眼樹蓮化學成分研究

何柳艷，梁 艷，唐云麗，潘翠柳，梁臣艷*

（1.廣西衛(wèi)生職業(yè)技術學院，廣西 南寧 530023；2.廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧 530200）

眼樹蓮為蘿藦科眼樹蓮屬附生藤本植物眼樹蓮Dischidia chinensisChamp.ex Benth.的全株，又名乳汁藤、望水王仙桃、金瓜核、瓜子藤、上樹鱉、翼魚草、小耳環(huán)、樹上瓜子等［1］，主要分布于廣西、廣東、海南等地［2］。其味甘、微酸，性寒，具有清肺熱、化瘧、涼血解毒之功效，主治肺燥咳血、瘡癤腫毒、小兒疳積、痢疾、跌打腫痛、毒蛇咬傷［3］。眼樹蓮以全株入藥，在廣西部分民間地區(qū)常用于治療肺燥咳痰、咳血、百日咳、支氣管炎及肺癆咳嗽等，有較好的療效［4］?；酐惸莸龋?］研究表明眼樹蓮乙酸乙酯部位具有較強的體外抗氧化作用；楊柳等［6］研究發(fā)現(xiàn)海南眼樹蓮乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物為其抗炎活性部位；洪家立等［7］研究結(jié)果表明，眼樹蓮乙醇提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位均對人胃癌SGC 細胞具有明顯抑制作用；本課題組前期研究表明眼樹蓮乙酸乙酯部位提取物具有一定的止咳、平喘、祛痰作用。為明確眼樹蓮的藥效活性成分，本文對眼樹蓮全草乙醇提取物的乙酸乙酯部位進行了化學成分研究。

1 實驗材料

1.1 試藥與試劑 眼樹蓮藥材采集于廣西橫縣，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學藥學院梁子寧教授鑒定為蘿藦科眼樹蓮屬眼樹蓮Dischidia chinensisChamp.ex Benth.的全株。硅膠G 板（青島海洋化工有限公司，批號：20191228），柱層析硅膠（100～200目，青島海洋化工有限公司，批號：20190417）；提取分離用乙醇為食用級酒精，其余試劑均為分析純。

1.2 儀器 AutoSpec Permier P776 質(zhì)譜儀（美國Waters 公司）；AVANCE Ⅲ 500 MHz 核磁共振儀（德國Brucker 公司）；超聲波清洗器（KH-600B，昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（CCA-1112A，上海愛朗儀器有限公司）；恒溫水浴鍋（HH-S6，鞏義市與予華儀器有限責任公司）；電子天平（YP5002，上海佑科儀器儀表有限公司）；三用紫外分析儀（ZF-2 型，上海市安亭電子儀器廠）。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取與分離 稱取7 kg 干燥切碎的全株眼樹蓮藥材放置容器中，加入75%乙醇在常溫下浸泡7 d，過濾，濾液減壓回收乙醇，連續(xù)浸漬提取共4 次，減壓濃縮后得到乙醇粗浸膏947.7 g。取乙醇總浸膏用蒸餾水混懸后，依次加入石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，得到眼樹蓮3個不同極性部位浸膏，分別為257 g，230 g，200 g。取眼樹蓮乙酸乙酯部位浸膏約80 g，經(jīng)硅膠色譜柱，二氯甲烷∶丙酮（80∶1～1∶1）梯度洗脫，洗脫液減壓回收溶劑，再采用硅膠柱色譜及重結(jié)晶等方法進行分離和純化，分別得到化合物1（528 mg）、化合物2（780 mg），化合物3（14 mg）、化合物4（5.0 mg）、化合物5（42 mg），化合物 6（8 mg）。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末，易溶于氯仿。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ（ppm）：0.88（3H，d，J=6.9 Hz，H-23），0.72（3H，s，H-24），0.87（3H，s，H-25），1.01（3H，s，H-26），1.05（3H，s，H-27），1.18（3H，s，H-28），1.00（3H，s，H-29），0.95（3H，s，H-30）；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ（ppm）：22.4（C-1），41.7（C-2），213.5（C-3），58.4（C-4），42.3（C-5），41.4（C-6），18.4（C-7），53.2（C-8），37.6（C-9），59.6（C-10），35.8（C-11），30.6（C-12），39.8（C-13），38.4（C-14），32.9（C-15），36.1（C-16），30.1（C-17），42.9（C-18），35.5（C-19），28.3（C-20），32.6（C-21），39.4（C-22），7.0（C-23），14.8（C-24），18.1（C-25），20.4（C-26），18.8（C-27），32.2（C-28），31.9（C-29），35.2（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻［8］中報道對照基本一致，鑒定化合物1為木栓酮。

化合物2：白色粉末，易溶于氯仿，與實驗室自制的β-谷甾醇對照品共薄層，用石油醚-乙酸乙酯（5∶1）作為展開系統(tǒng)，Rf值一致，與對照品混合后熔點不下降，鑒定化合物2為β-谷甾醇（β-sitosterol）。

