、IgM水平是反映機體免疫機能的重要指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，哺乳母豬日糧中添加速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后，IgA、IgG、IgM得到明顯提高，說明母豬免疫力也得到提高，其中試驗1組的IgM和白細(xì)胞介素-6顯著高于對照組，其他指標(biāo)也有提高，但差異不顯著，主要原因是母豬日糧中添加速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后，可能會引起炎癥反應(yīng)，所以炎癥因子IgM和白細(xì)胞介素-6有顯著性提高。白細(xì)胞介素-2能夠刺激活化的T細(xì)胞生長和分化，增強T細(xì)胞的殺傷活性，并且能夠刺激白血病細(xì)胞的增殖和產(chǎn)生免疫球蛋白，促進(jìn)B細(xì)胞表達(dá)白介素-2的受體[25]。本試驗中，試驗組的白細(xì)胞介素-2含量均有提高，說明試驗組母豬免疫力更強。蔣載陽等[23]在母豬日糧中添加發(fā)酵原料可顯著增加母豬血清中IgA、IgG和IgM的濃度（P＜0.05），且發(fā)酵果渣效果要好于發(fā)酵豆粕。董佳琦等[26]研究也發(fā)現(xiàn)，給哺乳期母豬飼喂益生菌培養(yǎng)液可改善哺乳母豬生產(chǎn)性能、免疫指標(biāo)和血清生化指標(biāo)，也進(jìn)一步說明益生菌發(fā)酵代謝產(chǎn)物是對哺乳母豬有益，可提高母豬的免疫力，進(jìn)而提高生產(chǎn)性能。張秀江等[27]用植物乳桿菌發(fā)酵液體飼料（風(fēng)干基礎(chǔ)）替代基礎(chǔ)飼糧中相應(yīng)比例的全價配合飼料，結(jié)果顯示發(fā)酵液體飼料對妊娠和哺乳期母豬采食量、便秘發(fā)病率、血液生化指標(biāo)和生產(chǎn)性能都有不同程度的改善和提高，這與本試驗研究結(jié)果基本一致。本試驗結(jié)果表明：在哺乳母豬日糧中添加不同比例的速溶酶解發(fā)酵乳化飼料，IgA、IgG、IgM、白細(xì)胞介素-6和白胞介素-2等免疫指標(biāo)均有不同程度的提高。

4 結(jié) 論

哺乳母豬基礎(chǔ)日糧中添加4.0%、5.0%和6.0%速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后，可以顯著性降低哺乳母豬便秘率，提高母豬采食量和斷奶后7 d發(fā)情率，提高仔豬斷奶重、日均增重和23 d存活率，提高哺乳母豬日糧養(yǎng)分消化率，提高母豬血清免疫指標(biāo)，增加母豬抗病能力，進(jìn)而提高母豬使用年限。本研究發(fā)現(xiàn)，哺乳母豬日糧中添加6.0%速溶酶解發(fā)酵乳化飼料飼喂效果最好，但生產(chǎn)實踐中考慮到成本因素，建議最佳添加量為5.0%。