化合物3：無色針狀晶體，易溶于丙酮、二氯甲烷，微 溶 于 水 。 EI-MS m/z：199［M+1］+。1H-NMR（500 MHz，Acetone）δ（ppm）：7.31（2H，s，H-2，6），3.87（6H，s，2-OCH3）；13C-NMR（500 MHz，Acetone）δ（ppm）：121.4（C-1），108.0（C-2，6），148.2（C-3，5），141.5（C-4），167.4（C-7），56.5（3，5-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［9］中報道對照基本一致，鑒定化合物3為丁香酸。

化合物4：無色透明針晶，1H-NMR（500 MHz，Acetone）δ（ppm）：7.59（1H，d，J=1.7 Hz，H-2），7.55（1H，dd，J=1.7，8.2 Hz，H-6），6.89（1H，J=8.2 Hz，H-5），3.89（3H，s，-OCH3）；13C-NMR（500 MHz，Acetone）δ：124.7（C-1），115.4（C-2），147.9（C-3），147.9（C-3），151.9（C-4），113.3（C-5），124.7（C-6），56.2（-OCH3），167.3（COOH）。以上數(shù)據(jù)與文獻［10］中報道對照基本一致，鑒定化合物4為異香草酸。

化合物5：白色粉末結(jié)晶，溶于丙酮，氯仿，不溶于石油醚。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ：5.16（1H，s，H-23a），4.91（1H，s，H-23b），3.76（1H，m，H-3a），3.65（1H，m，H-3b），2.38（2H，m，H-7），1.94（3H，s，H-24）；13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：20.6（C-1），34.2（C-2），61.6（C-3），149.7（C-4），76.7（C-5），20.9（C-6），42.3（C-7），53.5（C-8），39.3（C-9），60.2（C-10），34.3（C-11），30.3（C-12），39.6（C-13），38.4（C-14），32.5（C-15），39.1（C-16），29.9（C-17），42.7（C-18），35.3（C-19），28.1（C-20），32.7（C-21），36.0（C-22），114.5（C-23），23.5（C-24），15.5（C-25），20.1（C-26），18.7（C-27），32.2（C-28），34.9（C-29），31.8（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻［11］中報道對照基本一致，鑒定化合物5為眼樹蓮二醇。

化合物6：白色針狀結(jié)晶，易溶于氯仿，難溶于水。EI-MS m/z：426［M］+。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ（ppm）：4.68（1H，d，J=2.3 Hz，H-29）、4.56（1H，d，J=2.3 Hz，H-29）、1.68（3H，s，H-30）、1.02（3H，s，H-26）、0.97（3H，s，H-23）、0.91（3H，s，H-25）、0.79（3H，s，H-28）、0.76（3H，s，H-24）。13C-NM（125 MHz，CDCl3）δ（ppm）：38.9（C-1），27.5（C-2），79.0（C-3），38.8（C-4），55.3（C-5），18.3（C-6），34.3（C-7），40.8（C-8），50.4（C-9），37.2（C-10），20.9（C-11），25.1（C-12），38.1（C-13），43.0（C-14），27.4（C-15），25.2（C-16），42.8（C-17），48.3（C-18），48.0（C-19），151.0（C-20），29.9（C-21），40.0（C-22），28.0（C-23），15.9（C-24），16.1（C-25），16.0（C-26），14.5（C-27），18.0（C-28），109.3（C-29），19.3（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻［12］中報道對照基本一致，鑒定化合物6為羽扇豆醇。

3 小 結(jié)

本實驗通過反復柱色譜、重結(jié)晶等現(xiàn)代中藥化學分離手段和NMR、MS 等波譜技術，結(jié)合文獻數(shù)據(jù)，對眼樹蓮全草乙醇提取物的乙酸乙酯部位化學成分進行了研究，從中共分離得到6個化合物，分別鑒定為木栓酮（1）、β-谷甾醇（2）、丁香酸（3）、異香草酸（4）、眼樹蓮二醇（5）、羽扇豆醇（6），其中化合物 1～5 首次從該植物中分離得到。目前有關眼樹蓮的研究主要側(cè)重于藥理作用研究，而藥效物質(zhì)基礎的研究比較薄弱，國內(nèi)外相關的研究報道也較少。已經(jīng)證實，羽扇豆醇有抗氧化、抗炎癥、促進皮膚愈合等作用，且對乳腺癌、前列腺癌以及小鼠的黑色素瘤有一定的抑制作用［13］。推測羽扇豆醇是眼樹蓮的抗氧化和抗腫瘤藥效物質(zhì)基礎。前期的實驗研究為眼樹蓮的生物活性成分篩選和研究提供了實驗基礎和技術支持，下一步應對眼樹蓮的化學成分進行更深入的研究，探索藥效物質(zhì)基礎，為眼樹蓮的進一步開發(fā)研究提供依據(jù)和參考。